目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清microRNA-17(miR-17)、Netrin4的表达及与妊娠结局的关系.方法 回顾性分析2022年1月-2023年6月南通大学第二附属医院收治的GDM患者98例.根据妊娠结局将患者分为对照组(正常妊娠结局)和研究组(不良妊娠结局),分别为65和33例.收集患者临床资料包括受试者年龄、孕产次、口服葡萄糖耐量试验(O GTT)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、白蛋白(ALB)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-17和Netrin4的表达.分析影响GDM患者发生不良妊娠结局的因素.结果 对照组与研究组体质量指数(BMI)、OGTT2h、HbA1c、HOMA-IR比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).研究组miR-17相对表达量高于对照组(P＜0.05),Netrin4相对表达量低于对照组(P＜0.05).多因素一般Logistic回归分析结果显示:高水平 OGTT 2h[OR=1.548(95％CI:1.512,2.531)]、高水平 HbA1c[OR=3.041(95％CI:1.054,3.412)]、高表达miR-17[OR=2.865(95％CI:0.741,3.905)]及低表达Netrin4[OR=0.743(95％CI:0.378,0.835)]均是不良妊娠结局的危险因素(P＜0.05).结论 GDM患者血清miR-17表达升高和Netrin4表达降低是发生不良妊娠结局的影响因素.

目的:通过降低斑马鱼接触蛋白相关蛋白基因2（contact protein-related protein gene 2, cntnap2）表达，建立注意缺陷多动障碍（attention-deficit/hyperactivity disorder，ADHD）遗传模型。方法:以注射剪接抑制型吗啉代寡聚核糖核酸降低cntnap2表达的斑马鱼作为实验组（ n=48），注射随机寡核苷酸片段的斑马鱼作为对照组（ n=48)，通过原位杂交观察斑马鱼神经递质系统相关基因th、dbh、gad1b、glyt2、vglut2表达的变化，使用实时荧光定量PCR检测神经递质系统及神经元发育相关基因表达量变化。使用斑马鱼行为轨迹跟踪系统记录（Noldus行为仪）检测cntnap2表达降低后多动/冲动行为及托莫西汀对多动/冲动行为的改善作用。 结果:原位杂交实验结果显示实验组较对照组神经递质系统相关基因dbh表达减少，gad1b表达增加；th、glyt2、vglut2表达未见明显差异。实时荧光定量PCR显示实验组较对照组神经递质系统相关基因dbh表达降低（ t=5.772， P=0.005），snap25、dat、gad1b表达增高（ t=14.310、22.210、22.090,均 P<0.01）；神经元发育相关基因shha、epha4b、netrin1b、noi及神经递质系统相关基因drd4、th、vglut2、glyt2表达差异均无统计学意义。6 dpf时药物未处理实验组较药物未处理对照组幼鱼游动总距离长 ［143.12(98.56, 212.22) cm 与99.03(80.54, 133.96) cm， Z=-3.547， P<0.01］，平均游动速度快［0.050(0.041, 0.067) cm/s与0.033(0.025, 0.042) cm/s, Z=-5.495， P<0.01］；经托莫西汀处理后，实验组药物处理较药物未处理幼鱼游动总距离减少［106.59(95.28, 120.10) cm与143.12(98.56, 212.22) cm, Z=-3.591， P<0.01］，平均游动速度减慢［0.031(0.028, 0.037) cm/s与0.050(0.041, 0.067) cm/s， Z=-7.035， P<0.01］。 结论:cntnap2表达降低斑马鱼可通过改变dbh、snap25、dat、gad1b表达量而产生多动/冲动表型，托莫西汀可有效缓解多动/冲动表型，cntnap2表达降低斑马鱼可作为ADHD遗传模型。

目的:探讨神经轴突导向因子2(Slit2)在恶性神经胶质瘤组织中的表达及与患者临床病理特征和生存率的关系。方法:选取河南省商丘市第一人民医院和郑州大学第一附属医院2016年9月到2019年9月收集的104例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学检测Slit2蛋白表达，分析Slit2表达水平与患者临床病理特征和预后的关系。采用 χ2检验分析Slit2与临床病理特征的关系，生存分析采用Kaplan-Meier生存曲线，多因素采用Logistic回归分析。 结果:神经胶质瘤组织中Slit2蛋白表达阳性率[19.23%(20/104)]明显低于癌旁组织[80.77%(84/104)]，差异有统计学意义( χ2＝17.120， P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ级患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[38.10%(16/42)]明显高于Ⅲ~Ⅳ级患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[6.45%(4/62)]，差异有统计学意义( χ2＝11.109， P<0.05)。中高分化患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[28.13%(18/64)]明显高于低分化患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[2.50%(2/40)]，差异有统计学意义( χ2＝9.902， P<0.05)。Slit2高表达组患者生存率[55.00%(11/20)]明显高于Slit2低表达患者生存率[32.14%(27/84)]，差异有统计学意义( χ2＝8.771， P<0.05)。多因素回归分析，结果显示临床分期、分化程度和Slit2表达水平均是影响神经胶质瘤患者总生存率的独立危险因素( P<0.05)。 结论:Slit2蛋白在神经胶质瘤组织中呈低表达，与患者临床分期和分化程度以及总生存率密切相关。

Leucine-rich repeats containing 4 ( LRRC4, also named netrin-G ligand 2 [NGL-2]) is a member of the NetrinGs ligands (NGLs) family. As a gene with relatively high and specific expression in brain, it is a member of the leucine-rich repeat superfamily and has been proven to be a suppressor gene for gliomas, thus being involved in gliomagenesis. LRRC4 is the core of microRNA-dependent multi-phase regulatory loops that inhibit the proliferation and invasion of glioblastoma (GB) cells, including LRRC4/NGL2-activator protein 2 (AP2)-microRNA (miR) 182-LRRC4 and LRRC4-miR185-DNA methyltransferase 1 (DNMT1)-LRRC4/specific protein 1 (SP1)-DNMT1-LRRC4. In this review, we demonstrated LRRC4 as a new member of the partitioning-defective protein (PAR) polarity complex that promotes axon differentiation, mediates the formation and plasticity of synapses, and assists information input to the hippocampus and storage of memory. As an important synapse regulator, aberrant expression of LRRC4 has been detected in autism, spinal injury and GBs. LRRC4 is a candidate susceptibility gene for autism and a neuro-protective factor in spinal nerve damage. In GBs, LRRC4 is a novel inhibitor of autophagy, and an inhibitor of protein-protein interactions involving in temozolomide resistance, tumor immune microenvironment, and formation of circular RNA.

目的:探讨高尿酸血症(HUA)状态下低度炎症的病理特点.方法:根据体质量随机将迪法克鹌鹑分为正常组、模型组,每组10只.以普通饲料∶酵母浸膏粉=4∶1制备食饵,并以该食饵喂养模型组鹌鹑,正常组鹌鹑则自由饮食饮水.分别于造模第10、20、30天检测血清尿酸,血清炎症介质白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-33、IL-2、IL-13、IL-8、IL-17、IL-6、IL-10、IL-12/P40、IL-16、IL-21、C反应蛋白(CRP)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、趋化因子CC配体2(CCL2)及γ干扰素(IFN-γ)、神经突起生长导向因子2(Netrin-2)、五聚蛋白3(Pentraxin 3),观察各炎症介质强度变化;造模第30天,取鹌鹑肝、回肠、肾各脏器组织,进行HE染色后观察组织病理形态变化;造模第20天,用基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析差异炎症介质功能及相关信号通路;用Pearson相关性分析方法分析差异炎症介质与血清尿酸水平的相关性.结果:与正常组比较,模型组鹌鹑血清尿酸水平高(P＜0.05),以血清IL-17、IL-6、IL-33等为主的白细胞介素类,以IL-8、CCL2为主的趋化因子类,IFN-γ、TNF-α、CRP及GM-CSF水平均升高(P＜0.05),而IL-13、IL-10水平降低(P＜0.05).造模第20天,GO/KEGG富集分析结果显示,HUA状态下的低度炎症可能是尿酸代谢靶点群,通过IL-17、Janus激酶信号转导和转录激活因子(JAK-STAT)等信号通路激活、细胞因子-细胞因子间相互作用,从而诱导IL-6、TNF-α等炎症介质产生.2组组织病理变化结果显示,与正常组相比,模型组回肠组织黏膜下层可见炎性细胞浸润,肝、肾组织未见明显差异.差异炎症介质与血清尿酸水平的相关性分析结果显示,鹌鹑血清中IL-6、TNF-α、CRP、IL-33、IL-17、IL-8、IFN-γ、CCL2、GM-CSF、IL-1β、IL-2、IL-6 水平均与血清尿酸水平正相关,IL-10、IL-13 水平与血清尿酸水平负相关.结论:HUA鹌鹑模型存在低度炎症,该低度炎症可能与尿酸代谢靶点群通过IL-17、JAK-STAT等信号通路的激活以及细胞因子间的相互作用,从而调控IL-6、TNF-α等炎症介质的产生有关.

目的 探讨血清神经轴突导向因子1(netrin-1)联合脑电双频指数(BIS)对重度颅脑损伤患者预后的预测效能.方法 重度颅脑损伤患者80例,随访6个月后根据格拉斯哥预后量表(GOS)分为预后良好组(GOS评分为4～5分)43例和预后不良组(GOS评分<3分)37例.采用ELISA法检测血清netrin-1,比较两组BIS.采用多因素Logis-tic回归分析重度颅脑损伤患者预后的影响因素.采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清netrin-1、BIS对重度颅脑损伤患者预后的预测价值.结果 预后不良组血清netrin-1水平及BIS低于预后良好组(P均<0.05).高龄(OR= 2.020,95%CI 1.436～2.841)、脑中线移位≥5 mm(OR=2.469,95%CI 1.649～3.698)、环池受压(OR=2.416,95%CI 1.598～3.653)、netrin-1≤223.84 ng/mL(OR=0.300,95%CI 0.189～0.477)、BIS≤47.56(OR=0.380,95%CI 0.250～0.577)是重度颅脑损伤患者预后不良的危险因素.血清netrin-1及BIS预测重度颅脑损伤患者预后的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.857、0.739,截断值分别为223.84 ng/mL、47.56,灵敏度分别为0.91、0.91,特异度分别为0.66、0.55;两项指标联合预测的AUC为0.904,灵敏度为0.85,特异度为0.86.结论 预后不良的重度颅脑损伤患者血清netrin-1水平及BIS降低,血清netrin-1及BIS有望作为预测重度颅脑损伤患者预后的标志物,两项指标联合预测效能更高.

轴突生长导向因子-1(netrin-1)是netrins家族中研究最广泛的成员.netrin-1 最初被认为是胎儿发育过程中轴突引导的调节因子,与其经典受体非协调 5(uncoordinated-5,UNC5)与结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)共同介导轴突的吸引或排斥.随着更多netrin-1受体的发现,如唐氏综合征细胞粘附分子(down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)、整合素α6β4(integrin α6β4,Inα6β4)和整合素α3β1(integrin α3β1,Inα3β1)、腺苷A2B受体(A2B adenosine receptor,A2BAR)和CD146等的发现,扩展了netrin-1在非神经系统的功能,如调控血管生长,肿瘤生长,细胞凋亡,炎症发展.本文就netrin – 1及其受体在非神经系统中的作用的研究进展进行概述.

目的 研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)促进胶质瘤增殖的差异表达基因.方法 体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞分为3组,正常对照组(对照组)和实验组(GDNF 70μg·L-1干预6 h组和GDNF 70μg·L-1干预12 h组).利用全基因组表达谱芯片技术进行分析,实时定量PCR验证芯片结果,并对差异基因进行聚类分析和信号转导通路分析等.结果 与对照组比较,GDNF干预6 h组和GDNF干预12 h组分别上调772和664个基因,下调282和259个基因.其中,最显著的上调基因为NTN1、SLC7A5、NDST1、CD24、NFIC、KDM4A、CEACAM1、SOCS2.下调基因主要有Sctr、C4-2、GNAL、HSD3B1、Stfa2l1等.基于KEGG数据库进行生物学通路分析显示上调基因主要参与葡糖胺聚糖半乳糖基转移酶-硫酸盐肝素的生物合成、细胞的黏附连接、癌症的转录失活、JAK-STAT信号通路等.选取8个差异基因(CD24,CEACAM1、Synpo、Ndst1、Nfic、Ntn1、Socs2、Ccdc6)进行RT-PCR验证,GDNF干预12 h组与对照组比较,CEACAM1、Nfic、Socs2、Ccdc6基因表达倍数显著增加(P<0.05).提示差异基因的mRNA变化趋势与表达谱结果一致.结论 应用全基因组表达谱芯片并结合生物信息学软件分析差异表达基因,为GDNF促进胶质瘤细胞增殖的分子生物学机制的研究提供了依据.

神经突起导向因子netrins是层粘联蛋白家族的成员,最初被认为是轴突的引导分子.随后,人们发现netrins参与调节多种生理过程,包括胚胎形态发生、肿瘤发生、粘附以及最近的血管生成.netrin-1和netrin-4在内皮细胞中既有抗血管生成的作用,又有促进血管生成的作用.这些相反的结论似乎与内皮细胞的表现形式和结合的受体类型有关.

血管生成是维持机体需要的基本生理过程,倘若血管生成过度则会导致一些疾病的发生.糖尿病的主要病理改变包括病理性新生血管生成,且其机制受体内多种血管生成相关因子的影响.研究发现,Vasohibin、基质细胞衍生因子1、Ephrin-B2、Netrin-1这4种因子的生物学功能之一是参与调节机体的血管生成.最新研究表明,以上4种因子与糖尿病的血管生成密切相关,且参与糖尿病血管生成的交汇点均是血管内皮生长因子,并通过与血管内皮生长因子相互影响,共同参与调节糖尿病的血管生成.