目的:研究内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site，IRES)序列连接"抗原-佐剂"的单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2, HSV-2)DNA疫苗对免疫小鼠的保护作用。方法:利用IRES重组构建HSV-2包膜糖蛋白D(glycoprotein D，gD)和CCL28佐剂双表达DNA疫苗pgD-IRES-CCL28和pCCL28-IRES-gD，经测序验证，肌肉注射免疫BALB/c小鼠2次后，定期收集小鼠的血清和阴道灌洗液样品，分离免疫后的脾细胞、肠系膜淋巴结细胞和直肠黏膜组织。通过终点ELISA法检测免疫后小鼠的抗原特异性抗体滴度，采用体外中和试验检测免疫后及攻毒后血清和阴道灌洗液中的中和抗体滴度，采用脾细胞和肠系膜淋巴结细胞趋化试验和直肠组织的免疫组织化学染色检测组织和器官内的CCL28响应性免疫细胞变化。对免疫后小鼠进行阴道攻毒试验，采用荧光定量PCR、称量体重及观察疾病严重程度的方法评估各组小鼠抵抗病毒感染的能力。通过与1∶1混合的单独表达gD和CCL28的DNA疫苗(pgD+pCCL28)的免疫保护效果比较，分析IRES双表达DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫和细胞免疫应答水平，以及免疫保护效果。结果:pCCL28-IRES-gD免疫小鼠后可产生与pgD+pCCL28组相似的血清IgG滴度、阴道灌洗液IgA抗体滴度，以及较高的抗体中和能力、直肠黏膜IgA+浆细胞和黏膜组织内CCL28响应性免疫细胞，攻毒后血清中和抗体出现较晚，但小鼠未出现体重减轻、疾病症状和死亡。但pgD+pcDNA3.1和pgD-IRES-CCL28对小鼠的免疫保护无效。结论:pCCL28-IRES-gD双表达DNA疫苗可诱导小鼠产生较强的黏膜免疫应答，有较强的免疫保护作用。

目的:探讨同步加量调强放疗技术在头颈部肿瘤可疑阳性淋巴结治疗中的临床疗效及应用价值。方法:选取2017年1月至2019年2月在陕西省汉中市中心医院接受治疗可疑阳性淋巴结的头颈部肿瘤患者60例，按照治疗方案不同分为试验组和对照组，每组30例。试验组采用同步加量调强放疗技术给予患者63.36 ~ 66.66 Gy进行治疗，对照组给予常规颈部预防照射剂量54.12 ~ 60.06 Gy治疗。观察两组患者可疑阳性淋巴结最大横截面短径大小的变化，分析两组患者治疗过程中的不良反应，以评估该方法的可行性。结果:治疗前两组间患者可疑阳性淋巴结最大横截面短径比较差异无统计学意义（ P>0.05）。治疗结束后，两组可疑阳性淋巴结最大横截面短径均较治疗前缩小，试验组淋巴结最大横截面短径与治疗前水平出现缩小[（0.43 ± 0.07） cm比（0.72 ± 0.10） cm]，差异有统计学意义（ P<0.05）；对照组治疗后可疑阳性淋巴结最大横截面短径较治疗前下降，差异无统计学意义（ P>0.05）。治疗后试验组可疑阳性最大横截面短径缩小程度较对照组明显[（0.43 ± 0.07） cm比（0.66 ± 0.08） cm]，两组患者间可疑阳性最大横断面短径比较差异有统计学意义（ t = 11.523， P<0.05）。治疗前两组患者血红蛋白（HGB）水平均处于正常生理范围，组间比较均差异无统计学意义（ P>0.05）；治疗后不同时刻两组白细胞水平[第1周：（7.83 ± 2.53） × 10 9/L比（8.26 ± 3.16） × 10 9/L、第3周：（7.14 ± 3.65） × 10 9/L比（7.08 ± 2.53） × 10 9/L、第5周：（5.47 ± 2.81） × 10 9/L比（6.41 ± 2.57） × 10 9/L、第7周（4.36 ± 2.59） × 10 9/L比（4.98 ± 1.64） × 10 9/L]比较差异有统计学意义（ P<0.05），提示治疗过程中两组白细胞指标水平均呈逐渐降低趋势，且试验组降低程度高于对照组。两组患者治疗前及治疗后不同监测时刻的HGB和血小板均维持在正常生理范围内，比较差异无统计学意义（ P> 0.05）。试验组患者治疗过程中出现的相关性并发症以口腔干燥和口腔黏膜炎为主，对照组治疗不良反应表现为放疗靶区疼痛，比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:同步加量调强放疗技术的应用，既是一种有效地治疗淋巴结隐匿转移的手段，同时也是一种治疗性诊断方法，为研究头颈部肿瘤淋巴结转移规律提供佐证；头部加量调强放疗在头颈部可疑阳性淋巴结的治疗过程中其安全性及组织耐受性良好，可为头颈部可疑阳性淋巴结的治疗和患者预后评估提供一种有效的临床处理方式。

目的:探索基于不同黏膜佐剂的艰难梭菌类毒素B( Clostridium difficile toxoid B，CdtB)疫苗的微针经皮免疫效果，为艰难梭菌感染的防治提供思路。 方法:纯化的艰难梭菌B毒素(TcdB)经甲醛脱毒制备成CdtB疫苗，采用不同剂量的疫苗单独或加入黏膜佐剂的方法，于0 d、7 d、14 d、28 d、42 d微针经皮免疫雌性BALB/c小鼠，定期检测小鼠特异性血清IgG和粪便中IgA的效价水平变化，通过细胞中和试验和艰难梭菌人工感染免疫小鼠的方法来评价疫苗的免疫保护效果。结果:(1)CdtB疫苗单独微针免疫小鼠后，随着剂量与免疫次数的增加，产生了较好的血清特异性抗体IgG，粪便中也出现较高水平的IgA；(2)用含有热不稳定肠毒素(LT)佐剂、霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂的CdtB微针免疫小鼠，各组的血清特异性IgG效价趋势随着免疫剂量增加而提高，含有LT佐剂的免疫组效价变化趋势明显较好；与不加佐剂组比较，各组粪便中特异性IgA效价抗体水平变化趋势差异有统计学意义，但佐剂效应不明显；(3)分别用10 μg CdtB单独微针免疫小鼠和腹腔注射小鼠，虽然微针免疫与腹腔注射后小鼠血清IgG效价差别不大，但微针免疫可明显提高粪便中特异性IgA水平；(4)细胞中和试验和小鼠攻毒保护试验结果说明CdtB疫苗微针免疫可产生一定的保护效力。结论:CdtB疫苗微针经皮免疫小鼠的黏膜免疫效果较好，黏膜佐剂LT和CTB对CdtB疫苗的微针经皮免疫的佐剂效应不显著。

目的:通过比较简单混合和融合重组的单纯疱疹病毒2型糖蛋白D(herpes simplex virus type 2 glycoprotein D，HSV-2 gD)联合分子佐剂CCL19的DNA疫苗对免疫小鼠的免疫应答及免疫保护效果的差异，揭示融合重组疫苗的保护作用。方法:利用基因重组技术构建HSV-2 gD和CCL19单独表达及融合表达的DNA疫苗，经测序、Western blot和ELISA验证后，肌肉注射免疫BALB/c小鼠两次，免疫后定期收集血清和阴道灌洗液，分离免疫后的脾细胞、肠系膜淋巴结细胞及直肠组织。通过终点法ELISA、体外中和试验、免疫组织化学染色、趋化试验、阴道攻毒试验、荧光定量PCR、称量体重及观察疾病严重程度，比较两种形式的疫苗免疫后小鼠的体液免疫、细胞免疫应答和免疫保护作用的差异。结果:融合重组的pgD-IZ-CCL19质粒可在体外正常表达gD蛋白和CCL19蛋白，但pCCL19-IZ-gD质粒的CCL19蛋白表达量比pgD-IZ-CCL19少。免疫pgD-IZ-CCL19的小鼠能产生比pgD+pCCL19组更高水平的血清IgG抗体、阴道灌洗液IgA抗体( P<0.01)和中和能力。与其他组比较，pgD-IZ-CCL19组小鼠免疫后直肠黏膜、脾脏和肠系膜淋巴结均招募了较多的淋巴细胞，攻毒后该组小鼠未出现体重减少和疾病症状，阴道黏膜HSV-2检出率最低，小鼠死亡率也最低，而pCCL19-IZ-gD组的免疫保护无效。 结论:pgD-IZ-CCL19融合重组的DNA疫苗能诱导小鼠产生较强的免疫应答和免疫保护作用，免疫保护效果优于简单混合DNA疫苗。

目的:基于代谢组学的方法，从内源性代谢物的变化分析定喘汤对中性粒细胞型哮喘的干预效果及其可能机制。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为5组，分别为正常组(A组)、中性粒细胞型哮喘模型组(B组)、定喘汤低剂量治疗组(C组)、定喘汤中剂量治疗组(D组)、定喘汤高剂量治疗组(E组)，每组8只。B、C、D、E组采用卵清白蛋白(OVA)和完全弗氏佐剂(CFA)联合诱导致敏小鼠建立中性粒细胞型哮喘模型，C、D、E组采用不同生药浓度的定喘汤进行干预治疗。采用Buxco小动物肺功能检测仪评估小鼠的气道反应性；提取肺泡灌洗液(BALF)采用计数板计数其白细胞总数，细胞涂片染色进行分类计数；HE染色观察肺组织的病理改变。采用高效液相色谱联用四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)检测各组小鼠的血清代谢物，采用常用的主成分分析(PCA)，偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型对血清中代谢物图谱进行统计分析，从内源性代谢物的变化来反映定喘汤的干预效果及其可能机制。结果:(1)一般行为观察：除A组小鼠外，其他各组小鼠在激发期间均出现不同程度的哮喘症状。定喘汤各治疗组(C、D、E组)小鼠症状较B组程度减轻。(2)气道反应性：B组小鼠对乙酰甲胆碱(MCh)的气道反应性随着吸入浓度的升高而增加，各浓度MCh水平下的气道阻力均明显高于A组(均 P<0.01)；C、D、E组气道反应性低于B组(均 P<0.01)；D、E组小鼠气道反应性低于C组(均 P<0.05)；D、E组气道反应性比较差异无统计学意义( P>0.05)。(3)气道炎症细胞浸润：B组小鼠BALF中白细胞总数、中性粒细胞百分率明显高于A组(均 P<0.01)；C、D、E组白细胞总数、中性粒细胞百分率低于B组(均 P<0.01)；D、E组小鼠白细胞总数、中性粒细胞百分率低于C组(均 P<0.01)；D、E组之间比较差异无统计学意义(均 P>0.05)。(4)肺组织病理改变：A组小鼠肺组织未见病理改变。B组可见支气管管腔变狭窄，管腔内黏膜皱褶增生、上皮细胞脱落、肿胀及可见黏液栓、肺泡及肺组织结构破坏，支气管及血管周围大量炎症细胞浸润等典型病理学改变，其中以中性粒细胞及淋巴细胞浸润最明显；定喘汤各治疗组肺组织结构破坏、支气管黏膜水肿及炎症细胞浸润较B组均明显改善，其中D组小鼠肺组织病理改变相对较轻。(5)代谢组学分析：各组小鼠血清代谢物经PCA、PLS-DA以及OPLS-DA分析显示，A组和B组小鼠血清代谢物存在明显差异。通过代谢通路分析发现，不同生药浓度的定喘汤干预治疗可以在不同程度上改善哮喘疾病所致的代谢紊乱。 结论:定喘汤能有效减轻中性粒细胞型哮喘小鼠的气道炎症、气道高反应，有效调节中性粒细胞型哮喘所致的代谢异常。

成人多系统炎症综合征（MIS-A）是一种与严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）感染有关的严重疾病。由于缺乏对该综合征及其与新型冠状病毒（新冠病毒）感染所致其他炎症的交叉研究，MIS-A未被充分认识。为此，美国学者进行了一项回顾性队列研究。该研究通过电子病历审查，依据美国疾病控制与预防中心（CDC）定义来识别2020年4月至2021年1月从佐治亚州亚特兰大市4家附属医院出院的已确诊和未确诊的MIS-A成人患者。使用国际疾病分类（ICD）第10版修订版代码U07.1确定非MIS-A新冠病毒感染患者的住院情况。该研究计算了MIS-A住院患者与新冠病毒感染住院患者的比值，比较两个队列的人口统计学特征，并描述了MIS-A患者的临床特征。结果显示：3 598例实验室检测新冠病毒呈阳性的成人住院患者中，1 336例（37.1%）符合最初的MIS-A筛查标准，其中有11例完全符合MIS-A标准的住院患者，其他患者住院期间没有被诊断出MIS-A；所有患者都被诊断存在急性新冠病毒感染症状，MIS-A住院患者与新冠病毒感染住院患者为1 : 523。63.6%的MIS-A患者为男性。与新冠病毒感染患者相比，MIS-A患者年龄偏低（<50岁）的比例为72.7%比26.1%（ P<0.01），并且多为非西班牙裔黑种人（81.8%比50.0%， P＝0.04）。11例完全符合MIS-A的患者纳入本研究的分析中，其中有10例（90.9%）至少患有1种潜在疾病，有2例（18.2%）曾在入院前37 d和55 d出现过经实验室确诊的新冠病毒感染，并都出现了左心室收缩功能障碍，但无皮肤黏膜受累；所有患者均出现急性肾损伤，其中7例（63.6%）需要肾脏替代治疗，2例（18.2%）患有横纹肌溶解综合征，3例（27.3%）确诊为迟发性细菌感染。所有患者均接受全身皮质类固醇治疗，但未接受静脉注射免疫球蛋白或白细胞介素受体拮抗剂治疗，其中6例患者（54.5%）接受了应激剂量氢化可的松治疗，其中1例被诊断患有原发性肾上腺皮质功能不全；8例（72.7%）接受血管加压药治疗；8例（72.7%）需要机械通气治疗；2例（18.2%）需要机械心血管循环支持治疗。11例患者的中位住院时间为17（5，34） d。11例患者均被送入重症监护病房（ICU），其中2例（18.2%）死亡或转至临终关怀医院。研究人员据此得出结论：MIS-A是新冠病毒感染的严重并发症，但可能未被认识。需要提高对MIS-A的认识，增加诊断率和报告率，有助于量化其流行病学负担，并确定风险最高的人群。

目的 建立变应性鼻结膜炎小鼠模型,研究Nod样受体蛋白3(NLRP3)信号通路在变应性鼻结膜炎中的作用.方法 33只雌性C57小鼠(SPF级)随机分为3组:对照组,实验组,NLRP3-/-组.实验组和NLRP3-/-组分别于第0、4、7、14、21天行腹腔注射含卵清蛋白(OVA)100 μg与佐剂Al(OH)0.2 mL/只.间隔3 d后,每周连续5 d用5%OVA分别点每眼每鼻各10 μL诱发过敏症状;在致敏和激发阶段,对照组均用等量PBS替代.观察小鼠眼部、鼻部症状并进行评分.应用ELISA方法检测血清中OVA特异性IgE、IL-4、IL-17及IL-18含量.HE染色检测小鼠睑结膜及鼻黏膜组织变化.Real-time PCR 检测睑结膜及鼻黏膜组织NLRP3 mRNA的表达.结果 实验组和NLRP3-/-组均诱发出鼻部、眼部过敏症状;实验组鼻部出现过敏症状时间为(10.500±1.080)d,眼部出现过敏症状时间为(20.300±2.058)d;NLRP3-/-组鼻部出现过敏症状时间为(13.400±1.955)d,眼部出现过敏症状时间为(20.900±2.132)d;NLRP3-/-组鼻部过敏时间较实验组显著延长(P<0.05),但眼部过敏时间同实验组差异无统计学意义(P>0.05).实验组及NLRP3-/-组血清OVA特异性IgE及IL-4、IL-17水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).实验组血清IL-18含量较对照组及NLRP3-/-组显著增加(P<0.05).实验组及NLRP3-/-组睑结膜及鼻黏膜组织病变明显.实验组睑结膜及鼻黏膜NLRP3 mRNA表达较对照组及NLRP3-/-组显著增加(P<0.05).结论 变应性鼻结膜炎发病机制复杂,受多因素影响;NLRP3信号通路在其发病中起一定的促进作用.

菊粉是一种天然多糖,主要来源于菊苣、菊芋、大丽花等植物.菊粉具有增强免疫应答、减轻炎症反应、抗氧化、抗疲劳、改善糖脂代谢紊乱、提高骨密度等多种生物活性.目前,菊粉在医药和食品领域前景广阔.在医药领域,菊粉被用于药物递送载体、药物稳定剂、疫苗佐剂和肾功能诊断剂等,在补铁强化剂、肝损伤修复剂和肠黏膜保护剂等方面有天然优势.在食品领域,以菊粉为主要原料开发具有缓解便秘、降低血脂和控制血糖等功效的食品.本研究旨在对菊粉在医药和食品领域的研究成果进行系统概述,并提出不足与展望,为菊粉在医药和食品领域的产品开发提供理论依据.

目的 探究日本血吸虫源多肽SJMHE1对卵清蛋白(OVA)诱导的小鼠变应性鼻炎(AR)的保护作用与机制.方法 将15只雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、AR组以及AR+SJMHE1组,每组5只.正常组全程未给予任何处理;AR组在第0、7、14天腹腔给予OVA佐剂混悬液致敏,随后在第28～32天鼻腔滴注5%OVA溶液(20 μL)进行局部激发,每日1次;AR+SJMHE1组在诱导变应性鼻炎的基础上于第0、14、28天皮下注射SJMHE1乳化液进行干预.末次激发后观察各组小鼠20 min,并进行行为学(挠鼻和打喷嚏)记录;苏木精-伊红染色观察各组小鼠鼻黏膜病理学改变;酶联免疫吸附试验检测各组小鼠血清中白细胞介素(IL)-4、IL-13和IL-10含量;流式细胞术检测小鼠脾脏CD19+细胞中IL-10+细胞比例.另选6只雌性BALB/c小鼠分为空白对照组和异硫氰酸荧光素(FITC)-SJMHE1组,每组3只.空白对照组注射磷酸盐缓冲液(PBS),FITC-SJMHE1组皮下注射FITC标记的SJMHE1(FITC-SJMHE1).流式细胞技术检测FITC阳性细胞在脾脏中的含量,并观察CD19+细胞与FITC-SJMHE1 结合比例.结果 与AR组挠鼻次数(33.20±5.07)次/20 min和打喷嚏次数(中位数=8次/20 min)相比,AR+SJMHE1组小鼠挠鼻次数(17.20±6.02)次/20 min和打喷嚏次数(中位数=1次/20 min)显著下降,差异均有统计学意义(F/H=33.71、10.81,P均<0.01),且鼻粘膜病理损伤得到缓解.与AR组小鼠血清中IL-4(21.55±2.78)pg/mL、IL-13(40.80±3.54)pg/mL和IL-10(61.32±15.30)pg/mL的水平相比,AR+SJMHE1组IL-4(14.39±1.53)pg/mL、IL-13(22.49±3.32)pg/mL水平降低,IL-10(108.65±25.26)pg/mL水平升高,差异均有统计学意义(F=58.92、80.10、17.12,P均<0.01).与AR组小鼠脾脏CD19+细胞中IL-10+细胞比例(0.79±0.32)%相比,AR+SJMHE1 组IL-10+比例(3.35±0.99)%显著上调,差异有统计学意义(F=19.55,P<0.01).流式细胞术结果显示FITC-SJMHE1可分布于小鼠脾脏且与CD19+细胞结合.结论 SJMHE1对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有干预作用,可能与上调脾脏中Breg细胞比例有关.

目的:观察电针对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠全身炎症及肠黏膜屏障功能的影响.方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组与电针组,每组6只.采用高脂饲料结合单次小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立T2DM模型.电针组取双侧"足三里""三阴交""脾俞""肾俞",每周3次,给予8周治疗.治疗后检测各组大鼠空腹血糖(FBG);用ELISA法检测大鼠血清中空腹胰岛素(FINS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、内毒素(LPS)、D-乳酸(D-LA)及二胺氧化酶(DAO)含量,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);透射电镜观察大鼠小肠黏膜上皮超微结构;WB检测大鼠小肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达.结果:与模型组比较,电针能降低T2DM大鼠FBG、FINS和HOMA-IR(P＜0.01),下调血清中炎症因子TNF-α、IL-6含量(P＜0.01),下调血清LPS、D-LA和DAO含量(P＜0.01),上调小肠上皮ZO-1、Occludin及Claudin-1蛋白表达(P＜0.01).结论:电针"足三里""三阴交""脾俞""肾俞"能够降低T2DM大鼠空腹血糖,降低全身炎症并改善胰岛素抵抗状态,其作用机制与上调小肠上皮紧密连接蛋白、改善肠黏膜通透性和修复大鼠肠黏膜屏障功能有关.