目的 分析射干麻黄汤与定喘汤治疗支气管哮喘寒热证候的机制差异.方法 用中药系统药理学数据库与分析平台分别筛选射干麻黄汤与定喘汤中各组成药物的有效成分及作用靶点.通过基因与疾病关联数据库和人类基因信息数据库获取支气管哮喘对应的基因靶点,分别筛选射干麻黄汤与冷哮、定喘汤与热哮的核心作用靶点及成分,并用网络分析在线平台进行网络拓扑分析,通过在R软件中用"org.Hs.eg.db"软件包进行基因本体(GO)与京都基因组百科全书(KEGG)功能富集分析,预测其不同作用机制,并用Autodock Vina软件对核心活性成分和核心靶点进行分子对接技术分析验证.结果 射干麻黄汤药物活性成分130个,定喘汤药物活性成分236个,相同活性成分54个.在与支气管哮喘相关靶点中,射干麻黄汤有52个潜在治疗靶点,定喘汤有45个潜在靶点.GO与KEGG分析显示:射干麻黄汤与定喘汤在血小板活化、脂肪细胞因子信号通路、酒精性肝病、瞬时受体电位通道的炎症介质调节、炎症性肠病、心肌细胞中的肾上腺素能信号、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B等信号通路等存在差异.射干麻黄汤中核心化合物鸢尾甲黄素9CI、鸢尾甲黄素A与定喘汤中核心化合物花生四烯酸、甘草查尔酮A等存在差异;定喘汤治疗热哮与射干麻黄汤治疗冷哮药物作用机制在信号转导与转录活化因子3(STAT3)、辣椒素受体(TRPV1)与Ras同源基因(RHO)靶点存在差异.结论 2种中药方剂调节哮喘寒热证候引起的不同分子和生物过程反映了冷哮和热哮2种中医证候之间的生物学差异.

[目的]为明确几丁质和鞭毛蛋白衍生肽flg22诱导的辣椒幼苗先天免疫生理响应特征,探讨辣椒先天免疫生理响应与辣椒抗多种病害的关系.[方法]以5个四川本地辣椒品种幼苗为试材,鉴定它们对青枯病和疫病病情指数和抗性水平,采用水培法培育幼苗并进行外源几丁质和flg22处理,检测各品种不同诱导时间下幼苗根系生长、气孔孔径、胼胝质沉积、活性氧(ROS)积累和SOD、CAT活性,以及先天免疫相关基因表达量的变化,综合评价其生理响应及其与抗病性关系.[结果](1)各品种幼苗青枯病和疫病病情指数以'川腾10号'最低,抗病性最强,以'本地条椒'最高,抗病性最弱.(2)外源几丁质和flg22抑制了各品种幼苗根系生长速率,诱导离体叶片气孔闭合,促进叶片细胞壁胼胝质沉积加厚,ROS含量持续增加,SOD和CAT活性不断提高.各品种幼苗先天免疫生理响应指标的平均隶属函数值以'川腾10号'最高,'本地条椒'最低,并且平均隶属函数值与疫病、青枯病病情指数均具有显著负相关性.(3)外源flg22和几丁质诱导'川腾10号'幼苗先天免疫相关基因CaWRKY22、CaMAPK7和ChiIV3显著上调表达.[结论]外源flg22和几丁质可诱导辣椒幼苗先天免疫生理响应,且响应程度强弱在品种间存在差异,依据生理响应指标通过隶属函数可综合评价辣椒品种的抗病水平;'川腾10号'的平均隶属函数值最高,多抗性水平最好,这与其先天免疫相关基因CaWRKY22、CaMAPK7和ChiIV3的显著上调表达有关.

[目的]探究MADS-box家族基因RIN的表达特征和功能,解析其对辣椒类胡萝卜素代谢的影响.[方法]基于辣椒果实发育转录组,通过RT-PCR克隆辣椒MADS-box转录因子CaRIN基因CDS全长,分析其生物信息学、表达模式、亚细胞定位、转录活性等,并探讨VIGS诱导CaRIN基因沉默对类胡萝卜素代谢的影响.[结果](1)CaRIN基因CDS全长732 bp,编码243个氨基酸,蛋白分子质量为27.95 kD,等电点(pI)为7.06,其编码蛋白具有典型的MEF2_like MADS结构域,属MICK型转录因子.(2)CaRIN基因主要在花和果实中表达,具有组织特异性;CaRIN定位在细胞核,并且具有转录激活活性.(3)CaRIN基因启动子具有ABRE等多个激素应答元件,外源脱落酸和乙烯利均能加速果实转红,诱导CaRIN及相关基因高表达.(4)VIGS诱导沉默CaRIN基因后,类胡萝卜素代谢途径基因PSY1、CCS、PDS、CRTZ、LCYB和NCED1表达水平降低为对照组的0.27～0.59倍,且果实总类胡萝卜素含量(0.379 mg/g)较对照(0.650 mg/g)显著降低.[结论]CaRIN是辣椒果实类胡萝卜素代谢过程的重要调控因子.

目的:观察芳樟醇通过瞬时受体电位香草酸1(TRPV1)通路对中枢及外周神经的影响，以及其缓解肠易激综合征(IBS)内脏高敏感的作用。方法:选择36只无特定病原体动物级雌性Sprague-Dawley(SD)新生幼鼠，其中30只用于行为学实验，6只用于电生理实验。行为学实验：将30只SD新生幼鼠随机分为正常对照组(结直肠内注射0.2 mL 0.9%氯化钠溶液)，新生期结肠炎性刺激(NCI)组(结直肠内注射0.2 mL 0.5%的乙酸溶液)，以及芳樟醇20、50、100 mg/kg组(NCI造模成功后，在5周龄时分别予以芳樟醇20、50、100 mg/kg灌胃)；在6周龄时，通过结肠扩张试验评估各组大鼠的腹部撤回反射(AWR)评分和痛阈压力值(AWR评分为3分时的充气压力值)；在行为学观察结束后1 h，采用蛋白质免疫印迹法和免疫组织化学法检测各组大鼠结直肠黏膜和脊髓中的TRPV1蛋白质表达水平。电生理实验：采用6~7周龄雌性SD大鼠制作离体脊髓横切片，每只大鼠随机选取5~8个神经元进行全细胞膜片钳记录，分别记录芳樟醇、河豚毒素和抗辣椒素对胶状质区神经元自发性兴奋性突触后电流(sEPSC)的作用。统计学方法采用独立样本 t检验和配对 t检验。 结果:NCI组大鼠在40 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)压力下的AWR评分高于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组[(2.5±0.2)分比(1.0±0.3)、(1.5±0.3)、(1.5±0.2)、(1.5±0.2)分]，在60 mmHg压力下的AWR评分高于正常对照组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组[(3.8±0.2)分比(2.3±0.4)、(2.3±0.5)、(2.0±0.3)分]，差异均有统计学意义( t＝4.39、2.45、3.16、3.16、3.31、2.88、5.97； P＝0.001、0.034、0.010、0.010、0.008、0.028，<0.001)。NCI组大鼠的痛阈低于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组[(35.8±2.0) mmHg比(55.8±1.5)、(49.2±2.4)、(53.3±2.1)、(55.0±1.8) mmHg，差异均有统计学意义( t＝－7.91、－4.28、－6.01、－7.06， P<0.001、＝0.002、<0.001、<0.001)。蛋白质印迹法检测结果显示，NCI组大鼠结直肠中的TRPV1蛋白质相对表达水平高于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组(0.86±0.03比0.32±0.03、0.68±0.01、0.45±0.03、0.56±0.02)，脊髓中的TRPV1蛋白质相对表达水平高于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组(0.91±0.02比0.34±0.03、0.72±0.03、0.51±0.06、0.63±0.05)，差异均有统计学意义( t＝12.44、5.14、9.68、7.69、19.14、5.13、6.72、5.60， P<0.001、<0.001、<0.001、<0.001、<0.001、<0.001、＝0.001、<0.001)。给予2 mmol/L芳樟醇灌注给药4 min时sEPSC的频率和外向电流与同一胶状质区神经元给予0.5 μmol/L河豚毒素和2 mmol/L芳樟醇联合灌注给药4 min时比较[ n＝5，(23.84±4.81) Hz比(20.54±5.71) Hz、(7.60±0.35) pA比(7.62±0.75)pA]，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。给予2 mmol/L芳樟醇灌注给药4 min时sEPSC的频率高于同一胶状质区神经元给予10 μmol/L抗辣椒素和2 mmol/L芳樟醇联合灌注给药4 min时[ n＝5，(20.17±2.55) Hz比(14.09±2.98) Hz]，差异有统计学意义( t＝3.58、 P＝0.021)；外向电流比较[(7.42±0.78) pA比(7.03±1.32)pA]，差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:芳樟醇部分通过TRPV1通道缓解IBS内脏高敏感，这些效应可能与其引起胶状质区神经元细胞膜电位超极化有关。

目的:探讨高压氧治疗对瘢痕疙瘩组织中瘙痒相关因子表达的影响以及瘢痕疙瘩瘙痒症状的发生机制。方法:选取2021年2月至8月北京协和医院整形美容外科收治的12例瘢痕疙瘩患者作为研究对象，按照治疗方法分为高压氧治疗组（HK组）和对照组（K组），每组6例。2组患者均行手术切除加放疗，HK组患者在术前接受4次高压氧治疗。采用免疫组化染色法半定量分析手术切除后所得胸部瘢痕疙瘩标本中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、色氨酸羟化酶1（TPH1）、辣椒素受体1（TRPV1）、间隙连接蛋白43（Cx43）的表达水平。利用单调方程评价HIF-1α与TPH1、TRPV1、Cx43的相关性。结果:与K组相比，HK组标本中HIF-1α、TPH1、Cx43的表达明显降低，差异有统计学意义（ P<0.05）；TRPV1的表达降低，但差异无统计学意义（ P>0.05）。HIF-1α与Cx43、TRPV1呈中等正相关、与TPH1呈弱正相关，差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:高压氧治疗可降低瘢痕疙瘩组织Cx43、TPH1、HIF-1α的表达水平。HIF-1α与Cx43、TRV1、TPH1呈正相关趋势，可能为瘢痕疙瘩瘙痒的调控分子之一。

目的:探讨辣椒素受体(TRPV1)对小鼠神经元自噬和抑郁样行为的影响及分子机制。方法:87只C57雄性小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脑缺血/再灌注组(I/R组)、辣椒平(Capsazepine，CPZ)预处理的脑缺血/再灌注组(I/R+CPZ组)，剔除因不合要求3只外，每组28只。I/R组小鼠采用右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)建立脑缺血再灌注模型。I/R+CPZ组小鼠在造模前，侧脑室注射CPZ。Sham组小鼠只插入线栓，不进行动脉栓塞。采用mNSS评分评价神经功能缺失程度，用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的抑郁样行为，用TTC染色观测梗死体积，用HE染色观察杏仁核病理变化，用Western blot检测Beclin-1、LC3、p62及p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达。使用SPSS 23.0软件进行统计分析，两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:神经功能缺损评分结果显示，I/R+CPZ组[(9.77±2.32)分]小鼠的评分较I/R组[(12.85±2.73)分]明显降低( t＝3.10， P<0.01)。与I/R组比较，I/R+CPZ组小鼠的悬尾不动时间[(93.28±50.69)s，(143.80±35.61)s； t＝2.94， P<0.01]和强迫游泳不动时间[(139.50±13.33)s，(175.30±19.78)s； t＝5.40， P<0.01]均显著降低。TTC染色显示，I/R+CPZ组小鼠的脑梗死体积较I/R组显著减少[(19.30±5.19)%，(33.60±3.90)%； t＝5.40， P<0.01)。HE染色显示，与I/R组比较，I/R+CPZ组小鼠的杏仁核区细胞数增加，排列紧密，核固缩深染减少。Western blot结果发现，与I/R组比较，I/R+CPZ组小鼠杏仁核区自噬相关蛋白Beclin-1( t＝2.94， P<0.05)和LC3( t＝3.16， P<0.05)的表达水平下调，而p62( t＝3.60， P<0.05)、p-PI3K( t＝7.79， P<0.01)、p-AKT( t＝4.15， P<0.01)和p-mTOR( t＝6.15， P<0.01)的表达均上调。 结论:脑缺血/再灌注激活神经元自噬，而CPZ可能调控PI3K-AKT-mTOR通路，进而抑制自噬的过度激活，从而起到神经保护和改善卒中后抑郁样行为的作用。

为解析江西省辣椒育种骨干亲本材料的遗传多样性并构建其DNA指纹图谱,本研究利用毛细管电泳和SSR分子标记技术对江西60份辣椒种质材料进行位点检测.结果表明,49对SSR引物共检测到202个等位基因,平均4.122个,平均有效等位基因为2.172个,平均香农信息指数为0.850,平均多态信息含量为0.414,说明60份供试材料具有较为丰富的遗传多样性;平均期望杂合度0.475大于观测杂合度0.126,表明多代自交导致材料纯合度较高.聚类分析、群体结构分析和主坐标分析结果一致,即江西辣椒育种亲本材料以南方地区和小果型尖椒材料为主,遗传背景狭窄且保持较纯的血统.此外,本研究根据多位点匹配分析确定了 PM1、CAMS-855、CO911525S、PM22、HpmsE015和Hpms1214为核心引物,并利用这6对核心引物构建了 60份辣椒育种亲本的指纹图谱,为江西辣椒资源的鉴定和保护提供了有力支撑,为分子辅助育种中亲本的选择提供理论依据.

目的 探究辣椒素对急性心肌梗死大鼠的保护作用及相关机制.方法 联合TCMSP、DAVID网站进行网络药理学分析,探寻辣椒素抗急性心肌梗死可能的作用靶点及通路.48 只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、辣椒素(20 mg/kg)组、辣椒素+2-MeoE2(30 mg/kg)组,各组ig相应药物连续 14 d,1 次/d.采用心脏超声观察大鼠心肌功能的变化,试剂盒检测血清中心肌酶肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白(cTnT)水平.苏木精-伊红(HE)染色观察心脏组织的组织学变化.实时荧光定量检测低氧诱导因子-1A(HIF-1A)、血管内皮生长因子(VEGF)、血红素加氧酶 1(HMOX1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达.Western blotting检测大鼠心肌组织中HIF-1A、Bcl-2 蛋白水平.结果 网络药理学研究分析显示辣椒素抗急性心肌梗死靶点富集显著性最高的通路为HIF-1 信号通路.动物实验显示,与模型组相比,辣椒素组心肌细胞凋亡率明显减少,血清CK、CK-MB、LDH和cTnT水平均明显下降,左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)明显下降,左室短轴的缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF)、每搏量(SV)明显增加(P＜0.05、0.01),同时HIF-1A、VEGF、HMOX1、Bcl-2 mRNA表达明显增加,HIF-1A、Bcl-2 蛋白表达也明显升高(P＜0.01).与辣椒素组相比,辣椒素+2-MeoE2 组对急性心肌梗死大鼠的保护作用明显减弱.结论 辣椒素可能通过调节HIF-1A、VEGF、HMOX1、Bcl-2 等核心靶标,干预HIF-1 等信号通路的活性,进而发挥抗急性心肌梗死的作用.

[目的]探讨宣肺清络方对肺炎支原体肺炎(MPP)痉挛性咳嗽大鼠肺组织病理学及炎症因子的影响.[方法]60只大鼠随机分为空白组、肺炎支原体肺炎组、模型组、阿奇霉素组、宣肺清络组、宣肺清络+阿奇霉素组,共计6组.采用肺炎支原体培养液滴鼻+烟熏法+辣椒素溶液雾化建立肺炎支原体肺炎感染后痉挛性咳嗽大鼠模型,14 d造模成功后各组大鼠给予相应药物灌胃,连续治疗7 d后检测各组大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及观察各组大鼠肺组织病理改变.[结果]与正常组比较,肺炎支原体肺炎组、模型组血清中IL-6、IL-8、TNF-α含量表达增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,各治疗组血清中IL-6、IL-8、TNF-α含量表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);在治疗干预后,各治疗组血清中IL-6、IL-8、TNF-α含量相互比较差异无统计学意义(P＞0.05).肺组织病理学显示,各治疗组组织病理改变较肺炎支原体肺炎组及模型组均有不同程度改善.[结论]宣肺清络方可以减轻肺组织结构损害,减少间质内炎症细胞浸润,推测其机制可能与抑制血清炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α含量有关.

背景 牙周炎是以菌斑微生物为始动因子的感染性疾病,外周神经在牙周炎进展中的作用尚不清楚.目的 研究辣椒素敏感神经元对小鼠牙周炎骨吸收的影响.方法 选取20只雄性C57BL/6小鼠,随机分为消融组(Cap)和未消融组(Veh),每组10只,在Cap组小鼠双侧三叉神经眼/上颌(V1N2)区域注射高浓度辣椒素(5μg/mL)消融辣椒素敏感神经元,Veh组小鼠则注射载体(含有1％DMSO和10％TWeen-80的磷酸盐缓冲盐水),1周后对这20只小鼠左上颌第二磨牙进行牙周炎造模,右上颌第二磨牙不做处理作为对照,分为未消融对照组(Veh/Con)、消融对照组(Cap/Con)、未消融牙周炎组(Veh/Lig)和消融牙周炎组(Cap/Lig).造模1周后取材,对小鼠上颌骨进行微聚焦计算机断层(micro-CT)扫描观察牙槽骨吸收情况,脱钙后进行HE染色及TRAP染色观察软、硬组织破坏和破骨细胞形成情况,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测牙龈组织中炎性因子TNF-α、IL-1β基因表达水平情况.结果micro-CT检测结果显示,相较于Veh/Lig组,Cap/Lig组牙槽骨吸收减少(P＜0.01),而Veh/Con组与Cap/Con组牙齿周围的牙槽骨高度没有显著变化;HE染色及TRAP染色结果显示,相较于Veh/Lig组,Cap/Lig组软、硬组织破坏减轻,牙槽骨周围破骨细胞的数量减少(P＜0.01);而Veh/Con组与Cap/Con组间则没有显著差异;RT-qPCR结果显示,相较于Veh/Lig组,Cap/Lig组炎性因子TNF-α、IL-1β基因表达水平降低(P＜0.01),相比炎性因子表达水平没有显著变化.结论 辣椒素敏感神经元对牙周炎骨吸收具有促进作用,可能与其对破骨细胞分化的促进以及局部组织炎症加重相关.