目的 建立有效分离吲达帕胺对映异构体并测定其含量的超临界流体色谱法.方法 色谱柱为Daicel IB N-5 柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为二氧化碳-0.1%二乙醇胺甲醇溶液(70∶30,V/V),背压为 150 bar,流速为 3.0 mL/min,检测波长为 243 nm,柱温为 40℃,进样量为 5 μL.结果 吲达帕胺及其对映异构体分离度良好,5 min内均已出峰完全.两者质量浓度均在 2.48～37.10 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9,n=6);检测限均为 0.012 μg/mL,定量限均为 0.05 μg/mL;精密度、稳定性试验结果的RSD均小于 1.0%;耐用性良好;平均回收率分别为 100.75%和 100.90%,RSD分别为 1.00%和 0.72%(n=9).结论 建立的超临界流体色谱法结果准确、耐用性较好,能有效测定吲达帕胺片中吲达帕胺及其对映异构体的含量.

目的 建立一种快速检测卤化丁基胶塞中 14 种抗氧剂的方法.方法 采用超高效合相色谱法,色谱柱为ACQUITY UPC2 BEH-2EP(100 mm×3.0 mm,1.7 μm),主要以超临界二氧化碳流体作为流动相,同时以甲醇-乙腈(1∶1)为流动相改性剂进行梯度洗脱,流速 1.5 mL·min-1,系统背压 13.79×103 kPa,柱温 40℃,进样体积 1 μL,检测器为二极管阵列检测器(PDA),检测波长 220 nm.结果 14 种抗氧剂可以在 5 min内实现分离检测.在 5～100 μg·mL-1 范围内,14 种抗氧剂的质量浓度分别与各自峰面积呈现出良好的线性关系,相关系数(r)均＞0.998,平均加标回收率为89.80%～102.96%,相对标准偏差(RSD)为 0.4%～2.4%(n=9).对 10 批次卤化丁基胶塞样品进行检测,主要检测到了 4种抗氧剂,分别为抗氧剂BHT、抗氧剂 168、抗氧剂 1076 及抗氧剂 1010.结论 该方法简便高效,选择性非常强,能够准确快速地分析卤化丁基胶塞中的抗氧剂.

甘油二酯(diacylglycerol,DAG)是油脂代谢的中间产物,在人体中具有重要的生理功能,主要通过脂肪酶水解油脂制备.但对 1,2-甘油二酯(1,2-diacylglycerol,1,2-DAG)、1,3-甘油二酯(1,3-diacylglycerol,1,3-DAG)的检测分离方法及脂肪酶的催化特异性的研究较少,限制了其广泛应用.基于以上问题,本研究首先通过超临界流体色谱与蒸发光散射检测器联用,优化检测分析参数,建立了 1,2-DAG(0.025?0.200 g/L)和 1,3-DAG(0.025?0.150 g/L)的高效定量检测方法.进一步基于疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)与三油酸甘油酯的分子对接,挑选了 5 个潜在底物结合位点并通过定点饱和突变构建了突变体库,利用超临界流体色谱方法对突变体催化特异性进行筛选.突变文库中I202V表现出最高的 1,3-位置选择特异性,较野生型TLL提高了 11.7%.本文基于半理性设计方法实现了对TLL位置催化特异性的改造,并建立了一种能够高效分离检测DAG位置异构体的方法,为脂肪酶催化特异性研究提供了参考.

酸枣仁具有养心补肝、宁心安神的功效,为治虚烦不眠的要药,主要含有黄酮、皂苷、生物碱、脂肪酸等成分,其中黄酮类化合物是主要药效成分之一.本文拟从化学结构、提取方法、分析方法和生物活性四个方面对酸枣仁中黄酮类成分进行归纳.酸枣仁中黄酮类成分的提取方法主要有浸提法、加热回流法、超声波辅助提取法、酶提取法等;酸枣仁已发现黄酮类成分44个,包括31个黄酮、8个黄酮醇、2个二氢黄酮和3个异黄酮;分析方法主要有紫外分光光度法、高效液相色谱法、超临界流体色谱法、色谱-质谱联用等;药理作用研究表明,酸枣仁中黄酮类成分具有镇静安眠抗抑郁、抗氧化、改善记忆、保护心脏、抗肿瘤等生物活性.本文通过对酸枣仁中黄酮类成分的化学结构、提取、分析和生物活性进行总结,以期为酸枣仁中黄酮类成分的深入开发利用提供参考.

目的:研究超临界流体萃取选择性萃取补肾活血方产物的化学组成及体外诱导成骨细胞增殖的活性.方法:采用多元超临界流体萃取补肾活血方,采用气相色谱-质谱联用(GC/MS)表征各萃取产物的化学组成,并以体外培养原代大鼠颅成骨细胞为模型,研究各萃取产物含药血清诱导成骨细胞增殖的活性.结果:补肾活血方经超临界流体萃取得到SFEI和SFEII两个产物,GC/MS分析显示两个萃取产物挥发性组分的化学组成极为相似,为倍半萜和醛类化合物,但组成比例不同;体外研究显示SFEI与SFEII高、中、低剂量组合药血清均可显著诱导成骨细胞增殖(P＜0.05),且SFEI中剂量组、SFEII低剂量组促成骨细胞增殖作用显著强于醇-水提取物组和阳性对照药组(P＜0.05).结论:超临界流体可萃取选择性萃取补肾活血方中的挥发性和脂溶性成分,且该萃取物具有体外诱导成骨细胞增殖的活性.

目的:为更好地促进超临界流体色谱(SFC)技术在药物分析工作中的应用提供参考.方法:以“超临界流体色谱”“SFC”“合相色谱”“UPC”“中药”“Supercritical fluid chromatography”“UltraPerformance convergence chromatography”等为关键词,组合查询在中国知网、万方数据库、维普数据库、Web of Science等数据库中收录的2012年1月-2017年6月发表的相关研究文献,进行归纳和总结.结果与结论:共检索到相关研究文献315篇,其中有效文献38篇.SFC技术实现分离主要原理是根据待测物在固定相和流动相两相中的分配系数不同,继而实现对待测物的先后洗脱.SFC技术在手性药物分析领域的应用主要涉及化学药手性成分拆分和中药手性成分拆分两个方面;在非手性药物分析领域的应用主要涉及天然产物分离及制备、代谢组学研究、维生素分离及测定和指纹图谱研究等方面.具有快速、高效、灵敏、环保等优点的SFC及其联用技术给药物成分的定性与定量分析提供了一条新的思路.

目的 研究海南砂仁超临界CO2萃取物中的化学成分.方法 采用超临界CO2流体萃取法提取海南砂仁挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术对其成分进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定,同时采用峰而积归一化法确定各成分的相对百分含量.结果 从海南砂仁油中共分离出38个组分,鉴定了其中的35种成分,所鉴定的成分占总挥发油成分的95.55%,其中相对百分含量较高的有2-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3,7-二甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮(17.38%)、顺-9-十八碳烯醛(7.21%)、2-十一碳烯-10-十一碳炔酸酯(6.79%)、E,E,Z-1,3,12-十九碳三烯-5,14-二醇(5.97%)等.结论 从海南砂仁萃取物中分离鉴定了35种成分,它们的含量占超临界萃取成分总面积的95.55%.

多手性中心药物具有多个立体异构体,空间构型的差异导致异构体之间生物活性差异较大,多手性中心药物的手性分离分析仍然是一个巨大的挑战.关于单手性中心化合物手性分离分析的报道很多,而关于多手性中心药物的手性分离却非常少.本文总结了近年来关于多手性中心化合物色谱手性分离研究进展,主要包括HPLC、GC、毛细管电泳、超临界流体色谱及逆流色谱等在多手性药物分离分析中应用.

目的 建立超临界流体色谱(SFC)方法测定桂利嗪中的有关物质.方法 采用Torus DIOL色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.7μm),以二氧化碳-含0.1％三氟乙酸和0.1％三乙胺的甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为1.5 mL·min-1,柱温为40℃,背压为1.38×107 Pa,检测波长为230 nm.结果 桂利嗪系统适用性试验符合要求,桂利嗪及其有关物质在4.5 min内依次出峰,各杂质峰分离度符合要求.4种有关物质均在2 ～ 20 μg·mL-1内线性关系良好(r ＞0.999 9),检测限为0.7～1.3 ng(S/N≥3).桂利嗪在0.05～1.0 mg·mL-1内线性关系良好(r=1.000 0).4种有关物质在桂利嗪原料药中的平均回收率为98.0％ ～ 106.7％,RSD为2.57％～4.44％(n=9).结论 本方法可同时测定桂利嗪中的有关物质,为该产品的质量控制提供参考.

目的 建立一种超临界流体色谱方法拆分调血脂药阿托伐他汀钙与其对映异构体杂质,并对对映异构体杂质进行含量测定.方法 采用ACQUITY UPC2 Trefoil CEL2色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.5 μm),以超临界二氧化碳/含0.1％三氟乙酸的甲醇(78/22,V/V)为流动相,背压为13.8 MPa,进样量为4μL,柱温为45℃,流速为1.5 mL· min-1,于244 nm波长处分离阿托伐他汀钙及其对映异构体.结果 阿托伐他汀钙与其对映体在5 min内均已出峰完全,分离度达4.1,对映体在2.5 ～50μg·mL-内线性关系良好,相关系数为0.999 9(n =6).对映体的检测限与定量限分别为1.0 μg·mL-1(S/N=3)和2.5μg·mL-1 (S/N=10);阿托伐他汀钙原料药中对映异构体的平均加样回收率为100.40％.结论 利用超临界流体色谱分离阿托伐他汀钙手性杂质与使用普通液相色谱相比可极大缩短分离时间,减少有机溶剂的使用量,重现性好,可有效用于阿托伐他汀钙的质量控制.