目的:研究非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸(CpG-ODN，DSP30)在伴有骨髓浸润的B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell lymphoma，B-NHL)常规染色体检测中的价值。方法:搜集116例初诊时伴有骨髓浸润的B-NHL标本，设实验组应用DSP30联合IL-2刺激细胞增殖并培养72 h后进行染色体制备；对照组常规24 h培养处理并制备染色体，运用R显带技术对患者骨髓标本进行核型分析。结果:116例B-NHL中慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(CLL/SLL)47例，弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)19例，套细胞淋巴瘤(MCL)16例，滤泡细胞淋巴瘤(FL)13例，边缘区淋巴瘤(MZL)8例，伯基特淋巴瘤(BL)7例，淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症(LPL/WM)3例，毛细胞白血病(HCL)2例，富于T/组织细胞的大B细胞淋巴瘤1例；对照组116例行常规染色体检测，18例无分裂相，染色体成功分析中异常检出率为22.45%(22/98)，而经实验组(DSP30+IL-2)刺激的同期患者，无分裂相者减少至10例，异常检出率为59.43%(63/106)；在惰性淋巴瘤中，对照组检出率为16.21%(12/74)，实验组检出率为55.00%(44/80)，在非CLL/SLL的惰性淋巴瘤中，对照组检出率为17.95%(7/39)，实验组为52.50%(21/40)；无论骨髓侵犯比例多少，DSP30+IL-2都能够有效提高染色体异常检出率；实验组染色体异常累及数前5的依次为14、13、11、8和18号染色体，对照组依次为14、13、8、9和1号染色体；实验组检出具有特征性的染色体异常高于对照组。结论:DSP30+IL-2作为刺激剂应用于伴有骨髓浸润的B细胞淋巴瘤，可以明显提高染色体的异常检出率，特别在低比例肿瘤细胞浸润时，能有效减少异常染色体的漏诊率；DSP30+IL-2应用可检出更多不同种类的特异性遗传学改变，可以对淋巴瘤进行更准确的诊断分型，并为临床提供更精准的预后分层信息，也为少见的B-NHL特异性异常的研究提供遗传学证据。

目的:研究未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸（DSP30）和IL-2在慢性淋巴细胞白血病（CLL）常规染色体检测中的价值。方法:DSP30联合IL-2刺激CLL细胞增殖，CLL细胞培养72 h后进行染色体制备，采用R显带法进行核型分析。对85例患者进行FISH检测，与同期核型结果进行比较。结果:89例CLL患者中，无分裂象者5例，84例（94.38%）患者染色体分析成功，51例检测出染色体异常，异常检出率为60.71%（51/84），复杂核型者占52.94%（27/51）。对85例CLL患者进行了FISH检测，FISH探针为D13S25、RB1、P53、ATM、cen12。FISH检测结果显示74例异常，异常检出率为87.06%（74/85），其中复杂核型2例，占2.70%（2/74）。85例进行FISH检测的CLL患者中，50例常规染色体核型分析异常，30例核型正常，5例无分裂象，异常检出率为62.50%（50/80）；其中FISH检测异常而核型正常者25例，核型异常而FISH检测正常者4例，两者结合检测出异常者78例，异常检出率91.76%。FISH检测到的13q-异常率明显高于常规核型分析（69.41%对16.67%， P<0.001），11q-、+12、17p-异常检出率两种方法的差异无统计学意义（ P>0.05）。常规核型分析对复杂异常的检出率（50.98%）高于FISH（2.70%）。另外，根据FISH结果进行预后分层的11例低危和9例中危患者均为复杂核型，根据核型结果被归为高危组。 结论:DSP30联合IL-2可以提高CLL患者常规染色体异常的检出率，对复杂异常核型的检测更为有效。FISH异常检出率高于常规核型分析方法，对缺失片段较小的13q-异常更为敏感，两者结合不仅将染色体异常检出率提高至91.76%，还可对CLL患者进行更为准确的预后分层，为临床提供更多信息。

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,测定双壳贝类样品中9种腹泻性贝类毒素(DSP).方法 样品经100％甲醇提取过滤后,经ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱分离,乙腈-0.01％氨水为流动相,流速为0.2 ml/min,柱温为30℃,采用电喷雾电离和正负离子分段扫描,在多反应监测(MRM)模式下测定游离态的毒素(原多甲藻酸1、原多甲藻酸2、原多甲藻酸3、大环内酯类扇贝毒素2、软海绵酸、鳍藻毒素1、鳍藻毒素2、虾夷扇贝毒素和类虾夷扇贝毒素).当软海绵酸、鳍藻毒素1或鳍藻毒素2任一种或多种毒素呈阳性时,须采用碱水解将酯化的软海绵酸、鳍藻毒素1和鳍藻毒素2转化为游离态形式后,用UPLC-MS/MS测定其水解态毒素含量,外标法定量.结果 9种DSP在3个添加水平的平均回收率为85.9％ ～95.3％,相对标准偏差(RSD)为2.76％～4.18％,检出限(LOD)为4.4～9.9 μg/kg,定量限(LOQ)为14.7～33.0μg/kg.结论 该方法操作简便、灵敏度高,适用于DSP的日常检测.

目的 探讨复方丹参滴丸(DSP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠代谢、生化指标及缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)通路的影响.方法 选择48只6~8周龄的清洁级健康雄性SD大鼠,根据简单随机抽样方法分为对照组(NC组,n=10)和造模组(n=38),其中对照组给予常规饲料喂养,造模组采用高糖高脂饲料喂养,以30 mg/kg的剂量腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ)溶液,制备T2DM大鼠模型.32只成模大鼠以血糖水平分为糖尿病对照组(DM组,n=16)和DSP治疗组(DSP组,n=16),分别灌胃给予等量体积的生理盐水及400 mg·kg-1·d-1的DSP生理盐水混悬液治疗,疗程均为8 w.分别采用AU2700全自动生化仪和自动放射免疫仪测定3组大鼠血清糖脂代谢指标及生化指标水平,采用BNII全自动蛋白分析仪检测血清24 h尿微量白蛋白(24 h UAlb),显微镜下观察肾皮质组织切片的病理变化及进行肾小球细胞外基质(ECM)堆积指数的评估,采用Western印迹方法检测三组大鼠肾组织中HIF-1α及VEGF的表达水平,并比较三组各指标的差异.结果 显微镜下显示,与NC组比较,DM组及DSP组大鼠的肾小球基底膜及系膜区呈现明显肿胀、扩张,DSP组大鼠的肾小球病变程度较DM组有所减轻;DM组及DSP组大鼠的肾小球ECM堆积指数积分高于NC组,而DSP组低于DM组(P<0.05);三组大鼠血清中糖脂代谢指标水平整体比较差异均有统计学意义(P<0.05);与NC组比较,DM组及DSP组大鼠血清中空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,而HDL-C水平降低(P<0.05);除高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)外,DSP组其他指标水平均低于DM组(P<0.05);DM组与DSP组大鼠血清肌肝(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h UAlb水平及肾组织中HIF-1α和VEGF的相对含量均明显高于NC组,而DSP组明显低于DM组(P<0.05).结论 DSP可有效改善T2DM大鼠的糖脂代谢紊乱,延缓肾脏损害进程,其机制可能与HIF-1α/VEGF通路的调控作用有关.

目的:通过过表达整合素-α5(integrin-α5,ITGA5)技术促进牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)在硬介质表面的迁移及向牙本质分化,为牙组织工程提供方法借鉴.方法:原代分离培养小鼠DPSCs,流式细胞仪检测间充质细胞表面标记物;利用慢病毒质粒侵染ITGA5基因到DPSCs中,反转录聚合酶链式反应(reverse tran-scription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测ITGA5的mRNA表达水平;在弹性模量为(75~100)kPa的高硬度琼脂糖介质表面接种DPSCs,划痕实验检测细胞迁移能力,培养2D克隆球观察细胞团整体迁延能力;茜素红染色检测矿化结节形成情况;Western Blot方法检测牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein 1,DMPl)、牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)、牙本质磷蛋白(dentin phosphoprotein,DPP)的蛋白表达情况.结果:间充质细胞表面标记物鉴定结果表明所培养细胞为DPSCs;基因转染后ITGA5可在DPSCs中稳定表达达至少30 d;过表达的DPSCs细胞迁移能力和细胞团整体迁延能力均明显加强;同时形成更多、更大的矿化结节,并明显高表达DMPl、DSP和DPP蛋白.结论:过表达ITGA5能够促进DPSCs在硬介质表面的迁移及向牙本质的分化能力,可为牙组织工程提供新的方法借鉴.

目的:应用香烟尘雾颗粒(DSP)滴鼻的方法构建小鼠慢性阻塞性肺病(COPD)肺功能损伤模型,并评价该方法复制COPD模型的效果.方法:将BALB/c小鼠随机分为正常对照组(control)组、LPS 100 mg/L组、DSP 0.75 mL/L组、DSP 1.5 mL/L组和DSP 3 mL/L组,滴鼻造模,连续30 d.FlexiVent肺功能检测仪检测各组小鼠气道阻力(Rrs)、气道弹性阻力(Ers)、呼吸系统动态顺应性(Crs)、准静态弹性(Est)、准静态顺应性(Cst)、主气道阻力(P-3/8 Rn)、组织衰减(P-3/8G)和组织弹性(P-3/8H);Myograph法检测各组小鼠主支气管环对乙酰甲胆碱(Mach)诱发的气道阻力增加的影响;收集各组小鼠气管、肺组织,进行HE、Masson和间苯二酚品红染色.结果:DSP连续滴鼻30 d可引起小鼠Rrs、Ers、Est、P-3/8Rn增加(P＜0.01),Crs、Cst、P-3/8G、P-3/8H降低(P＜0.01);DSP可使Mach诱发的小鼠气管收缩量效曲线左移,增加气道对Mach的敏感性,且能显著增加Mach的最大收缩气道的效应(P＜0.01);DSP可引起小鼠气道上皮下显著纤维化,胶原蛋白在气道基底膜下网状板沉积,网状板增厚,肺部支气管管腔严重变形,肺部可见大量炎症细胞浸润,肺泡壁肌纤维和胶原纤维显著增加.结论:香烟尘雾颗粒滴鼻30 d的方法能够较好地建立同人类COPD疾病特点一致的小鼠模型.

目的:评估咪达唑仑术前喷鼻对儿童在七氟烷诱导麻醉期间癫痫样放电的影响.方法:将择期行全身麻醉下口腔颌面外科手术的86例患者(ASA分级Ⅰ～Ⅱ级,年龄0.5～6岁),随机分为咪达唑仑组和生理盐水组2组.患儿在等候区予以术前药物喷鼻,入室后以相同步骤行8％七氟烷面罩诱导,持续监测麻醉诱导期间脑电图改变.采用SPSS 25.0软件包对数据进行统计学分析.结果:咪达唑仑组23例(53％,包括DSP30％、PSR37％、PED9％)、生理盐水组29例(67％,包括DSP37％、PSR35％、PED19％)患儿发生癫痫样脑电图改变,2组癫痫样脑电图发生率无统计学差异(P=0.186).咪达唑仑组意识丧失时间早于生理盐水组,但差异无显著性[(41.6±11.O)s:(44.1±16.1)s,P=0.409].结论:0.4 mg/kg咪达唑仑术前喷鼻并不能减少儿童在七氟烷诱导期间的癫痫样脑电图发生.

遗传性牙本质发育不全Ⅱ型是一种常见的常染色体显性遗传性牙本质缺陷病,牙本质涎磷蛋白基因(DSPP)的突变已被证明是其致病原因.现今在DSPP编码区已发现了超过30个突变位点,可分为信号肽编码区突变、牙本质涎蛋白基因(DSP)编码区突变和牙本质磷蛋白基因(DPP)编码区突变等3组,本文对以上各组突变位点及突变机制进行综述.

目的 分析伴有t(18;22)(q21;q11)慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)的临床及实验室特征.方法 应用DSP30+IL-2刺激剂对慢淋细胞进行72 h刺激培养,采用常规方法制备染色体并利用R显带技术进行核型分析,进一步通过荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)验证3例患者BCL-2基因重排,同时对例1患者进行全基因组测序分析,随访患者化疗疗效及生存情况.结果 3例患者均伴有t(18;22)(q21;q11)异常核型,FISH检测均为BCL-2重排,全基因组测序证实例1患者涉及BCL-2与IGL易位.结论 t(18;22)具有与t(14;18)不同的分子结构,且该异常核型发生率低,多见于CLL;伴有该异常核型的CLL可能具有难治性和易复发等特点.

目的 比较SLIPA喉罩与气管插管全麻对腹腔镜胆囊切除手术患者循环和呼吸参数的变化及并发症的情况,探讨相应的护理方法.方法 60例择期腹腔镜胆囊切除手术患者随机分为SLIPA喉罩组和气管插管组,记录两组患者插管前后心率、血压、每分通气量(MV)、潮气量(TV)、气道峰压(Ppeak)和呼吸末二氧化碳分压(PETCO2);观察术中反流误吸,术毕呛咳,术后咽痛、声音嘶哑、恶心、呕吐、肺部感染等发生率.结果 两组患者正压通气15 min和气腹15 min时MV、TV、Ppeak、PETCO2均有明显改变,SLIPA喉罩组术后发症发生率低于气管插管组.结论 SLIPA喉罩通气用于开腹腔镜胆囊切除手术优于气管插管,易于维持血流动力学稳定,并发症低.喉罩组患者护理侧重于术前护理评估及防止术中移位,气管插管患者护理侧重气管护理及预防感染等并发症的发生.