目的 观察通关藤注射液联合SOX方案治疗进展期胃癌的疗效.方法 将60例进展期胃癌患者随机分为对照组和观察组,每组30例.对照组患者接受标准SOX方案化学治疗;观察组患者加用通关藤注射液治疗.治疗前后分别检测患者血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)125、CA153、CA199水平,以及肝肾功能和血清白蛋白,并检测血小板、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞计数及中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR),采用卡氏功能状态量表(Karnofsky's performance status,KPS)评价患者生活质量,比较两组患者总生存期(overall survival,OS)和无进展生存期(progression-free survival,PFS).结果 观察组在降低血清CA125、CA199、PLR水平,提高KPS评分,防止血清白蛋白和淋巴细胞水平降低,延长OS和PFS方面均显著优于对照组(P<0.05).结论 通关藤注射液联合SOX方案治疗进展期胃癌具有增效减毒作用,可降低化学治疗药物不良反应,延长患者生存期.

目的 基于网络药理学和实验验证探讨通关藤治疗乳腺癌的作用机制.方法 通过文献检索获得通关藤的活性成分,并利用SwissTargetPrediction数据库获得活性成分对应的靶点,通过GeneCards、GEPIA2、OMIM、PharmGKB、TTD数据库获得乳腺癌的靶点,将药物靶点与疾病靶点取交集后,用Cytoscape3.9.0软件构建通关藤活性成分-乳腺癌-靶点网络,通过蛋白相互作用(PPI)网络筛选关键靶点,进行GO和KEGG通路富集分析,并筛选相关信号通路.对前10个关键靶点和主要活性成分进行分子对接验证.利用通关藤注射液体外干预人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,CCK-8法和集落形成实验检测细胞增殖能力,Calcein-AM/PI染色和流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移能力,Western blot对PI3K-AKT信号通路进行验证.结果 从通关藤中筛选出11α-O-苯甲酰-12β-O-乙酰通关藤苷元B、咖啡酸、苦绳苷元A、山柰酚等 37 个活性成分和治疗乳腺癌的 276 个潜在作用靶点,PPI网络筛选出AKT1、EGFR、TNF、CTNNB1、IL-6等25个关键靶点,主要影响雌激素信号通路、ErbB信号通路、HIF-1信号通路和PI3K-AKT信号通路等.分子对接结果显示,通关藤的主要活性成分与核心靶点AKT1、ALB、CASP3、ESR1和TNF均有较好的结合活性.体外实验结果显示,通关藤注射液可抑制MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力(P<0.01,P<0.001),诱导细胞凋亡(P<0.001),同时抑制PI3K-AKT信号通路激活(P<0.05,P<0.01).结论 通关藤可能通过多靶点和多途径发挥抗乳腺癌作用,其机制可能与抑制PI3K-AKT信号通路有关.

目的:基于蛋白质组学技术研究通关藤注射液对小鼠肺癌组织生长情况及蛋白表达的影响,探究其作用机制.方法:40只BALB/c雄性小鼠,采用腋下接种Lewis肺癌瘤株的方法建立肺癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组、顺铂组和通关藤注射液高、低剂量组,每组10只.分别在给药前及给药后记录小鼠肿瘤生长情况,在给药第21天时处死,眼球取血,取肿瘤组织,称量体积及瘤体质量.通过检测各组小鼠肿瘤大小,计算抑瘤率来评价肿瘤生长情况.取血清样本,采用定量蛋白质组学分析血清中蛋白表达差异的影响,并分析差异蛋白参与的信号通路.结果:与模型组相比,通关藤注射液高剂量和低剂量组肿瘤组织显著减小(P<0.01).共定量得到6 272个蛋白质,给药组与模型组之间有176个差异蛋白(上调59个,下调117个),这些差异蛋白的功能主要为基因表达、细胞生物合成、DNA模板转录等;对差异蛋白富集的信号通路进行分析可知,PI3K/Akt信号通路、HIF-1信号通路、ErbB信号通路、心肌收缩、志贺菌病、系统性红斑狼疮、胰岛素信号通路、不同环境中的微生物代谢、cAMP信号通路、信使核糖核酸监测通路等通路可能与肿瘤细胞的增殖、存活有密切关系.结论:通关藤注射液抑制肺癌小鼠肿瘤生长的作用机制,可能通过调节关键蛋白影响基因表达、细胞生物合成、DNA模板转录等过程,与PI3K/Akt信号通路、HIF-1信号通路、ErbB信号通路等通路密切相关.

目的 探讨通关藤注射液和通关藤提取液对人骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及潜在机制.方法 体外培养人骨肉瘤细胞MNNG/HOS、Saos-2和人骨髓间充质干细胞(BMSC),分别予通关藤注射液或通关藤提取液(40、60、80 mg/mL)处理,CCK-8实验和平板克隆实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Hoechst33342染色和Annexin-V/PI双染实验检测细胞凋亡情况,RT-qPCR检测细胞Bax、Bcl-2、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达,Western blot检测细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3、Janus激酶1(JAK1)、p-JAK1、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3、基质金属蛋白酶(MMP)9蛋白表达.结果 与对照组比较,不同浓度通关藤注射液和提取液均能显著降低MNNG/HOS和Saos-2细胞存活率,抑制细胞克隆形成、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡(P<0.05,P<0.01),促进细胞Bax mRNA和蛋白表达,抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达,上调Caspase-3 mRNA和Cleaved Caspase-3蛋白表达.通关藤注射液可显著下调Saos-2细胞p-JAK1、p-STAT3、MMP9蛋白表达(P<0.05,P<0.01).结论 通关藤注射液和提取液均可显著抑制人骨肉瘤细胞MNNG/HOS和Saos-2增殖、迁移和侵袭,诱导其凋亡,二者抗肿瘤作用无明显差异,其机制可能与抑制JAK1/STAT3信号通路激活有关.

通关藤又名乌骨藤、通光藤、通关散、奶浆藤等[1-3] ,最早记载于《滇南本草》,1974 年版《云南省药品标准》及《中国药典》等均有收载. 通关藤为摩罗科植物,入药部位为干燥藤茎,味苦,性微甘、凉,有止咳平喘、祛痰、通乳、清热解毒等功效[4]. 现代药理学研究证实通关藤具有抗癌、平喘、抑菌、免疫调节、保肝、利尿等作用[5]. 通关藤成分复杂[5] ,含C21甾体皂苷、酚酸、萜类化合物、多糖、醇类等物质,以往主要用于支气管炎、哮喘等疾病治疗,近年其制剂消癌平(如消癌平注射液、消癌平片、消癌平滴丸等)抗肿瘤作用显著,受到临床广泛关注. 本文复习相关文献,对通关藤及其制剂消癌平的化学成分、药理作用机制、临床抗肿瘤疗效综述如下.

目的 建立测定消癌平注射液中通关藤苷G含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法 色谱柱采用Symmetry C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液(45:55),等度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长为230 nm,柱温为25℃,进样量为20μL.结果 通关藤苷G质量浓度在4～80μg/mL范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率为98.58％,RSD为0.99％(n=9).结论 该方法准确、简便、可靠,可为消癌平注射液的质量控制提供参考.

目的 建立UPLC-MS/MS同时测定消癌平注射液中通关藤苷A、通关藤苷I、通关藤苷H的含量.方法 采用Phenomenex Kinetex XB-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.6 μm),以0.1％甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱分离,流速为0.2 mL·min-l,通过电喷雾离子源,多反应监测(MRM),正离子模式.结果 通关藤苷A、I、H分别在0.05～10 ng·mL-1,0.025～10 ng.mL-1,0.025～10 ng·mL-1浓度内呈良好的线性关系,r＞0.998,检测限为0.012 5～0.025 ng.mL-1,平均回收率分别为97.9％,95.7％,96.1％,RSD＜3.4％.结论 方法简单快速,准确灵敏,可用于消癌平注射液中通关藤苷A、I、H的定量测定.

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)分析消癌平注射液中通关藤苷A和I的方法 并测定其含量.方法消癌平注射液经微孔滤膜过滤,用HPLC进行分析,采用Symmetry C18(5μm,250 mm×4.6 mm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B);梯度洗脱方式(0～10 min,32％A;10～10.01 min,32％A～42％A;10.01～15 min,42％A;15～15.01 min,42％A～50％A;15.01～28 min,50％A);流速:1.0 ml/min;检测波长:223 nm.结果 通关藤苷A和I的线性范围分别为6.60～132.00、3.52～70.40μg/ml,通关藤苷A和I的平均加样回收率均>98％,相对标准偏差均<3％.结论 HPLC准确可靠、操作简便,可用于同时测定消癌平注射液中通关藤苷A和I的含量.

目的:通过对抗肿瘤相关的中药注射液的调配进行合理分类,为静脉用药集中调配中心(PIVAS)人员的安全防护提供依据.方法:通过数据库和国家医保目录查找抗肿瘤相关的中药注射液品种,对药物活性成分、不良反应、药动学、特殊人群用药和毒理学研究等数据进行分析,作为分类调配的依据.结果:将通关藤注射液(消癌平注射液)、鸦胆子油乳注射液等13种抗肿瘤相关的中药注射液纳入本次研究.除黄芪多糖注射液外,多数抗肿瘤相关的中药注射液存在不同程度毒性,具有剂量和时间相关性.结合国内调配现状建议通关藤注射液、鸦胆子油乳注射液等7个品种按照抗肿瘤药物调配,其余6个品种按照普通危险药物和中药注射液调配,并根据药物的毒性和极性合理安排药物调配顺序.结论:目前国内尚无药品调配安全性分类及防护指南,PIV AS应进一步提高现有防护要求,以减少职业暴露.

目的 探讨ATF3介导的通关藤注射液增强紫杉醇抗乳腺癌的作用机制.方法 体外培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,siRNA干扰ATF3的表达,给予通关藤注射液和紫杉醇单独或联合干预.采用RT-qPCR和Western blot法分别检测ATF3及相关细胞因子CCL2、TNF-α 的表达,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Hoechst活细胞染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 在ATF3-siRNA干扰的MDA-MB-231细胞中,紫杉醇可上调ATF3 mRNA和蛋白表达及细胞因子CCL2、TNF-αmRNA表达(P<0.05);而通关藤注射液有抵消紫杉醇引起的ATF3 mRNA和蛋白表达升高的趋势,可抵消细胞因子CCL2、TNF-αmRNA表达的上调(P<0.01).通关藤注射液可抑制MDA-MB-231细胞的增殖和转移、诱导细胞凋亡,并且联合紫杉醇组的作用更为显著(P<0.01).结论 通关藤注射液联合紫杉醇可能通过调控ATF3及相关细胞因子的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖、转移、侵袭,促进乳腺癌细胞的凋亡,从而发挥增效作用.