目的:探讨中成药"龟龄集"联合左卡尼汀治疗男性肾阳虚不育症效果.方法:选择2022年1月—2023年12月本院就诊的少弱精子症男性患者205例,随机分为西药组102例、中西药组103例,两组均予以基础对症治疗及左卡尼汀治疗,中西药组联合龟龄集治疗,均连用12周.统计疗效、中医证候积分、精子质量、性激素促黄体生成素,氧化应激指标精浆丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD).结果:研究期间,西药组自行退出1例、记录不全2例,纳入99例;中西药组失访1例,个人因素退出1例,纳入101例.治疗后中西药组主症(8.51±2.53分)、次症及舌脉(3.34±1.02分)、中医证候积分总分(11.85±3.45分)均低于西药组(12.15±3.20分、5.02±1.24分、17.17±3.83分),总有效率(82.2％)高于西药组(67.7％),精子浓度(30.15±5.45)× 10 6/ml、前向运动A级精子百分率(27.26±4.33)％、A 级+B 级精子百分率(54.46±6.58)％均高于西药组[(22.04±4.62)× 10 6/ml、(24.36±4.18)％、(48.52±5.16)％],血清促黄体生成素(3.87±1.01U/L)、卵泡刺激素(5.24±1.78U/L)均低于西药组(4.21±1.23 U/L、6.32±2.26U/L),睾酮(15.54±1.96nmol/L)高于西药组(13.68±2.02nmol/L),精浆 ROS(425.26±86.18U/ml)、MDA(6.25±1.73nmol/L)均低于西药组(463.73±82.67U/ml、7.12±1.64nmol/L),精浆 SOD(102.54±18.02U/ml)高于西药组(95.10±15.25U/ml)(均P＜0.05).结论:龟龄集联合左卡尼汀治疗男性不育症可明显缓解患者临床症状,提高治疗效果,可能与其可改善精子质量,调节性激素表达,降低氧化应激损伤有关.

OBJECTIVE:To investigate the effectiveness and safety of Guilingji capsule(龟龄集胶囊,GLJC)in treatment of Alzheimer's disease(AD)patients with kidney-marrow deficiency pattern(KMDP)compared with gingko extract tablets.METHODS:This is a secondary analysis of a large-scale multicenter randomized non-inferiority clinical trial.A total of 120 AD patients with KMDP were enrolled in this study.The participants were randomly categorized into two groups:(a)GLJC group(n=60)and(b)gingko group(n=60).The GLJC group was treated with GLJC and gingko extract mimetic tablets,whereas the gingko group received gingko extract tablets and mimetic GLJC.The data on the Mini-Mental State Examination(MMSE),Alzheimer's Disease Assessment Scale-Cognitive Subscale(ADAS-Cog),Activities of Daily Living(ADL),and Chinese Medicine Symptom Scale(CM-SS)was evaluated at 0,12,and 24 weeks of treatment.The serum levels of acetylcholine(Ach),acetylcholinesterase(AchE),B-cell lymphoma-2(Bcl-2),and Bcl-2-associated X protein(Bax)in the participants were measured before and after 24 weeks of treatment.The safety was based on the incidence of adverse events.RESULTS:Both interventions significantly increased the MMSE scores of the participants and decreased their ADAS-Cog,ADL,and CM-SS scores(P＜0.01).Compared with the gingko group,the GLJC group had a higher effective rate of improvement in the symptoms of"amnesia"and"dull expression and slow thinking"at the 12th week and 24th week(P＜0.05,P＜0.01).In the GLJC group,serum Bcl-2 levels were significantly increased at the 24th week(P＜0.05).Serum Bax and AchE levels of the two groups were significantly decreased at the 24th week(P＜0.01).No treatment-related adverse events were reported in the two groups.CONCLUSIONS:GLJC is equivalent to the gingko extract tablets in terms of improving cognitive function and the quality of life in AD patients with KMDP and has good clinical efficacy and safety.When it comes to improving TCM symptoms and anti-aging,GLJC is even more advantageous.

鹿茸是我国传统中药之一,使用广泛且临床应用历史悠久.通过查阅古代本草典籍及近现代文献,对鹿茸的活性成分、药理作用、临床应用以及质量控制方面进行综述,提出实际药效-活性成分-药材质量相联系的研究思路,寻找鹿茸药材的质量标志物,以期对中药复方龟龄集中鹿茸的药效物质基础及质量控制的相关研究提供参考.

总结国医大师张志远治疗早泄的经验,认为早泄病因为纵欲过度、情志内伤、湿热侵袭、久病体虚所致,虚证多因肾中阴阳亏虚所致,治以阴阳并补、补益肝肾;实证多因湿热蕴积下焦所致,治以清利湿热、畅通气血.助阳善用肉苁蓉、锁阳、淫羊藿、巴戟天、附子,滋阴常选枸杞子、生地黄、熟地黄、天冬、楮实子,填精益髓则取鹿茸、龟甲、海马、胎盘.龟龄集、还少丹、天雄散、育麟汤、前列腺二号汤等为其常用经验方.

目的 建立龟龄集胶囊无机元素指纹图谱,评价龟龄集胶囊产品质量均一性,并寻找特征元素.方法 采用微波消解法对样品进行前处理,ICP-MS法对龟龄集胶囊中Na、Mg、K、Ca、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Se、Mo、Sn共14种无机元素进行了定量测定,绘制无机元素质量分数分布图,并应用IBM SPSS Statistics 22.0软件对结果进行主成分分析(PCA).结果 建立了龟龄集胶囊的无机元素指纹图谱,10批次样品平均数相似度(夹角余弦值)、中位数相似度(夹角余弦值)均大于0.970,表明产品质量均一性良好.应用PCA选出4个主因子,得出Cr、Mn、Fe、Zn、Se为龟龄集胶囊的特征元素.结论 建立的龟龄集胶囊无机元素指纹图谱,可为龟龄集胶囊的质量评价提供研究基础.

目的 探讨龟龄集对衰老引起的学习记忆功能障碍的改善作用.方法 分别应用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型和自然衰老大鼠模型,考察龟龄集对小鼠跳台实验和大鼠Morris水迷宫等学习记忆功能指标的改善作用,同时考察其对大鼠胸腺、脾脏、睾丸、附睾脏器指数和血液生化指标的影响.结果 龟龄集能显著延长模型小鼠的跳台潜伏期(P＜0.05),明显减少5 min内的错误次数(P＜0.05、0.01).龟龄集能够缩短自然衰老大鼠定位航行逃逸潜伏期(P＜0.01),延长空间探索象限滞留时间(P＜0.05、0.01),增加进入平台次数(P＜0.05);能够增加睾丸、胸腺、脾脏指数(P＜0.05),降低血清中丙氨酸转氨酶(ALT)水平(P＜0.05).结论 龟龄集具有明显改善衰老引起的学习记忆功能减退的作用,同时在提高免疫、改善生殖、保护肝脏方面也具有一定的作用.

目的 考察海马补肾丸对小鼠学习记忆障碍的改善作用,并探讨其作用机制.方法 小鼠随机分为对照组、模型组、吡拉西坦组、龟龄集组和海马补肾丸组.采用腹腔注射东莨菪碱制备小鼠记忆获得性障碍模型,计算学习正确率,测定蛋白含量和乙酰胆碱酯酶活力.采用腹腔注射亚硝酸钠制备小鼠记忆巩固性障碍模型,计算训练、测定学习正确率,测定蛋白含量、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果 海马补肾丸2.20 g/kg组能显著增加小鼠学习记忆的正确率(P＜0.05),显著降低乙酰胆碱酯酶活力(P＜0.01).测定时,与模型组比较,海马补肾丸1.10、2.20 g/kg组能显著增加小鼠学习记忆正确率(P＜0.05),能不同程度增加小鼠大脑SOD含量,降低MDA含量(P＜0.05、0.01).结论 海马补肾丸能明显改善小鼠的记忆获得、记忆巩固障碍,推测其作用机制主要是通过降低乙酰胆碱酯酶活性,增加脑内乙酰胆碱的含量,改善记忆获得能力;通过抗脑组织的氧化损伤,增加大脑SOD含量,降低MDA含量,改善记忆巩固能力.

目的 采用不同模型评价海马补肾丸免疫调节作用和抗应激作用.方法 健康昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、香菇菌多糖(100 mg/kg)组、龟龄集(0.24 g/kg)组和海马补肾丸0.55、1.10、2.20 g/kg组,每天ig给药1次,连续14d.①采用注射盐酸环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型,给药结束尾iv 25％印度墨汁,计算廓清指数(K)和吞噬指数(α),观察小鼠肝指数、脾指数和胸腺指数;②采用注射盐酸环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型,ip 5％鸡红细胞悬液0.3 mL致敏,观察各组血清溶血素生成量;③给药第8～10天,除对照组外,剩余各组开始ip环磷酰胺80 mg/kg,连续3d,继续给药,至给药第14天眼眶静脉取血,测定白细胞数及免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量;④SD大鼠随机分为对照组、模型组、单硝酸异山梨酯片20 mg/kg、龟龄集0.12 g/kg和海马补肾丸低、中、高剂量(0.28、0.56、1.12 g/kg)组,每天ig给药1次,连续14d,观察海马补肾丸对运动疲劳大鼠游泳时间及运动后对血清尿素氮(BUN)、乳酸(LD)、肝糖原水平的影响;⑤健康昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、单硝酸异山梨酯片(40 mg/kg)组、龟龄集(0.24 g/kg)组和海马补肾丸低、中、高剂量(0.55、1.1、2.2 g/kg)组,每天ig给药1次,连续5d,于末次给药后lh,采用注射异丙肾上腺素致小鼠缺氧模型,将小鼠置于密封瓶中,观察存活时间.结果 与模型组比较,海马补肾丸2.2 g/kg显著增加α及1(P＜0.05、0.0l),海马补肾丸11、2.2 g/kg剂量显著增加脾、胸腺系数(P＜0.05、0.01);海马补肾丸各剂量组显著增加血清溶血素生成量(P＜0.05、0.01);海马补肾丸2.2 g/kg剂量组显著增加白细胞数量及免疫球蛋白IgG、IgM、IgA的含量(P＜0.05);海马补肾丸0.56、1.12 g/kg剂量显著延长大鼠力竭游泳时间(P＜0.05、0.01),1.12 g/kg剂量能显著地减少血清中BUN、LD含量,减少肝糖原消耗(P＜0.05、0.01);海马补肾丸1.1、2.2 g/kg剂量能显著延长小鼠缺氧存活时间(P＜0.05、0.01).结论 海马补肾丸具有明显免疫增强和抗应激作用.

分析龟龄集(Guilingji,GLJ)对氢化可的松致肾阳虚证大鼠血清内源性代谢物紊乱的调控作用,明确其发挥药效的代谢调控通路.以大剂量注射氢化可的松复制大鼠肾阳虚证模型.将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药(金匮肾气丸)组和龟龄集低、中、高剂量组,连续给药30天.利用传统药效学指标(体质量、行为学、生化指标)评价龟龄集药效.动物实验获得山西大学伦理委员会的批准.采用基于UHPLC-Q Exactive Orbitrap-MS代谢组学方法研究血清的整体代谢轮廓,分析龟龄集改善肾阳虚证的代谢调控机制.结果 显示,龟龄集可显著改善肾阳虚证;通路分析显示亮氨酸-异亮氨酸代谢、醚酯代谢、胆汁酸代谢为其改善肾阳虚证的主要途径;龟龄集对肾阳虚证改善作用的主要效应机制涉及其对能量平衡、肠道稳态和免疫功能的调节作用.

基于LC-MS代谢组学的方法,研究龟龄集(Guilingji,GLJ)对D-半乳糖致衰老大鼠的自主活动的影响并探究其作用机制.采用皮下注射D-半乳糖(300 mg·kg-1)致大鼠衰老的模型,分析不同浓度龟龄集(37.5、75和150 mg·kg-1)对衰老大鼠旷场实验的影响.造模后8周对收集的血清进行LC-MS检测,分析探讨龟龄集的延缓衰老作用机制,动物实验获得山西大学伦理委员会的批准(SXULL2014032).旷场实验表明龟龄集能显著改善衰老大鼠的自主活动能力.代谢组学分析共找到23个潜在生物标志物,主要涉及3条代谢通路,分别为原发性胆汁酸生物合成、鞘脂代谢和缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成.龟龄集可以显著调节模型大鼠血清中的4种代谢物,主要回调胆汁酸合成和鞘脂代谢两条通路.龟龄集可延缓大鼠的衰老行为,该实验为龟龄集延缓衰老的潜在机制的研究提供了借鉴.