背景:角膜修复材料可修复角膜损伤,这种产品在进入临床试验之前需要评估其有效性,但现阶段尚缺乏标准化的有效性评估方法.目的:建立并验证兔角膜真菌感染模型和角膜移植实验方法.方法:取新西兰大白兔12只,建立左眼角膜真菌感染模型(实验组),右眼作为正常对照.模型建立2周后,左眼进行脱细胞猪角膜基质移植,移植后定期进行裂隙灯显微镜、角膜厚度、眼压、共聚焦显微镜及光学相干断层成像等检测,评估角膜修复材料透明度、上皮愈合程度、水肿程度、角膜新生血管程度、角膜修复材料融解程度;移植后3,6,12个月,进行角膜病理组织观察.结果与结论:①实验组移植后1个月时角膜厚度明显增高,移植3-6个月时角膜厚度开始稳定,1年时趋于稳定,趋向于正常眼;②实验组眼压始终接近于正常眼;③光学相干断层成像显示,移植后7 d,角膜修复材料与植床贴合良好;移植后6个月上皮覆盖完整,移植区植片厚度较为均一;移植后1年恢复情况趋于正常眼;④共聚焦显微镜显示,移植后1个月时,移植区材料均匀;移植后6个月时,移植区有少量细胞迁入;移植后1年时,上皮细胞密度增大,移植区有迁入细胞,但少于正常眼;⑤移植后1年,角膜修复材料几近完全透明,可认为此角膜修复材料治疗感染性角膜溃疡有效;未发生排斥反应,表明该角膜修复材料的治愈性良好;⑥移植后3个月,大量基质细胞迁移至角膜角膜替代物中,移植区域胶原纤维排列整齐、致密,无明显瘢痕及降解现象;移植后6个月时,移植区域已基本恢复至正常角膜状态;移植后1年,移植区域已恢复至正常角膜状态,生物相容性很好;⑦结果表明,实验建立的兔角膜真菌感染模型和角膜移植实验方法可作为评价此类角膜材料有效性的动物模型和方法.

目的 评价壳聚糖/明胶静电纺丝膜对球结膜损伤后组织的促修复作用及抗瘢痕化作用.方法 利用静电纺丝技术制备壳聚糖/明胶静电纺丝膜,采用钨灯丝扫描电子显微镜观察静电纺丝膜纤维表征.采用随机数字表法将30只新西兰白兔随机分为模型组、羊膜修复组和静电纺丝膜修复组,每组10只.各组实验兔右眼均接受手术切除6 mm×8 mm的球结膜,用弱酸灼伤损伤部位和角膜缘,制备兔球结膜损伤动物模型,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组均于术中在伤口处结膜与巩膜之间平铺生物膜.分别于术后4、8、14、28 d行裂隙灯显微镜检查,观察兔眼手术伤口炎症反应及球结膜修复情况. 结果 扫描电子显微镜下可见静电纺丝膜纤维呈立体网状结构,与生物羊膜空间结构相似,纺丝直径均匀,为0.1 ～0.5 μm.裂隙灯显微镜下观察发现,术后4d各组兔实验眼均未见明显炎症反应;术后8d模型组兔眼球结膜水肿、糜烂,黏性分泌物较多,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜轻度充血;术后14 d模型组兔球结膜水肿、充血,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜均未见炎症反应;术后28 d模型组兔球结膜可见新生血管,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜完全修复.组织病理学观察结果显示,模型组兔眼在术后4d时伤口处球结膜组织游离,术后8d球结膜根部贴附巩膜,术后14d球结膜组织增厚,术后28 d大量纤维组织填充伤口,结膜上皮化.羊膜修复组兔眼术后4d羊膜贴附于巩膜与球结膜之间,术后8d羊膜开始消融,术后14d纤维组织生长且球结膜上皮化,术后28 d球结膜组织修复,瘢痕组织填充较少.术后4d静电纺丝膜修复组可见静电纺丝膜孵育于结膜与巩膜之间,静电纺丝膜消融,术后8d球结膜上皮沿巩膜长入损伤部位,术后14d结膜下组织生长,术后28 d结膜完全修复.结论 与单纯球结膜损伤缝合相比,羊膜或壳聚糖/明胶静电纺丝膜修补对损伤的球结膜有促进修复的作用,且可减轻组织瘢痕化,壳聚糖/明胶静电纺丝膜的促组织修复作用优于羊膜.

目的:研究由全飞秒激光SMILE手术所得的角膜基质透镜作为角膜移植材料治疗角膜溃疡的临床疗效.方法:回顾性病例研究.收集本院2017-01/06角膜溃疡患者6例6眼,其中细菌性、真菌性、深层异物伴感染各1例1眼,角膜穿孔3例3眼.采用由全飞秒激光SMILE手术所得的角膜基质透镜作为角膜移植的材料进行修复手术,确保植片与角膜层间无空气间隙.术后随访1～6(平均3.71±1.56)mo,观察手术前后视力、角膜移植物存活情况及术后并发症发生情况等.结果:所有患者均在控制感染下顺利完成手术,无术中并发症.术后所有角膜植片透明.末次随访时,患者最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)较术前明显改善(0.48±0.12 vs 1.50±0.08),差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:来源于全飞秒激光屈光手术的角膜基质透镜用于角膜溃疡修复是安全有效的,但植片的远期疗效尚需进一步观察.

背景:角膜炎、化学伤、创伤和其他疾病往往导致角膜组织不可逆的损伤,留下纤维瘢痕进而最终导致视力下降甚至视力丧失.角膜移植是唯一的治疗途径,但供体的缺乏限制了其应用,此外其他替代材料制备复杂且价格昂贵.丝素蛋白和壳聚糖是组织工程领域常用的材料,制备成生物支架的技术已日趋成熟,得到了广泛应用,但在角膜修复领域尚处于起步阶段.目的:系统分析丝素蛋白/壳聚糖支架材料应用于角膜修复领域的相关文献,为进一步研究和促进其修复角膜时的临床应用提出新方向和理论支持.方法:以“丝素蛋白,壳聚糖,角膜,角膜修复材料”为中文关键词,以“silk fibroin,chitosan,cornea,keratoprosthesis,scaffold”为英文关键词检索CNKI,万方以及PubMed数据库有关角膜修复材料的相关文献,追踪以丝素蛋白/壳聚糖作为修复材料在角膜组织工程领域的发展过程,并分析其应用现状及前景.结果与结论:初步检索178篇文献,最终纳入52篇符合标准的文献进行综述.①丝素蛋白/壳聚糖支架作为缺损角膜的修复体,细胞毒性低,生物相容性良好;②丝素蛋白/壳聚糖支架为角膜细胞提供了适宜的细胞外环境,有利于角膜细胞的水电解质交换;③ABCG2蛋白的检出,提示支架为角膜缘干细胞的增殖提供了可能;④大量的动物模型实验表明该支架几乎不会引起角膜细胞的炎症反应,这对于维持角膜组织的透明性有重要意义;⑤由于供体角膜的缺乏,寻找新型的人工材料修复损伤角膜是角膜移植领域的发展方向,而丝素蛋白壳/聚糖支架具有巨大的潜力,值得深入研究.

目的 对比分析生物羊膜和角膜绷带镜作为辅助材料用于治疗翼状胬肉的临床效果.方法 选取2015年4月至2016年12月我院收治的原发性翼状胬肉患者114例(114眼),按照随机数字表法将其分成2组,其中羊膜组61例,绷带镜组53例.所有患者均由同一主刀医师在局部麻醉下行翼状胬肉切除联合自体游离结膜瓣移植术.羊膜组:取10 mm×15 mm大小冻干生物羊膜,基底层面向下覆盖于患者角结膜创面,并用10-0尼龙线间断缝合固定;绷带镜组:取博士伦纯视一片,居中覆盖于患者角膜上.记录术前及术后1个月、3个月时患者的最佳矫正视力、角膜地形图表面不对称指数(surface asymmetry index,SAI)、表面规则指数(surface regularity index,SRI)以及角膜散光度.应用Wong-Baker脸评分疼痛强度.结果 术后2周时观察两组患者角膜创面荧光素染色情况,羊膜组7眼阳性,绷带镜组1眼阳性,羊膜组角膜创面染色阳性率高于绷带镜组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者术前、术后各时间点最佳矫正视力差异均无统计学意义(均为P＞0.05).两组患者术前角膜散光度差异无统计学意义(P＞0.05),术后1个月及3个月时,绷带镜组角膜散光度低于羊膜组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).术前羊膜组SRI、SAI分别为1.52±0.83、1.68±0.62,绷带镜组分别为1.61±0.66、1.73±0.59,两组差异均无统计学意义(均为P ＞0.05),术后1个月及3个月绷带镜组SRI(0.99±0.72、0.63±0.58)和SAI(0.61±0.53、0.54±0.28)均低于羊膜组[(1.28±0.67、0.85±0.47)和(0.97±0.47、0.82±0.35)],差异均有统计学意义(均为P＜0.05).术后当天、术后第1天绷带镜组疼痛指数低于羊膜组,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);术后2周时绷带镜组与羊膜组疼痛指数差异无统计学意义(P＞0.05).术后3个月羊膜组复发1眼(1.64％),绷带镜组复发2眼(3.77％),复发率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在翼状胬肉手术中配戴角膜绷带镜较贴敷生物羊膜更有利于患者角膜创面修复,降低术后角膜散光,减轻术后疼痛.

目的 系统探讨眼科学领域的创新发展态势.方法 采用对比分析法,搜集美国国立眼科研究所、我国国家自然科学基金委员会最新眼科学资助规划,2012至2016年美国国立卫生研究院(NIH)以及我国国家自然科学基金委员会、国家重点研发计划等资助项目,分析国内外眼科学重点资助领域.采集2012至2016年Web of Science核心合集眼科学论文,选取其中的ESI(essential science indicators)高被引论文和热点论文,利用文献计量法分析论文数量和被引频次时间趋势,采用共现聚类分析法,分析眼科学论文持续关注和新兴关注研究领域.结果 美国国立眼科研究所资助规划主要布局在眼科学9种疾病,我国国家自然科学基金项目重点关注视网膜疾病损伤及其修复机制研究,国家重点研发计划关注高端眼科植入材料研究.美国NIH持续关注糖尿病视网膜病变、老年性黄斑变性、青光眼、角膜病、白内障等致盲性眼病的分子机制、遗传学等基础性研究以及影像学等先进诊断治疗技术的研究,最新关注领域涉及基因编辑技术、干细胞技术在眼科学领域的应用.我国干细胞在眼科疾病中的研究和应用、眼内药物缓释载体研究、眼科精准医学研究是资助的新兴领域.2012至2016年,眼科学ESI论文168篇,研究主题主要聚焦在黄斑变性、视网膜疾病、青光眼等眼部疾病.我国眼科研究领域面临着如何快速将新药物和新技术成果向临床应用推广的问题,如何使眼科诊断治疗模式凭借信息时代的契机发生改变,为患者提供更为方便和优质的服务,已成为需要重视的研究课题.结论 基于多维度分析,眼科学领域创新发展态势在于实现眼科学与先进影像技术、干细胞技术、基因编辑技术、分子靶向技术、人工智能技术等高新技术领域的交叉应用、整合和集成,为提升我国眼科学研究创新能力和国际竞争力提供有力的基础支撑.注重加强眼科自主研发和转化研究力度,早日实现成果转化.

细胞膜片技术保留了大量自体细胞分泌的细胞外基质,为细胞的增殖和分化提供与体内极度相似的微环境,通过获取完整的膜片而用于修复软骨缺损.同传统的软骨缺损修复方法相比,细胞膜片技术展现了巨大的临床应用潜力,目前细胞膜片技术已经用于临床眼角膜和食道缺损的修复.近年来,对于脱细胞基质膜片和静电纺丝膜片的研究也日益增多,脱细胞基质膜片克服了传统的脱细胞组织块的缺点,有利于细胞的迁移增殖和分化,而且具有免疫耐受的特点.静电纺丝膜片具有纳米结构,类似于天然的软骨细胞外基质,机械特性好,易于操作,利于物质的交换.现阶段,应用膜片技术修复软骨缺损还主要处于实验研究中,临床应用的报道还很少,其中膜片技术还面临着一些不可忽视的问题需要解决.随着生物医学和材料学的发展,未来还需应用更多的创新技术成果不断改进膜片技术,以期早日用于临床软骨缺损的修复.

目的 研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果.方法 使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等10种生物活性因子的表达含量加以测定,同时和新鲜泪道纤维蛋白胶羊膜(fresh lacrimal duct amniotic membrane,F-LDAM)、单层泪道纤维蛋白胶羊膜(monolayer lacrimal duct amniotic membrane,M-LDAM)进行对比.此外,利用负荷传感器对比细胞外基质胶泪道纤维蛋白胶羊膜(extracellular matrix lacrimal duct amniotic membrane,ECM-LDAM)与F-LDAM、M-LDAM的弹性模量、抗拉强度、断裂伸长率,并把ECMLDAM应用于兔干眼症的治疗,术后8周观察实验兔干眼治疗前后荧光染色(fluorescein stain,FL)评分、各时段泪液分泌、FL情况和角膜共焦显微镜下角膜上皮下神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分.结果 ECM-LDAM、M-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量均比F-LDAM低,差异均有统计学意义(均为P＜0.05),而ECM-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量明显高于M-LDAM,差异有统计学意义(P＜0.05).ECM-LDAM的弹性模量明显低于F-LDAM及M-LDAM,差异有统计学意义(P＜0.05);而ECM-LDAM的抗拉强度和断裂伸长率明显高于与M-LDAM和F-LDAM,差异有统计学意义(P＜0.05).术后8周发现B组与A组相比FL评分降低,泪液分泌时间延长,角膜共焦显微镜下观察发现神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ECM-LDAM作为一种新型安全的泪道修复材料,其丰富的生物活性因子和优越的柔韧性,可以更有效地改善兔干眼,营养修复受损的角膜神经.

自20世纪40年代耳显微外科创建以来,随着对于耳部解剖及生理的认识不断加深、手术经验的逐步积累以及技术材料的应用创新,中耳手术实现了长足而稳定的发展,目前主要包括去除进展性病变、修复中耳的解剖结构以及听力重建.中耳手术中用于修补或重建的植入材料对于手术成功率及术后长期效果有着至关重要的影响.1853年,Tonybee提出以橡胶片修补鼓膜.此后100多年间,耳科医师对于植入材料进行了不懈的探索,尝试了包括棉片、纸张、皮肤、静脉壁、心包膜、角膜、硬脑膜、颞肌筋膜、软骨膜等一系列材料.Hall等[1]首次将软骨应用于听骨链成形术;Heermann等[2-3]首先提出栅状软骨修补鼓膜穿孔;Salen[4]和Jansen[5]使用鼻中隔软骨成功进行鼓膜修补.此后各种软骨技术层出不穷,Tos的专著中报道目前已有100余种软骨技术应用于中耳手术.软骨已不仅仅作为鼓膜修补材料的重要选择,同时也广泛应用于听骨链成形、上鼓室修复、外耳道后壁重建等多种中耳手术中.本文围绕软骨在中耳手术中的应用展开探讨.

目的:观察生物工程角膜移植治疗感染性角膜炎的疗效,评价其临床应用价值和意义.方法:对我院35例35眼需要进行手术治疗的感染性角膜炎患者分为3组:观察组15例,使用生物工程角膜施行板层角膜移植手术.对照组有两组:对照1组10例,使用保存人角膜施行板层角膜移植手术;对照2组10例,实施自体结膜瓣遮盖手术.随访3～20mo,观察视力、感染控制情况以及角膜透明度.结果:观察组15眼术后感染控制,视力不同程度提高,除1眼在随访中发生植片混浊外,其余14眼植片均维持基本透明.对照1组,除1眼病毒性角膜炎因病毒复发导致角膜混浊外,其余9眼角膜植片维持透明.对照2组,除1眼真菌性角膜溃疡感染加重,行眼内容物剜除术,其余角膜溃疡瘢痕修复.结论:生物工程角膜是一种新型的人角膜替代材料,为解决逐年增长的角膜病患者与短缺的角膜供体之间的矛盾发挥了作用.