目的:测试基于患者解剖结构三维剂量重建进行容积调强弧形治疗(VMAT)剂量验证系统(3DVH)，并探索其临床应用。方法:对ArcCheck行阵列校准后按10 cm×10 cm射野、源轴距100 cm、投照量200 MU标定其绝对量，标定时将FC65-G置于模体中心测量。根据实测剂量、3DVH重建中心点及百分深度剂量与对应计划值间差异，调整绝对量标定值或ArcCheck CT密度值，使上述差异最小。选择肺癌、宫颈癌VMAT病例各10例，使用TrueBeam投照并用ArcCheck、FC65-G测量，由验证后的3DVH重建各测试例三维剂量并与计划值及实测值比对。结果:ArcCheck不同阵列校准文件对ArcCheck二维面剂量测量及3DVH三维剂量重建影响不同。使用自行阵列校准文件及249.96 cGy为标定值时得到最优结果。所有测试例重建与原计划剂量相比靶区D mean、D 95%偏差<±4.2%，部分危及器官差异较大；点剂量差异平均值为负，重建值更接近实测值。各器官三维γ通过率中部分病例靶区通过率较低，50%处方剂量包绕区域稍高，其他器官大都较高。 结论:使用本研究方法能准确完成3DVH模型建立和测试，其能提供详实直观的信息用于剂量验证。

随着疾病的进展，2型糖尿病的治疗往往需要加用基础胰岛素。尽管临床指南建议"不应推迟基础胰岛素的强化治疗"，但医护人员和患者在决定起始胰岛素治疗时，常常表现出"犹豫不决"。一周一次的基础胰岛素，用药频率更低，可能有助于改善糖尿病管理以及患者的生活质量。基础胰岛素周制剂(weekly basal insulin fc，BIF)是将一种新的胰岛素单链变体与人lgG-Fc结构域融合结合而成，每周皮下注射一次，用于1型或2型糖尿病的治疗。

目的:应用扩散MRI（dMRI）的扩散张量成像（DTI）模型和基于fixel分析（FBA）的方法探讨轻中度孤立性侧脑室扩张（IVM）胎儿脑白质纤维结构的变化情况。方法:该研究为病例对照研究，前瞻性纳入2022年8月至2023年8月在山东第一医科大学附属省立医院就诊的轻中度IVM胎儿20例，胎龄为24~36（29.9±3.6）周，为IVM组。对照组纳入22例正常胎儿，来自中国胎儿脑dMRI图谱数据，胎龄为24~36（30.2±3.7）周。所有胎儿均采集dMRI数据，采用DTI模型获得胼胝体膝部、胼胝体压部、小脑中脚，双侧的皮质脊髓束、下纵束、下额枕束、丘脑前辐射7种主要纤维束的各向异性分数（FA）、平均扩散率、轴向扩散率和径向扩散率。采用FBA方法获得全脑纤维密度（FD）、纤维横截面积（FC）和纤维密度与横截面积（FDC）。IVM组与对照组间各纤维束DTI参数的比较采用独立样本 t检验或Mann-Whitney U检验。2组间FBA参数的比较使用协方差分析，使用MRtrix3软件包显示有差异的脑区。 结果:IVM组与对照组胎儿下纵束的FA值分别为0.142±0.012和0.133±0.015，差异有统计学意义（ t=2.21， P=0.033），其余纤维束DTI参数差异均无统计学意义（ P>0.05）。全脑FBA结果显示，与对照组比较，IVM组胎儿FD和FC改变的区域主要分布在胼胝体压部、穹隆、矢状层，其中FD降低而FC升高，FDC在皮质脊髓束降低。 结论:轻中度IVM胎儿存在脑白质纤维微观结构的改变，以位于侧脑室体部、三角区及颞角周围的白质纤维束为主。

糖基化修饰是免疫球蛋白G（IgG）结构和功能的一部分，唾液酸位于IgG N-糖链的最末端，通过调节IgG与可结晶片段γ受体及补体的结合而调控IgG抗炎和促炎活性，与自身免疫疾病的发生发展及转归密切相关，在疾病诊断、监测及治疗领域都显示出了巨大潜能，有望成为自身免疫疾病新型标志物和治疗靶点。

目的:通过对抗黑色素瘤分化相关基因5（MDA5）抗体阳性和抗Jo-1抗体阳性的肌炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）进行基因表达谱的分析，以阐明特发性炎性肌病亚型的病理生理学机制。方法:①用Illumina HT-12 v4表达谱芯片对12例抗MDA5抗体阳性和16例抗Jo-1抗体阳性的肌炎患者及43名健康对照者的PBMCs进行基因表达谱筛查和分析。应用非配对 t检验，经Benjamini-Hochberg校正，选取基因表达信号倍数变化的绝对值≥2且校正 P<0.05为差异表达基因。将差异基因集进行基因本体论数据库（GO）功能富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，以 P<0.05作为显著性富集的阈值。②用实时荧光聚合酶链反应（real time-PCR）对差异表达基因进行验证，采用Kolmogorov-Smirnov检验对连续型变量进行正态性检验，符合正态分布且方差齐性，采用单因素方差分析，不符合正态分布则用Kruskal-Wallis检验， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:①分析抗MDA5抗体和抗Jo-1抗体阳性患者PBMCs的基因表达谱，发现2种肌炎亚型患者PBMCs的基因表达存在明显差异。抗MDA5抗体阳性患者特异性表达上调的差异基因为407个，GO功能富集分析主要富集于固有免疫应答（ P<0.001）、病毒应答（ P<0.001）和干扰素应答（ P<0.001）等生物过程，KEGG通路富集分析主要富集于病毒感染相关通路（ P<0.001）、视黄酸诱导基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）样受体通路（ P<0.001）和Toll样受体通路（ P=0.002）等。抗MDA5抗体阳性组中特异性下调的259个差异基因，GO功能富集分析主要富集于免疫应答（ P=0.006）、TGF-β受体信号通路（ P=0.010）和自然杀伤细胞介导的免疫（ P=0.015）等生物过程。抗Jo-1抗体阳性患者特异性表达上调的差异基因有162个，GO功能富集分析主要富集于核小体组装（ P<0.001）、细胞增长的负调控（ P=0.001）、凋亡负调控（ P=0.004）和黏膜固有免疫（ P=0.012）等生物过程，KEGG通路富集分析主要富集于代谢相关信号通路（ P<0.001）和免疫相关通路（ P<0.001）等。②Real time-PCR证实与健康对照组相比RIG-Ⅰ样受体通路中的干扰素诱导的解旋酶C结构域1（IFIH1）（ P=0.037）、干扰素刺激基因15（ P<0.001）和DEAD（Asp-Glu-Ala-Asp）盒多肽58（DDX58）（ P=0.032）以及人单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）（ P<0.001）、人单核细胞趋化蛋白2（MCP-2）（ P<0.001）和转录因子人碱性亮氨酸拉链转录因子激活蛋白1家族样转录因子2（BATF2）（ P<0.001）、炎症信号通路相关的髓样分化因子88（MYD88）（ P<0.001）在抗MDA5抗体阳性肌炎患者的PBMCs呈高表达。 结论:抗MDA5抗体阳性患者PBMCs基因表达谱特征提示其发病机制与固有免疫应答、病毒应答和干扰素应答等生物过程密切相关。

目的:探讨人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2，HER2)蛋白的哪种结构域更适合激发赫赛汀抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)效应。方法:真核表达五种包含HER2胞外段不同结构域的蛋白，即HER2-Fc、HER2-His、T23-561-Fc、T276-T652-Fc、T276-T652-His。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)对蛋白相对分子质量及纯度进行检测。酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测这些蛋白与赫赛汀的结合能力。自然杀伤(natural killer，NK)细胞活化实验比较这五种蛋白增强赫塞汀ADCC效应的能力差异。结果:成功获得纯度较高的蛋白。ELISA结果显示HER2-Fc，HER2-His和T276-T652-His都表现出较好的结合能力，T276-T652-Fc结合较差，T23-561-Fc则完全不结合。此外，HER2-Fc、HER2-His、T276-T652-Fc、T276-T652-His、T23-561-Fc的EC50值分别为0.16、0.17、0.16、0.15、1.12。NK细胞活化实验结果显示HER2-Fc和T276-T652-His能显著增强赫赛汀刺激NK细胞脱颗粒和分泌干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)的效应，HER2-Fc组CD107a表达量最高可达61.50%，IFN-γ的分泌可达38.10%。T276-T652-His组CD107a的表达最高可达63.00%，IFN-γ的分泌可达43.10%，与HER2-Fc作用相当。该效应呈浓度梯度依赖性，蛋白低浓度0.5 μg/mL时，赫赛汀的ADCC效应降低，且组间差异有统计学意义( t值分别为4.21、4.24、6.51、3.17、3.44、3.05、3.34、2.82、8.55、11.52、4.50、2.96、5.58、6.03、3.77、4.42， P值均<0.05)。 结论:验证了T276-T652-His具有增强赫赛汀ADCC功能的作用，且与HER2-Fc相当，为后续将HER2蛋白用于肿瘤免疫治疗研究打下了基础。

目的:探索原核表达系统生产的T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白-1-Fc(Tim-1-Fc)融合蛋白能否为Tim-1蛋白模拟品。方法:大肠杆菌合成Tim-1-Fc融合蛋白，以体外蛋白质结合实验测定其能否与Tim-4蛋白结合。通过荧光激活的细胞分选(FACS)检测磷脂酰丝氨酸(PS)与膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)间的结合情况，间接探明该蛋白与PS的结合。结果:体外蛋白相互作用实验证实Tim-1-Fc融合蛋白可以结合Tim-4蛋白。FACS数据分析表明无论有无过氧化氢诱导，Tim-1-Fc组凋亡细胞FITC信号平均强度(231.16±8.27、263.45±7.91)均高于对照组(190.80±5.09、203.29±10.89， t＝－7.200、7.739， P<0.01)，差异有统计学意义。 结论:原核表达版本的Tim-1-Fc融合蛋白可能具备在体外模拟Tim-1蛋白的作用。

对血清阴性RA的研究进展进行阐述，通过查阅文献对其病因、编码基因、新型生物标记物、发病机制等多方面进行补充。多个编码基因例如含LEM结构域的蛋白2基因、FC受体样3基因、信号转导及转录活化因子3（STAT3）基因、肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3（TNFAIP3）基因、分泌型磷酸蛋白1（SPP1）基因、抗原呈递凝集素样受体复合物（APLEC）基因、树突状细胞免疫受体（DCIR）基因被发现可能与血清阴性RA的发生有关，也存在一些可降低其发病率的基因，多个新型生物标志物如抗正五聚蛋白3抗体和抗双特异性磷酸酶11抗体联合检测，SR-A，同型半胱氨酸化α1抗胰蛋白酶（Hcy-α1AT）被发现有助于提高血清阴性RA检出率；基因通路的研究有助于药物研发。这些发现都为疾病的早期诊断，识别以及治疗提供新的思路。

目的:探讨SARS-CoV-2感染者血浆样本抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)及其与抗体滴度和中和活性的相关性。方法:采用表达SARS-CoV-2刺突(spike, S)蛋白的HEK293T细胞为靶细胞，表达FcγRⅢa-V158的Jurkat细胞为效应细胞，建立一种简便的抗体ADCC检测方法。对效应细胞和靶细胞比例进行优化后，分析38份血浆样本的ADCC活性进行。血浆特异性抗体采用捕获ELISA法检测，即用抗标签抗体捕获C-端带标签的重组SARS-CoV-2 S蛋白。血浆抗体中和活性采用假病毒中和试验测定。统计学分析使用Mann-Whitney U检验进行组间比较，非参数Spearman相关检验计算相关性。 结果:特异性抗体检测结果显示，38份血浆样本S、S1和受体结合结构域(receptor-binding domain，RBD)抗体阳转率均为97.4%(37/38)；动态观察抗体滴度随康复时间的变化趋势，结果显示抗体滴度在3~4周达到峰值。抗体滴度>1∶320的血浆样本的中和活性高于抗体滴度<1∶320的血浆样本[IC 50值：749.6(396.5~3 772.0) vs 81.4(11.6~228.4)， P<0.01]。对同样的样本进行抗体ADCC活性检测，86.8%(33/38)的血浆样本可检测出ADCC活性，其随康复时间的变化趋势与特异性抗体滴度是一致的，同样在3~4周达到峰值。进一步分析抗体ADCC活性与抗体滴度和中和活性相关性，结果显示均呈正相关，针对S、S1和RBD三个不同靶向区域的抗体，其相关系数分别为0.686、0.535、0.471( P均<0.01)，与中和活性的相关系数为0.573( P<0.01)。 结论:本研究提供了一种简便的抗体ADCC检测方法，检测结果表明SARS-CoV-2可诱导特异性血浆抗体ADCC活性，且ADCC活性可能来自非中和抗体。同时，ADCC活性在3~4周达到峰值，这些发现为临床血浆救治提供了参考。

目的:分析早产和足月儿母乳来源外泌体（breast milk extracellular vesicles，BM-EV）的蛋白质组学差异。方法:收集2019年在南京医科大学附属妇产医院出生的早产儿和足月儿母乳各3例，采用超速离心法提取外泌体。初步鉴定外泌体特征后，采用液相色谱-串联质谱法（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）定量分析，筛选出早产儿BM-EV中显著上调的差异蛋白质（差异倍数≥1.5且 P<0.05），并进行GO和KEGG功能预测及相关信号通路分析。采用Mann-Whitney U检验或Fisher精确概率法进行组间比较。以Pearson相关分析描述样品间蛋白质定量值的相关性。使用 t检验比较2组样本间蛋白质丰度的差异，并对结果进行多重校正。应用超几何分布检验，筛选出差异蛋白质中显著富集的GO和KEGG通路条目。 结果:（1）早产和足月组初产母亲分别为3例和1例。足月儿和早产儿BM-EV存在标记性蛋白分子分化簇9、分化簇81和热休克蛋白70。（2）6个样本组间可比性较好，组内重复性较高，样品间蛋白定量值的相关性最高达0.99。早产和足月儿样本的变异系数分别为11.21%和19.72%，且早产样本的变异系数比较集中。（3）鉴定得到945种蛋白质。早产与足月儿BM-EV之间存在156种差异蛋白质，其中在早产儿BM-EV中有83种上调。早产儿BM-EV中丰度值前3位的蛋白质分别为补体C4a、脂肪酸合成酶和硬化蛋白结构域蛋白-1。（4）GO功能预测中富集度最高的生物过程或细胞成分主要集中在血红蛋白和糖原的合成，参与免疫突触的构成，Fc γ受体信号通路介导的吞噬作用等。KEGG信号通路相关性最高的通路为核糖体相关通路、补体和凝血级联、中性粒细胞胞外陷阱形成和Fc γ受体介导的吞噬作用等。结论:早产儿BM-EV中显著上调的差异蛋白质可能通过参与调节早产儿的免疫、胃肠道功能和能量代谢过程，从而发挥保护作用。