目的:探讨胰岛淀粉样多肽（IAPP）对阿尔茨海默病（AD）小鼠脑组织中长链非编码RNA（LncRNA）和信使RNA（mRNA）表达谱的影响。方法:选取7月龄雄性APP/PS1转基因AD模型小鼠10只，体质量20～30 g。将AD模型小鼠按数字表法随机分为IAPP干预组和对照组，每组5只。IAPP干预组小鼠腹腔内注射0.5 μmol/L的IAPP（200 μg/kg），每日1次。对照组小鼠腹腔注射相同剂量的磷酸盐缓冲液。两组小鼠干预时间均为10周。干预完成后，颈椎脱位处死小鼠，开颅剥离完整脑组织提取总RNA。应用基因芯片技术获得2组小鼠脑组织LncRNA和mRNA表达谱，筛选出差异表达的LncRNA和mRNA。在差异表达的LncRNA和mRNA中随机选取6个LncRNA，采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）验证基因芯片结果的可靠性。将筛选出的差异表达的mRNA与基因本体论（GO）数据库的各条目比对，从分子功能、生物过程和细胞成分3个领域行GO富集分析；使用京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库行信号通路富集分析。结果:实验过程中小鼠死亡4只，每组2只。IAPP干预组与对照组比较，显著差异表达的LncRNA共有902个，其中显著上调238个、显著下调664个；显著差异表达的mRNA共555个，其中显著上调236个、显著下调319个。qRT-PCR检测验证LncRNA的表达情况，与对照组比较，IAPP干预组AD小鼠脑组织中AK034056、Spock3表达上调，Map3k8、rgs20、Rint、Ppp2r1b表达下调，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。qRT-PCR检测结果与芯片结果相符。GO富集分析：555个差异表达的mRNA，富集得到2 224个GO条目，其中显著上调的差异表达mRNA具有蛋白质结合、细胞周期等分子功能，与催化复合物、蛋白质复合物等细胞组分相关，参与了细胞代谢、高分子代谢等生物过程；显著下调的差异表达mRNA具有G蛋白偶联受体活性、跨膜信号受体活性等相关分子功能，与细胞黏附复合物、整合素复合物等细胞组分相关，参与G蛋白偶联受体信号通路、生物过程的调节等生物学过程。KEGG通路富集分析：555个差异表达的mRNA，富集得到62个通路，其中显著上调的差异表达mRNA富集评分较高的通路为神经退行性变的途径、阿尔茨海默病通路、氧化磷酸化通路、GABA能突触通路等，显著下调的差异表达mRNA富集评分较高的通路为钙信号通路、趋化因子信号通路、磷酸肌醇代谢通路、神经活性配体-受体相互作用通路、白细胞介素-17信号通路等。 结论:IAPP干预使AD小鼠脑组织 LncRNA、mRNA表达谱发生显著变化。差异表达的mRNA分别参与多种不同的生物学过程，差异表达的LncRNA可能通过调控相关mRNA的表达，发挥其生物学功能。

目的:探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)抑制TLR4/NF-κB通路减少蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元凋亡的作用及其机制。方法:采用随机分组的方式将SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组 n＝24，Sham 2组 n＝21)、SAH模型组(SAH组 n＝24，SAH 2组 n＝21)及SAH模型+G1激动剂组(简称G1组， n＝24)。通过颈内动脉穿刺法进行SAH模型的构建。采用Sugawara评分评价大鼠SAH的严重性。SAH后24 h采用Garcia评分和平衡木试验评分评定神经功能缺损程度。成功建模24 h后，称重脑组织湿重和干重，计算脑组织含水率。绘制伊文思蓝标准曲线，评估血脑屏障通透性。采用免疫荧光染色观察各组小胶质细胞活化情况。采用蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组GPR30、TLR4及NF-κB蛋白的表达情况；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组外周血TNF-α、IL-1β和IL-6促炎细胞因子的表达情况；采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。 结果:与SAH组相比，G1组Sugawara评分降低、平衡木试验评分和Garcia评分升高、脑含水率和伊文思蓝的渗出率均降低(均 P<0.05)。随着时间的变化，Sham 2组GPR30表达量无明显变化( P>0.05)，建模后6、12、24、48和72 h，SAH 2组的GPR30表达量均较Sham 2组高，SAH 2组建模24 h的GPR30表达量最高，而后下降(均 P<0.05)。Sham组、SAH组与G1组三组间比较，GPR30、TLR4和NF-κB表达量的差异均有统计学意义(均 P<0.05)，其中G1组较SAH组TLR4和NF-κB表达量下降(均 P<0.05)。免疫荧光染色结果显示，SAH组小胶质细胞数目较Sham组增多，而G1组较SAH组的小胶质细胞减少。ELISA结果显示，SAH组、Sham组与G1组的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达差异均有统计学意义(均 P<0.05)，其中，与SAH组比较，G1组的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达均降低(均 P<0.05)。TUNEL法染色结果显示，SAH组的TUNEL阳性细胞数较Sham组增加，而G1组较SAH组的TUNEL阳性细胞数减少。 结论:GPR30活化后可能通过抑制TLR4/NF-κB通路减少SAH后的神经元凋亡，改善SAH后早期脑损伤，保护神经功能。

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是临床常见的慢性肝病，其中10%～30%的患者为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)，部分患者可进展为肝硬化，甚至肝细胞癌。近年来，肠道菌群与胆汁酸代谢在NAFLD发病过程中的作用越来越受到重视。NAFLD患者存在肠道菌群紊乱；通过外源途径补充益生菌、益生元纠正紊乱的肠道菌群，可在一定程度上治疗NAFLD。同时，NAFLD患者伴有不同程度的胆汁酸代谢异常；胆汁酸受体如法尼醇受体(farnesoid X receptor，FXR)和G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptor，TGR)5，是开发治疗NAFLD新药的重要靶点。此外，肠道菌群和胆汁酸代谢相互作用、互为因果，共同影响NAFLD的发生、发展。

目的:评价G蛋白偶联受体30(GPR30)在17β雌二醇减轻氯胺酮致发育期大鼠远期认知功能障碍中的作用。方法:7日龄健康雄性SD大鼠30只，体重11~18 g，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：对照组(C组)、氯胺酮组(K组)、17β雌二醇+氯胺酮组(EK组)、GPR30激动剂G1+氯胺酮组(G1K组)和GPR30抑制剂G15+17β雌二醇+氯胺酮组(G15EK组)。K组腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，EK组皮下注射17β雌二醇600 μg/kg，腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，G1K组皮下注射G1 200 μg/kg和腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，G15EK组皮下注射G15 300 μg/kg和17β雌二醇600 μg/kg以及腹腔注射氯胺酮75 mg/kg，C组腹腔注射等容量生理盐水。每隔24 h注射1次，连续注射3 d。所有大鼠饲养至60日龄，采用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能。于水迷宫实验结束后处死大鼠取海马，采用ELISA法检测海马乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱(ACh)的含量。 结果:与C组比较，K组大鼠第3~5天逃避潜伏期延长，穿越平台次数及靶象限停留时间百分比减少，海马AChE含量增加，ACh含量减少( P<0.05)；与K组比较，EK组和G1K组大鼠第3~5天逃避潜伏期缩短，穿越平台次数及靶象限停留时间百分比增加，海马AChE含量减少，ACh含量增加( P<0.05)；与EK组和G1K组比较，G15EK组大鼠第3~5天逃避潜伏期延长，穿越平台次数及靶象限停留时间百分比减少，海马AChE含量增加，ACh含量减少( P<0.05)。 结论:GPR30参与了17β雌二醇减轻氯胺酮致发育期大鼠远期认知功能障碍的过程，与调节海马AChE和ACh含量有关。

目的:探究下调G蛋白偶联受体C家族5A（GPRC5A）表达对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞（GFs）炎症反应的影响并探索其机制，为深入探讨G蛋白偶联受体（GPCR）在牙周炎中的调控作用及其机制奠定基础。方法:于2022年12月至2023年2月在山东大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科、牙周科收集3名牙周健康者（牙周健康组）和3例牙周炎患者（牙周炎组）的牙龈组织，采用免疫组化染色检测两组牙龈组织中GPRC5A的表达。收集健康牙龈组织提取GFs，健康牙龈组织来自2022年12月至2023年2月在山东大学齐鲁医学院口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科招募的6例16~20岁需拔除埋伏阻生齿的患者。应用胶原酶消化法提取并培养GFs，设置30、50和80 μmol/L浓度转染GPRC5A小干扰RNA（siGPRC5A）的实验组和阴性对照小干扰RNA（siNC），利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测siGPRC5A的沉默效率；设置阴性对照、脂多糖、siGPRC5A+脂多糖和siGPRC5A 4个组，通过RT-qPCR和蛋白质印迹法分别验证应用siGPRC5A对1 mg/L脂多糖诱导的GFs炎症状态下GPRC5A在基因和蛋白水平的表达；下调GPRC5A表达后，RT-qPCR检测脂多糖诱导的GFs白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）基因的表达；通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色检测核因子-κB（NF-κB）信号通路的激活情况。结果:免疫组化结果显示，牙周炎组牙龈组织中GPRC5A表达（0.132±0.006）显著高于牙周健康组（0.036±0.019）（ t=8.24， P=0.001）。RT-qPCR结果显示，在脂多糖作用2、6、12和24 h时，脂多糖组GPRC5A基因水平表达量（分别为0.026±0.002、0.042±0.005、0.004±0.000、0.016±0.000）均分别显著高于阴性对照组（分别为0.004±0.000、0.004±0.000、0.002±0.000、0.007±0.000）（均 P<0.001），且6 h时达峰值。50 μmol/L siGPRC5A（31.16±3.29）与siNC组（100.00±4.88）相比能有效沉默GFs中GPRC5A的表达（ F=297.98， P<0.001）。RT-qPCR和蛋白质印迹法结果显示，脂多糖组GPRC5A在基因和蛋白水平的表达（分别为1.30±0.10、1.43±0.03）均显著高于阴性对照组（分别为1.00±0.01、1.00±0.00）（均 P<0.001），siGPRC5A组（分别为0.27±0.03、0.71±0.00）均显著低于阴性对照组（分别为1.00±0.01、1.00±0.00）（均 P<0.001），siGPRC5A+脂多糖组（分别为0.39±0.03、1.06±0.16）均显著低于脂多糖组（分别为1.30±0.10、1.43±0.03）（均 P<0.001）。RT-qPCR结果显示，脂多糖组IL-8、IL-1β、IL-6、TNF-α、PTGS2基因表达水平均显著高于阴性对照组，siGPRC5A+脂多糖组均显著低于脂多糖组（均 P<0.001）。蛋白质印迹法结果表明，脂多糖组p65和IκBα蛋白磷酸化水平均显著高于阴性对照组，而siGPRC5A+脂多糖组均显著低于脂多糖组（均 P<0.01）。免疫荧光染色结果显示，对照组NF-κB p65集中表达于胞质，在脂多糖刺激下p65部分向核内转位，应用siGPRC5A后能一定程度上抑制脂多糖诱导的p65核内转位。 结论:GPRC5A在GFs炎症状态下表达增加，下调GPRC5A的表达能抑制脂多糖诱导的炎症反应，且GPRC5A可通过NF-κB信号通路发挥炎症调控的作用。

目的:分析壬基酚对人结肠癌SW480细胞活性及跨膜G蛋白偶联雌激素膜受体30（GPR30）表达的影响。方法:采用实验研究方法。通过体外培养人结肠癌SW480细胞，采用细胞增殖、周期及凋亡检测以及基因和蛋白检测实验，分析壬基酚影响人结肠癌SW480细胞增殖、细胞周期、凋亡以及GPR30表达的情况。细胞分组：SW480细胞加入培养基设为对照组，加入培养基+1×10 ?8 mol/L雌二醇设为雌二醇组，加入培养基+1×10 -8 mol/L壬基酚设为壬基酚组，加入培养基+1×10 -8 mol/L壬基酚+1×10 -7 mol/L GPR30特异性拮抗剂G15设为壬基酚+G15组。观察指标：（1）4组人结肠癌SW480细胞增殖指数。（2）4组人结肠癌SW480细胞的周期占比。（3）4组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数。（4）4组人结肠癌SW480细胞GPR30信使RNA（mRNA）表达情况。（5）4组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白表达情况。正态分布的计量资料以 x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用最小显著差异法检验。 结果:（1）4组人结肠癌SW480细胞增殖指数。细胞增殖实验结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的增殖指数分别为100.00±0.00、89.19±4.86、148.96±6.04、120.40±3.39，4组比较，差异有统计学意义（ F=21.45， P<0.05）；壬基酚组与对照组比较，差异有统计学意义（ P<0.05）；雌二醇组、壬基酚+G15组分别与对照组比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。（2）4组人结肠癌SW480细胞的周期占比。细胞周期实验结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的S期细胞占比分别为39.96%±2.02%、36.67%±0.62%、43.85%±1.02%、38.29%±1.42%，4组比较，差异有统计学意义（ F=10.08， P<0.05）；雌二醇组、壬基酚组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；壬基酚+G15组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（3）4组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数。细胞凋亡实验结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数分别为1.67±0.18、4.80±0.31、0.75±0.11、2.20±0.19，4组比较，差异有统计学意义（ F=136.79， P<0.05）；雌二醇组、壬基酚组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；壬基酚+G15组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（4）4组人结肠癌SW480细胞GPR30 mRNA表达情况。实时荧光定量聚合酶链式反应检测结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞GPR30 mRNA相对表达率分别为1.00±0.00、0.86±0.05、1.89±0.27、0.64±0.12，4组比较，差异有统计学意义（ F=26.61， P<0.05）；壬基酚组、壬基酚+G15组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；雌二醇组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（5）4组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白表达情况。Western blot检测结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白相对表达率分别为1.83±0.16、1.68±0.15、3.10±0.30、1.26±0.11，4组比较，差异有统计学意义（ F=34.05， P<0.05）；壬基酚组、壬基酚+G15组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；雌二醇组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:低剂量壬基酚可增加人结肠癌SW480细胞增殖指数与S期细胞占比，降低细胞凋亡指数，并促进GPR30 mRNA和蛋白表达。

女性生殖系统包括子宫、卵巢及输卵管等多种组织,且会伴随年龄的不断增长,经历发育、成熟及衰退等一系列的演变过程.生殖系统疾病已经成为目前严重威胁女性健康的重要病因之一.有研究[1]表明,基因、生长因子等均能够参与生殖疾病的发生发展过程.

目的 探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)通过Nrf2/ARE信号通路抑制白细胞介素1β(IL-1β)诱导的大鼠椎间盘髓核细胞的凋亡、炎症反应和氧化应激.方法 使用IL-1β处理大鼠椎间盘髓核细胞复制体外椎间盘退变模型,将椎间盘髓核细胞分为空白对照(Control)组、IL-1β组、IL-1β+过表达GPR30阴性对照质粒(oe-NC)组、IL-1β+过表达GPR3 0质粒(oe-GPR30)组、IL-1β+oe-GPR30+干扰Nrf2表达阴性对照质粒(si-NC)组、IL-1β+oe-GPR30+干扰Nrf2表达质粒(si-Nrf2)组,IL-1β的处理浓度为10 ng/mL.实时荧光定量聚合酶链反应检测GPR30 mRNA表达;Western boltting检测GPR30、抗重组与合成蛋白(Nrf2)和抗醌NADH脱氢酶(NQO1)和抗血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6水平;使用ELISA法检测活性氧(ROS)、分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,比色法检测丙二醛(MDA)水平.结果 IL-1β组髓核细胞GRP30 mRNA、蛋白相对表达量较Control组降低(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30组较IL-1β+oe-NC组升高(P＜0.05).IL-1β组髓核细胞核中Nrf2蛋白相对表达量较Control组升高(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30组较IL-1β+oe-NC组升高(P＜0.05).IL-1β组Nrf2、HO-1 及NQO1蛋白相对表达量较Control组降低(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30组较IL-1β+oe-NC组升高(P＜0.05).IL-1β组髓核细胞Nrf2蛋白相对表达量较Control组降低(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30组较IL-1β+oe-NC组升高(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30+si-Nrf2组较IL-1β+oe-GPR30+si-NC组降低(P＜0.05).IL-1β组髓核细胞凋亡率较Control组升高(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30组较IL-1β+oe-NC组降低(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30+si-Nrf2组较IL-1β+oe-GPR30+si-NC组升高(P＜0.05).IL-1β组TNF-α、IL-6水平较Control组升高(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30 组较 IL-1β+oe-NC 组降低(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30+si-Nrf2 组较 IL-1β+oe-GPR30+si-NC组升高(P＜0.05).IL-1β组ROS、MDA水平较Control组升高(P＜0.05),SOD水平较Control 组降低(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30 组 ROS、MDA 水平较 IL-1β+oe-NC 组降低,SOD 水平较 IL-1β+oe-NC 组升高(P＜0.05),IL-1β+oe-GPR30+si-Nrf2 组 ROS、MDA 水平较 IL-1β+oe-GPR30+si-NC 组升高,SOD水平较IL-1β+oe-GPR30+si-NC组降低(P＜0.05).结论 上调GPR30表达激活Nrf2/ARE信号通路,能抑制IL-1β诱导的髓核细胞凋亡、炎症和氧化应激反应.

GPR30是一种G蛋白偶联受体,同时其因为能够与雌激素直接结合而被称为G蛋白偶联雌激素受体.作为雌激素的新型受体,其功能被广泛与雌激素已知效应比较.雌激素对神经中枢系统作用以及这些作用是否能够转化用于治疗各种神经系统疾病已经得到广泛的讨论.据文献报道GPR30受体在神经中枢系统中分布并部分参与雌激素样神经保护作用,同时其被激动不具备雌激素直接使用带来的副作用,比如乳腺癌,雌化效应.这些特征提示GPR30受体可能是新的从激素角度出发治疗神经系统疾病的潜在靶点.本综述首先总结该受体在脑部分布,介导的信号通路以及这些通路产生的神经作用,随后对近十年关于GPR30神经作用应用于神经系统疾病时获取的新认识进行总结并从中提出针对神经系统疾病可能的治疗策略,最后粗略探讨GPR30受体在神经系统疾病临床转化过程中可能遇到的问题.

目的 采用RNA测序技术分析成纤维样滑膜细胞(FLSs)中与类风湿关节炎(RA)相关的核心基因.方法 (1)将30只SD大鼠随机分为模型组和正常组,各15只.给予模型组大鼠注射弗氏完全佐剂以构建佐剂性关节炎大鼠模型(经典RA模型),给予正常组大鼠注射等量无菌生理盐水.分别采用HE染色法、番红固绿染色法观察两组大鼠膝关节组织形态学变化和软骨组织破坏情况.(2)获取两组大鼠滑膜组织以分离培养FLSs.采用RNA测序技术分析两组FLSs的基因表达情况后,利用R软件筛选两组FLSs中的差异表达基因.对差异表达基因进行基因本体论功能富集分析、京都基因与基因组百科全书通路富集分析、基因集富集分析.通过STRING数据库和Cytoscape软件建立差异表达基因的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并筛选核心基因.采用实时荧光定量PCR对部分差异表达基因进行验证.结果 HE染色和番红固绿染色结果表明造模成功.共筛选到227个差异表达基因,包括133个上调基因与94个下调基因.差异表达基因主要富集于平滑肌细胞增殖负向调控等生物过程,脂肪颗粒等细胞组分,钙离子结合等分子功能,以及脂肪细胞中脂肪分解的调节等信号通路;差异表达基因富集的基因集主要涉及防卫反应、G蛋白偶联受体信号通路及活动分子传感器.共筛选出 10 个核心基因,包括 MMP9、AGT、CECR2、FGR、Hist1h3c、APOB、CDH3、MMP15、Hist2h4、NPPB.实时荧光定量PCR结果显示,模型组大鼠滑膜组织中MMP9、FGR、APOB的mRNA表达量高于正常组(P＜0.05),与RNA测序结果相符.结论 MMP9、FGR、APOB等核心基因可能通过参与调控免疫炎症反应来参与RA的发生和发展.