目的:探讨雌激素受体(ESR1)对乳腺癌细胞辐射抗性的影响及分子机制。方法:在雌激素受体阴性乳腺癌细胞中转染ESR1过表达质粒(过表达对照vector组、过表达ESR1 OE组)，在雌激素受体阳性乳腺癌细胞中通过慢病毒转染方法构建稳定敲低ESR1(敲低对照shNC组、敲低shESR1组)的细胞模型，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)和免疫印迹方法检测自噬相关基因mRNA(ATG5)和蛋白表达水平(LC3B-I、LC3B-II、P62、FIP200、ATG5、ATG7、ATG12、Beclin1、ULK1)；在8 Gy X射线的电离辐射处理下，免疫印迹法检测自噬通量；采用流式细胞术检测细胞死亡；采用集落形成实验检测乳腺癌细胞辐射敏感性(未照射sham组、照射IR组、电离辐射联合铁死亡抑制剂处理Fer-1＋IR组、电离辐射联合凋亡抑制剂处理Z-VAD＋IR组、电离辐射联合自噬抑制剂处理CQ＋IR组)；用台盼蓝染色检测自噬基因敲低和过表达细胞模型以及雌激素受体抑制剂他莫昔芬(TAM)与电离辐射联合治疗下乳腺癌细胞的死亡率(他莫昔芬未处理TAM－组、他莫昔芬处理TAM＋组)。结果:在8 Gy X射线照射后24 h处理条件下，雌激素受体阳性乳腺癌ZR75细胞ESR1的敲低促进细胞死亡( t＝3.49、3.13, P < 0.05)，而雌激素受体阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞ESR1的过表达抑制细胞死亡( t＝4.16、7.48, P < 0.05)；与单纯照射相比，自噬抑制剂氯喹的处理后增加了敲低ESR1的ZR75细胞集落形成数量( t＝8.49, P < 0.05),抑制自噬可以减少沉默ESR1所致的ZR75细胞死亡。在电离辐射处理下，MDA－MB－231细胞过表达ESR1促进了细胞保护性自噬；ZR75细胞敲低ESR1后细胞保护性自噬降低。在ZR75细胞中敲低ATG5发现自噬降低，细胞死亡增加( t＝4.19、6.39, P < 0.05)，而在ZR75中过表达ATG5可以逆转因敲低ESR1导致的细胞死亡增加( t＝1.70、4.65, P < 0.05)。化疗药物他莫昔芬处理雌激素受体阳性乳腺癌细胞ZR75后发现自噬基因ATG5、ATG12的表达下降，自噬抑制，细胞死亡增加( t＝18.70, P < 0.05)，电离辐射处理促进了这一进程( t＝16.82, P < 0.05)。 结论:雌激素受体ESR1通过增加ATG5自噬相关蛋白，促进雌激素受体阳性乳腺癌细胞的保护性自噬，从而导致雌激素受体阳性乳腺癌细胞的辐射抵抗，化疗药物他莫昔芬联合电离辐射治疗增加了雌激素受体阳性乳腺癌细胞的辐射敏感性。

放射性肠炎是放射治疗引起的肠道并发症。辐射引起肠道微生态改变、肠黏膜屏障破坏，肠道共生微生物及其代谢产物通过影响肠道黏膜屏障免疫功能在辐射损伤和辐射抗性中发挥一定作用。以肠微生态为靶点的微生态制剂和菌群移植可能为预防和治疗放射性肠炎提供新的方向。

目的:研究miR-27b-3p对乳腺癌细胞辐射抵抗的影响。方法:通过检索基因表达(GEO)数据库，筛选分析miR-27b-3p在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达水平。利用实时荧光定量PCR技术分析其在不同乳腺癌细胞系中的表达水平。通过细胞克隆形成、免疫荧光和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)检测技术评价miR-27b-3p对乳腺癌细胞辐射抵抗作用。采用荧光素酶报告基因技术确定miR-27b-3p的靶基因PLK2，并在乳腺癌细胞中进一步验证miR-27b-3p的辐射抵抗作用。结果:与正常乳腺组织和细胞相比，miR-27b-3p在乳腺癌组织( t＝2.99， P<0.01)和乳腺癌细胞中表达水平显著上调( t＝21.21、32.88， P<0.05)。尤其在抗辐射细胞MCF-7R中升高更加明显( t＝25.63， P<0.05)。过表达miR-27b-3p增强了MCF-7细胞的克隆形成能力( t＝10.32， P<0.05)，且随着辐照剂量的增加，miR-27b-3p对MCF-7增殖能力的保护效应逐渐凸显( t＝8.77、8.26、8.03， P<0.05)；干扰miR-27b-3p则抑制MCF-7R细胞克隆形成数( t＝40.00， P<0.05)，且随着辐照剂量的增加，进一步削弱了MCF-7R细胞的增殖能力( t＝8.54、8.32、8.23， P<0.05)。报告基因实验结果表明，PLK2是miR-27b-3p的直接靶标。过表达PLK2抑制了miR-27b-3p介导的乳腺癌细胞辐射抵抗(MCF-7： t＝9.66， P<0.05；MCF-7R： t＝6.42， P<0.05)。 结论:miR-27b-3p可通过靶向PLK2提高乳腺癌细胞的辐射抗性。

放疗是治疗恶性肿瘤的三大常规手段之一，但由于其存在高辐射剂量损伤正常组织和肿瘤细胞辐射抵抗性强等问题，导致治疗后往往达不到预期效果。为提高放疗疗效，并且减少对正常组织的不良作用，探索新型放疗增敏剂及放化疗联合的新策略已成为研究热点。高分子纳米材料凭借其良好的生物相容性和生理稳定性等优点，为提高肿瘤放疗效果开拓了广阔的应用前景。笔者就高分子纳米材料用于放疗增敏的研究进展进行综述。

目的:探索lncRNA H19在结肠癌预后评估及辐射抗性调控中的作用，为结肠癌的诊疗提供新的潜在靶点。方法:基于生物信息学技术分析lncRNA H19在结肠癌临床病理参数及预后评估中的价值。通过siRNA和过表达质粒转染调节lncRNA H19在结肠癌细胞HCT116及SW620中的表达。通过CCK8、EdU、克隆存活及流式细胞术检测调节lncRNA H19表达对X线辐射后结肠癌细胞增殖、DNA合成、辐射敏感性及细胞周期的影响。结果:lncRNA H19在结肠癌组织中表达显著上调并与结肠癌患者的预后不良相关。lncRNA H19作为结肠癌的高风险因子，对于结肠癌的预后评估具有显著的优势（曲线下面积值为0.816）。进一步的实验表明，辐射可以诱导lncRNA H19在结肠癌细胞中高表达。敲低lncRNA H19（siRNA-H19）可以明显增加HCT116细胞对X线的敏感性，而过表达lncRNA H19（H19-OE）的SW620细胞辐射抗性增强。此外，流式分析显示敲低lncRNA H19可以增强X线诱导的G 2/M期阻滞，提示lncRNA H19可能通过参与细胞周期调控影响结肠癌细胞的辐射敏感性。 结论:lncRNA H19在结肠癌预后评估及辐射抗性调控中发挥关键作用，可能作为增强放疗敏感性的潜在靶点。

目的:体外构建鼻咽癌放射抵抗细胞株，为进一步研究鼻咽癌放射抵抗的分子机制提供实验基础。方法:采用剂量梯度法照射诱导建立放射抵抗细胞模型5-8F-IR。光学显微镜观察细胞形态变化；克隆形成实验检测细胞克隆形成能力；CCK-8实验检测细胞活力；5-溴-2-脱氧尿嘧啶（EdU）实验检测细胞增殖能力；彗星实验及免疫荧光实验检测细胞DNA损伤修复能力；流式细胞术检测细胞凋亡水平及周期分布；蛋白质印迹法检测DNA损伤相关蛋白γH2AX及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3（Caspase-3）的蛋白表达水平。结果:剂量梯度照射后5-8F-IR细胞形态较亲本5-8F细胞形态变长，5-8F-IR细胞的克隆形成能力（ P<0.01）、细胞活力（ P<0.001）、细胞增殖能力（ P<0.05）、DNA损伤修复能力（ P<0.05）均明显优于亲本细胞5-8F，照射后5-8F-IR细胞的凋亡率明显低于5-8F细胞（ P<0.01），未接受照射时5-8F-IR细胞处于S期的百分比较5-8F细胞升高，接受照射后5-8F-IR细胞出现明显的G 2/M期阻滞（ P<0.01），同时照射后5-8F-IR细胞的DNA损伤相关蛋白γH2AX（ P<0.001）及凋亡相关蛋白Caspase-3（ P<0.05）蛋白表达水平明显低于5-8F细胞。 结论:人鼻咽癌细胞株5-8F经剂量梯度法照射诱导建立的5-8F-IR细胞具有放射抗拒性并显示出与亲代5-8F细胞不同的生物学特性，为探索鼻咽癌放射抵抗机制提供了研究工具。

目的:研究泛醌氧化还原酶复合物组装因子4（NDUFAF4）的表达与肝癌患者临床预后的相关性，探究NDUFAF4对人肝癌细胞系的辐射敏感性的影响及其机制。方法:通过数据库及肝癌组织样本探究NDUFAF4在肝癌中的表达及其表达水平与临床预后的相关性。通过脂质体将敲减NDUFAF4基因的质粒si-NDUFAF4转入HepG2和Huh7细胞，克隆形成实验检测辐射敏感性。同时通过裸鼠开展荷瘤实验，免疫荧光法检测β联蛋白（β-catenin），蛋白质印迹法检测上皮钙黏素（E-cadherin）和神经钙黏素（N-cadherin）的蛋白表达。结果:生物信息学分析结果证实，NDUFAF4在肝癌组织中显著高表达，其表达水平越高，患者预后越差（ P＜0.05）。NDUFAF4在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织；克隆形成实验证实，敲减NDUFAF4显著降低肝癌细胞的生存率（ P＜0.01）；体内实验证实，敲减NDUFAF4可以减慢癌细胞增殖，减少β-catenin及Ki-67的表达。敲减NDUFAF4显著减少肝癌细胞系核内β-catenin的蛋白水平，提示NDUFAF4可以激活Wnt/β-catenin通路。敲减NDUFAF4显著上调E-cadherin和下调N-cadherin的蛋白表达水平。 结论:敲减NDUFAF4可以通过抑制Wnt/β-catenin通路增强人肝癌细胞系的辐射敏感性，并且与临床预后紧密相关，或可为克服肝癌的辐射抗性提供新的靶点。

代谢重编程是指肿瘤细胞为满足自身生长和能量的需求，通过改变代谢模式来调节细胞生物学功能，帮助自身抵御外界胁迫，从而使细胞适应低氧、酸性、营养物质缺乏等微环境而快速增殖的现象。放射生物学研究发现，电离辐射可通过诱导细胞代谢重编程产生辐射抗性；也可通过旁效应促进未受照射细胞发生代谢重编程，从而赋予细胞癌变和辐射抗性能力。因此，探索电离辐射和电离辐射旁效应中代谢重编程机制，可以为辐射防护、放射治疗、放射损伤诊断等提供新的思路和理论依据。本文对代谢重编程在电离辐射及其旁效应中的研究进展进行综述。

目的:探索核仁小RNA(snoRNA）SNORA72基因在不同癌症特别是结直肠癌（CRC）中的表达模式及其对CRC细胞的生长及放射敏感性的影响。方法:应用开放的癌症数据库分析SNORA72在不同癌症组织和CRC组织中的表达水平。构建过表达或敲低SNORA72的CRC细胞株HT29，将HT29细胞株分为过表达SNORA72组（LV-SNORA72）及其阴性对照组（LV-NC）、敲低SNORA72表达组（ASO-SNORA72）及其阴性对照组（ASO-NC）。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测HT29细胞中SNORA72表达情况。分别检测在体外过表达或敲低SNORA72后，对细胞增殖、细胞克隆形成、细胞凋亡、细胞周期的影响。对LV-SNORA72组及LV-NC组的HT29细胞进行不同剂量 60Co γ射线照射，检测各组细胞的存活分数（SF）和凋亡率。采用转录组学分析法探讨SNORA72影响HT29细胞生长可能的作用机制。两组间的比较采用独立样本 t检验。 结果:癌症数据库分析发现SNORA72在包括CRC在内的多种癌症组织中高表达，且差异均有统计学意义（均 P<0.05）。qRT-PCR检测结果显示，与LV-NC组相比，LV-SNORA72组SNORA72的相对表达水平明显升高[（2.68±0.06）对（1.00± 0.17）]，且差异有统计学意义（ t=16.570， P<0.001）。另外，与ASO-NC组相比，ASO-SNORA72组SNORA72的相对表达水平明显降低[（0.61±0.08）对（1.00±0.13）]，且差异有统计学意义（ t=4.355， P<0.05）。细胞增殖检测结果显示，在实验的第3、4、5天，LV-SNORA72组的吸光度值明显高于LV-NC组[（0.79±0.05）对（0.51±0.09）、（1.78±0.04）对（1.22±0.05）、（3.30±0.05）对（2.19± 0.06）]，且差异均有统计学意义（ t=8.582、16.400、31.200，均 P<0.001）。相反，ASO-SNORA72组的吸光度值明显低于ASO-NC组[（0.42±0.07）对（0.55±0.05）、（1.04±0.08）对（1.25±0.05）、（1.46± 0.09）对（1.74±0.08）]，且差异均有统计学意义（ t=3.957、6.147、8.471，均 P<0.01）。细胞克隆形成实验结果显示，LV-SNORA72组的克隆形成率明显高于LV-NC组[（40.87±1.70）%对（26.60± 0.40）%]，且差异有统计学意义（ t=14.140， P<0.001）。相反，ASO-SNORA72组的克隆形成率明显低于ASO-NC组[（9.60±0.40）%对（12.43±0.38）%]，且差异有统计学意义（ t=8.910， P<0.001）。细胞凋亡检测结果显示，LV-SNORA72组的细胞凋亡率明显低于LV-NC组[（1.89±0.16）%对（2.64±0.15）%]，且差异有统计学意义（ t=6.115， P<0.01）。相反，ASO-SNORA72组的细胞凋亡率明显高于ASO-NC组[（6.44±0.54）%对（3.92±0.37）%]，且差异有统计学意义（ t=6.644， P< 0.01）。Western blot结果显示，与ASO-NC组相比，ASO-SNORA72组可以促进凋亡蛋白PARP和Caspase3发生剪切活化，Bax蛋白表达水平升高，同时抑制抗凋亡蛋白Survivin和Bcl-2的表达。放射敏感性分析的细胞克隆形成实验结果显示，在经1、2、4、6 Gy γ射线照射后，LV-SNORA72组细胞的SF均较LV-NC组增加[（0.89±0.05）对（0.81±0.03）、（0.64±0.10）对（0.47± 0.01）、（0.16±0.04）对（0.09±0.01）、（0.04±0.01）对（0.02±0.01）]，且差异均有统计学意义（ t=4.063、8.802、4.045、2.937，均 P<0.05）。放射诱导的细胞凋亡结果显示，在4 Gy照射后48 h和72 h，与LV-NC组相比，LV-SNORA72组细胞凋亡率明显降低[（8.14±0.12）%对（9.86±0.22）%、（11.26±0.52）%对（15.83±1.54）%]，且差异均有统计学意义（ t=3.470、9.208，均 P<0.05）；在8 Gy照射后48 h和72 h，与LV-NC组相比，LV-SNORA72组细胞凋亡率明显降低[（13.29±0.17）%对（14.88±0.58）%、（19.82±0.56）%对（23.7±0.6）%]，且差异均有统计学意义（ t=3.201、7.819，均 P<0.05）；在12 Gy照射后48 h和72 h，与LV-NC组相比，LV-SNORA72组细胞凋亡率明显降低[（14.06±0.32）%对（18.56±1.08）%、（22.19±0.02）%对（26.84±0.66）%]，且差异均有统计学意义（ t=9.054、9.369，均 P<0.001）。转录组学分析结果显示，SNORA72过表达影响细胞活化、细胞黏附、免疫和炎症反应，以及细胞迁移和增殖等生物学过程。 结论:SNORA72在CRC组织中特异性高表达且与患者不良预后相关，过表达SNORA72促进CRC细胞的生长和增殖，增加细胞放射抵抗性。

目的:探索脱氧胞苷激酶（dCK）在放射诱导三阴性乳腺癌（TNBC）铁死亡中的调控作用。方法:用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建 dCK基因沉默和不同磷酸化表型的细胞模型，并给予铁死亡诱导剂Erastin和/或铁死亡抑制剂Fer-1联合或不联合X线放射处理。通过MTT法检测细胞活性，活性氧荧光探针（DCFH-DA）检测活性氧水平，通过蛋白质印迹法（Western blot）检测dCK、转铁蛋白、转铁蛋白受体（TfR1）、铁转运蛋白（FPN）、铁蛋白重链1（FTH1）的蛋白表达量。采用SPSS 17.0和Origin 2021软件对数据进行分析。计量资料符合正态分布，以 xˉ±s表示。两组之间的比较使用Student t检验进行，而三组及以上的比较使用单向方差分析。 结果:在MDA-MB-231细胞中，放射诱导细胞死亡，铁死亡诱导剂Erastin显著促进放射诱导的细胞死亡，铁死亡抑制剂Fer-1能够逆转放射诱导的细胞死亡。与对照细胞相比， dCK基因沉默细胞的放射诱导的细胞死亡增加，活性氧水平降低，Erastin联合放射诱导的细胞死亡减少，活性氧水平减弱，Fer-1可使放射诱导的细胞死亡程度降低，并且Fer-1无法抑制放射对活性氧的诱导作用。与对照细胞相比，在野生型dCK（dCK-WT）或dCK过磷酸化（dCK-S74E）的 dCK基因沉默细胞中，放射诱导细胞死亡减少，活性氧水平降低，FTH1表达量降低，加入放射进一步降低FTH1的表达水平。此外，在这些细胞中，Erastin促进放射诱导的细胞死亡和活性氧水平增加，Fer-1对放射诱导活性氧和细胞死亡的逆转程度明显增强。 结论:dCK磷酸化促进了放射诱导TNBC细胞的铁死亡，靶向dCK可能是一种克服TNBC治疗中辐射抗性的新治疗方式。