目的:探究同时伴有低密度脂蛋白受体衔接蛋白1（LDLRAP1）及胆固醇转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体G8（ABCG8）基因异常的家族性高胆固醇血症（FH）一家系的临床及分子生物学特征。方法:2020年9月于上海交通大学医学院附属瑞金医院收治1例FH患者，采集该家系成员外周静脉血样本，检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）；用高效液相色谱法检测血清豆固醇和谷固醇含量。二代基因测序检测先证者及家系成员基因变异情况。采用Pymol软件对基因变异位点进行致病性分析，并使用Uniprot Modelling软件行蛋白结构建模。结果:先证者表现为贫血合并多部位黄色瘤、早发急性冠状动脉综合征。冠状动脉造影示冠状动脉三支严重病变；腹部超声示脾肿大；血涂片示异型红细胞、大血小板散在可见；血清TC、LDL-C、豆固醇和谷固醇浓度均升高［分别为8.54 mmol/L（正常值2.3~5.7 mmol/L）、4.84 mmol/L（正常值1.3~4.3 mmol/L）、44 μmol/L（正常值1.0~10 μmol/L）、28 μmol/L（正常值1.0~15 μmol/L）］。基因测序示：LDLRAP1：NM_015627.2：exon 4 c.415 C>T（p.Q139X），该纯合突变形成的蛋白截断体丢失多个稳定蛋白结构区域，不具备正常功能。同时，先证者发现ABCG8基因变异：exon13 c.1895T>C（p.V632A），exon8 c.1199C>A（p.T400K）。2例家系成员HDL-C增高（Ⅱ5：2.33 mmol/L，Ⅱ6：2.96 mmol/L）；3例带ABCG8基因变异的成员豆固醇（Ⅱ8：23 μmol/L，Ⅱ7：24 μmol/L，Ⅰ2：18 μmol/L）、谷固醇（Ⅱ8：41 μmol/L，Ⅱ7：33 μmol/L，Ⅰ2：45 μmol/L）轻度增高。结论:同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的FH患者，可出现植物固醇浓度异常，其临床表现更加复杂，应综合考虑家族史及LDL-C、植物固醇水平及基因检测结果。

植物固醇血症是罕见且严重的常染色体隐性遗传代谢性疾病，由三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G5或G8（ABCG5/G8）基因突变引起，最显著的临床特征是血清植物固醇含量显著增加。该文立足于临床检验应用，简要阐述植物固醇的代谢，从植物固醇血症的诊断现状、与ASCVD关系、实验室诊断方法（包括血清植物固醇浓度的检测、ABCG5/G8基因突变的检测）等方面详细介绍了该疾病的最新研究成果，以提高人们对该疾病的关注度。

目的:分析谷固醇血症（STSL）合并心脑血管事件患者的临床表现、基因及血液学检测结果。方法:收集并分析2020年11月至2023年6月上海交通大学医学院附属瑞金医院门诊的11例STSL患者的临床资料、基因检测以及血液学结果。采用全外显子组测序技术检测脂代谢相关基因突变；酶终点法检测血清总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）浓度；高效液相色谱法检测血清谷固醇浓度；酶联免疫吸附法检测C反应蛋白（CRP）、白细胞介素（IL）-6以及肿瘤坏死因子（TNF）-α水平；凝固法检测纤维蛋白原含量、蛋白C以及凝血因子Ⅷ（FⅧ）活性；免疫比浊法检测血管性血友病因子（vWF）抗原及活性，发色底物法检测抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）活性。结果:11例患者均发生心脑血管事件，其中3例冠心病，6例脑梗死，2例冠心病合并脑梗死，4例伴有眼睑黄褐瘤，2例伴有关节炎。基因测序发现3种ABCG5基因突变（exon9：c.G1166A：p.R389H、exon9：c.T1195C：p.F399L、exon12：c.1762+1G>A）和3种ABCG8基因突变（exon4：c.445_453del：p.A149_V151del、exon11：c.1720G>A：p.Gly574Arg、exon13：c.1949T>G：p.Leu650Arg）。STSL患者的外周血口红细胞比例为（11.3±8.6）%，血清TC、LDL-C和谷固醇浓度分别为（6.8±2.4）mmol/L、（4.4±2.0）mmol/L和40.0（22.0，203.7）μmol/L；血清CRP、IL-6、TNF-α浓度分别为15.5（7.2，29.6）mg/L、（4.2±2.0）pg/ml和（6.7±1.5）pg/ml；PC、FⅧ以及ATⅢ的活性分别为（114±51）%、（110±41）%和（83±33）%，纤维蛋白原含量为（3.2±1.4）g/L，vWF抗原及活性分别为（305±168）%和（275±112）%。结论:谷固醇血症合并心脑血管事件的患者存在复杂的脂代谢相关基因缺陷，其炎症介质CRP、凝血参数vWF等血液学指标明显升高。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) GAS5对耐阿霉素乳腺癌细胞的影响及其分子机制。方法:采用浓度梯度(0.50、1.00和4.00 μg/ml) μm阿霉素长期处理MCF-7乳腺癌细胞(河南中医药大学第五临床医学院的)，建立阿霉素耐药的细胞株MCF-7/ADR，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞lncRNA GAS5表达水平；采用对照lncRNA和lncRNA GAS5慢病毒感染MCF-7/ADR细胞株，构建lncRNA对照和lncRNA GAS5过表达细胞系(lncRNA对照组和lncRNA GAS5组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定两组细胞对阿霉素的敏感性；采用平板克隆形成实验分析两组细胞细胞克隆形成率；采用流式细胞术分析两组细胞的凋亡；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA GAS5的靶基因；采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析lncRNA GAS5靶蛋白的表达水平。计量数据比较采用 t检验。 结果:采用阿霉素浓度递增法成功构建对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR。MCF-7乳腺癌细胞lncRNA GAS5表达水平(1.09±0.11)明显高于MCF-7/ADR细胞lncRNA GAS5表达水平(0.51±0.09)，差异有统计学意义( t＝9.127， P<0.05)。lncRNA对照组细胞吸光值(1.96±0.09)明显高于lncRNA GAS5组(1.42±0.09)，差异有统计学意义( t＝9.258， P<0.05)。lncRNA对照组细胞克隆数[(218.81±23.51)个]明显高于lncRNA GAS5组细胞克隆数[(114.23±16.27)个]，差异有统计学意义( t＝8.181， P<0.05)。lncRNA对照组细胞凋亡率[(4.70±0.89)%]明显高于lncRNA GAS5组细胞凋亡率[(18.53±2.99)%]，差异有统计学意义( t＝9.913， P<0.05)。lncRNA对照组细胞MRP1、ABCB1、ABCG1、P-gp蛋白表达水平(1.25±0.10、0.97±0.08、1.80±0.15、1.50±0.12)明显高于lncRNA GAS5组细胞(0.75±0.07、0.43±0.06)，0.83±0.11、0.72±0.08)，差异有统计学意义( t＝9.315、11.710、11.780、11.971， P<0.05)。 结论:lncRNA GAS5在阿霉素耐药细胞株中表达水平显著下调，通过调节肿瘤细胞耐药相关蛋白的表达参与乳腺癌耐药过程。

目的:通过网络药理学挖掘和实验方法，考察麦冬五味子联用方抗动脉粥样硬化的作用，探讨其作用机制。方法:从TCMGeneDIT数据库系统中，挖掘麦冬、五味子靶点蛋白，构建麦冬-五味子多成分-蛋白网络，提取显著性差异的子网络中蛋白并进行信号通路映射。将ApoE-等位基因敲除小鼠按随机数字表法分成对照组，模型组，低、中、高剂量组和阿托伐他汀钙片组，每组6只。除对照组外，其余各组以H10540高脂饲料喂饲12周。第4周开始给药，阿托伐他汀钙片组灌胃阿托伐他汀钙片混悬液6 mg/kg，低、中、高剂量组灌胃麦冬五味子混煎液4.68、2.34、1.17 g/kg，1次/d，连续灌胃8周。采用油红染色观察动脉粥样硬化主动脉管壁病理学改变。采用Western blot法检测肝组织促分裂素原活化蛋白激酶p38(mitogen-activated protein kinases p38, p38)、ATP结合盒亚家族G成员1(ATP binding cassette subfamily G member 1, ABCG1)、Toll样受体4(toll-like receptor 4, TLR4)、热休克蛋白90α家族A成员1 (heat shock protein 90 alpha family class A member 1, HSP90AA1)、MMP-9和花生四烯酸5脂氧合酶(arachidonate 5-Lipoxygenase, ALOX5)蛋白表达，以及脑组织核因子E相关因子(nuclear factor related factor, Nrf2)和血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1, HO-1)蛋白表达。结果:发现麦冬五味子联用方中有11个成分，与数据库中挖掘到的37个蛋白有匹配，构成48个结点、190条边界的成分-蛋白网络，提取显著性差异蛋白网络中 P<0.05的子网络1个。与模型组比较，低、中、高剂量组小鼠肝组织p-p38/p38 [(2.12±0.12)、(1.76±0.11)、(1.69±0.10)比(2.45±0.16)]、TLR4[(1.98±0.10)、(1.64±0.11)、(1.55±0.12)比(2.68±0.06)]、HSP90AA1[(1.79±0.10)、(1.66±0.09)、(1.59±0.11)比(2.06±0.07)]、MMP-9[(1.84±0.11)、(1.75±0.12)、(1.66±0.08)比(2.68±0.10)]蛋白表达降低( P<0.05)，ABCG1[(0.53±0.08)、(0.78±0.09)、(0.81±0.10)比(0.45±0.04)]、ALOX5[(0.59±0.04)、(0.67±0.09)、(0.88±0.07)比(0.47±0.02)]蛋白表达升高( P<0.05)，脑组织细胞质Nrf2[(1.62±0.12)、(1.32±0.09)、(1.14±0.06)比(2.12±0.08)]蛋白表达降低( P<0.05)，细胞核中Nrf2[(1.12±0.09)、(1.61±0.07)、(1.68±0.11)比(1.07±0.08)]蛋白表达升高( P<0.05)，HO-1[(1.16±0.09)、(1.73±0.11)、(1.82±0.08)比(1.05±0.04)]蛋白表达升高( P<0.05)。 结论:本研究采用网络药理学和分子生物学方法，阐释了麦冬五味子联用防治动脉粥样硬化的分子机制，并且在氧化应激诱导Nrf2途径上进行验证，为联用方的进一步研究提供参考。

目的 运用网络药理学结合实验验证探讨雷公藤红素调控肠上皮细胞胆固醇代谢的潜在靶点及作用机制.方法 应用网络药理学筛选雷公藤红素调控肠上皮细胞胆固醇代谢的关键靶点和通路.运用Autodock Vina软件进行分子对接验证.通过构建体外肠上皮细胞高胆固醇模型,考察雷公藤红素对肠上皮细胞胆固醇代谢及其关键通路和靶点表达的影响.结果 共获得94个雷公藤红素靶点、15 415个肠道靶点、14 177个胆固醇代谢靶点.取交集得75个共有靶点.蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络筛选得到1个关键子网络.基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析发现网络中的靶点与多种生物功能相关.基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析发现,雷公藤红素调控肠道胆固醇代谢涉及多条途径,其中肠道脂质代谢的关键通路(fat digestion and absorption)与PPI网络中的关键子网络之一密切相关.分子对接结果表明,雷公藤红素与关键网络中的核心蛋白肝X受体α(liver X receptorα,LXRα)具有良好的结合亲和力.体外实验表明,雷公藤红素显著降低高胆固醇环境下肠上皮细胞脂质堆积(P＜0.05、0.01、0.001),显著上调三磷酸腺苷结合盒转运蛋白 G5 和 G8(adenosine triphosphate-binding cassette transporters G5 and G8,ABCG5/8)蛋白表达(P＜0.05、0.01),并下调 NPC1 样细胞内胆固醇转运蛋白 1(NPC1 like intracellular cholesterol transporter 1,NPC1L1)表达(P＜0.05).结论 雷公藤红素调控肠上皮细胞胆固醇代谢的作用机制可能与调节LXRα促进胆固醇流出、抑制胆固醇摄取密切相关.

目的 探究十二味疏肝利胆颗粒(Twelve-Flavor Shugan Lidan Granule,TSLG)降低胆固醇累积预防结石生成的分子机制.方法 基于药理学数据分析获取TSLG的活性成分与靶点;从Genebass数据库获取与胆囊结石疾病相关的基因,通过Cytoscape软件构建TSLG调控网络并进行核心基因鉴定;采用GO与KEGG通路富集分析对TSLG调控网络中的核心基因及肝组织转录组差异基因进行生物功能与通路注释;利用分子对接方法模拟关键生物标志物与TSLG核心成分的对接模式.采用油酸构建胆固醇累积的细胞模型,应用Western blot法、免疫荧光法检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)、肝脏X受体α(liver X receptorsα,LXRα)、ATP结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette sub-family G member,ABCG)5、ABCG8、胆固醇调节元件结合蛋白2(sterol regulatory element-binding protein 2,SREBP2)、磷酸化蛋白激酶B(phosphoryla-ted protein kinase B,p-AKT)、磷酸化叉头盒蛋白O1 a(phosphorylated forkhead box O1 a,p-FOXO1 A)的表达水平;Seahorse细胞能量代谢仪检测细胞线粒体耗氧率和细胞外酸化率;RT-qPCR检测三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TAC)关键酶的mRNA表达水平.结果 网络药理学分析获得了41个TSLG调控疾病的相关靶点.分子生物学实验结果表明,TSLG抑制p-AMPK、LXRα、ABCG5、ABCG8、SREBP2的表达,增强p-AKT、p-FOXO1 A的表达,TSLG抑制糖酵解并增强氧化磷酸化,TSLG抑制TAC循环酶活性,改善肝脏糖脂代谢,从而预防胆固醇结石的生成.结论 TSLG中主要成分可能通过靶向AMPK、AKT及Hippo信号通路调节肝脏代谢,以达到降低胆固醇累积、预防结石生成的作用.

胆固醇结石是胆囊结石患者的常见类型,且受多种因素影响.近年来,遗传学因素在胆囊结石中研究广泛,尤其在胆固醇结石形成机制中的作用成为当前研究的热点.ATP结合盒转运体(ABC)是人体内最大的膜转运蛋白家族,在维持脂质和甾醇平衡中发挥着关键功能.ABCG5/8是胆固醇转运蛋白,参与调节体内胆固醇水平,被认为是人体胆固醇结石的主要遗传易感因素.本文讨论了ABCG5/8在胆囊胆固醇结石形成中作用的相关研究进展,并介绍了靶向ABCG5/8治疗胆固醇结石的可能性,为胆固醇结石的病因探究及临床治疗提供一定的理论依据.

目的 观察磷脂转运蛋白基因敲除(PLTP-/-)后雌雄小鼠血浆脂质水平的差异,比较PLTP-/-对雌雄小鼠胆固醇逆转运(RCT)效率的影响.方法 选择8周龄同窝出PLTP-/-小鼠雌雄各8只,喂饲高脂饲料4周后,酶法检测小鼠血浆中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Ch)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-Ch)水平,Western blot检测血浆载脂蛋白A1(apoA1)表达,小鼠腹腔注射含3H-胆固醇的巨噬细胞,48 h后,取小鼠血浆、肝脏、胆汁、小肠和粪便,利用液闪计数仪检测小鼠各组织中的放射活度,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织清道夫受体BI(SR-B1)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G5/G8(ABCG5/G8)、肝X受体α(LXRα)、胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)、小肠ABCG5/G8和肝x受体α(LXRα)的基因表达.结果 相比于雄性PLTP-/-小鼠,雌性PLTP-/-小鼠血浆中TC、TG、HDL-Ch和non-HDL-Ch的表达无明显改变,但apoA1水平,差异有统计学意义(P＜0.05),雌性PLTP-/-小鼠升高;体内RCT实验显示:与雄性PLTP-/-小鼠相比,雌性PLTP-/-小鼠血浆和小肠中放射活度无变化,肝脏、胆汁和粪便中放射活度,差异有统计学意义(P＜0.05),雌性PLTP-/-小鼠升高;RT-PCR显示:与雄性PLTP-/-小鼠相比,雌性PLTP-/-小鼠肝脏中RCT相关因子LXR α、ABCG5/G8及CYP7A1表达,差异有统计学意义(P＜0.05),雌性PLTP-/-小鼠升高,而SR-B1、LDL-R表达无明显变化;小肠壁LXRα、ABCG5/G8表达未见明显变化.结论 磷脂转运蛋白基因敲除后,雌性PLTP一-小鼠的胆固醇逆转运效率较高于雄性PLTP-/-小鼠,肝脏中RCT相关蛋白基因表达增加.

目的 探讨常见的痛风基因在痛风中的作用.方法 报道1例同时具有3个基因异常的严重痛风患者,并以“ABCG2”“SLC2A9”“SLC22A12”“MTHFR”分别与“痛风/gout”或“高尿酸血症/hyperuricemia”组合作为关键词,在中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库和Pubmed进行检索,收集并分析检索到的相关文献.结果 该例为29岁男性患者,具有脊柱和全身多关节痛风石,基因检测发现其同时存在ABCG2、SLC2A9和SLC22A12的异常变异,具体表现为ABCG2:421 C＞A(rs2231142);SLC2A9:881 G＞A(rs3733591);SLC22A12:831-192 C＞A(rs893006).文献检索结果显示,ABCG2和痛风/高尿酸血症英文文献137篇、中文文献11篇,SLC2A9和痛风/高尿酸血症英文文献138篇、中文文献8篇,SLC22A12和痛风/高尿酸血症英文文献139篇、中文文献4篇,MTHFR和痛风/高尿酸血症英文文献11篇、中文文献5篇.尚无报道同时具有ABCG2、SLC2A9和SLC22A12 3个基因异常的病例.结论 遗传因素在痛风和高尿酸血症中起着非常重要的作用,对于严重痛风患者应该及时进行基因检测.