目的:评估缺氧缺血(HI)自我复苏的新生SD大鼠模型外周血微小RNA(miRNA)指标。方法:3只孕鼠所产幼鼠按窝别分为3组，A组为空白对照组，B组为HI组，C组备用。采用高通量深度测序方法比较对照组和HI组新生4日龄SD大鼠外周血中miRNA的表达谱。应用生物信息学分析研究这些差异表达的miRNA。采用基因本体论(GO)和京都基因与基因组学百科全书(KEGG)分析方法预测相关的细胞信号通路和功能。通过miRBD预测miRNA及与缺氧缺血性脑病(HIBD)相关的靶基因。应用HE染色观察脑组织病理变化。结果:经外周血深度测序后可得到成熟miRNA序列为1 049种。A组miRNA种类为525种；HI组miRNA种类为524种；其中A组有27种miRNA与HI组存在差异，且2组间miRNA种类呈高度相关。HI新生大鼠外周血中有38个miRNA表达异常，并存在显著差异表达(2 -ΔΔCt值>2.5， P< 0.05),其中21个miRNA显著过表达，17个显著低表达。KEGG通路富集分析和GO分析显示这些差异的miRNA与谷氨酸能突触通路、髓鞘脂类代谢、神经活性配体-受体相互作用和血管上皮生长因子(VEGF)信号通路与缺氧/缺血诱导的脑损伤有关，并且过度活化。2组间幼鼠脑组织未见皮质及胼胝体下白质病变、脑室扩大、灰质神经元排列紊乱和明显凋亡。 结论:HI自然复苏模型大鼠外周血中miRNA差异表达提示，miRNA对缺氧缺血有积极的应答。存在高度显著差异的miR-200家族、miR-471家族、miR-429、miR-216和miR-871，与神经系统损伤分子生物学机制有关，有望成为HIBD或HI新的生物学诊断指标，对HI新的治疗靶点的研究探索是有益的。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-200家族在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达，并分析其表达与预后的关系。方法:纳入95例原发ccRCC组织，及其配对的癌旁正常肾组织，另外纳入19例确定为ccRCC远处转移的癌组织。所有组织标本均来自2018年1月至12月，于吉林大学中日联谊医院泌尿外科就诊的ccRCC患者。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析miR-200家族的3个成员：miR-200b、miR-200c和miR-141在ccRCC组织、正常肾组织，以及远处转移灶中的表达，并在肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中进行验证。应用X-tile算法计算miR-200b、miR-200c和miR-141的最佳临界值，并据此将患者分别分为miR-200b、miR-200c和miR-141高表达和低表达组。应用生物信息学方法分析其生物学功能。应用SPSS 19.0统计软件分析，组间比较采用方差分析。miR-200b、miR-200c和miR-141与无病生存期的关系应用COX多因素回归分析进行分析。结果:与正常肾组织比较，肿瘤组织中miR-200b、miR-200c和miR-141的表达(20.51±14.92、13.95±8.61、0.22±0.11)显著降低，差异有统计学意义( F＝5.391、8.443、3.295， P值均<0.01)，在转移灶中，miR-200b和miR-141的表达(12.51±6.79、0.11±0.61)进一步降低，差异有统计学意义( F＝7.047、2.841， P值均<0.01)；miR-200b、miR-200c和miR141与肿瘤大小( F＝13.274、15.557、10.492， P<0.05)、TNM分期( F＝11.399、8.292、9.879， P<0.05)以及肿瘤复发有相关( F＝5.836、6.277、8.519， P<0.05)；miR-200b、miR-200c和miR-141的阳性表达是影响ccRCC患者无病生存期的独立危险因素(miR-200b， HR＝0.41，95% CI＝0.29～0.73， P<0.05；miR-200c， HR＝0.46，95% CI＝0.22～0.87， P<0.05；miR-141， HR＝0.42，95% CI＝0.21～0.81， P<0.05)；三者共同参与了肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)通路、磷脂酰肌醇蛋白聚糖通路(GLYPICAN)通路、血管内皮生长因子(VEGF)通路、GLYPICAN-1网络、质膜雌激素受体(PMER)通路和上皮-间充质转化(EMT)通路。 结论:miR-200b、miR-200c和miR-141三者共同参与了多种肿瘤信号传导通路，可作为ccRCC预后的标志物。

目前恶性肿瘤仍然严重威胁着人类的健康和生命，而微小核糖核酸(microRNAs，miRNAs)的表达水平与多种肿瘤的发生和发展密切相关，可在多种肿瘤的发生中起到促进或抑制的作用。microRNA-429(miR-429)作为miR-200家族的成员之一，它的异常表达可以导致多种肿瘤的发生，促进或抑制肿瘤细胞侵袭、迁移、上皮-间质转化和耐药性。根据肿瘤细胞和组织的不同类型，miR-429可能特异性地作为某些肿瘤的终止子或启动子发挥作用。miR-429的作用机制复杂，可在不同的肿瘤细胞和组织中产生不同的效应，可以抑制肿瘤的发生，也可以促进肿瘤的发生，在一些肿瘤中还显示出矛盾的作用。本文综述了miR-429与恶性肿瘤的关系以及潜在的作用机制，并分析了miR-429作为某些肿瘤的诊断、治疗和预后的生物标志物的意义。

目的:应用生物信息学的方法研究β-微管蛋白亚型TUBB3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其分子调控机制。方法:通过GEO数据集(GEO profile)、转录因子和miRNA调控关系数据库(TransmiR)、综合型的miRNA靶基因数据库(miRWalk)、转录因子结合位点搜索(ConSite)等，研究TUBB3上游转录因子、共表达基因及与其有相互作用的miRNA等，阐明NSCLC中TUBB3表达的分子调控机制及其可能的作用。结果:TUBB3的启动子存在Snail、n-MYC等多个与NSCLC相关的转录因子结合位点。其在转录后水平受到miR-200家族、miR-342-3p、miR-410等miRNA的调控，这些miRNA与NSCLC的增殖与侵袭有关。TUBB3与HDGF、GMPS、MRPL9、PMAIP1和SLBP有共表达行为，受转录因子Snail共同调控。其中SLBP、PMAIP1及转录因子Snail与细胞周期和细胞凋亡存在一定的联系。结论:NSCLC中TUBB3的表达受到多个层面的调控，其可能参与了细胞周期和凋亡，同时与NSCLC细胞增殖与侵袭存在一定的联系。

微小RNA-141(microRNA-141，miR-141)是miR-200家族成员之一，其编码基因位于12号染色体，miR-141的前体pre-miRNA在胞浆内可加工生成miR-141-3p和miR-141-5p两种成熟miRNA。miR-141可以作为癌基因或抑癌基因，通过调节不同的信号转导通路，在多种恶性肿瘤中异常表达，参与恶性肿瘤的增殖、分化、侵袭和转移。与妇科癌症相关的途径有miRNA失调和mRNA表达，miR-141的过度表达导致卵巢癌细胞系对顺铂的耐药性增强从而促进肿瘤的生长，miR-141-3p促进子宫内膜癌细胞的增殖，在子宫内膜癌的发展中可以作为促癌miRNA，宫颈癌和癌前病变组织中miR-141的高表达增加了宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化。本文对miR-141在妇科恶性肿瘤中的相关研究进展进行综述。

子宫内膜异位症(EMs)是一种具有恶性肿瘤特征的良性疾病,严重影响患者的生活质量,增加患者的医疗、经济负担.目前子宫内膜异位症的发病机制不明,临床治疗效果欠佳.近年来发现,miR-200家族在多种疾病的发病中发挥着重要的作用.有研究表明,miR-200家族在EMs中存在差异表达并稳定存在,认为其在EMs发病过程中起重要作用,但作用机制尚不明确.本文就有关miR-200家族与EMs相关性的研究进行综述,为进一步研究及临床治疗EMs提供新思路.

目的 探讨FEZ家族锌指1-反义RNA 1(LncRNA FEZF1-AS1)对肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮-间充质相互作用(EMT)的影响及其作用机制.方法 将转化生长因子-β1(TGF-β1)作用于A549细胞,诱导肺间质纤维化细胞模型,将其分为空白对照组(A549细胞组)和模型组.Western blotting检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达,观察模型复制是否成功;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达.根据实验目的和转染质粒不同,将A549细胞分为空白对照组(Blank组)、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组.CCK-8法检测细胞增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell检测细胞侵袭能力.Western blotting检测细胞E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;qRT-PCR检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达.结果 模型组E-cadherin蛋白相对表达量较空白对照组降低(P＜0.05),N-cadherin及Vimentin蛋白相对表达量较空白对照组升高(P＜0.05);模型组LncRNA FEZF1-AS1 基因相对表达量较空白对照组升高(P＜0.05),miR-200c-3p 基因相对表达量较空白对照组降低(P＜0.05).与Blank组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组细胞增殖、迁移、侵袭能力升高(P＜0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低(P＜0.05).与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组LncRNA FEZF1-AS1基因相对表达量及N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量降低(P＜0.05),E-cadherin蛋白相对表达量升高(P＜0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 组和Blank组miR-200c-3p 基因相对表达量升高(P＜0.05).结论 LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭及EMT过程.

转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)最初被发现在早期非小细胞肺癌(NSCLC)中过表达.MALAT1因其结构的特殊性呈现的半衰期使其在NSCLC组织或血液中被检测到,并在NSCLC发生、发展中起关键作用.MALAT1的表达与NSCLC的肿瘤大小、分期、转移和远处浸润显著相关.MALAT1可促进NSCLC进展,其机制为下调miR-202表达,通过miR-185-5p上调鼠双微体4表达,下调叉头框蛋白P3泛素化影响轧棉厂复合亚基1转录;靶向miR-374b-56上调富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子7表达;靶向miR-200a上调锌指E盒结合同源盒因子家族表达.因此,MALAT1可作为NSCLC患者早期诊断、病情评估、预后预测的生物标志物.

目的 探讨FEZ家族锌指1-反义RNA1(LncRNA FEZF1-AS1)靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞HLF生物学行为的影响.方法 采用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLF向肌成纤维细胞转化,分为空白对照组(Blank组)和造模组(HLF+TGF-β1组),另根据转染质粒不同将细胞分为Blank组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组和TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组.采用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p的表达.采用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力;采用双萤光素酶实验检测FEZF1-AS1与miR-200c-3p的靶向作用关系.结果 与Blank组比较,HLF+TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达及LncRNA FEZF1-AS1表达水平升高,miR-200c-3p表达水平降低(P＜0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,LncRNA FEZF1-AS1表达及α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达水平降低,miR-200c-3p表达水平升高(P＜0.05);FEZF1-AS1与miR-200c-3p基因序列上存在结合位点.结论 LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进特发性肺间质纤维化的发生、发展.

目的 探讨妊娠期高血压患者GATA结合蛋白3(GATA-3)、可溶性白细胞抗原 Ⅰ类分子(sHLA-Ⅰ)、三磷酸肌醇受体(IP3R)、微小核糖核酸-15b(miR-15b)水平变化及意义.方法 选取2021年5月-2022年8月金华市中心医院收治的妊娠期高血压患者70例,同期在该院建档并分娩的50例健康产妇为健康对照组.纳入本研究后采集空腹外周静脉血4 ml,分娩后取胎盘组织约200 mg.酶联免疫吸附法检测血清GATA-3、sHLA-Ⅰ浓度;Western blot检测胎盘组织中IP3R表达;RT-PCR 检测血清 miR-15b 表达.结果 妊娠期高血压组血清 GATA-3(35.16±2.18)ng/L、sHLA-Ⅰ(21.31±2.85)U/ml 明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);妊娠期高血压组胎盘组织中IP3R相对表达量(1.63±0.18)、miR-15b相对表达量(1.71±0.35)明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).有妊娠期高血压史、高血压家族史的妊娠期高血压患者血清GATA-3、sHLA-Ⅰ浓度明显低于无妊娠期高血压史、无高血压家族史的患者,胎盘组织中IP3R、miR-15h表达水平明显高于无妊娠期高血压史、无高血压家族史的患者,差异均有统计学意义(均P＜0.05).GATA-3、sHLA-Ⅰ、IP3R及miR-15b水平在不同年龄、体质量指数、孕产情况的妊娠期高血压患者间比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).妊娠期高血压组不良母婴结局的发生率明显高于健康对照组,其中早产、胎儿生长受限、胎儿窘迫及产后出血发生率明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).母婴结局不良的妊娠期高血压患者血清GATA-3(38.14±2.53)ng/L、sHLA-Ⅰ(23.45±2.68)U/ml明显高于母婴结局良好患者,胎盘组织中IP3R相对表达量(1.51±0.18)、miR-15b相对表达量(1.48± 0.29)明显低于母婴结局良好患者,差异均有统计学意义(均P＜0.05)ROC曲线分析显示,GATA-3、sHLA-Ⅰ、IP3R及miR-15b对妊娠期高血压患者母婴结局均具有较高的预测价值(P＜0.01);其中各指标联合检测对妊娠期高血压患者母婴结局的预测价值最高.结论 妊娠期高血压患者血清GATA-3、sHLA-Ⅰ浓度明显降低,胎盘组织中IP3R、miR-15b表达水平明显升高,联合检测可用于母婴结局的预测.