目的 探究胃肠肿瘤手术中应用不同剂量羟考酮麻醉对术后致痛物质水平、组织灌注及肠道屏障功能的影响.方法 选取2020年6月至2023年1月于六安市中医院接受手术治疗的45例胃肠肿瘤患者,随机分为3组,各15例.麻醉诱导过程中,A组予以0.08 mg/kg羟考酮,B组予以0.10 mg/kg羟考酮,C组予以0.12 mg/kg羟考酮.分别于麻醉诱导前(S1)、气管插管时(S2)、手术开始后30 min(S3)、术毕(S4)记录3组患者的血流灌注指数(PI),于术前1 d及术后2 d检测致痛物质[5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)]水平,于术前1 d及术后2、4 d评估肠道屏障功能[二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、内毒素(ET)],记录3组患者麻醉期间发生的不良反应情况.结果 S2、S3、S4时3组患者的PI水平较S,均升高,且A组高于B组、C组(P＜0.05);术后2d,3组患者的血清5-HT、SP水平较术前1 d均升高,且A组高于B组、C组(P＜0.05);术后2、4 d,3组患者的血清DAO、D-乳酸、ET水平较术前l d均降低,且A组低于B组、C组(P＜0.05).麻醉期间,A组、B组、C组患者的不良反应总发生率(20.00％、26.67％、26.67％)相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 相较于0.08 mg/kg或0.12 mg/kg的羟考酮,采用0.10 mg/kg的羟考酮进行麻醉可有效维持胃肠肿瘤手术患者术后的致痛物质、PI及肠道屏障功能的稳定性,且安全性较好.

T-2毒素作为粮食作物的主要污染物，对人和动物的消化系统、神经系统、生殖发育等都存在毒性作用。在我国大骨节病病区，大骨节病发生的病因物质是病区产谷物内超常聚集的T-2毒素。通过改变生产生活方式、换粮等综合防治措施，大骨节病防治成果显著，但病区外环境中仍有致病因子存在。本文在T-2毒素代谢动力学方面，将相关研究文献进行综述，阐述了T-2毒素的理化性质、体内分布、代谢动力学、生物转化以及T-2毒素及其代谢产物对各脏器的损伤，以期为T-2毒素对全身各器官影响研究提供新的思考。

目的:探讨HT-2毒素对体外培养软骨细胞沉默信息调节因子1（SIRT1）及自噬与凋亡通路相关蛋白表达的影响。方法:采用体外培养方法，取1~2日龄SD乳鼠第三代软骨细胞，采用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原免疫荧光染色法进行细胞鉴定；CCK-8法检测软骨细胞增殖情况，根据细胞存活率选取2、4、8 ng/ml HT-2毒素用于后续实验，确定作用时间为48 h，同时设立阴性对照组和溶剂（无水乙醇）对照组。采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测各组细胞SIRT1及自噬与凋亡通路相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p62、Beclin1、Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2-Associated X的蛋白质（Bax）]的表达情况。结果:经染色，细胞鉴定为软骨细胞且纯度较高。2、4、8 ng/ml HT-2毒素组SIRT1蛋白表达水平（0.69 ± 0.18、0.46 ± 0.13、0.35 ± 0.19）均明显低于阴性对照组（1.00 ± 0.39， P均< 0.05）；2、4、8 ng/ml HT-2毒素组自噬相关蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ蛋白表达比值（LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ，1.47 ± 0.15、1.37 ± 0.13、1.81 ± 0.34）均高于阴性对照组（1.00 ± 0.21， P均< 0.05），4、8 ng/ml HT-2毒素组p62蛋白表达水平（0.70 ± 0.04、0.57 ± 0.01）均低于阴性对照组（1.00 ± 0.15， P均< 0.05）。2、4、8 ng/ml HT-2毒素组凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平（0.61 ± 0.06、0.54 ± 0.16、0.47 ± 0.06）均明显低于阴性对照组（1.00 ± 0.14， P均< 0.05），且8 ng/ml HT-2毒素组Bax与Bcl-2蛋白表达比值（Bax/Bcl-2，3.27 ± 0.18）高于阴性对照组（1.00 ± 0.27， P < 0.05）。SIRT1蛋白表达水平与自噬相关蛋白LC3-Ⅱ蛋白表达水平呈显著性负相关（ r = - 0.819， P < 0.01），与p62蛋白表达水平呈显著性正相关（ r = 0.772， P < 0.01），但与Beclin1蛋白表达水平未见相关性（ r = 0.399， P > 0.05）；SIRT1蛋白表达水平与凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白表达水平均未见相关性（ r = - 0.297、- 0.284， P均> 0.05），但与Bcl-2蛋白表达水平呈显著性正相关（ r = 0.755， P < 0.01）。 结论:HT-2毒素可能通过抑制SIRT1的表达造成软骨细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高、p62蛋白表达下降，凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2升高，从而导致细胞自噬和细胞凋亡异常，最终导致软骨细胞损伤。

目的:筛选成人大骨节病患者尿液中差异代谢物及代谢通路，为寻找大骨节病特异性生物标志物及发病机制提供新的科学依据。方法:在陕西省大骨节病病区永寿县选取成人大骨节病患者作为病例组，同时在同病区村选取无大骨节病临床症状的健康人群作为对照组。采集研究对象空腹中段晨尿，使用液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术检测尿液中小分子代谢物，通过多变量统计分析偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）以及与KEGG、人类代谢组学数据库（HMDB）比对，鉴定并筛选大骨节病患者差异代谢物及代谢通路。结果:共纳入58名研究对象，病例组39名，其中男性23名、女性16名；年龄为（61.2 ± 7.8）岁；体质指数为（22.7 ± 6.5）kg/m 2。对照组19名，其中男性10名、女性9名；年龄为（50.0 ± 9.0）岁；体质指数为（24.3 ± 5.5）kg/m 2。鉴定并筛选出与大骨节病发病机制高度相关的一级差异代谢物3个（HT-2毒素、T-2四醇、硒-腺苷硒蛋氨酸），均表达下调；二级差异代谢物38个，其中10个上调、28个下调。筛选出差异代谢通路9条，主要涉及氨基酸代谢、脂类代谢和能量代谢。 结论:成人大骨节病患者和健康对照的尿液代谢谱存在显著差异，主要涉及氨基酸代谢、脂类代谢和能量代谢，其中一级差异代谢物HT-2毒素、T-2四醇、硒-腺苷硒蛋氨酸与大骨节病发病机制高度相关。

目的:建立高效的人肠三叶因子（ITF）重组表达及纯化策略，观察重组人ITF（rhITF）对烧伤小鼠肠黏膜损伤与修复的作用并探讨其机制。方法:采用实验研究方法。采用新型酵母表达载体pGAPZαA和酵母菌X33重组表达ITF，并通过金属螯合亲和层析与阴、阳离子交换层析法纯化蛋白，行非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及蛋白质印迹法鉴定rhITF。rhITF与胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液按体积比1∶1混合，分别作用0.5、1.0、1.5、2.0 h和1.0、2.0、4.0 h后行非还原SDS-PAGE，分析rhITF的稳定性。按随机数字表法将105只6~8周龄BALB/c雄性小鼠分为假伤组（30只）、单纯烧伤组（45只）、烧伤+rhITF组（30只）。将单纯烧伤组和烧伤+rhITF组小鼠背部造成30%体表总面积Ⅲ度烧伤，假伤组小鼠模拟致假伤，烧伤+rhITF组小鼠伤后灌胃1 mg/kg rhITF，其余2组小鼠伤后给予等量生理盐水。伤后24 h，取15只单纯烧伤组小鼠，制备烧伤血清，用于细胞实验。伤后3、5、7 d，每组各取10只小鼠处死后取小肠组织，苏木精-伊红染色观察肠黏膜病理变化，分光光度法和酶联免疫吸附测定法测定肠组织二胺氧化酶（DAO）及乳酸脱氢酶（LDH）活性。取3批人结直肠腺癌HT-29细胞，分为阴性对照组、25 μg/mL rhITF组、50 μg/mL rhITF组（样本数为3），正常对照组、烧伤血清组、烧伤血清+rhITF组（样本数为3），CK869抑制剂组、CK666抑制剂组和溶剂对照组（样本数为2），分别进行相应处理，Transwell实验观察培养12 h后细胞移行。另取2批HT-29细胞，每批细胞均分为正常对照组、烧伤血清组和烧伤血清+rhITF组（样本数均为6），培养24 h后，蛋白质印迹法检测细胞腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（p-AMPK）、Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1（Rac1）及肌动蛋白相关蛋白2/3（Arp2/3）复合亚基1B（ARPC1B）蛋白表达，活化磁珠下拉实验检测细胞Rac1活性。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、SNK检验。结果:每升发酵液获得rhITF 82.35 mg，蛋白纯度高达98%，且具有良好的抗原特异性。rhITF在胃蛋白酶和胰蛋白酶溶液中较稳定，与胰蛋白酶溶液作用2.0 h后仍有45%残余，与胃蛋白酶溶液作用4.0 h后仍有90%残余。假伤组小鼠伤后各时间点肠黏膜未见充血、水肿，单纯烧伤组小鼠伤后各时间点肠黏膜主要病理表现为充血、水肿、糜烂及出血。烧伤+rhITF组小鼠伤后3、5 d肠黏膜主要以充血、水肿为主，伤后7 d肠黏膜水肿和充血减轻。与单纯烧伤组比较，假伤组、烧伤+rhITF组小鼠伤后3、5、7 d肠组织DAO和LDH活性显著升高（ P<0.05或 P<0.01）。培养12 h后，25 μg/mL rhITF组细胞移行数为（58±12）个，显著多于阴性对照组的（16±5）个（ P<0.01），显著少于50 μg/mL rhITF组的（123±9）个（ P<0.05）。培养12 h后，烧伤血清组细胞移行数为（60±13）个，显著少于正常对照组的（143±11）个和烧伤血清+rhITF组的（138±8）个（ P<0.05）。培养12 h后，溶剂对照组细胞移行数为（155±9）个，明显多于CK666抑制剂组的（33±5）个、CK869抑制剂组的（28±5）个（ P<0.01）。培养24 h后，烧伤血清组细胞AMPK、Rac1蛋白表达量与正常对照组、烧伤血清+rhITF组相近（ P>0.05），p-AMPK蛋白表达量明显高于正常对照组、烧伤血清+rhITF组（ P<0.05或 P<0.01），ARPC1B蛋白表达量明显低于正常对照组、烧伤血清+rhITF组（ P<0.05）。培养24 h后，烧伤血清组细胞Rac1活性明显低于正常对照组、烧伤血清+rhITF组（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:本研究获得的rhITF具有较高的纯度和超强的稳定性，能耐受极端pH和蛋白酶水解，减轻烧伤小鼠肠黏膜损伤。rhITF能通过抑制AMPK磷酸化维持Rac1-Arp2/3活性，促进肠上皮细胞移行，加速肠黏膜修复。

探讨四君子汤对糖尿病小鼠肠屏障的改善作用.C57BL/6J小鼠给予高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)建立 2 型糖尿病(T2DM)模型.将T2DM小鼠随机分为空白组、T2DM组、多奈哌齐(DON)组、罗格列酮(RGZ)组、四君子汤不同剂量(7.5、15、30 g·kg-1)组,灌胃给药 6 周.记录小鼠体质量和空腹血糖(FBG);测定空腹血清胰岛素(FINS)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),观察胰岛素抵抗(IR)作用;分析肠道菌群及血清中 5-羟色胺(5-HT)、内毒素(LPS)、短链脂肪酸(SCFAs)水平;通过HE染色与免疫组化观察小鼠结肠结构和紧密连接蛋白occludin、claudin-1、ZO-1 的变化;自发交替实验观察空间记忆能力.与空白组比较,T2DM组小鼠FBG、HOMA-IR显著增加(P<0.01);物种丰度指数(Sobs指数)、香农多样性指数(Shannon指数)、物种丰度估计指数(Chao指数)降低;LPS显著增加(P<0.001),5-HT、SCFAs、occludin、claudin-1、ZO-1 水平显著降低(P<0.01),结肠屏障功能受损;自发交替正确率显著降低(P<0.05).四君子汤治疗 6 周后,与 T2DM 组相比,四君子汤15 g·kg-1组小鼠FBG、HOMA-IR显著降低(P<0.01);Sobs指数、Shannon指数、Chao指数升高;LPS显著降低(P<0.01),5-HT、SCFAs、occludin、claudin-1、ZO-1水平显著升高(P<0.05),结肠屏障功能改善;自发交替正确率显著升高(P<0.001).综上,四君子汤具有改善糖尿病小鼠肠屏障的作用.

目的 探讨九味镇心颗粒联合氟哌噻吨美利曲辛片及双歧杆菌四联活菌治疗腹泻型肠易激综合征的临床观察.方法 选取2020年1月-2021年1月期间信阳市中心医院收治的100例腹泻型肠易激综合征患者,按随机数字表法分为对照组和研究组,每组各50例.对照组给予氟哌噻吨美利曲辛联合双歧杆菌四联活菌治疗,研究组在对照组治疗的基础上给予九味镇心颗粒治疗.观察比较两组患者临床疗效、不良反应情况,治疗前后中医证候积分、直肠敏感性(肛管静息压、直肠感知阈值、腹痛阈值、排便阈值)、神经递质[神经递质5-羟色胺(5-Hydroxy Tryptamine,5-HT)、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide.CGRP)、胃肠激素神经肽 Y(Neuropeptide Y,NPY)]、二胺氧化酶、D-乳酸、内毒素水平.结果 治疗后研究组总有效率98.00％(49/50)明显高于对照组86.00％(43/50),差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者中医证候大便溏稀、腹痛隐隐、多梦易醒、便次增多、少气懒言、心悸怔忡、神疲乏力、食少纳呆、腹胀、面色不华评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且研究组中医证候大便溏稀、腹痛隐隐、多梦易醒、便次增多、少气懒言、心悸怔忡、神疲乏力、食少纳呆、腹胀、面色不华评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者肛管静息压、直肠感知阈值、腹痛阈值、排便阈值水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且研究组肛管静息压、直肠感知阈值、腹痛阈值、排便阈值均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者神经递质5-HT、CGRP、NPY水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且研究组神经递质5-HT、CGRP、NPY水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者二胺氧化酶、D-乳酸、内毒素水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且研究组二胺氧化酶、D-乳酸、内毒素水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗期间,研究组不良反应发生率1.44％(2/50)明显低于对照组16.00％(8/50),差异有统计学意义(x2=4.001,P=0.041).结论 九味镇心颗粒联合氟哌噻吨美利曲辛片及双歧杆菌四联活菌能够有效缓解腹泻型肠易激综合征患者临床症状,降低中医证候积分,恢复神经递质水平及肠道屏障功能,疗效显著,安全性高.

目的 建立LC-MS/MS法同时测定活血止痛胶囊/片中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2,伏马毒素B1、B2、B3,赭曲霉毒素A,玉米赤霉烯酮,脱氧雪腐镰刀菌烯醇,T-2毒素,HT-2 毒素,桔青霉毒素,杂色曲霉毒素的含量,并对其污染状况进行分析.方法 以亲水-亲脂HLB固相萃取柱净化作为前处理方式,分析采用Agilent RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm);流动相乙腈-水(0.1%甲酸-2 mmol/L甲酸铵),梯度洗脱;体积流量 0.3 mL/min;柱温 35℃;电喷雾电离源(ESI),正负离子模式,动态多反应离子检测(DMRM)模式.结果 16 种真菌毒素在各自范围内线性关系良好(R2＞0.999 2),平均加样回收率 81.7%～118.0%,RSD 0.9%～13.1%.40批样品中检出黄曲霉毒素B1、G1,伏马毒素B1、B2,赭曲霉毒素A,杂色曲霉毒素,检出率分别为 20%、32.5%、57.5%、25%、42.5%、27.5%,其中黄曲霉毒素B1 含量最高,为 10.26 μg/kg.结论 活血止痛制剂中真菌毒素残留较严重,对人体产生危害的潜在风险较高.

目的 探讨蒙脱石散与双歧杆菌三联活菌联合治疗对腹泻患儿胃肠道菌群、炎症因子的影响.方法 选取2019年1月至2022月3月东南大学医学院附属南京同仁医院收治的100例患儿为研究对象,随机分为对照组、试验组各50例,对照组予以蒙脱石散治疗,试验组予以蒙脱石散联合双歧杆菌三联活菌治疗.比较两组治疗3天后的疗效,以及治疗前后的胃肠道菌群、炎症因子、血清神经递质水平及肠屏障功能指标.结果 试验组临床治疗有效率(94.00％)高于对照组(80.00％),差异有统计学意义(x2=4.332,P<0.05);试验组脱水、腹泻、呕吐和腹痛好转时间及大便次数、体温复常时间均短于对照组(t值介于9.980～31.829之间,P<0.05);治疗后,两组益生菌数量较治疗前均上升,致病菌数量下降,试验组乳酸杆菌、双歧杆菌数量多于对照组,大肠杆菌数量少于对照组(t值分别为3.420、17.867、15.254,P<0.05);治疗后,两组患儿白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、P物质(SP)、5-羟色胺(5-HT)、神经肽Y(NPY)、内毒素、二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸(D-Lac)均下降,试验组低于对照组(t值介于2.803～27.669之间,P<0.05).结论 与蒙脱石散单一治疗小儿腹泻比较,联合双歧杆菌三联活菌可获得更佳的疗效,更有效地改善胃肠道菌群,更快地降低患儿体内炎症因子水平、降低神经递质与改善肠屏障功能,具有良好的临床应用价值.

目的 分析我国不同气候区域小麦真菌毒素共污染特征,建立气候分类模型.方法 对来自12个省、自治区的887份小麦样本中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、玉米赤霉烯酮、T-2和HT-2共8种真菌毒素检测数据按样本采集地的气候类型分为温带大陆性气候、温带季风气候和亚热带季风气候3类.对数据进行预处理并使用Borderline-SMOTE方法扩充以平衡数据集.使用主成分分析方法(PCA)对8种真菌毒素检测数据进行特征降维,选择降维后累计贡献率达97％的前二维特征作为小麦毒素数据特征.利用机器学习中的K最近邻(KNN)非线性分类器对上述数据特征进行分类研究,同时使用网格搜索算法对KNN模型参数进行调优.采用混淆矩阵、准确率、召回率和F1得分4个指标对模型进行评价,并比较所构建模型与支持向量机、随机森林和人工神经网络等常见分类模型在上述数据中的表现效果.结果 本文提出的Borderline-SMOTE、PC A与KNN相结合的分类模型对小麦8种真菌毒素共污染特征的气候分类准确率可达98.31％,且方法性能优于其他分类方法.结论 本文建立的分类模型能有效判别我国3种气候条件下小麦8种真菌毒素的共污染特征,可为分地区的真菌毒素联合暴露风险评估提供依据,并提出了 一种基于食品多项检测指标进行地区分类的方法.