目的:评价Ras同源家族成员A(RhoA)在氢减轻脂多糖(LPS)致小鼠肺微血管内皮细胞屏障功能损伤中的作用。方法:小鼠肺微血管内皮细胞培养于含10%胎牛血清和1%青链双抗的DMEM/F12培养基中，传代至第4～6代的细胞用于实验，采用随机数字表法分为6组( n＝36)：对照组(A组)、富氢液组(B组)、LPS组(C组)、LPS＋富氢液组(D组)、LPS＋RhoA抑制剂C3酶组(E组)和LPS＋富氢液＋RhoA激活剂U-46619组(F组)。A组、C组和E组采用正常培养基培养，B组、D组和F组采用含饱和氢气培养基培养，C组、D组、E组和F组加入LPS，终浓度1 μg/ml；E组于加入LPS前2 h加入C3酶，终浓度3 μg/ml；F组于加入LPS前3 h加入U-46619，终浓度10 mg/ml。分别于LPS孵育后6、12和24 h时采用Western blot法检测血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和紧密连接蛋白(occludin)的表达；于LPS孵育后24 h时采用LDH法测定细胞LDH释放率，MTT法测定细胞活力，GST pull-down法测定RhoA活性。 结果:与A组比较，C组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达下调，孵育24 h时细胞活力降低，LDH释放率和RhoA活性升高( P<0.05)；与C组比较，D组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达上调，孵育24 h时细胞活力升高，LDH释放率和RhoA活性降低( P<0.05)；与C组比较，E组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达上调，孵育24 h时细胞活力升高，LDH释放率和RhoA活性降低( P<0.05)；与D组比较，F组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达下调，孵育24 h时细胞活力降低，LDH释放率和RhoA活性升高( P<0.05)。 结论:RhoA参与了氢减轻LPS致小鼠肺微血管内皮细胞屏障功能损伤的过程。

目的:研究血清缺血修饰蛋白（ischemia modified albumin，IMA）、钙调蛋白（CaM）表达水平与脑小血管病（cerebral small vessel disease，CSVD）患者神经功能受损的相关性。方法:回顾性分析2020年4月至2021年12月在聊城市第三人民医院住院治疗的CSVD患者的140例临床资料，在患者入院时，采用酶联免疫吸附法测定患者血清中CaM水平，采用白蛋白-钴结合实验测定患者血清中IMA水平，采用美国国立卫生院卒中量表（NIHSS）量表对患者的神经功能进行评价，参照国立神经病学与中风研究所（NINDS）评价患者短暂性脑缺血情况，评价患者尿失禁情况、步态障碍情况，采用蒙特利尔认知评估（MoCA）量表对患者的认知功能进行评价。分析CSVD患者血清IMA和CaM表达水平的影响因素，分析CSVD患者神经功能受损程度的影响因素及其与患者血清IMA和CaM表达水平的相关性。结果:患者的性别、年龄、有无步态障碍、有无尿失禁等与患者血清IMA、CaM表达水平均无相关性（均 P > 0.05）；认知功能障碍患者、头晕和眩晕患者、短暂性脑缺血患者的血清IMA表达水平［（38.5±5.3）×10 3U/L、（38.5±4.7）×10 3U/L、（39.0±4.4）×10 3U/L］、CaM表达水平［（190.4±34.5）μg/L、（191.2±26.7）μg/L、（199.7±24.8）μg/L］均显著高于认知功能正常患者、无头晕和眩晕患者、无短暂性脑缺血患者［（27.3±4.4）×10 3U/L、（21.0±3.8）×10 3U/L、（20.5±5.1）×10 3U/L、（180.6±29.6）μg/L、（179.5±28.6）μg/L、（168.6±32.4）μg/L］（ t=14.10、24.36、22.50，均 P < 0.05）。轻度、中度、重度神经功能受损患者的认知功能障碍（38/16/9）、头晕和眩晕（39/16/8）、短暂性脑出血（35/16/9）、NIHSS评分［（3.6±0.8）分、（7.5±0.9）分、（16.2±3.2）分］、CaM表达水平［（125.3±20.5）μg/L、（185.5±23.6）μg/L、（237.9±54.3）μg/L］、IMA表达水平［（21.2±3.5）×10 3U/L、（38.5±4.3）×10 3 U/L、（74.9±5.4）×10 3U/L］，组间差异均有统计学意义（ t=32.87、11.28、12.42、34.59、151.73、147.84，均 P < 0.05）。多因素分析结果显示，认知功能障碍（ OR=1.578，95% CI：1.043～2.386）、短暂性脑缺血（ OR=2.396，95% CI：1.156～4.969）、头晕和眩晕（ OR=1.906，95% CI：1.086～3.345）、NIHSS评分（ OR=2.171，95% CI：1.162～4.056）、CaM水平（ OR=2.022，95% CI：1.268～3.224）、IMA水平增加（ OR=2.090，95% CI：1.313～3.325）均是患者神经功能受损加重的独立影响因素（均 P < 0.05）。患者血清IMA、CaM表达水平与神经功能受损程度呈明显的正相关（ r=5.45、8.33，均 P < 0.05）。 结论:脑小血管病患者血清IMA、CaM表达水平的升高是神经功能受损的独立危险因素，其表达水平与神经功能受损程度呈正相关。

现今研究发现在耐药性癫痫形成过程中，环磷酸腺苷反应元件结合蛋白可能通过抑制γ-氨基丁酸表达使癫痫反复发作，造成神经元受损，抗癫痫药物靶点效果减弱或失效，继而使用抗癫痫药物不能控制癫痫发作的程度和频率，癫痫患者呈持续发作状态，形成耐药性癫痫。由此，本文就环磷酸腺苷反应元件结合蛋白导致耐药性癫痫产生的机制进行综述，为找到治疗耐药性癫痫患者的方法提供思路。

目的:探讨孕期和哺乳期壬基酚(nonylphenol，NP)暴露对后代小鼠脑组织Th17/Treg细胞平衡的影响及其相关机制研究。方法:30只C57BL/6孕鼠随机分为3组：对照组(饮用蒸馏水)和NP处理组(饮用0.2 μg/ml或2.0 μg/ml NP水溶液)。使用ELISA试剂盒测量仔鼠血清中的TNF-α、IFN-γ和IL-17水平，流式细胞术分析仔鼠脾脏Treg、Th17细胞频率，定量RT-PCR分析仔鼠脑组织中RORγt、Foxp3 mRNA表达，Western blot分析仔鼠脑组织中RORγt、Foxp3和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白质表达，免疫荧光分析仔鼠脑组织中离子钙结合衔接分子1(Iba1)表达情况。结果:与对照组相比，NP暴露增加了雄性后代小鼠的血清IL-17、TNF-α水平( P<0.05)，降低了IFN-γ水平( P<0.05)。流式细胞术分析显示，NP暴露(0.2 μg/ml或2.0 μg/ml)的雄性后代小鼠脾脏中Th17细胞的百分比较对照组显著增加，而Tregs细胞的百分比降低。与对照组相比，NP暴露(0.2 μg/ml或2.0 μg/ml)的雄性后代小鼠脑组织中Foxp3蛋白质水平显著降低，RORγt蛋白质水平显著升高( P<0.05)。在qRT-PCR分析中也观察到类似的mRNA表达结果。在孕期和哺乳期暴露于剂量增加的NP期间，雄性后代小鼠脑组织中mTOR(p-mTOR)及其上游相关调节因子[PI3K、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)]的蛋白质表达水平均升高( P<0.05)。免疫荧光分析显示，与对照组相比，NP暴露(0.2 μg/ml或2.0 μg/ml)的雄性后代小鼠脑组织中Iba1阳性细胞的数量显著增加( P<0.05)。 结论:孕期和哺乳期小鼠暴露于NP可能通过神经免疫轴影响后代神经元的发育/功能，增加后代神经发育障碍的风险。

目的:探讨β-石竹烯通过调节海马胰岛素生长因子-1(IGF-1)信号通路缓解小鼠围术期神经认知障碍的作用。方法:老年小鼠共60只，鼠龄20~22个月，体重28~34 g，将其分为4组( n＝15)：假手术对照组(Sham组)、外科手术组(O组)、外科手术+低剂量β-石竹烯组(O+B1组)和外科手术+高剂量β-石竹烯组(O+B2组)。Sham组仅行戊巴比妥钠麻醉，但不行外科手术操作；O组小鼠于戊巴比妥钠麻醉下行剖腹探查术；O+B1和O+B2组于戊巴比妥钠麻醉下行剖腹探查术，术后即刻、24、48、72 h分别腹腔注射β-石竹烯100 mg/kg和200 mg/kg。术后第14~18天行水迷宫测试；术后第7天，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测海马B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、离子钙结合衔接分子1(Iba-1)、IGF-1、胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)、白细胞介素(IL)-1β、磷酸化IGF1R(p-IGF1R)、活化半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的蛋白表达水平。采用单因素方差分析(ANOVA)以评估组间差异。 结果:O组术后第16~18天逃离潜伏期延长，穿越平台次数[(2.8±0.2)次比(1.7±0.3)次， P<0.05)和目标象限停留时间[(38.5±5.4) s比(23.7±3.2) s， P<0.05]低于Sham组，海马IGF-1(0.298±0.037比0.179±0.008， P<0.05)和p-IGF1R(0.251±0.028比0.204±0.030， P<0.05)水平低于Sham组，Iba-1(0.290±0.026比0.449±0.045， P<0.05)和促炎因子IL-1β蛋白(0.331±0.043比0.514±0.083， P<0.05)表达水平高于Sham组；O+B1和O+B2组术后第16~18天逃离潜伏期低于O组，穿越平台次数[(1.7±0.3)次比(2.4±0.3)、(2.7±0.4)次， P<0.05]和目标象限停留时间[(23.7±3.2) s比(29.5±3.5)、(36.8±4.0) s， P<0.05]高于O组，海马IGF-1(0.179±0.008比0.288±0.029、0.289±0.014， P<0.05)和p-IGF1R(0.204±0.030比0.253±0.024、0.282±0.049， P<0.05)水平高于O组，Iba-1(0.449±0.045比0.322±0.063、0.312±0.036， P<0.05)和IL-1β(0.514±0.083比0.421±0.027、0.371±0.027， P<0.05)蛋白表达水平低于O组。 结论:β-石竹烯治疗可减轻小鼠术后认知功能障碍及海马神经炎性反应，其作用机制和上调IGF-1信号通路相关。

目的:探讨运动性晕厥与儿童缺铁性贫血的相关性，以及营养供给对运动性晕厥发生的影响。方法:选取2018年6月至2020年6月泉州医学高等专科学校附属人民医院收治的306例缺铁性贫血患儿作为研究对象，将发生运动性晕厥的患儿纳入观察组（105例），未发生运动性晕厥的患儿纳入对照组（201例）。比较两组患儿一般资料和红细胞参数、铁代谢指标、血液微量元素水平的差异，分析两组患儿每日食物构成情况、三大营养素摄入量和微量元素及维生素摄入量。结果:观察组体质量指数、腰臀比和血氧饱和度低于对照组，男性、重度贫血、偏食挑食和经常吃零食占比高于对照组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。观察组患儿血红蛋白、红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均体积低于对照组，红细胞容积分布宽度高于对照组[（70.12 ± 9.68）g/L比（83.64 ± 10.12）g/L、（20.12 ± 3.64）pg比（26.97 ± 3.52）pg、（63.46 ± 8.46）fl比（71.34 ± 8.12）fl、0.258 ± 0.058比0.201 ± 0.064]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。观察组患儿血清铁蛋白和总铁结合力高于对照组，血清铁和转铁蛋白饱和度低于对照组[（136.58 ± 28.71）μg/L比（113.21 ± 24.45）μg/L、（69.64 ± 7.23）μmol/L比（56.48 ± 8.65）μmol/L、（15.32 ± 4.15）μmol/L比（17.69 ± 4.21）μmol/L、0.198 ± 0.056比0.265 ± 0.062]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。观察组患儿血液钙和锌水平低于对照组[（5.44 ± 0.28）mmol/L比（5.63 ± 0.34）mmol/L、（63.23 ± 2.73）μmol/L比（68.42 ± 2.65）μmol/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。观察组患儿每日粮谷类、动物类、蔬菜水果、豆类和蛋奶类摄入量低于对照组，观察组患儿每日碳水化合物和蛋白质摄入量低于对照组，观察组患儿每日铁、维生素C和维生素A摄入量低于对照组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:儿童缺铁性贫血可能是运动性晕厥发生的危险因素之一，应加强对该人群儿童和家长的健康宣教，改变不良饮食行为，调整膳食结构，以降低运动性晕厥发生率。

目的:分析红花素的分子特性，筛选并鉴定红花素抗脓毒症的潜在靶点。方法:通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）分析红花素的药理参数和分子特性。采用SwissTargetprediction服务器（提供化合物靶点预测的网站）和通过化学蛋白质相互作用分析来预测化学成分靶向蛋白的服务器（DRAR-CPI）筛选红花素抗脓毒症的潜在靶点，并与人类孟德尔遗传病数据库（OMIM）、毒性与基因比较数据库（CTD）和药物靶点数据库（TTD）中已发布的抗脓毒症相关疾病靶点进行匹配，筛选出红花素的抗脓毒症靶点，进一步通过分子对接服务器鉴定红花素抗脓毒症的潜在靶点。结果:红花素的口服生物利用度为41.15%，药物相似度为0.24，可旋转键数为1，表明红花素口服吸收较好，具有良好的成药性。通过SwissTargetprediction和DRAR-CPI服务器共筛选到115个潜在靶点；从OMIM、CTD和TTD 3个数据库中共获得149个疾病靶点；将两个服务器筛选出的115个红花素靶向蛋白与疾病靶向蛋白进行匹配，发现既是分子靶点又是疾病靶点的蛋白有10个，分别为凝血因子Ⅸ（F9）、腺苷A1受体（ADORA1）、一氧化氮合酶2（NOS2）、丝裂素活化蛋白激酶1（MAPK1）、组织蛋白酶G（CTSG）、中性粒细胞弹性蛋白酶（ELANE）、蛋白C（PROC）、脂钙蛋白2（LCN2）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）和前列腺素内过氧化物酶２（PTGS2）。经分子对接服务器鉴定显示，红花素具有与上述10个靶向蛋白结合的能力，为红花素抗脓毒症的潜在靶点；红花素可通过与靶向蛋白的关键氨基酸残基发生交互作用，从而发挥相应的药效。结论:红花素能够通过调节CTSG、ELANE和LCN2抑制脓毒症组织和器官损伤，通过调控ADORA1、PTGS2、NOS2和MAPK1减轻炎症，通过调控PROC和F9抑制凝血并减轻脓毒症炎症反应，通过调节G6PD改善氧化应激而减少脓毒症的发生，最终预防和治疗脓毒症。

目的 观察电针对动脉粥样硬化(AS)家兔腹腔巨噬细胞胆固醇逆转运受体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G1(ABCG1)、B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)mRNA及蛋白表达的影响,探究电针治疗AS的作用机制.方法 将26只雄性新西兰家兔按照随机数字表法分为阴性对照组(n=7)、造模组(n=19).阴性对照组家兔给予普通饲料喂养,造模组采用高脂饲料与颈总动脉球囊损伤术相结合的方法制备AS模型.将造模成功的家兔按随机数字表法分为模型组、电针组和阿托伐他汀组,每组各6只.电针组家兔予"内关""足三里""关元"进行电针治疗,疏密波(4 Hz/20 Hz),电流为1 mA,每次留针20 min,1次/d,6 d为1个疗程,共4个疗程;阿托伐他汀组家兔灌胃阿托伐他汀钙片悬浊液(1 mg/kg),1次/d,6 d为1个疗程,共4个疗程.干预结束后,采用HE染色法观察家兔颈总动脉组织形态学变化;取家兔腹腔巨噬细胞,实时荧光PCR法检测ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ的蛋白表达水平.结果 阴性对照组家兔颈总动脉内膜平滑;模型组家兔颈总动脉内膜受损,管壁增厚,粥样斑块形成;电针组、阿托伐他汀组家兔管壁增厚情况改善明显,粥样斑块面积缩小.与阴性对照组比较,模型组家兔腹腔巨噬细胞中ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ mRNA和蛋白表达均降低(均P＜0.01);与模型组比较,电针组和阿托伐他汀组家兔腹腔巨噬细胞中ABCA1、ABCG1、SR-B ⅠmRNA和蛋白表达均升高(均P＜0.01);与电针组比较,阿托伐他汀组家兔腹腔巨噬细胞中ABCG1、SR-B Ⅰ mRNA升高,ABCA1、ABCG1、SR-B Ⅰ蛋白表达升高(均P＜0.01).结论 电针可上调AS家兔腹腔巨噬细胞ABCA1、ABCG1、SR-B Ⅰ mRNA及蛋白的表达,增强胆固醇逆转运过程,这可能是针刺治疗AS的机制.

目的 通过生物信息学分析寻找布鲁氏杆菌性脊柱炎(BS)患者椎间组织中差异表达基因(DEGs)和关键信号通路,为深入了解BS的免疫相关机制及寻找新的治疗靶点提供理论依据.方法 收集4例BS患者和3例腰椎间盘突出(LDH)患者术中的椎间组织完成转录组测序.通过生物信息学分析找到BS患者和LDH患者椎间组织的DEGs,使用Enirchr在线富集工具对筛查到差异表达的免疫基因进行基因本体论(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,用Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并筛选识别关键基因.收集14例BS患者(BS组)和10例LDH疾病患者(Control组)的椎间组织进行qRT-PCR验证生物信息学分析结果,同时收集患者外周血,使用流式细胞术检测两组患者外周血中M2型巨噬细胞及Th2细胞的比例.结果 BS患者病灶处椎间组织中M2型巨噬细胞与Th2细胞比例均较LDH患者升高(P＜0.05).筛选出的DEGs共1 651个,上调基因1 294个,下调基因357个.对1 651个DEGs进行GO功能富集分析,其生物学过程主要集中于抗原处理和呈递、免疫反应、免疫系统过程等;细胞组分主要富集在MHC蛋白复合体、MHC Ⅱ类蛋白复合物、细胞膜的重要组成部分中,分子功能主要与磷酸酶活性、多糖结合、离子通道活性有关.KEGG通路富集分析显示,PI3K-Akt信号通路、钙信号通路和MAPK信号通路等与BS发展密切相关.通过PPI网络分析筛选出前20的关键基因与PI3K-Akt信号通路的基因取交集后获得3个关键基因,分别为:FN1、EGFR、EGF.qRT-PCR结果显示,BS组患者病灶处椎间组织FN1、EGFR、EGF的mR-NA表达均高于Control组(P＜0.000 1).结论 FN1、EGFR、EGF可能是预测BS的生物学标志物及潜在治疗新靶点,本研究有助于加强对BS相关免疫调节机制的了解.

目的 探究接头相关蛋白复合物1亚基σ1(AP1S1)基因表达水平与乳腺癌化疗患者预后之间的相关性,分析AP1S1在乳腺癌化疗耐药中的作用.方法 采用生物信息学方法,对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中的乳腺癌患者和乳腺正常组织的AP1S1表达水平差异进行分析.运用Kaplan-Meier生存分析法,探究AP1S1表达水平与乳腺癌化疗患者无复发生存预后的关联.通过细胞培养、RNA提取、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹(Western blot)分析及药物敏感性实验等多种实验手段,基于AP1S1高表达的乳腺癌细胞模型,研究AP1S1基因高表达对乳腺癌细胞化疗耐药的影响,并考察AP1S1过表达对肿瘤细胞干性及上皮-间充质转化(EMT)特性标志物表达的作用.结果 乳腺癌组织中AP1S1基因的表达水平显著高于正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05).在肿瘤不同分期,AP1S1基因的表达水平均表现出显著高于正常组织,差异均有统计学意义(P均＜0.05);其中4期肿瘤的过表达水平更高,差异有统计学意义(P＜0.05).管腔(Luminal)型、人类表皮生长因子2(HER2)阳性型和三阴型乳腺癌组织较正常组织均表现出AP1S1基因高表达,差异均有统计学意义(P均＜0.05);其中在HER2阳性型和三阴型乳腺癌组织中AP1S1表达水平更高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).Kaplan-Meier生存分析发现,AP1S1高表达的乳腺癌患者在化疗后无复发生存期显著短于低表达组,差异有统计学意义(P=0.038);在三阴型、HER2阳性乳腺癌患者中,AP1S1高表达与化疗后预后不良显著相关(P=0.037、0.017);Luminal B型患者中,AP1S1高表达与较长的无复发生存期显著相关(P=0.007).实时荧光定量PCR显示,与对照组比较,在AP1S1过表达的细胞系CAL-51-oe-AP1S1、Hs-578T-oe-AP1S1中AP1S1转录水平显著上调,差异均有统计学意义(t=23.51、6.22,P均＜0.05);Western blot 结果显示,与对照组比较,在 AP1S1 过表达的细胞系 CAL-51-oe-AP1S1、Hs-578T-oe-AP1S1中AP1S1蛋白水平显著上调,差异均有统计学意义(P均＜0.05);肿瘤药物敏感性基因组项目(GDSC)数据库中分析结果显示,乳腺癌细胞CAL-51、Hs-578T的半抑制浓度(IC50)分别为0.008 398、0.000 935 μmol/L;药物毒性实验结果显示,过表达AP1S1显著增强了乳腺癌细胞CAL-51、Hs-578T对化疗药物多西紫杉醇的耐受性,差异均有统计学意义(t=8.74、9.90,P均＜0.05);三维培养实验结果显示,过表达AP1S1的CAL-51细胞形成更多的球体细胞团,而对照组的结构在药物作用下显著恶化,差异有统计学意义(t=11.54,P＜0.05).与对照组比较,在CAL-51-oe-AP1S1、Hs-578T-oe-AP1S1乳腺癌细胞系中,AP1S1过表达在转录水平上显著上调了干细胞标志基因纳诺克同源盒(NANOG)、辛烷结合转录因子4(OCT4)、性别决定区相关HMG盒基因2(SOX2)、B细胞特异性分化基因1(BMI1)以及多药耐药相关基因ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)的表达,差异均有统计学意义(t=20.75、39.05、28.55、29.76、94.18,24.78、17.79、19.60、14.10、16.79,P均＜0.05);同时显著降低 了上皮钙黏蛋白(E-cadherin)(CDH1)和紧密连接蛋白1(TJP1)的mRNA表达,并增加了与EMT相关的标志物神经钙黏蛋白(N-cadherin)(CDH2)和波形蛋白(VIM)的表达,差异均有统计学意义(t=6.26、4.99、9.79、5.23,13.25、19.87、13.83、11.42,P均＜0.05).在CAL51 细胞系中,Western blot结果显示,AP1S1的过表达导致干细胞标志基因SOX2的表达水平上升和多药耐药基因ABCG2的表达增加,同时显著抑制了细胞黏附蛋白E-cadherin的表达,并促进了 N-cadherin的过表达,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 AP1S1在乳腺癌中高表达,不仅促进化疗药物多西紫杉醇的耐药性,还促进乳腺癌细胞的干性增强并诱发EMT过程.