目的:检测妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）孕妇胎盘组织过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）基因甲基化水平及mRNA表达水平，并探讨二者与胎儿宫内窘迫的关系。方法:选取2018年7月至2019年12月烟台市烟台山医院产科收治的174例GDM孕妇为研究对象，其中胎儿出现宫内窘迫的78名孕妇作为胎儿宫内窘迫组；胎儿正常出生未出现宫内窘迫的96例孕妇为对照组；另同期选取82名无GDM正常妊娠孕妇作为健康组。亚硫酸氢钠处理DNA后采用直接测序法检测胎盘组织中PGC-1α基因甲基化水平；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测胎盘组织中PGC-1α mRNA表达水平；全自动生化分析仪检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平；分析胎儿发生宫内窘迫孕妇PGC-1α基因甲基化频率与PGC-1α mRNA表达水平的相关性；分析影响胎儿宫内窘迫发生的因素。结果:胎儿宫内窘迫组PGC-1α基因甲基化频率及TG水平[（25.42±7.31）%、（4.72±0.68）mmol/L]高于对照组[（9.26±2.67）%、（4.31±0.64）mmol/L]和健康组[（3.24±1.07）%、（4.33±0.72）mmol/L]，对照组PGC-1α基因甲基化频率高于健康组，差异均有统计学意义（ P<0.05）；胎儿宫内窘迫组PGC-1α mRNA表达水平（0.67±0.16）低于对照组（0.74±0.14）和健康组（1.00±0.27），对照组PGC-1α mRNA表达水平低于健康组，差异均有统计学意义（ P<0.05）；胎儿发生宫内窘迫孕妇PGC-1α基因甲基化频率与PGC-1α mRNA表达水平呈负相关（ r=-0.515、 P<0.05）；PGC-1α基因甲基化是影响胎儿发生宫内窘迫的独立危险因素（ P<0.05），PGC-1α mRNA高表达是胎儿发生宫内窘迫的保护因素（ P<0.05）。 结论:GDM孕妇PGC-1α基因DNA甲基化水平与胎儿宫内窘迫相关，有可能作为胎儿宫内窘迫的基因修饰靶点。

目的:探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路在巴戟天寡糖(MOO)改善去势大鼠缺血再灌注损伤(IRI)心肌能量代谢中的作用。方法:100只健康雌性SD大鼠按随机数字表法均分为空白对照组、假IRI组、IRI组、MOO 2.1 g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组等5组，每组20只。后3组均按去势大鼠心肌IRI模型处理，其中MOO 2.1 g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组按体质量10 ml/kg用相应浓度MOO灌胃。结束后计算心肌梗死率，检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平，检测心肌组织磷酸化AMPK(p-AMPK)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)蛋白。多组之间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD- t检验。 结果:MOO 2.1 g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组心肌梗死率、血清CK-MB水平、血清LDH水平低于IRI组[心肌梗死率：(26.68±2.29)%、(33.30±3.27)%比(46.30±4.41)%，血清CK-MB水平：(100.01±6.58) U/L、(132.43±8.51) U/L比(173.19±12.92) U/L，血清LDH水平：(137.05±7.01) U/L、(210.76±11.84) U/L比(277.28±21.95) U/L， P<0.01]；MOO 0.7 g/(kg·d)组心肌梗死率、血清CK-MB水平、血清LDH水平高于MOO 2.1 g/(kg·d)组[(33.30±3.27)%比(26.68±2.29)%，(132.43±8.51) U/L比(100.01±6.58) U/L，(210.76±11.84) U/L比(137.05±7.01) U/L， P<0.01]。MOO 2.1 g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组p-AMPK、SIRT1、PGC-1α相对表达量高于IRI组(p-AMPK：2.767±0.049、2.071±0.074比1.700±0.043，SIRT1：1.440±0.135、1.114±0.093比0.887±0.110，PGC-1α：1.024±0.113、0.905±0.075比0.639±0.067， P<0.01)；MOO 0.7 g/(kg·d)组p-AMPK、SIRT1、PGC-1α相对表达量低于MOO 2.1 g/(kg·d)组(2.071±0.074比2.767±0.049，1.114±0.093比1.440±0.135，0.905±0.075比1.024±0.113， P<0.01)。 结论:MOO能够通过激活AMPK信号通路改善IRI心肌细胞能量代谢，减轻去势大鼠心肌IRI。

目的 研究微小RNA-126(miR-126)-内皮祖细胞(EPC)-微粒(MPs)改善心肌细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤的分子机制.方法 采用心肌细胞建立对照(control)和OGD/R损伤模型,并分别给予EPC-MPs和miR-126 mimic EPC-MPs处理.通过透射电子显微镜评估心肌细胞细胞器的结构变化.采用ELISA检测心肌细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平.采用Western blot和实时荧光定量PCR(qPCR)检测不同处理后心肌细胞中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-6(caspase-6)、一氧化氮合酶(eNOS)、叉头框蛋白O1(FOXO1)、髓过氧化物酶(MPO)、核因子-κB(NF-κB)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、肝激酶B1(LKB1)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、130×103高尔基体基质蛋白(GM130)和过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)的蛋白和mRNA表达水平.结果 OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组部分心肌细胞线粒体结构完整,部分线粒体大小增大,内质网表面核糖体较少,高尔基体部分囊泡聚集.与OGD/R+EPC-MPs组比较,OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组IL-6、TNF-α和HMGB-1的表达水平下调.与OGD/R+EPC-MPs组比较,OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组AngⅡ、caspase-6、p-ERK1/2和GRP78的蛋白表达水平下调,p-LKB1、GM130和PGC-1α的蛋白表达水平上调.qPCR结果显示,与OGD/R+EPC-MPs组比较,OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组AngⅡ、MPO和GRP78的mRNA表达水平下调,eNOS、GM130和PGC-1α的mRNA表达水平上调.结论 当心肌细胞发生OGD/R损伤时,miR-126 mimic EPC-MPs调节PGC-1α/GM130表达,抑制AngⅡ诱导的应激损伤反应,减少心肌细胞的OGD/R损伤.

目的 探讨基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路观察黄连素(BBR)对心肌梗死后心力衰竭(HF)大鼠心肌能量代谢的作用.方法 选取雄性SD大鼠,造模前确保大鼠心功能正常.模型制备后将大鼠分为模型(Model)组、BBR低剂量(BBR-L)组、BBR高剂量(BBR-H)组及MAPK阻断剂(anti-MAPK)组各 12 只,另取 12 只大鼠设为假手术(Sham)组.使用彩色多普勒超声仪检测各组心室功能;苏木素-伊红染色和Masson染色检测心肌组织病理结构;提取心肌细胞线粒体并检测线粒体形态及肿胀情况;液相色谱法检测心肌组织三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)含量;Western印迹检测过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子(PGC)-1α、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38MAPK总蛋白及磷酸化蛋白表达.结果 假手术组毛色白、有光泽、反应较快、行动敏捷;与假手术组相比,模型组毛色干枯、行动迟缓、精神萎靡、呼吸急促、活动力差;与模型组相比,BBR低/高剂量组、anti-MAPK组症状均有不同程度改善.与Sham组相比,Model组舒张末期内径(LVEDD)、收缩末期内径(LVESD)、AMP水平及ERK、p38 MAPK蛋白磷酸化水平明显升高,舒张末期左室后壁厚度(LVPWTd)、收缩末期左室后壁厚度(LVPWTs)、左心室射血分数(LVEF)、血流动力学指标、ATP、ADP、能量负荷(EC)和PGC-1α均明显降低(P<0.05);与Model组相比,BBR-L组LVEDD、LVESD、AMP水平及ERK、p38 MAPK蛋白磷酸化水平明显降低,LVPWTd、LVPWTs、LVEF、血流动力学指标、ATP、ADP、EC和PGC-1α明显升高(P<0.05);与BBR-L组相比,BBR-H组的LVEDD、LVESD、AMP水平及ERK、p38 MAPK蛋白磷酸化水平明显降低,LVPWTd、LVPWTs、LVEF、血流动力学指标、ATP、ADP和EC和PGC-1α明显升高(P<0.05).结论 BBR可抑制ERK/MAPK信号通路,进而上调PGC-1α蛋白表达,影响线粒体结构和功能,改变心肌能量代谢,发挥心肌保护功能.

目的 研究印记基因PGC-1α和PDX1在无妊娠并发症孕妇分娩的异常出生体质量儿胎盘组织中的mRNA表达和甲基化的状态,探讨PGC-1α和PDX1甲基化状态对新生儿出生结局的影响.方法 应用实时定量PCR技术和基因组DNA亚硫酸氢钠处理后直接测序法检测高出生体质量组、低出生体质量组和正常出生体质量组胎盘组织中PGC-1α和PDX1的mRNA表达和甲基化.结果 PGC-1α、PDX1两基因低出生体质量组与正常出生体质量组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),PDX1在高出生体质量组与正常出生体质量组之间差异有统计学意义(P ＜0.05);PDX1甲基化水平与mRNA的表达呈负相关(r=-0.73,P＜0.01).在低出生体质量组和正常出生体质量组,PGC-1α和PDX1mRNA在胎盘中的表达与出生体质量呈正相关(r值分别为0.87、0.68,P＜0.01).结论 PGC-1α和PDX1的表达下调可能是发生低出生体质量儿的原因之一,甲基化水平的升高可能参与其表达下调,并且可能与低出生体质量儿的产生相关.

目的 观察罗格列酮对高脂饮食喂养老年大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)表达的影响以及胰岛素敏感性的变化.方法 21～ 23月龄的老年Wistar大鼠被随机分为对照组、高脂组、高脂+罗格列酮干预组(干预组),每组20只,对照组给予基础饲料,高脂组给予高脂饲料,干预组在给予高脂饲料同时增加罗格列酮灌胃,3 mg·kg-1 ·d-1.检测喂养8周末3组血清三酰甘油、游离脂肪酸、骨骼肌三酰甘油水平、血糖相关指标[空腹血糖、空腹胰岛素、葡萄糖输注率]和体重.应用正常葡萄糖高胰岛素钳夹试验评估胰岛素敏感性,之后处死老鼠取材,检测其骨骼肌PGC-1 α和GLUT4的mRNA及蛋白表达水平的变化.结果 高脂喂养8周后,高脂组空腹血清三酰甘油、血清游离脂肪酸及骨骼肌中三酰甘油的检测结果与对照组比较明显升高,葡萄糖输注率明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).与高脂组比,干预组血清三酰甘油、血清游离脂肪酸及骨骼肌三酰甘油水平较明显下降(P＜0.05),葡萄糖输注率比较对照组升高(P＜0.05).与对照组比较,高脂组骨骼肌PGC-1α和GLUT4的表达下降,干预组PGC-1α和GLUT4的表达均显著高于高脂组(P＜0.05),但仍低于对照组(P＜0.05).结论 高脂饮食能够诱导大鼠产生胰岛素抵抗状态,伴有PGC-1α及GLUT4在骨骼肌中表达下调,罗格列酮干预后可改善胰岛素抵抗状态,增加骨骼肌PGC-1α及GLUT4的表达.

目的:通过观察强心康颗粒对心衰大鼠心肌细胞病理形态学及心肌线粒体腺苷酸转位酶(ANT),过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)mRNA表达的影响来探讨其治疗心衰的机制.方法:选择健康雄性SD大鼠,应用腹腔注射阿霉素(3 mg·kg-1),造成心衰大鼠模型,然后分为正常组,模型组,芪苈强心组(芪苈强心胶囊,0.65 g·kg-1),曲美他嗪组(10.8 mg·kg-1)及强心康高、中、低剂量组(20,10,5 g·kg-1),造模之后进行心功能的检测,验证模型是否成立,服药4周后,苏木素-伊红(HE)及电镜扫描观察心肌细胞病理形态学变化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)观察7组大鼠心肌细胞病理形态学及心肌ANT,PGC-1α mRNA表达的变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠心率明显减慢,左心室最大上升和下降速率均降低,左心室收缩压显著降低,左室终末舒张压明显增加,收缩压、舒张压、平均血压显著降低(P＜0.01),表明心衰模型成立;模型组大鼠心肌细胞病变较明显,模型组大鼠心肌细胞病变改善明显,ANT,PGC-1α mRNA含量显著减少(P＜0.01).与模型组比较,盐酸曲美他嗪组、芪苈强心组、强心康高、中剂量组的均能显著增加ANT,PGC-1αmRNA含量(P＜0.01);强心康低剂量组能明显增加ANT,PGC-1α mRNA含量,与模型组比较有统计学差异(P＜0.05).结论:强心康颗粒可通过改善心肌细胞结构,增加ANT,PGC-1α mRNA含量来纠正心功能.

目的 探讨急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者循环中脂联素(APN)水平对粒体转录因子A(Tfam)和过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)的影响.方法 纳入2015年1月~2016年4月于首都医科大学附属北京友谊医院收住的急性STEMI患者160例,根据入院患者血清APN的中位数将患者随机分为低脂联素和高脂联素两组,比较两组患者临床情况、血清PGC-1α、Tfam、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、冠状动脉造影分析、心肌灌注情况和临床预后.结果 低脂联素组STEMI患者吸烟的比例较高(4.0% vs. 52.7%,P=0.007),高脂联素组STEMI患者血清肌酐水平较低[(90.2±54.5)mmol/L vs. (76.2±17.3)mmol/L,P=0.022].低脂联素组患者中, Gensini积分显著升高[(34.6±26.1) vs. (42.6±20.1),P＜0.05].低脂联素组患者中,Tfam和PGC-1α水平较低(P＜0.01),TNF-α和IL-6水平较高(P＜0.01).结论 急性STEMI患者病变较重的患者APN水平较低,血清APN较低的患者炎症因子较高,Tfam和PGC-1α因子下降.

目的:探讨地黄饮子对阿尔茨海默病(AD)大鼠中枢神经线粒体生物合成能力、氧化损伤保护的作用机制以及对AD大鼠学习记忆能力的改善作用.方法:120只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、安理申组、地黄饮子高、中、低剂量组,除假手术组外均侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)建立AD模型,各治疗组给予相应药物灌胃,假手术组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30 d.通过大鼠避暗箱实验,Y迷宫实验对大鼠行为学进行观察.行为学实验后,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)表达量和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平;测定脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性;测定丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果:地黄饮子可显著改善AD大鼠学习记忆和工作记忆能力.与模型组比较,在避暗箱实验中,地黄饮子可使AD大鼠的停留潜伏期明显增加(P＜0.05,P＜0.01),而错误次数显著减少(P＜0.05,P＜0.01);Y迷宫实验中,地黄饮子可显著提高AD大鼠自发交替反应率(P ＜0.05,P＜0.01).地黄饮子显著增加AD大鼠脑组织PGC-1α表达量和CREB磷酸化水平,显著提高脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅲ和Ⅳ活性(P＜0.01),而对呼吸链复合物Ⅱ活性无显著作用.地黄饮子能显著降低AD大鼠脑组织MDA含量(P＜0.01),提高抗氧化酶类SOD和GSH-Px活性(P ＜0.05,P＜0.01).结论:地黄饮子通过激活AD大鼠CREB/PGC-1α信号通路,提高线粒体生物合成能力,增加线粒体呼吸链酶系活性,改善线粒体功能损伤,同时通过增强抗氧化酶系活性,发挥提高机体抗氧化损伤,从而改善AD大鼠学习记忆和工作记忆能力.

目的:观察加味黄风汤对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏组织沉默信息调节因子1(SIRT1)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1o (PGC-1oα)表达的影响.方法:雄性SD大鼠经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模,随机分为正常组、模型组、白藜芦醇组、加味黄风汤低、高剂量组(简称低、高剂量组),各10只,8周后检测24h尿微量白蛋白,光镜及电镜下观察肾脏病理改变,Western Blot方法检测肾组织SIRT1及PGC-1 α蛋白的表达水平,RT-PCR方法检测肾组织SIRT1及PGC-1αmRNA的表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠可见微量白蛋白尿增加,肾脏病理可见肾小球肥大,系膜基质增生,基底膜增厚及足细胞足突融合,肾组织中SIRT1及PGC-1α蛋白及mRNA表达水平显著下降(P＜0.05).8周后,与模型组比较,高、低剂量组DN大鼠24h尿微量白蛋白水平显著下降(P＜0.05);光镜下肾小球肥大、系膜基质增生减轻;电镜下足细胞足突融合、基底膜增厚情况有所改善;肾组织中SIRT1及PGC-1α蛋白及mRNA表达水平均显著上升(P＜0.05).结论:加味黄风汤可降低DN大鼠尿微量白蛋白,改善肾脏病理损伤,其机制可能与上调肾组织的SIRT1及PGC-1 α的表达水平,改善足细胞能量代谢相关.