目的:观察补骨脂素联合重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)对山羊股骨骨折愈合和生物力学的影响。方法:将24只20～30月龄健康山羊(来源于山西医科大学第一医院)采用完全随机法分为为模型组(灌服1 ml 0.9%生理盐水)、补骨脂素组[灌服8 mg/(kg·d)补骨脂素溶液]，rhBMP-2组[6 g/(kg·d) rhBMP-2灌服]，补骨脂素联合rhBMP-2组[灌服rhBMP-2 6 g/(kg·d)与补骨脂素8 mg/(kg·d)]。术后120 d处死动物，X线片检测骨愈合；游标卡尺测量骨皮质厚度和骨髓腔直径；858 Mini Bionix型材料测试系统测试股骨最大载荷和弹性载荷。组间比较采用LSD- t检验法进行组间两两分析。 结果:补骨脂素＋rhBMP-2组的骨愈合度、骨髓腔直径、股骨最大载荷、弹性荷载分别为(89.14±6.81) mm 3、(26.23±3.11) mm、(387.78±56.36) N、(106.23±22.11) Mpa均高于模型组[(63.47±7.16) mm 3、(13.41±3.12) mm、(152.32±22.36) N、(55.63±12.18) Mpa]，差异有统计学意义( t＝12.115、9.158、10.232、12.523， P<0.05)；补骨脂素＋rhBMP-2组的上述指标高于补骨脂素组[(71.52±8.44) mm 3、(17.27±1.03) mm、(221.71±43.47) N、(58.45±18.27) Mpa]，差异均有统计学意义( t＝7.521、6.332、8.201、6.511， P<0.05)；补骨脂素＋rhBMP-2组的上述指标高于rhBMP-2组[(68.14±5.28) mm 3、(19.12±2.51) mm、(238.45±31.52) N、(61.04±17.96) Mpa]，差异有统计学意义( t＝5.661、7.052、6.044、5.206， P<0.05)。另外，补骨脂素＋rhBMP-2组的骨皮质厚度[(1.12±0.10) mm]低于模型组[(2.11±0.09) mm]、补骨脂素组[(1.45±0.15) mm]、rhBMP-2组[(1.32±0.08) mm]，差异均有统计学意义( t＝15.358、8.551、7.141， P<0.05)。 结论:补骨脂素联合rhBMP-2是潜在的股骨骨折愈合关键药物之一。

目的:探讨重组人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、重组人骨形态发生蛋白-7(BMP-7)在非肌层浸润性膀胱癌患者癌组织中的表达及临床预后意义。方法:选取2016年1月至2018年1月在本院接受经尿道切除术治疗的118例非肌层浸润性膀胱癌患者为研究对象，采用免疫组化法测定膀胱癌组织(膀胱癌组)及癌旁组织(癌旁组)中BMP-2、BMP-7蛋白的表达水平。采用 χ2检验分析BMP-2、BMP-7蛋白表达水平与非肌层浸润性膀胱癌患者的临床病理特征关系，采用多因素Cox回归分析探讨影响非肌层浸润性膀胱癌患者预后的危险因素。 结果:膀胱癌组的BMP-2、BMP-7蛋白阳性表达率低于癌旁组(均 P<0.05)。BMP-2、BMP-7蛋白表达与年龄、性别均无明显相关性(均 P>0.05)，与肿瘤最大径、TNM分期、浸润深度、病理级别、淋巴结转移、复发有明显相关性(均 P<0.05)，且肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期越高、浸润深度越深、病理级别越高、有淋巴结转移、有复发患者的BMP-2、BMP-7阳性表达率较低(均 P<0.05)。BMP-2、BMP-7阳性的膀胱癌患者的5年生存率明显高于BMP-2、BMP-7的阴性患者[75.0%(30/40) vs. 41.0%(32/78)、77.8%(28/36) vs. 41.5%(34/82)，均 P<0.05]。肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴血管浸润、病理级别高、有复发、BMP-2阴性、BMP-7阴性的膀胱癌患者的5年生存率均显著缩短(均 P<0.05)。Cox回归分析显示：TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、病理级别高、BMP-2阴性、BMP-7阴性是影响膀胱癌患者预后的独立危险因素(均 P<0.05)。 结论:非肌层浸润性膀胱癌患者的癌组织中BMP-2、BMP-7蛋白表达降低，二者与非肌层浸润性膀胱癌的进展程度呈负相关，BMP-2、BMP-7阴性表达是非肌层浸润性膀胱癌预后不良的危险影响因素。

目的:观察氧化应激条件下骨形成蛋白4（BMP4）对人视网膜微血管内皮细胞（hRMEC）的增生和迁移影响。方法:将体外培养的hRMEC分为对照组、4-羟基壬烯醛（HNE）处理组（4-HNE组）、4-HNE+BMP4处理组（BMP4组）。4-HNE组细胞培养基加入10 μmmol/L 4-HNE；BMP4组细胞培养基加入10 μmmol/L 4-HNE刺激6 h后，再加入100 ng/ml重组人BMP4。噻唑蓝比色法检测4-HNE、BMP4对hRMEC生存力的影响。细胞划痕实验测定4-HNE、BMP4对细胞迁移能力的影响。实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测对照组、4-HNE组细胞中BMP4 mRNA相对表达量以及对照组、BMP4组细胞中纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（Laminin）、α-平滑肌收缩蛋白（α-SMA）、胶原蛋白Ⅰ型（Collagen Ⅰ）、血管内皮生长因子（VEGF）、结缔组织生长因子（CTGF）mRNA相对表达量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测对照组、4-HNE组细胞中BMP4蛋白相对表达量。两组间比较采用 t检验。 结果:与对照组比较，4-HNE组、BMP4组细胞生存力（ t=12.73、16.26， P=0.000 2、<0.000 1）、细胞迁移率（ t=28.17、37.48， P<0.000 1、<0.000 1）均明显提高，差异有统计学意义；4-HNE组细胞中BMP4 mRNA、蛋白相对表达量明显升高，差异有统计学意义（ t=16.36、69.35， P=0.000 1、<0.000 1）。qRT-PCR检测结果显示，与对照组比较，BMP4组细胞中VEGF、FN、Laminin、α-SMA、Collagen Ⅰ、CTGF mRNA相对表达量明显升高，差异有统计学意义（ t=10.61、17.00、14.85、7.78、12.02、10.61， P=0.0004、<0.000 1、0.000 1、0.001 5、0.000 1、0.000 4）。 结论:BMP4可诱导hRMEC的增生和迁移，并可调控hRMEC中血管生成因子和纤维化相关因子表达。

目的:结合3D打印技术与可降解复合材料，探讨可用于中耳听力重建的组织工程听骨支架的制备方法。方法:选择国产高分子聚合物聚乳酸-羟基乙酸共聚物（polylactic acid-glycolic acid copolymer, PLGA）和可降解陶瓷β-磷酸三钙（β-tricalcium phosphate,β-TCP），按设计配比应用低温沉积方法制备打印原料。采用自主研发的低温沉积打印装置，根据所需支架的外形设计编程代码，选择合适的打印程序文件，低温环境下制备组织工程听骨支架。支架打印成型后冷冻干燥，灭菌备用。分别用光镜、扫描电镜观察支架表观特征与内部结构，检测其孔径、孔隙率以及力学特性。结果:3D打印后可获得所需降解支架，呈小柱状，直径1.5 mm，长度6.0 mm，光学显微镜下可见其表面有微孔。扫描电镜下构成支架的单丝呈横竖交织的经纬结构，间距1.2 mm，单丝间有交联孔道互相连接。支架表面可见直径100~400 μm类圆形或四边形孔隙，其间的交联孔道直径约50 μm，周边圆形微孔直径约10~40 μm。在PLGA材料表面附着粒径约700 nm的β-TCP微粒。整体支架的平均孔隙率为（83.43±0.01）%，负载重组人骨形态发生蛋白-2（recombinant human bone morphogenetic protein-2，rhBMP-2）含量约0.7 μg/mm 3。经冻干处理后支架机械强度适中，拉伸及挤压后无明显变形，符合组织工程骨力学要求。 结论:运用低温沉积打印法，通过严格控制的流程与条件，可制备供植入实验的高分子聚合物-可降解陶瓷听骨组织工程支架。该复合材料具有合适的孔隙率及力学特性，可负载成骨诱导因子。

患者，男，20岁，因"反复瘀斑3个月"于2020年10月就诊于我院。患者于入院前3个月无明显诱因出现皮肤多处瘀斑，可自行消退，未在意。此后反复发作，2个月前就诊于外院，血常规：WBC 8.41×10 9/L，HGB 162 g/L，PLT 5×10 9/L，免疫球蛋白IgG 4.57 g/L（正常参考值7~16 g/L），IgA 0.38 g/L（正常参考值0.7~4.0 g/L），IgM 0.36 g/L（正常参考值0.4~2.3 g/L），完善骨髓穿刺等检查诊断"免疫性血小板减少症"，给予重组人促血小板生成素（TPO）15 000 U/d联合艾曲泊帕25 mg/d口服，2周后血小板计数升至160×10 9/L，此后以艾曲泊帕25 mg/d维持治疗。2020年10月瘀斑再发而入住我院。起病以来无发热，否认肝病史和特殊家族史。入院后复查血常规：WBC 7.05×10 9/L，HGB 157 g/L，PLT 6×10 9/L。网织血小板31%，球蛋白20.2 g/L，IgG 5.15 g/L，IgA 0.54 g/L，IgM 0.38 g/L，肝炎病毒学、甲状腺功能、风湿免疫相关抗体、淋巴细胞亚群、调节性T细胞（Treg）比例均无异常。流式细胞术检测血浆T细胞相关细胞因子（IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、INF-γ和IL-17A）浓度无异常。肺CT和腹部彩超无异常。骨髓细胞形态学检查：增生活跃，粒系、红系、淋巴系形态和比例未见异常，全片见巨核细胞1515个，颗粒巨核细胞为主，未见产板巨核细胞，提示巨核细胞成熟障碍。染色体核型46,XY[4]。追问病史，患者自幼体弱，10岁前几乎每月均发生"感冒或发热"，患者近3年多次血生化检查示球蛋白14~18 g/L（正常参考值20~40 g/L）。患者父母均无免疫球蛋白和血常规异常。

目的 探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变.方法 将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周龄,体质量约为10～15 g,n=4)和老年组(12月龄,体质量约为20 g～25 g,n=4),每组雌雄各半.分别从2组小鼠的整骨中提取间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过流式细胞术鉴定2组BMSCs的表面标志物,通过β-半乳糖苷酶染色比较2组BMSCs的衰老程度,通过MTT和EdU掺入实验比较2组BMSCs的增殖及自我更新能力.通过Western blot分析2组BMSCs中周期蛋白CyclinD1、P21的表达情况.采用ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR评估2组BMSCs的体外成骨分化能力,使用RNA-seq分析比较2组BMSCs经BMP2诱导后的差异基因表达,并用流式分析验证测序结果.结果 流式细胞术分析结果显示,分离培养的小鼠BMSCs符合间充质干细胞判定标准.β-半乳糖苷酶染色结果显示,老年组BMSCs的衰老水平显著高于青年组(P＜0.05).而MTT和EdU掺入实验结果表明,老年组BMSCs的细胞活力和增殖能力显著低于青年组(P＜0.05).Western blot结果显示,与青年组比较,老年组BMSCs的细胞周期蛋白CyclinD1表达水平较低,而细胞周期阻抑因子P21蛋白表达水平显著增高(P＜0.05).ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR检测结果显示,BMP2诱导后青年组BMSCs的成骨分化能力显著高于老年组(P＜0.05).RNA-seq 结果显示,BMP2 诱导后,整合素 αV 重组蛋白(cluster of differentiation 51,CD51)在青年组和老年组中的表达趋势相反.而流式细胞术分析结果显示,青年组CD51+细胞在CD45-细胞中占比明显高于老年组(P＜0.01).结论 老年组BMSCs中CD51+细胞在CD45-细胞中占比下降与CD51+细胞对BMP2的成骨诱导响应性下降密切相关.

目的:探讨肾衰营养胶囊对肾性骨病模型大鼠的改善作用及其对骨形态发生蛋白(BMP)-7/Smads信号通路的影响,阐明肾性骨病模型大鼠肾功能和骨代谢与肾性骨病的关系.方法:选取50只SPF级SD大鼠,随机选取10只大鼠作为对照组,另外40只大鼠建立肾性骨病模型.将30只造模成功大鼠分为模型组、阳性对照组和肾衰营养胶囊组,每组各10只.对照组和模型组大鼠采用生理盐水灌胃,阳性对照组大鼠给予0.01 mg·kg-1骨化三醇灌服,肾衰营养胶囊组大鼠给予1.2 g·kg-1肾衰营养胶囊灌服,均灌胃12周.采用HE染色观察各组大鼠股骨组织病理形态表现,全自动生化分析仪和化学发光法检测各组大鼠血清中肾功能和钙磷代谢指标,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠股骨组织中BMP-7和Smad1/5/8 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠股骨组织中BMP-7、磷酸化BMP-7(p-BMP-7)、Smad1/5/8和磷酸化Smad1/5/8(p-Smad1/5/8)蛋白表达水平.结果:HE染色,对照组大鼠骨小梁排列正常,成骨细胞和类骨质面积未发生改变;模型组大鼠骨小梁宽度和平均类骨质面积增加,成骨细胞数量减少;阳性对照组和肾衰营养胶囊组大鼠骨小梁宽度及平均类骨质面积减小,成骨细胞数量增加.与对照组比较,模型组大鼠血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平均升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和肾衰营养胶囊组大鼠BUN及Scr水平均降低(P<0.05);与阳性对照组比较,肾衰营养胶囊组大鼠BUN和Scr水平均降低(P<0.05).与对照组比较,模型组大鼠血清中钙离子(Ca2+)水平降低(P<0.05),磷离子(P3-)、甲状旁腺激素(PTH)和碱性磷酸酶(ALP)水平均升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和肾衰营养胶囊组大鼠血清中Ca2+水平升高(P<0.05),P3-、PTH和ALP水平均降低(P<0.05);与阳性对照组比较,肾衰营养胶囊组大鼠血清中Ca2+水平升高(P<0.05),P3-、PTH和ALP水平均降低(P<0.05).RT-qPCR法,与对照组比较,模型组大鼠股骨组织中BMP-7 和Smad1/5/8 mRNA表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,阳性对照药组和肾衰营养胶囊组大鼠股骨组织中BMP-7及Smad1/5/8 mRNA表达水平升高(P<0.05);与阳性对照组比较,肾衰营养胶囊组大鼠股骨组织中BMP-7和Smad1/5/8 mRNA表达水平升高(P<0.05).Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠股骨组织中BMP-7、p-BMP-7、Smad1/5/8和p-Smad1/5/8蛋白表达水平均降低(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和肾衰营养胶囊组大鼠股骨组织中BMP-7、p-BMP-7、Smad1/5/8 和p-Smad1/5/8蛋白表达水平均升高(P<0.05);与阳性对照组比较,肾衰营养胶囊组大鼠股骨组织中BMP-7、p-BMP-7、Smad1/5/8和p-Smad1/5/8蛋白表达水平均升高(P<0.05).结论:肾衰营养胶囊可改善肾性骨病模型大鼠的肾功能和钙磷代谢紊乱,促进骨髓基质细胞增殖,改善骨代谢情况,其机制可能与激活BMP-7/Smads信号通路有关.

目的 探讨异常流体剪切力诱导髓核细胞(NPC)凋亡、炎症和自噬的作用及其可能的机制.方法 对NPC 加载24 dyn/cm2流体剪切力,时间分别为 0、60、90、120、150 min.使用细胞骨架染色研究流体剪切力对细胞骨架及细胞形态的影响;使用 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷染色验证NPC的增殖能力;用线粒体膜电位变化评估流体剪切力对线粒体的损伤效应;用赫斯特染色研究凋亡与流体剪切力的关系;用丹酰戊二胺染色研究自噬与流体剪切力的关系;探究细胞培养基酸碱度的变化,验证流体剪切力与炎症的关联;使用蛋白质印迹法研究 cGAS-STING 相关蛋白(cGAS、STING、TBK1)、炎症相关蛋白(肿瘤坏死因子-α、COX-2)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)以及自噬蛋白(IL3-Ⅰ/Ⅱ、p62)的变化.结果 作为一种细胞间的机械刺激,24 dyn/cm2强度的流体剪切力可造成 NPC 形态由梭形转变为多边形,细胞骨架发生重组,细胞增殖能力下降,培养基酸性增强,线粒体JC-1多聚体减少、单体增加;同时,细胞内肿瘤坏死因子-α、COX-2、Bax蛋白表达量上调,LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ增加,p62、Bcl-2降解增加,出现凋亡、炎症、自噬以及线粒体损伤;加载 24 dyn/cm2的流体剪切力可以激活 NPC 内的 cGAS-STING 信号通路,且与时间呈正相关关系,120 min 时强度最高.使用 cGAS 抑制剂 RU.521 可以减缓24 dyn/cm2流体剪切力造成的 NPC 的凋亡、炎症、自噬以及线粒体损伤.结论 流体剪切力诱导的 NPC 凋亡、炎症和自噬与cGAS-STING 信号通路激活相关,抑制 cGAS-STING 信号通路的激活可以缓解异常流体剪切力造成的细胞损害.

在骨肿瘤、外伤和恶性肿瘤骨转移等导致骨缺损修复的外科手术中,支架材料作为自体骨替代物已有一定的研究和应用.骨形态发生蛋白2(BMP-2)衍生肽作为人工合成BMP-2同系短肽,具有与重组人BMP-2相似的生物活性,已被证实具有促进成骨效果,能够调控骨髓间充质干细胞的增殖和分化,诱导体内异位成骨,有巨大的应用前景.文章现将BMP-2衍生肽促进成骨增殖的机制进行综述.

目的 探讨拮抗剂方案与高孕激素促排卵(PPOS)方案在卵巢低反应人群体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用效果.方法 选择该院2018年1月至2022年7月就诊的卵巢低反应患者128例为研究对象,根据促排卵方案不同分为拮抗剂组和PPOS组,每组64例.比较两组重组人绒毛膜促性腺素(HCG)注射日性激素水平[孕酮(P)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)]、卵泡周围血流参数[搏动指数(PI)、收缩期最大血流速度(PSV)、阻力指数(RI)、动脉收缩期峰值流速/舒张末期血流速度(S/D)]、血清生长分化因子-9(GDF-9)、骨形态发生蛋白-15(BMP-15)及促排卵情况、胚胎质量、妊娠结局.结果 PPOS组HCG注射日血清E2、BMP-15水平及PSV、优势卵泡数、可移植胚胎数、获卵数、成熟卵数、优质胚胎数、两原核(2PN)受精数、临床妊娠率、活产率大于或高于拮抗剂组,LH水平、周期取消率、流产率低于拮抗剂组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在卵巢低反应人群IVF-ET中,与拮抗剂方案相比,PPOS方案可通过调节性激素水平,改善卵泡周围血流参数及BMP-15水平,提升促排卵效果,改善胚胎质量及妊娠结局.