目的:研究Notch1信号通路抑制剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用及其可能机制。方法:将SPF级出生后第7天(P7)的幼鼠与C57BL/6J母鼠共同饲养于含75%氧气的氧箱中5 d，然后放回正常氧气环境下饲养，以制备OIR模型。采用随机数表法将54只OIR小鼠分为OIR组、OIR+DMSO组和OIR+DAPT组，每组18只，所有小鼠右眼作为实验眼。OIR+DAPT组和OIR+DMSO组在P14小鼠玻璃体腔内分别注射10 mmol/L DAPT和DMSO溶液1 μl，OIR组不予注射。P17时处死各组小鼠，摘出眼球后分离视网膜，采用Western blot法测定Notch1信号通路蛋白及其下游Hes1蛋白、视网膜小胶质细胞M1型标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型标志物精氨酸酶-1(Arg-1)蛋白的相对表达量；制备视网膜铺片，采用同工凝集素(IB4)染色视网膜血管，计算小鼠视网膜新生血管相对面积，定义为新生血管面积/视网膜总面积×100%；采用苏木素－伊红染色法观察突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量。结果:OIR+DAPT组、OIR组和OIR+DMSO组小鼠视网膜中Notch1蛋白相对表达量分别为0.68±0.06、1.00±0.00和1.03±0.08，Hes1蛋白相对表达量分别为0.70±0.08、1.00±0.00和1.02±0.07，组间总体比较差异有统计学意义( F＝70.62、53.65，均 P<0.01)。OIR+DAPT组小鼠视网膜中Notch1和Hes1蛋白相对表达量均明显低于OIR组和OIR+DMSO组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。OIR+DAPT组、OIR组和OIR+DMSO组小鼠视网膜中Arg-1蛋白相对表达量分别为1.49±0.12、1.00±0.00和0.94±0.07，iNOS蛋白相对表达量分别为0.74±0.07、1.00±0.00和1.04±0.10，组间总体比较差异均有统计学意义( F＝89.32、31.63，均 P<0.01)，与OIR组和OIR+DMSO组比较，OIR+DAPT组小鼠视网膜中Arg-1蛋白相对表达量明显升高，iNOS蛋白相对表达量明显下降，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。OIR+DAPT组、OIR组和OIR+DMSO组小鼠视网膜新生血管相对面积分别为(8.82±2.71)%、(22.32±5.34)%和(20.27±3.36)%，突破内界膜的血管内皮细胞数分别为38.17±3.29、60.83±5.11和58.67±4.75，总体比较差异均有统计学意义( F＝33.72、39.44，均 P<0.01)。与OIR组和OIR+DMSO组比较，OIR+DAPT组小鼠视网膜新生血管相对面积缩小，突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数较少，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:玻璃体腔注射DAPT可抑制OIR小鼠视网膜新生血管形成，其作用主要是通过抑制Notch1信号通路活化，进而促使M1型视网膜小胶质细胞向M2型转化来实现。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-146-5p靶向Notch2对非小细胞肺癌增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:选取南阳医学高等专科学校第一附属医院2018年5月至2022年5月收治的58例非小细胞肺癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤和癌旁组织miR-146-5p表达水平。采用慢病毒建立miR-146-5p过表达非小细胞肺癌A549细胞系，分别为miRNA对照组和miR-146-5p组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析肿瘤细胞增殖能力，采用流式细胞术分析细胞凋亡水平；采用Transwell分析细胞侵袭能力；生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-146-5p靶基因。蛋白质免疫印迹分析靶基因的表达水平。组间数据比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中miR-146-5p表达水平(1.09±0.16)明显高于非小细胞肺癌组织表达水平(0.48±0.12)，差异有统计学意义( t＝23.940， P<0.05)。miRNA对照组细胞miR-146-5p表达水平(0.96±0.41)明显低于miR-146-5p组细胞(2.69±0.25)，差异有统计学意义( t＝8.094， P<0.05)。miRNA对照组细胞吸光度值(1.96±0.07)明显高于miR-146-5p组细胞(1.56±0.08)，差异有统计学意义( t＝9.123， P<0.05)。miRNA对照组细胞体内肿瘤体积[(691.50±51.29) mm 3]明显高于miR-146-5p组细胞[(443.80±61.43) mm 3]，差异有统计学意义( t＝9.787， P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(3.64±1.24)%]明显低于miR-146-5p组细胞[(23.26±2.91)%]，差异有统计学意义( t＝13.910， P<0.05)。miRNA对照组细胞侵袭数量[(98.80±14.97)%]明显低于miR-146-5p组细胞[(69.80±10.89)%]，差异有统计学意义( t＝3.502， P<0.05)。，Nocth2是miR-146-5p的靶基因。miRNA对照组细胞Nocth2蛋白表达水平(1.21±0.12)明显低于miR-146-5p组细胞(0.63±0.10)，差异有统计学意义( t＝9.282， P<0.05)。 结论:miR-146-5p通过调节靶蛋白Notch2表达水平，调节着非小细胞肺癌的增殖、凋亡和侵袭能力。

目的:探讨Notch对初次全膝关节置换术（total knee arthroplasty，TKA）后股骨侧假体周围骨折（periprosthetic fracture，PPF）的影响。方法:回顾性收集2013年1月至2020年12月在西安市红会医院收治股骨侧PPF 34例患者的病历资料，男4例，女30例；年龄（69.2±7.2）岁（范围55~84岁）。通过性别和年龄按1∶3匹配初次全膝关节置换术后未发生PPF的102例患者为对照组，男12例，女90例；年龄（69.2±7.2）岁（范围55~84岁）。主要观察指标为患者的一般资料、下肢力线、假体类型及Nocth情况，再以Nocth的深度和Tayside分级进行亚组分析，分析其对PPF的影响。结果:PPF组和对照组患者的性别、年龄、体质指数（body mass index，BMI）、手术侧别等基线资料的差异均无统计学意义。两组患者下肢力线的差异无统计学意义（χ 2=1.019， P=0.601），假体类型的差异无统计学意义（χ 2=1.545， P=0.214），有无Notch比例的差异亦无统计学意义（χ 2=3.548， P=0.060）。PPF组Notch的长度为（4.5±2.7） mm，对照组为（4.9±2.8） mm，差异无统计学意义（ t=0.732， P=0.465）。进一步以Notch深度为3 mm为界及Tayside分级进行亚组分析，两组患者Notch深度分组（χ 2=11.262， P=0.004）及分级（χ 2=14.601， P=0.003）的差异均有统计学意义；与无Notch的患者相比，当Notch深度>3 mm时PPF的风险更高，比值比（odds ratio， OR）为4.88（95% CI为1.76，13.51）。当Notch深度达到Tayside分级3级或4级时，PPF的发生率会更高；与无Notch的患者相比，Tayside分级达到3级时发生PPF的风险将增加6.99倍（95% CI为1.85，26.32）。女性患者中PPF组与对照组间有无Notch比例的差异有统计学意义（χ 2=3.956， P=0.047），存在Notch的女性患者发生PPF的风险更高， OR为2.33（95% CI为1.01，5.43）。行右侧TKA的患者中，PPF组与对照组间有无Notch比例的差异有统计学意义（χ 2=5.502， P=0.019），存在Notch的右侧手术患者PPF的风险更高， OR为3.58 （95% CI为1.19，10.75）。 结论:Notch对初次全膝关节置换术后股骨侧PPF的发生无明显影响，但当Notch深度>3 mm或Tayside 3级以上时股骨侧PPF的发生风险会明显增加。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) SNHG16通过微小RNA(miR)-455-3p/Nocth2对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的影响及其机制。方法:选取2017年6月到2021年6月新乡市中心医院收治的51例鼻咽癌及其癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织lncRNA SNHG16和miR-455-3p表达水平。采用慢病毒建立lncRNA SNHG16敲降稳定细胞系SNHG16 KD组和对照组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力和体内成瘤能力。采用流式细胞术分析两组细胞凋亡水平；采用流式细胞术分析细胞周期变化；采用生物信息学和生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA SNHG16靶基因。组间数据比较采用 t检验。 结果:癌旁组织lncRNA SNHG16表达水平(0.89±0.09)明显低于鼻咽癌组织lncRNA SNHG16表达水平(2.11±0.22)，差异有统计学意义( t＝36.260， P<0.05)。对照组细胞吸光度( A)值(1.93±0.06)明显高于SNHG16 KD组(1.27±0.06)，差异有统计学意义( t＝18.350， P<0.05)。对照组细胞在裸鼠体内成瘤体积[(904.94±39.53) mm 3]明显高于SNHG16 KD组细胞成瘤体积[(742.82±97.80) mm 3]，差异有统计学意义( t＝4.860， P<0.05)。对照组细胞成瘤重量[(4.70±0.46) g]明显高于SNHG16 KD组细胞[(2.22±0.18) g]，差异有统计学意义( t＝15.960， P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(4.07±1.34)%]明显低于SNHG16 KD组细胞[(26.79±5.16)%]，差异有统计学意义( t＝10.430， P<0.05)。对照组细胞G 0/G 1期比例[(31.56±3.27)%]明显高于SNHG16 KD组细胞[(45.96±1.72)%]，差异有统计学意义( t＝9.5201， P<0.05)。lncRNA SNHG16是miR-455-3p的海绵。对照组细胞miR-455-3p表达水平(1.19±0.10)明显低于SNHG16 KD组细胞(2.15±0.15)，差异有统计学意义( t＝13.040， P<0.05)。对照组细胞Notch2表达水平(0.93±0.05)明显高于SNHG16 KD组细胞(0.44±0.06)，差异有统计学意义( t＝13.040， P<0.05)。 结论:lncRNA SNHG16海绵吸附miR-455-3p，进而调控Nocth2表达水平，调节鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期。

基于形态学和分子系统学方法,对1974、2019-2023年间采自雅鲁藏布江下游(我国实际控制区内,下同)的403尾鮡科鱼类标本进行分类整理.标本检视结果及结合历史记录表明,雅鲁藏布江下游共分布有鮡科鱼类6属10种,即黑斑原鮡Glyptosternon maculatum(Regan 1905)、穴形纹胸鮡Glyptothorax cavia(Hamilton 1822)、墨脱纹胸鮡G.medogensis Chen&He sp.nov.、疑似细体纹胸鮡G.cf.gracilis(Günther 1864)、稀有纹胸鮡G.rara Chen&He sp.nov.、西仁褶鮡Pseudecheneis sirenica Vishwanath&Darshan 2007、扁头异鮡Creteuchiloglanis kamengensis(Jayaram 1966)、细尾鰋Exostoma tenuicaudatum Tamang,Sinha&Gurumayun 2015、西藏鰋E.tibetanum Gong,Lin,Liu&Liu 2018和无斑平唇鮡Parachiloglanis immaculata Chen&He sp.nov..新种墨脱纹胸鮡是安氏纹胸鮡G.annandalei Hora 1923种名的修订,其偶鳍具羽状皮褶,项背骨前突与上枕骨棘相离,腹鳍起点位于背鳍基后缘垂直下方之后,腹鳍末端远离臀鳍起点,更细的尾柄,以及更长的头长等联合特征区别于同属其他物种.新种稀有纹胸鮡其偶鳍腹面光滑,无羽状皮褶;胸部吸着器心形,皮纹向前延伸至咽部,附着器后缘中部微陷、开放,皮纹不明显;臀鳍不分枝鳍条11根;项背骨前突与上枕骨棘间隔距离远;上颌须延伸超过胸鳍基末端,达胸鳍长的1/2处,其长为头长的134.2%等特征区别于同属其他种.新种无斑平唇鮡是霍氏平唇鮡P.hodgarti(Hora 1923)种名修订,其上颌齿带两侧向后延伸,内侧内凹,呈弯月形,横向宽约为纵向深的2倍;下颌齿带前缘和后缘中部微凹,左右两块紧靠,无明显间隔;鳃孔下角限于胸鳍基前1/3处;脂鳍末端游离,与尾鳍起点有一缺刻;胸鳍分枝鳍条16-17根;尾鳍末端明显内凹;侧线明显,侧线孔周围具白色稀疏圆点,体表和各鳍无明显的斑纹等特征有别于同属其他物种.穴形纹胸鮡为我国新记录种.西仁褶鮡为黄斑褶鮡P.sulcata(McClelland 1842)种名的修订.文章对10种鮡科鱼类的主要鉴别特征进行了描述,并编制了属种分类检索表.

目的 探讨局部应用傅山风湿外治方对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠炎性细胞因子和Notch2表达的影响.方法 雌性Wistar大鼠36只,随机分为正常组10只,造模组26只,成功构建CIA模型20只,随机平均分配为模型组、傅山风湿外治方组各10只.第14天开始,傅山风湿外治方组将0.4 mL药膏均匀涂抹于大鼠踝关节.正常组和模型组给予等体积生理盐水局部涂抹.每天更新2次,连续42天.每周观察大鼠关节肿胀情况进行关节炎指数评分.干预结束后,取大鼠腹主动脉血、踝关节、脾脏和肝肾组织.HE染色评估关节炎严重程度及踝关节和肝肾组织病理变化;ELISA检测血清炎性细胞因子表达;qRT-PCR和Western blot检测踝关节滑膜和脾脏Notch2、Delta-like配体蛋白 1(Delta-like ligand protein-1,DLL1)和核因子-κBp65(Nuclear factor-κBp65,NF-κBp65)mRNA和蛋白表达,并利用免疫组织化学法检测其在踝关节的阳性表达;检测各组大鼠血清肝肾功能水平变化.结果 与正常组相比,模型组关节炎指数评分升高(P<0.01),关节损伤增加,病理学评分升高(P<0.01),血清炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-17和IFN-γ水平升高(P<0.01),大鼠踝关节和脾脏Notch2、DLL1和NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达升高(P<0.01),踝关节阳性表达增多(P<0.01);与模型组相比,傅山风湿外治方组关节炎指数评分下降(P<0.05,P<0.01),关节损伤减轻,病理学评分降低(P<0.01),血清炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-17和IFN-γ水平下降(P<0.01),大鼠踝关节和脾脏中Notch2、DLL1和NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达降低(P<0.01),踝关节阳性表达减少(P<0.01),肝肾组织均未见明显的病理损伤,血清天冬氨酸转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、丙氨酸转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(Creatinine,Cr)水平无显著变化(P>0.05).结论 傅山风湿外治方可缓解CIA大鼠的关节炎症状,减轻关节损伤,且对肝肾无毒副作用,其作用机制可能与降低炎性细胞因子,下调Nocth2通路有关.

目的:研究小细胞肺癌患者血清降钙素原(PCT)含量与癌细胞浸润性生长及血管新生的关系.方法:选择2015年3月~2017年6月梅州市蕉岭县人民医院诊断为小细胞肺癌的患者作为研究的SCLC组,同期体检的健康志愿者作为对照组.取血清并测定PCT 含量,取穿刺活检的肿瘤病灶组织和瘤旁病灶组织并测定增殖基因、侵袭基因、血管新生基因的表达量.结果:SCLC组患者血清中PCT的含量显著高于对照组;肿瘤病灶组织中 HOXA13、CyclinD1、MDM2、MMP9、Vimentin、N-cadherin、VEGF、VE-cadherin、EGFL8、Nestin的 mRNA 表达量显著高于瘤旁病灶组织,Nocth3、Rb、Bin1、E-cadherin的mRNA表达量显著低于瘤旁病灶组织;差异均有统计学意义(P<0.05).SCLC患者血清中PCT 的含量与肿瘤病灶组织中 HOXA13、CyclinD1、MDM2、MMP9、Vimentin、N-cadherin、VEGF、VE-cadherin、EGFL8、Nestin的mRNA表达量呈正相关,与Nocth3、Rb、Bin1、E-cadherin的mRNA表达量呈负相关.结论:小细胞肺癌患者血清PCT 含量的异常升高与病灶内癌细胞浸润性生长及血管新生密切相关.

目的 对4例NOTCH3基因突变的遗传性脑小血管病患者的临床及认知特点进行分析比较.方法 回顾性收集2015年5月-2017年9月天津市环湖医院神经内科收治的4例NOTCH3基因突变的遗传性脑小血管病患者的临床资料,分析其首发症状、临床表现、影像学检查、辅助检查、基因检测及相关神经心理学评估等方面的特点.结果 4例NOTCH3基因突变的患者中2例以急性缺血性卒中,1例以认知功能障碍,1例以头晕头痛就诊,其中1例患者除了有急性卒中症状外还伴有家族性秃头和腰痛.4例患者中2例伴有脑血管病危险因素.4例患者头颅MRI均可见不同程度皮质下脑白质损害,但部位不完全相同.4例患者基因检测分别在19号染色体NOTCH3基因3号,4号,20号,11号外显子发生杂合突变.4例患者神经心理学评估均提示存在认知功能障碍,主要在执行功能、语言、抽象能力及延迟回忆方面分值降低,而在定向力、计算力、命名、注意力等方面降低不明显.结论 NOTCH3基因突变的遗传性脑小血管病患者在临床特征方面有各自不同的特点,个体间存在异质性.

目的 检测Notch信号通路在激活和失活状态下,鼠膝骨关节软骨细胞中Notch1、Bax和Bcl-2基因的表达情况,探讨Notch信号通路在大鼠膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞凋亡中的作用机制.方法 选取34只无特定病原体级Sprague Dawley大鼠,其中32只使用Hulth方法制造右膝OA模型,余下2只正常饲养.4周后,造模大鼠随机选择2只以及正常饲养的2只大鼠全部处死,观察右膝软骨的形态变化,并进行病理检查证实造模成功,余下的30只大鼠随机分成激活组、抑制组、空白对照组,每组10只.于每周星期二、五行大鼠膝关节腔注射,其中激活组注射Nocth信号通路特异性激活剂Jagged1蛋白25 ng/kg,抑制组注射γ分泌酶抑制剂DAPT (GSI-IX) 100 ng/kg,空白对照组注射同体积磷酸盐缓冲液.关节腔注射8周后全部处死大鼠,取右膝股骨髁关节骨软骨标本,大体观察3组大鼠膝关节软骨的退变程度,行光学显微镜下组织形态学观察及Mankin评分,并采用免疫组织化学检测各组软骨细胞中Notch1、Bax和Bcl-2蛋白的表达情况.结果 关节腔注射8周后,抑制组、空白对照组、激活组Mankin评分分别为(3.40±0.84)、(6.70±0.95)、(11.10±1.37)分,组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).抑制组大鼠膝关节软骨的Notch1、Bax阳性率均低于空白对照组及激活组(P＜0.05),Bcl-2阳性率高于空白对照组及激活组(P＜0.05).结论 Notch信号通路激活后可能通过凋亡途径上调Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白,从而促进软骨细胞凋亡,加重OA;Notch信号通路抑制后可能通过凋亡途径下调Bax蛋白,上调Bcl-2蛋白,从而抑制软骨细胞凋亡,减轻OA发展.

目的 探讨微小核苷酸-211(microRNA-211,miR-211)与 β-晶体蛋白B2(β-crystalin B2)参与的年龄相关性白内障的作用及其机制.方法 通过CCK-8以及流式细胞术检测不同浓度双氧水或不同表达miR-211后HLEC-3细胞活性的变化.生物信息学方法预测miR-211与Notch2潜在的结合位点.Westren blot以及逆转录定量PCR(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检不同表达miR-211后HLEC-3细胞中Nocth2蛋白以及Mrna的变化.采用荧光素酶报告方法确认miR-211与Notch2的靶向性.Western blot检测单独miR-211或共表达miR-211+Notch2或低表达Notch2后 β-crystallin B2蛋白的变化.结果 过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2 O2)能够明显降低HLCE-3细胞的活性(t=3.67,P<0.05).下调miR-211可以明显抑制H 2 O2诱导的晶状体上皮细胞(HLEC-B3)凋亡(t=4.07,P<0.05);上调miR-211则可以显著地加重氧化因子表达(t=4.21,P<0.05).同时,荧光素酶(luciferase)和Western blot研究实验表明,上调miR-211靶向抑制Notch2的表达(t值分别为4.02和3.90,P值均<0.05).与此相一致的是,下调miR-211则可以恢复Notch2的蛋白表达水平(t=4.04,P<0.05).除了Notch2之外,miR-211 inhibitor也可以增加 β-crystallin B2的表达,而沉默Notch2表达后,则可以明显抑制由miR-211 inhibitor引起的 β-crystallin B2表达升高(t值分别为4.20,4.19和4.15,P值均<0.05).结论 miR-211靶向调控Notch2表达使β-crystallin B2的表达增加,表明miR-211可能是治疗年龄相关白内障的潜在药物靶点.