目的:探讨代谢综合征(MS)与复发性急性胰腺炎(RAP)之间的相关性。方法:回顾性收集2012年6月1日至2023年6月1日就诊于重庆医科大学附属第一医院的463例RAP患者(复发组)，以及计算机随机抽取463例同期就诊的未复发的急性胰腺炎患者(未复发组)的临床资料。复发组患者初发和复发急性胰腺炎均就诊于重庆医科大学附属第一医院。分析两组之间合并MS及其各组分[肥胖(体重指数≥25 kg/m 2)、空腹血甘油三酯≥1.7 mmol/L、高血压、高血糖、空腹血高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)<1.04 mmol/L]患者占比的差异。统计学方法采用卡方检验。采用二元logistic回归分析影响AP复发的危险因素。 结果:复发组463例患者中，MS患者221例(47.7%)，肥胖患者276例(59.6%)，高血压患者223例(48.2%)，高血糖患者185例(40.0%)，空腹血甘油三酯≥1.7 mmol/L患者365例(78.8%)。未复发组463例患者中，MS患者95例(20.5%)，肥胖患者245例(52.9%)，高血压患者115例(24.8%)，高血糖患者92例(19.9%)，空腹血甘油三酯≥1.7 mmol/L患者301例(65.0%)。复发组中MS、肥胖、高血压、高血糖、空腹血甘油三酯≥1.7 mmol/L患者占比均高于未复发组，差异均有统计学意义( χ2＝76.27、4.22、54.35、44.55、21.90， P<0.001、＝0.040、<0.001、<0.001、<0.001)，复发组与未复发组空腹血HDL-C<1.04 mmol/L患者占比[68.5%(317/463)比65.4%(303/463)]比较差异无统计学意义( P>0.05)。二元logistic回归分析结果显示，合并MS[ OR＝3.538，95%置信区间(95% CI) 2.647～4.728]、高血压( OR＝2.700，95% CI 2.025～3.602)、高血糖( OR＝2.228，95% CI 1.633～3.039)、空腹血甘油三酯≥1.7 mmol/L ( OR＝1.757，95% CI 1.276～2.421)增加AP反复发作的风险，均有统计学意义( P<0.001、<0.001、<0.001、＝0.001)；肥胖不是AP复发的独立危险因素( OR＝0.967，95% CI 0.727～1.286， P＝0.816)。 结论:合并MS、高血压、高血糖及空腹血甘油三酯≥1.7 mmol/L是AP反复发作的独立危险因素。

目的:探讨昼夜不同时间对犬行右心房快速起搏（RAP）观察其对心房颤动（房颤）诱发情况及自主神经重构的影响。方法:18只杂种犬按随机数字表法均分为白天起搏组（D组）、夜间起搏组（N组）和对照组（C组），各6只。其中，D组起搏时间为6：00至18：00，N组为18：00至次晨6：00，C组为装入起搏器不起博。所有犬饲养8周后测定其心率变异性（HRV）、各部位不应期（ERP）及房颤诱发情况，同时测定血清及心房组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和乙酰胆碱（ACh）水平，心房组织中交感神经（TH）和副交感神经（ChAT）的表达情况，以观察昼夜心房刺激对炎性因子及神经重构的影响。结果:8周后，D组和N组HRV各参数除低频（LF/HF）外均显著高于C组，且D组亦明显高于N组，而C组中HRV各参数与基线期比较差异无统计学意义（均 P<0.05）。D组各部位ERP均显著低于N组，ERP离散度（dERP）则高于N组[（27.33±5.16）ms对（17.67±6.86）ms， P<0.05]；与C组比较，N组各部位ERP均较低且dERP较高[（17.67±6.86）ms对（9.50±3.27）ms， P<0.05]。D组的房颤诱发率显著高于N组和C组[（70.37%±18.14%）对（46.30%±19.14%），（11.11%±0.99%），均 P<0.05]。与N组和C组比较，D组犬RAP可明显升高ChAT、TNF-α和IL-6，降低TH和ACh水平。 结论:长期间断白天心房RAP较夜间RAP更易诱发犬心房电重构和神经重构，进而促进房颤发展。

Background::Long non-coding RNA colon cancer-associated transcript 1 (CCAT1) is involved in transforming multiple cancers into malignant cancer types. Previous studies underlining the mechanisms of the functions of CCAT1 primarily focused on its decoy for miRNAs (micro RNAs). However, the regulatory mechanism of CCAT1–protein interaction associated with tumor metastasis is still largely unknown. The present study aimed to identify proteome-wide CCAT1 partners and explored the CCAT1–protein interaction mediated tumor metastasis.Methods::CCAT1–proteins complexes were purified and identified using RNA antisense purification coupled with the mass spectrometry (RAP-MS) method. The database for annotation, visualization, and integrated discovery and database for eukaryotic RNA binding proteins (EuRBPDB) websites were used to bioinformatic analyzing CCAT1 binding proteins. RNA pull-down and RNA immunoprecipitation were used to validate CCAT1–Vimentin interaction. Transwell assay was used to evaluate the migration and invasion abilities of HeLa cells.Results::RAP-MS method worked well by culturing cells with nucleoside analog 4-thiouridine, and cross-linking was performed using 365 nm wavelength ultraviolet. There were 631 proteins identified, out of which about 60% were RNA binding proteins recorded by the EuRBPDB database. Vimentin was one of the CCAT1 binding proteins and participated in the tumor metastasis pathway. Knocked down vimetin ( VIM) and rescued the downregulation by overexpressing CCAT1 demonstrated that CCAT1 could enhance tumor migration and invasion abilities by stabilizing Vimentin protein. Conclusion::CCAT1 may bind with and stabilize Vimentin protein, thus enhancing cancer cell migration and invasion abilities.

目的 解析治疗结直肠腺瘤(CRA)的临床验方参白解毒方(SBJDD)化学成分并探究其防治CRA癌变的潜在机制.方法 建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)检测方法,分析SBJDD水煎液及口服该方大鼠的血浆样品中化学成分;基于网络药理学方法筛选SBJDD在CRA癌变不同阶段的潜在活性成分,探究其抗CRA癌变作用机制;开展体外实验验证SBJDD抗CRC作用机制.结果 在SBJDD水煎液和大鼠口服该方后的血浆样品中分别鉴定出 152 和 41 种化学成分.网络药理学结果表明,在结直肠上皮炎症(CREI)阶段,SBJDD中潜在活性成分Epiberberine和Kushenol H等可能通过作用于PIK3CA、MAPK3 和PIK3CB等靶点,影响PI3K-AKT和Ras等信号通路,调控与蛋白质磷酸化和信号转导等相关的生物过程;在CRA阶段,该方中活性成分3,7-Dihydroxycoumarin、Palmatine和Kushenol A等可能通过靶向AKT和EGFR等靶点,影响HIF-1、Rap1 等信号通路,调控细胞凋亡和细胞增殖等生物过程;在CRA癌变阶段,3,7-Dihydroxycoumarin等潜在活性成分可能通过作用于TP53 等靶点,影响PI3K-AKT和甲状腺激素等信号通路,调控RNA聚合酶Ⅱ启动子转录和细胞凋亡等生物过程;在CRC阶段,p-Coumaric acid等潜在活性成分通过作用于PRKCB等靶点,影响EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性和PI3K-AKT等信号通路,调控细胞凋亡和信号转导等生物过程.体外研究表明,SBJDD显著抑制HT29 细胞增殖,并抑制EG-FR和PKC蛋白的表达.结论 SBJDD中化学成分主要由生物碱、有机酸和黄酮类成分组成,方中成分在CRA癌变的不同阶段中与不同的靶点结合,调节相关的信号通路,产生治疗效果.

目的 探讨黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂(别嘌醇与非布司他)对家兔快速心房起搏(RAP)房颤模型心房电重构的影响.方法 24只健康雄性新西兰白兔,随机分为4组,假手术组(S组)、快速心房起搏组(P组)、快速心房起搏-别嘌醇干预组(ALL组)及快速心房起搏-非布司他干预组(FP组).使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中超敏C反应蛋白(hs-CRP)、生长分化因子-15(GDF-15)、半乳糖凝集素-3的活性及左心房组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、XO、黄嘌呤脱氢酶(XDH)的活性.在起搏之前及4周的RAP之后分别进行电生理检查,测定基础起搏周长为200ms时的心房有效不应期(AERP 200)和房颤诱发率.实时荧光定量聚合酶链式反应及蛋白质印记法检测钙离子电压门控通道亚基α 1 C(Cav1.2)、钾离子电压门控通道亚族D3(Kv4.3)的信使RNA(mRNA)和蛋白表达.采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析.根据数据类型分别采用单因素方差分析或x2检验进行组间比较.结果 与S组相比,P组SOD活性明显降低,XO、XDH、hs-CRP、GDF-15及半乳糖凝集素-3水平显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).应用XO抑制剂后,SOD活性回升明显,XO、hs-CRP、GDF-15及半乳糖凝集素-3活性均显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).FP组SOD显著高于ALL组,XDH、hs-CRP、GDF-15及半乳糖凝集素-3活性显著低于ALL组,差异均有统计学意义(P＜0.05);但FP组与ALL组XO水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).此外,FP组XDH水平明显低于P组,差异有统计学意义(P＜0.01),但ALL组XDH水平与P组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).RAP后P组的AERP200明显低于S组(P＜0.01),然而FP组的AERP200显著高于P组和ALL组(P＜0.05).除S组外,P组、ALL组和FP组在RAP后的房颤诱发率均显著高于起搏之前基线状态下的房颤诱发率(P＜0.05);应用XO抑制剂干预后,房颤诱发率有一定程度的降低,在FP组尤为明显.RAP可导致左心房组织中Cav1.2和Kv4.3mRNA及蛋白表达水平下调,但是应用XO抑制剂干预可部分抑制这些改变,在FP组尤为明显.结论 XO抑制剂(尤其是非布司他)可能通过减轻炎症反应和氧化应激损伤,抑制左心房组织中Cav1.2、Kv4.3表达水平的下调,进而延长AERP,降低房颤诱发率,改善心房电重构.

目的:基于网络药理学与实验验证探讨玉肤解毒膏治疗卡培他滨所致手足综合征(HFS)的作用机制.方法:采用高效液相色谱仪鉴定玉肤解毒膏化学成分;通过TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction数据库筛选玉肤解毒膏活性成分及作用靶点;通过String平台进行蛋白互作网络分析;GeneCards数据库筛选HFS相关靶点;使用Metascape数据库对交集靶点进行基因本体(GO)富集功能分析、京都基因与基因百科组全书(KEGG)通路富集分析;运用AutoDocktools软件对活性成分及核心靶点进行分子对接验证.构建HFS大鼠模型,通过蛋白免疫印迹法检测比较玉肤解毒膏和尿素软膏对HFS大鼠足跖部皮肤中组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)、Toll样受体4(TLR4)蛋白表达水平的影响.结果:共筛选得到玉肤解毒膏活性成分97个,成分作用靶点304个,与HFS交集靶点45个.关键靶点主要富集在Toll样受体信号通路、中性粒细胞胞外陷阱形成、Rap1通路等信号通路.活性成分龙血素A、漆黄素、乔松素、紫檀芪、芫花素与核心靶点HDAC6、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、组织蛋白酶D(CTSD)具有较好的结合活性和稳定性.玉肤解毒膏可显著降低HFS大鼠足跖部皮肤中HDAC6、TLR4蛋白表达水平.结论:玉肤解毒膏可能通过调控HDAC6、TLR4表达而降低神经炎症反应,发挥治疗HFS的作用.

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)和网络药理学探讨姜栀子及栀子炭功效改变的物质基础及作用机制.方法:采用UPLC-Q-TOF-MS分析鉴定姜栀子和栀子炭中的化学成分,通过与文献质谱数据对比分析,对姜栀子和栀子炭中的化学成分进行鉴定.运用网络药理学方法构建不同栀子炮制品产生不同功效的"有效成分-靶点-通路",通过网络节点度值筛选栀子不同炮制品产生不同功效的核心成分和关键靶点.结果:与生栀子相比,姜栀子与栀子炭中的成分数量均发生减少,其中生栀子共鉴定出42个化合物,姜栀子共鉴定出39个化合物,栀子炭中共鉴定出26个化合物.网络药理学预测姜栀子止呕的作用机制主要涉及PI3K-Akt、Rap1、Ras、C型凝集素受体、催乳素、ErbB等信号通路.栀子炭止血的作用机制主要涉及AGE-RAGE,磷脂酶D、鞘脂、Rapl、松弛素、Fc epsilon RI、ErbB、C型凝集素受体、TNF、VEGF等多条信号通路.结论:姜栀子和栀子炭均可通过多成分、多靶点、多通路的综合作用其功效发生改变,该研究可为栀子炮制品临床应用奠定科学基础.

背景:课题组前期研究发现气虚血瘀证是脊髓型颈椎病各种中医证型中的主要证型.然而,用于气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄向脊髓型颈椎病转化的早期诊断蛋白组学标志物未见相关报道.目的:探讨发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病的血清蛋白组学差异质,寻找并鉴定两者之间的潜在血清生物学标志物.方法:分别采集气虚血瘀证脊髓型颈椎病患者(实验组)血清9例、气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄(对照组)血清9例,选用同位素相对标记与绝对定量技术(TMT)联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术进行蛋白组学分析,以此寻找并鉴定差异表达的蛋白质.结果与结论:①TMT技术共筛选出有意义差异蛋白1 027种,最终鉴定出显著性差异蛋白89种(P<0.05),其中与对照组比较,实验组中α-肌动蛋白4、α-肌动蛋白1、细胞分裂控制蛋白42同系物、整合素连接蛋白激酶、Β-肌动蛋白等 45种蛋白表达上调;纤维连接蛋白、纤维蛋白原γ链、纤维蛋白原α链、纤维蛋白原β链等44种蛋白表达下调;②基于GO富集分析,这些差异蛋白参与了信号受体结合、激酶结合、蛋白激酶活性、整合素结合、肌动蛋白丝结合等分子功能;③KEGG 通路分析,筛选20条主要共同差异信号/代谢通路,分别为粘着斑、紧密连接、Rap1信号通路、血小板活化、肌动蛋白细胞骨架的调节等信号通路;④PPI分析表明,气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病之间的共同差异蛋白中ILK,FGA,FGB,FGG,FN1,CDC42,ACTN1,ACTN4,ACTB等位于蛋白质互作网络的节点,且与骨生成与破坏系统、神经系统、凝血系统、细胞炎症等系统关系密切;⑤结论:采用TMT联合LC-MS/MS技术成功筛选出了气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病之间的血清差异表达蛋白质,明确了ILK、FN1、CDC42、ACTN4是气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄向脊髓型颈椎病转化的特异性标志物,为进一步阐明其转化机制提供了依据.

目的 通过UHPLC-Q-Exactive-MS/MS结合网络药理学和分子对接方法探讨泻肺利水汤治疗心力衰竭的主要活性成分、靶点及作用机制.方法 利用UHPLC-Q-Exactive-MS/MS 快速鉴定泻肺利水汤水提物的化学成分,SwissADME筛选可能具有活性的成分,SwissTargetPrediction数据库预测成分潜在的作用靶点,GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD等数据库筛选心力衰竭疾病相关靶点.将药物靶点与疾病靶点取交集,构建"药物-活性成分-靶点"调控图,构建蛋白互作网络,筛选出核心基因,利用R语言对核心作用靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析,最后利用分子对接技术进行初步验证.结果 共鉴定化合物82个,黄酮类37个,酚酸类10个,香豆素类7个,生物碱类5个,皂苷类5个,其他类18个;网络药理学研究筛选出活性成分37个,药物-疾病共同靶点135个;PPI及网络分析显示TNF、AKT1、EGFR、VEGFA、ESR1等5个靶点为主要作用靶点,PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、癌症中的蛋白聚糖、Rap1信号通路为主要信号通路.分子对接结果表明,主要活性成分及核心靶点之间具有良好的亲和力.结论 本研究初步揭示了泻肺利水汤是通过多成分、多靶点、多通路的机制治疗心力衰竭,为其进一步开发利用及临床应用提供了生物学信息基础.

目的 研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对食管鳞癌Eca109细胞分泌的外泌体(exosome,Ex)蛋白表达及相关功能和信号通路的影响.方法 纳米液相色谱-串联质谱分析Nano-LC-MS/MS鉴定Pg感染和未感染的Eca109细胞外泌体蛋白,通过生物信息学方法找出差异蛋白,并对差异蛋白进行GO富集分析和KEGG通路分析.结果 Nano-LC/MS分析检测到Pg-Ex和Ex分别有729、952种蛋白质,与Ex相比,Pg-Ex有387个蛋白表达上调、294个蛋白表达下调.这些差异蛋白主要参与调节细胞增殖、分化、黏附、迁移、血管生成、趋化、免疫反应等生物过程;富集在肿瘤中心碳代谢、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、Rap1信号通路、缝隙连接、Ras信号通路、mTOR信号通路、胰岛素信号通路、cGMP-PKG信号通路、ECM受体相互作用、趋化因子信号通路、VEGF信号通路等信号通路.结论 这些差异蛋白所参与的功能及信号通路提示Pg通过调控肿瘤细胞增殖、迁移、血管生成和免疫反应参与食管癌发生发展.