目的:探讨千层纸素A (oroxylin A，OrA)对结核分枝杆菌感染诱导的巨噬细胞焦亡的作用及分子机制。方法:构建结核分枝杆菌感染J774A.1细胞体外模型；MTT法检测OrA对J774A.1细胞活力的影响；乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)检测试剂盒检测细胞LDH释放水平；Western blot检测细胞焦亡相关蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3)、GSDMD-N、caspase1-p20、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC)、α7烟碱乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR)蛋白质表达水平及NF-κB p65的磷酸化。ELISA检测各组细胞IL-1β表达水平；免疫荧光检测α7nAChR蛋白及定位。结果:MTT结果表明OrA在80 μmol/L浓度范围内对J774A.1细胞无细胞毒性；OrA抑制J774A.1细胞LDH的释放，降低细胞焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD-N、caspase1-p20的蛋白质表达水平以及ASC寡聚化，促进α7nAChR蛋白表达，并抑制NF-κB p65磷酸化和IL-1β的释放；加入α7nAChR激动剂PNU282987可降低GSDMD-N并抑制NF-κB p65磷酸化。结论:OrA可能通过调控胆碱能抗炎通路抑制结核分枝杆菌感染诱导的巨噬细胞焦亡。

目的:探讨NOD样受体家族3（NOD-like receptors3，NLRP3）炎症小体介导的炎症反应与抑郁症发病的相关性，并研究氟西汀对该过程的影响。方法:选取雄性 C57BL/6J（野生型）小鼠120只，采用随机数字表法将其随机分为对照1组、对照2组、慢性不可预知性温和刺激（chronic unpredictable mild stress，CUMS组）及CUMS+氟西汀组。另取雄性 C57BL/6J（NLRP3基因敲除，NLRP3-/-）小鼠30只，作为NLRP3-/-组。对照1组及对照2组：不做处理；CUMS组、CUMS+氟西汀组及NLRP3-/-组给予慢性不可预知性温和刺激，连续6周。造模后，对照2组、CUMS+氟西汀组小鼠经腹腔注射氟西汀［10 mg/（kg·d）］，其他3组小鼠每天注射等量生理盐水，连续4周。各组小鼠在应激前即刻及应激后每周进行1次行为学测试。应激前即刻、应激后3周、应激后6周抽取尾静脉血，3 000 r/min离心10 min，留取上清液冻存备用，采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）水平。各组小鼠在给予药物干预［10 mg/（kg·d）氟西汀或等量生理盐水］后每周进行1次行为学测试，包括糖水偏好实验、强迫游泳实验（forced swimming test，FST）及悬尾实验（tail suspension test，TST），每组小鼠在给药后1、3、4周抽取尾静脉血，离心留取上清液冻存备用，采用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β及IL-18水平，并分别于上述时间点每次每组处死5只小鼠，收集新鲜海马组织低温冻存备用，采用Western-Blot检测海马脑区NLRP3、胱冬肽酶-1（caspase-1）、诱导转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、IL-1β及IL-18的表达。结果:（1）造模情况：CUMS 6周后，与对照1组和对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠糖水消耗量明显降低，FST及TST不动时间明显延长，造模成功。NLRP3-/-组小鼠经CUMS后，在FST、糖水偏好实验及TST中均未表现出抑郁样改变，造模失败。（2）经腹腔注射氟西汀后，对照2组小鼠与对照1组小鼠相比，糖水消耗量、FST及TST不动时间的差异均无统计学意义（ P>0.05），CUMS+氟西汀组小鼠相较CUMS组小鼠糖水消耗量明显增加（ P<0.05），FST及TST不动时间明显缩短（ P<0.05）。（3）酶联免疫吸附实验检测结果显示，给予CUMS后，与对照1组及对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠血清 IL-1β、IL-18水平显著升高（ P<0.05），NLRP3-/-组小鼠则变化不明显（ P>0.05）。给药后，CUMS+氟西汀组小鼠血清中IL-1β、IL-18较CUMS组下降（ P<0.05）。（4）蛋白免疫印迹检测结果显示，给予CUMS后，与对照1组及对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠海马脑区NLRP3的表达、胱冬肽酶-1的活化及诱导转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、IL-1β、IL-18的表达增加（ P<0.05），氟西汀治疗后，CUMS+氟西汀组小鼠海马脑区NLRP3的表达、胱冬肽酶-1的活化及NF-κB、IL-1β、IL-18的表达显著下降（分别恢复至对照1组的99%、91%、97%、95%及97%）。 结论:（1）CUMS可引起小鼠海马区NLRP3、胱冬肽酶、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达增加以及血清上述炎症指标水平升高，而NLRP3基因敲除小鼠未发现此现象；（2）氟西汀治疗可显著降低抑郁症模型小鼠NLRP3、胱冬肽酶-1、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达及血清水平，改善小鼠抑郁样表现。

目的:探索粪菌移植（fecal microbiota transplantation，FMT）通过调节肠道菌群对SAE大鼠的神经保护作用。方法:30只SD大鼠分为假手术、SAE、SAE+FMT、SAE+FMT+ NF-κB激动剂，SAE+FMT+NLRP3激动剂组。通过16S rRNA测序、神经行为学评分、水迷宫测试、尼氏染色、定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹试验等分析大鼠肠道菌群，神经功能及炎症反应改变。采用SPSS软件对组间多样本行单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey检验。结果:①与假手术组相比，SAE大鼠α多样性降低（ P<0.01），而FMT治疗后的SAE大鼠的α多样性升高（ P<0.05），SAE组有益菌Bacteroidete，Clostridiales相比假手术组减少，FMT后增加。②与假手术组相比，SAE大鼠mNSS降低（ P<0.01），学习记忆能力降低（ P<0.01），海马CA1区神经元数量减少（ P<0.01），而FMT治疗后的SAE大鼠的mNSS评分提高（ P<0.01），学习记忆能力增加（ P<0.05），神经元数量增加（ P<0.05）。③与假手术组相比，SAE组大鼠肝肾功能指标、炎症相关因子、血脑屏障蛋白、NLRP3通路蛋白、NF-κB通路蛋白表达增加（ P<0.05），FMT降低以上指标（ P<0.05），④ NF-κB和NLRP3激动剂干预后抵消了FMT的作用（ P<0.05）。 结论:FMT通过调节肠道菌群并抑制脑内NF-κB/NLRP3信号通路。这为SAE的治疗提供了新的见解，同时强调了在临床治疗中考虑肠道微生物的重要性。

目的:探讨大电导钙依赖性钾通道（BKCa）参与脓毒症发病的机制。方法:收集脓毒症患者（28例）、普通感染者（25例）和健康体检者（25例）血清，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BKCa水平；并分析脓毒症患者血清BKCa水平与急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）的相关性。培养RAW 264.7细胞，用脂多糖（LPS）刺激，部分实验以尼日尼亚菌素（Nigericin）作为第二刺激信号构建脓毒症细胞模型；采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）测定不同浓度LPS（0、50、100、1 000 μg/L）刺激后细胞BKCa的mRNA和蛋白表达。RAW 264.7细胞转染BKCa的小干扰RNA（siRNA-BKCa），用Western blotting测定细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1前体（pro-caspase-1）、白细胞介素-1β前体（pro-IL-1β），细胞培养液中caspase-1 p20、IL-1β p17，以及NOD样受体蛋白3（NLRP3）、核转录因子-κB（NF-κB）水平。碘化丙啶（PI）染色后荧光显微镜下观察凋亡情况，测定乳酸脱氢酶（LDH）释放率，Western blotting测定细胞凋亡蛋白Gasdermin D（GSDMD）表达以评估沉默BKCa对细胞焦亡的影响。结果:脓毒症患者血清BKCa明显高于普通感染者和健康体检者（ng/L：165.2±25.9比102.5±25.9、98.8±20.0，均 P<0.05），且脓毒症患者血清BKCa水平与APACHEⅡ评分呈显著正相关（ r＝0.453， P＝0.013）。用LPS构建脓毒症细胞模型，显示LPS呈浓度依赖地促进BKCα的mRNA和蛋白表达，1 000 μg/L刺激后细胞BKCa的mRNA和蛋白表达水平均较空白组（0 μg/L）明显增加〔BKCa mRNA（2 -ΔΔCt）：3.00±0.36比1.00±0.16，BKCa/β-actin：1.30±0.16比0.37±0.09，均 P<0.05〕。与对照组比较，模型组细胞caspase-1 p20/pro-caspase-1比值、IL-1βp17/pro-IL-1β比值均明显升高（caspase-1 p20/pro-caspase-1比值：0.83±0.12比0.27±0.05，IL-1βp17/pro-IL-1β比值：0.77±0.12比0.23±0.12，均 P<0.05）；但转染siRNA-BKCa后二者均较模型组明显下降（caspase-1 p20/pro-caspase-1比值：0.23±0.12比0.83±0.12，IL-1βp17/pro-IL-1β比值：0.13±0.05比0.77±0.12，均 P<0.05）。与对照组比较，镜下观察模型组凋亡细胞明显增多，LDH释放率、GSDMD表达明显增加〔LDH释放率：（30.60±8.40）%比（15.20±7.10）%，GSDMD-N/GSDMD-FL：2.10±0.16比1.00±0.16，均 P<0.05〕；但转染siRNA-BKCa后上述指标均较模型组明显下降〔LDH释放率：（15.60±7.30）%比（30.60±8.40）%，GSDMD-N/GSDMD-FL：1.13±0.17比2.10±0.16，均 P<0.05〕。脓毒症细胞NLRP3的mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显增加〔NLRP3 mRNA（2 -ΔΔCt）：2.06±0.17比1.00±0.24，NLRP3/GAPDH：0.46±0.05比0.15±0.04，均 P<0.05〕；但转染siRNA-BKCa后NLRP3表达较模型组明显下降〔NLRP3 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.57±0.09比2.06±0.17，NLRP3/GAPDH：0.19±0.02比0.46±0.05，均 P<0.05〕。与对照组比较，脓毒症细胞NF-κB p65核转移明显增加（NF-κB p65/Histone：0.73±0.12比0.23±0.09， P<0.05）；而转染siRNA-BKCa后细胞核中NF-κB p65表达明显下降（NF-κB p65/Histone：0.20±0.03比0.73±0.12， P<0.05）。 结论:BKCa参与脓毒症发病，其可能机制是激活NF-κB/NLRP3/caspase-1信号通路诱导炎症因子生成和细胞焦亡。

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路对动脉粥样硬化(AS)模型小鼠脂质沉积及自噬相关蛋白表达的影响。方法:以10只6周龄雄性C57BL/6小鼠为对照组，并将20只同龄雄性载脂蛋白E基因敲除( ApoE-/-)小鼠按随机数字表法分为AS组与硼替佐米(BTZ)组，每组10只。予AS组和BTZ组小鼠高脂饮食喂养8周后，BTZ组小鼠给予50 μg/kg BTZ腹腔注射(2次/周，持续4周)，AS组小鼠注射等量生理盐水。实验过程中持续观察各组小鼠的一般情况，于干预12周后测量其体质量及检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)含量，并予HE染色和油红O染色观察小鼠主动脉根部组织病理形态及脂质沉积状况，予免疫组化染色检测小鼠主动脉根部组织中NF-κB、NLRP3的阳性表达，予Western blotting实验检测小鼠主动脉根部组织中自噬相关蛋白Beclin-1、P62和Atg12蛋白的表达量。 结果:干预12周后，AS组和BTZ组小鼠的体质量，TC、LDL含量，病变程度及脂质沉积占比，NF-κB、NLRP3阳性表达及P62蛋白表达量均明显高于对照组，而BTZ组小鼠这些指标均明显低于AS组，差异均有统计学意义( P<0.05)；AS组和BTZ组小鼠的HDL含量、Beclin-1和Atg12蛋白表达量均明显低于对照组，而BTZ组小鼠这些指标均明显高于AS组，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:抑制NF-κB/NLRP3通路可通过调节血脂含量以减少脂质沉积，并介导自噬相关蛋白表达以促进自噬发生，从而起到抑制AS进程的作用。

二甲双胍是2型糖尿病的一线治疗药物，目前也逐渐用于皮肤病的治疗，包括银屑病等。本文综述二甲双胍治疗银屑病的机制及临床研究进展，为皮肤科治疗银屑病尤其是银屑病合并代谢性疾病提供思路和方法。

目的:探究碘化钾诱导甲状腺滤泡细胞焦亡的分子机制。方法:ELISA检测桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中焦亡指标白细胞介素(interleukin, IL)-1β及IL-18的含量，以癌旁桥本甲状腺炎组织为对照；Western印迹检测焦亡标志性蛋白焦孔素(gasdermin, GSDM)的活化情况。碘化钾作用于甲状腺滤泡细胞，检测细胞焦亡IL-1β、IL-18、乳酸脱氢酶(LDH)的分泌及GSDM蛋白的活化及分子机制；转录组芯片分析高浓度碘化钾诱导甲状腺滤泡细胞差异性表达的分子及其在焦亡中的作用机制。结果:桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中IL-1β和IL-18细胞因子含量较同一患者癌旁桥本甲状腺炎组织显著升高( P<0.01)，且焦亡标志性蛋白GSDMD的活化显著，而GSDME无显著活化改变。高浓度碘化钾作用于甲状腺滤泡细胞后，通过激活核因子-κB (NF-κB)/NLRP3信号轴诱导IL-1β、IL-18、LDH的分泌( P<0.01)和GSDMD活化，使甲状腺滤泡细胞发生焦亡。转录组芯片分析发现，甲状腺滤泡细胞受高浓度碘化钾刺激后PARP1蛋白表达显著上调，并通过调控NF-κB转录因子的活性促进细胞焦亡。 结论:本研究发现高浓度碘化钾通过促进PARP1蛋白表达，诱导甲状腺滤泡细胞NF-κB/NLRP3炎症小体的活化，从而诱导甲状腺滤泡细胞发生炎症性焦亡。

目的:评价毛蕊花苷对小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤的影响及其与NF-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的关系。方法:动物实验：SPF级健康雄性C57BL/6小鼠18只，6~8周龄，体质量24~28 g，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：对照组(C组)、心脏移植冷缺血再灌注组(I/R组)和心脏移植冷缺血再灌注+毛蕊花苷组(I/R+VB组)。采用cuff套管法颈部异位心脏移植的方法制备小鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤模型，C组供体心脏取下后立即移植至受体，I/R组供体心脏于4 ℃保存液保存8 h后移植至受体，I/R+VB组供体与受体小鼠分别于术前3 d时腹腔注射毛蕊花苷20 mg/kg。于再灌注24 h时进行移植物跳动评分后取移植心脏心肌组织，采用ELISA法检测MDA含量和SOD活性；取部分供体心肌组织，观察病理学结果；采用Western blot法检测NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1的表达；RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA的表达。细胞实验：建立大鼠心肌细胞H9c2冷缺氧复氧模型，采用随机数字表法将细胞分为3组( n＝24)：对照组(C组)、冷缺氧复氧组(H/R组)、冷缺氧复氧+毛蕊花苷组(H/R+VB组)。采用10 ℃缺氧18 h，37 ℃复氧24 h的方法建立冷缺氧复氧模型，检测细胞活力和LDH活性；Western blot法检测NF-κB和NLRP3的表达；免疫荧光染色法检测p-NF-κB的表达。 结果:动物实验：与C组比较，I/R组MDA含量升高，移植物跳动评分和SOD活性降低，p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1表达、IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA表达上调( P<0.05)，心肌组织病理学损伤加重；与I/R组比较，I/R+VB组MDA含量降低，移植物跳动评分和SOD活性升高，p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1表达、IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA表达下调( P<0.05)，心肌组织病理学损伤减轻。细胞实验：与C组比较，H/R组细胞活力降低，LDH活性升高，p-NF-κB、NLRP3、ACS、caspase-1和p-NF-κB表达上调( P<0.05)；与H/R组比较，H/R+VB组细胞活力升高，LDH活性降低，p-NF-κB、NLRP3、ACS、caspase-1和p-NF-κB表达下调( P<0.05)。 结论:毛蕊花苷可减轻小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤，其机制与抑制NF-κB/NLRP3信号通路激活有关。

目的:探讨红景天苷(salidroside，SAL)是否通过介导Toll样受体4/核转录因子-κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)信号通路改善重症肺炎(severe pneumonia，SP)大鼠肺组织损伤。方法:Wistar大鼠75只，随机选择15只作为假手术组，其余60只通过气管内滴注肺炎克雷伯菌( Klebsiella pneumoniae， Kp)悬液诱导构建SP大鼠模型。建模成功大鼠随机分为模型组、SAL低剂量组(30 mg/kg)、SAL高剂量组(60 mg/kg)和地塞米松(dexamethasone, DXMS)组(15 mg/kg)，每组15只，假手术组和模型组均灌服等量生理盐水，连续7 d。检测肺组织湿干重比(Wet/Dry，W/D)；HE和TUNEL染色观察各组大鼠肺脏组织形态及细胞凋亡情况；ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18及IL-10水平；Western blot检测肺组织中TLR4、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88，MyD88)、NF-κBp65、磷酸化NF-κBp65(phosphorylated NF-κBp65，p-NF-κBp65)、NLRP3蛋白相对表达水平。 结果:经气管滴注 Kp悬液成功构建SP大鼠模型；与假手术组比较，模型组大鼠肺组织水肿严重，W/D值升高( P<0.05)，肺泡结构松散不完整，肺泡壁水肿增厚，大量炎性细胞浸润，细胞凋亡率升高，BALF中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-18水平升高，IL-10水平降低，肺组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65、p-NF-κBp65及NLRP3蛋白相对表达水平升高( P<0.05)；与模型组比较，SAL低、高剂量组及DXMS组大鼠肺组织病理损伤情况均逐渐改善，W/D值降低( P<0.05)，肺泡结构逐渐完整，肺泡壁水肿程度逐渐减轻，细胞凋亡率降低，BALF中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-18水平降低，IL-10水平升高，肺组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65、p-NF-κBp65及NLRP3蛋白相对表达水平降低( P<0.05)；低、高剂量SAL及DXMS改善SP大鼠肺组织损伤的作用效果表现为逐渐增强( P<0.05)。 结论:SAL可减少细胞凋亡，改善由 Kp诱导的大鼠肺组织病理损伤，其作用机制可能与阻断TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活，抑制炎性因子表达有关。

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）特异性抑制剂RGFP966对创伤性脑损伤（TBI）大鼠早期脑损伤的神经保护作用及其机制。方法:将48只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI组、TBI+溶媒对照组、TBI+RGFP966组，每组12只。后3组大鼠采用液压冲击脑损伤法建立TBI模型，其中TBI+RGFP966组于造模后30 min经腹腔注射RGFP966（溶于1%DMSO中，剂量为10 mg/kg，2次/d，共给药3 d），TBI+溶媒对照组同期注射等量DMSO。于造模后第3天，分别应用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估各组大鼠的神经功能，干湿重法检测各组大鼠损伤侧大脑皮层含水量，尼氏染色检测各组大鼠损伤侧额叶皮层组织中损伤神经元比例，免疫组化染色及Western blotting检测各组大鼠损伤侧额叶皮层组织中HDAC3及焦亡相关蛋白表达，ELISA法检测各组大鼠血清中炎性因子含量。结果:造模后第3天，与TBI+溶媒对照组比较，TBI+RGFP966组大鼠mNSS评分[(9.83±0.75)分 vs.(6.67±0.82)分]、脑组织含水量[(82.73±0.36)% vs. (80.92±0.66)%]明显下降，损伤神经元比例[(75.60±7.44)% vs. (55.87±4.10)%]明显下降，HDAC3蛋白表达明显下降（0.67±0.09 vs. 0.51±0.07），乙酰化H3、乙酰化H4蛋白表达明显上升（0.81±0.02 vs. 1.22±0.02；0.74±0.01 vs. 1.07±0.02），核因子-κB（NF-κB）（1.20±0.05 vs. 0.94±0.04）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）（0.72±0.02 vs. 0.40±0.03）、活性含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1、消皮素D N-末端片段（GSDMD-N）（0.71±0.03 vs. 0.52±0.01）蛋白表达明显下降，NF-κB、NLRP3免疫组化染色评分明显下降，肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-18含量明显下降，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:TBI后早期应用RGFP966干预可以减轻神经细胞焦亡和炎症反应，发挥神经保护作用，其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3/GSDMD通路激活有关。