目的:研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法:通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果:与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低( P<0.05)，VDAC1表达显著升高( P<0.05)，Bcl-2表达下调( P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调( P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低( P<0.05)，而ROS水平显著升高( P<0.05)，细胞凋亡率显著升高( P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调( P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调( P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高( P<0.05)，ROS水平显著降低( P<0.05)，细胞凋亡率明显降低( P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达( P<0.05)。 结论:miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。

目的:探讨lncRNA UCA1通过调控miR-873-5p表达对体外培养的胶质瘤SHG-44、U87、U251细胞放射敏感性的影响。方法:采用克隆形成实验检测X线照射0、2、4、6、8 Gy SHG-44、U87、U251细胞存活情况，qRT-PCR检测SHG-44、U87、U251细胞中UCA1基因表达。以放射抵抗的U87、U251细胞为研究对象，沉默UCA1表达、过表达miR-873-5p后用克隆形成实验及流式细胞术检测细胞存活分数和细胞凋亡率。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR检测验证UCA1和miR-873-5p的靶向关系。结果:UCA1在U87、U251细胞中表达上调。沉默UCA1或过表达miR-873-5p可抑制U87、U251细胞存活，并促进细胞凋亡。miR-873-5p是UCA1靶基因，UCA1可负性调控miR-873-5p1的表达。抑制miR-873-5p表达可逆转沉默UCA1对胶质瘤细胞放射敏感性的影响。沉默UCA1增加射线对胶质瘤细胞U251移植瘤的抑制作用。结论:沉默UCA1通过上调miR-873-5p表达，抑制胶质瘤细胞存活并促进其凋亡，从而提高胶质瘤细胞放射敏感性。

目的:探究circ_0023990对甲状腺癌细胞放射敏感性的影响及可能机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测2016年8月至2018年11月于河南省人民医院就诊的55例甲状腺癌患者［其中男12例，女43例，年龄（53.3±7.3）岁］癌组织及甲状腺癌细胞系（TPC-1、KTC-1、FTC-133和CAL-62）中circ_0023990的表达，分析癌组织中circ_0023990表达与患者临床病理特征的关系。甲状腺癌细胞TPC-1和KTC-1均分为circ_0023990小干拢RNA（sh-circ_0023990）组、无意义阴性序列（sh-NC）组、sh-circ_0023990+miR-873-5p抑制剂（anti-miR-873-5p）组、sh-circ_0023990+阴性对照序列（anti-miR-NC）组、miR-873-5p组、对照序列（miR-NC）组、miR-873-5p+pcDNA-ANXA2组和miR-873-5p+pcDNA组，克隆形成实验检测细胞放射敏感性；且各组细胞用4 Gy放射线照射后，蛋白质印迹法检测细胞中γH2AX蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0023990与miR-873-5p及miR-873-5p与ANXA2的靶向关系。结果:circ_0023990在甲状腺癌组织表达高于正常组织（2.15±0.09比0.97±0.05， P<0.05），且其表达与甲状腺癌患者肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期密切相关（ P<0.05）。甲状腺癌TPC-1、KTC-1、FTC-133和CAL-62细胞中circ_0023990表达高于正常甲状腺细胞HTori-3（3.16±0.38、2.63±0.28、1.82±0.24、1.71±0.22比1.00±0.10， P均<0.05）。sh-circ_0023990组TPC-1和KTC-1细胞存活分数明显低于sh-NC组（ P<0.05），增敏比分别为2.482、1.643；sh-circ_0023990+anti-miR-873-5p组TPC-1和KTC-1细胞存活分数高于sh-circ_0023990+anti-miR-NC组（ P<0.05），增敏比分别为0.305、0.441。miR-873-5p组TPC-1、KTC-1细胞存活分数低于miR-NC组（ P<0.05），增敏比分别为2.044、1.653；miR-873-5p+pcDNA-ANXA2组TPC-1、KTC-1细胞存活分数高于miR-873-5p+pcDNA组（ P<0.05），增敏比分别为0.496、0.686。4 Gy+sh-circ_0023990组TPC-1和KTC-1细胞中γH2AX蛋白表达高于4 Gy+sh-NC组（2.68±0.27比1.87±0.25，2.46±0.19比1.77±0.14； P均<0.05），4Gy+sh-circ_0023990+anti-miR-873-5p组TPC-1和KTC-1细胞中γH2AX蛋白表达低于4 Gy+sh-circ_0023990+anti-miR-NC组（1.13±0.09比1.69±0.09，1.11±0.08比1.60±0.08， P均<0.05）；4 Gy+miR-873-5p组TPC-1和KTC-1细胞中γH2AX蛋白表达高于4 Gy+miR-NC组（2.35±0.16比1.84±0.14，2.26±0.12比1.77±0.13， P均<0.05），4Gy+miR-873-5p+pcDNA-ANXA2组TPC-1和KTC-1细胞中γH2AX蛋白表达低于4 Gy+miR-873-5p+pcDNA组（1.96±0.12比2.41±0.12，1.92±0.07比2.28±0.12， P均<0.05）。circ_0023990靶向负调控miR-873-5p，而ANXA2是miR-873-5p的靶基因。 结论:circ_0023990在甲状腺癌组织和细胞系中呈高表达，其可能通过靶向调控miR-873-5p/ANXA2轴促进体外甲状腺癌细胞放疗抗性。

目的:分析研究孕早期促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)及微小 RNA-873-5 p(miR-873-5 p)水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性.方法:选取定期产检的 GDM孕妇命名为 GDM组(n=109),另选同期在本院产检的糖耐量正常孕妇为对照组(n=60).收集两组孕妇的一般资料及孕早期实验室检测指标(TSH、TPOAb、miR-873-5p),采用单因素、多因素分析 TSH、TPOAb、miR-873-5p 水平与 GDM 的关系;并绘制 ROC曲线分析血清 TSH、TPOAb、miR-873-5p 水平对 GDM 的预测价值.结果:GDM 组的血清 TSH、TPOAb、miR-873-5p水平均高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05);多因素 Logistic回归分析显示,年龄>30 岁(OR=1.982)、孕前 BMI≥24 kg/m2(OR=2.020)、TSH 升高(OR=2.113)、TPOAb 升高(OR=2.307)及miR-873-5p水平升高(OR=2.059)是发生 GDM的独立危险因素(均 P<0.05);ROC 曲线分析显示,血清 TSH、TPOAb、miR-873-5p及联合检测的曲线下面积(AUC)分别为 0.830、0.829、0.762、0.936,联合检测优于单一检测(P<0.05).结论:TSH、TPOAb及 miR-873-5 p 在 GDM孕妇体内呈高表达,可能成为 GDM发生的辅助预测指标.

目的 探讨血清微小核糖核酸(micro RNA,miRNAs)-873 和微小核糖核酸-138-5p表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤免疫微环境(tumor immune microenvironment,TIME)以及预后的关系.方法 选择 2019 年 2 月～2021 年 2 月重庆医科大学附属巴南医院收治的 108 例NSCLC患者(NSCLC组)和 65例门诊体检的健康志愿者(对照组).实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-873 和miR-138-5p表达,多重免疫荧光染色法检测TIME指标,出院后定期随访.Pearson分析血清miR-873 和miR-138-5p表达与TIME指标的相关性,Kaplan-Meier和COX比例风险回归分析miR-873,miR-138-5p与NSCLC患者预后的关系.结果 与对照组比较,NSCLC组血清miR-873(1.02±0.23 vs 3.15±0.82)和miR-138-5p(1.21±0.26 vs 3.54±0.92)表达降低,差异具有统计学意义(t=-25.426,-24.769,均P＜0.05).TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低中度分化患者血清miR-873 和miR-138-5p表达低于TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、高度分化患者(t=9.615,10.253;6.889,3.361,均P＜0.05).血清miR-873,miR-138-5p表达与PD-1,PD-L1,CD4 和CD8 H值呈负相关(r=-0.418～-0.673,均P＜0.05).低表达miR-873 和miR-138-5p的NSCLC患者OS生存率低于高表达miR-873和miR-138-5p的NSCLC患者(Log-Rankχ2=4.724,5.607,P＜0.05).TNM分期Ⅲ～Ⅳ期是NSCLC患者不良预后的危险因素(P＜0.05),miR-873,miR-138-5p是保护因素(P＜0.05).结论 NSCLC患者血清miR-873和miR-138-5p表达下调,且与TIME以及低生存率有关.

目的 检测妊娠期糖尿病患者血清中miR-873-5p、核内不均一核糖核蛋白K(hnRNPK)的表达,分析二者与糖脂代谢和妊娠结局的关系.方法 回顾性选取2018年4月至2020年4月青岛市妇女儿童医院接收的80例妊娠期糖尿病患者为研究组,另选取年龄相仿、孕周相近的健康孕妇80名为对照组.采用qRT-PCR法检测血清miR-873-5p表达水平,酶联免疫吸附试验检测hnRNP K表达水平,同时检测并比较两组孕妇空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析孕妇血清miR-873-5p、hnRNP K与糖脂代谢指标和不良妊娠结局的相关性.ROC曲线分析血清miR-873-5p和hnRNP K联合对妊娠期糖尿病患者不良妊娠结局的评估效能.结果 研究组的空腹血糖、HbA1c、甘油三酯、总胆固醇、LDL-C、FINS、HOMA-IR、血清miR-873-5p水平均高于对照组,血清HDL-C和hnRNP K水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).妊娠期糖尿病患者血清miR-873-5p表达与空腹血糖、HbA1c、甘油三酯、LDL-C、FINS、HOMA-IR以及不良妊娠结局呈正相关(P＜0.05),与血清hnRNP K和HDL-C呈负相关(P＜0.05).血清hnRNP K与空腹血糖、HbA1c、甘油三酯、LDL-C、FINS、HOMA-IR以及不良妊娠结局呈负相关(P＜0.05),与HDL-C呈正相关(P＜0.05).血清miR-873-5p预测不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)为0.765,灵敏度59.09％,特异度91.67％,血清hnRNP K预测的AUC为0.862,灵敏度93.18％,特异度77.78％,二者联合预测的AUC为0.882,灵敏度86.36％,特异度83.33％.结论 妊娠期糖尿病患者血清miR-873-5p水平升高,血清hnRNP K水平降低,二者与糖脂代谢及不良妊娠结局关系密切.

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)淋巴结转移(lymph node metastasis,LNM)患者在高碘及正常碘水平下的血清外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)差异表达谱,为不同碘水平下PTC LNM的早期鉴别诊断提供参考依据.方法:选取高碘及正常碘PTC LNM+组与PTC LNM-组各5例样本,提取血清外泌体miRNA进行高通量测序,筛选不同碘水平下PTC LNM+组共有的差异表达miRNA.并进行靶基因预测、GO富集分析和KEGG富集分析.结果:高碘和正常碘PTC LNM+组共有的差异表达外泌体 miRNA 有 5 个,其中 hsa-miR-7113-5p、hsa-miR-873-3p、hsa-miR-548q 在不同碘水平下表达情况相反,hsa-miR-616-3p、hsa-miR-5189-5p均表达上调.差异外泌体miRNA调控HIF-1信号通路、神经活性配体-受体的相互作用和GnRH信号通路.结论:血清外泌体hsa-miR-7113-5p、hsa-miR-873-3p、hsa-miR-548q用于筛选PTC LNM时,应区分高碘及正常碘水平;hsa-miR-616-3p、hsa-miR-5189-5p 可用于一般人群 PTC LNM 的早期诊断.

目的 探讨微小-873-5p(miR-873-5p)转染对PYGO2基因表达的调控作用及对膀胱癌细胞5637生长的影响.方法 根据处理不同,膀胱癌细胞分为对照组(转染miR-NC)和实验组(转染miR-873-5p).qRT-PCR检测转染后两组细胞中miR-873-5p表达量.生物信息学预测PYGO2为miR-873-5p可能的靶基因.qRT-PCR检测PYGO2mRNA的表达.构建PYGO2基因的3'UTR野生型及突变型序列双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测.Western blot检测PYGO2及下游靶蛋白的表达.流式细胞术分析细胞周期分布,MTS法和集落形成实验分析细胞活力和增殖能力.结果 实验组中miR-873-5p表达量显著上升(P＜0.01).双荧光素酶报告基因系统结果显示PYGO2是miR-873-5p的靶基因.与对照组相比,实验组细胞中PYGO2 mRNA水平下调58.48％ (P＜0.01).PYGO2及下游靶蛋白表达明显下调.转染miR-873-5p后,细胞周期被阻滞在G0/G1期(P＜0.01),实验组细胞的活力和增殖能力均明显降低(P＜0.05).结论 miR-873-5p通过干扰膀胱癌细胞5637中PYGO2基因的表达,阻滞细胞周期进展,抑制细胞的增殖,可能成为膀胱癌基因治疗的靶标分子.

目的 通过分析缺氧缺血性脑病(HIE)动物模型中信使RNAs(mRNAs)及微小RNAs(miRNAs)差异表达谱明确HIE发病过程中关键miRNAs及其调控途径.方法 18只新生7 d SD大鼠按随机数字表法分为缺氧缺血组及假手术组,每组9只;并进一步按照造模后不同时间分为0 h、1 d、7 d 3个亚组,每个亚组3只.缺氧缺血组大鼠采用改良Rice法制作HIE模型,假手术组大鼠仅分离左侧颈总动脉,不行血管结扎等操作.取2组大鼠大脑皮层120 mg行总RNA提取及质检、测序,建立mRNAs及miRNAs表达谱;同时应用在线靶基因预测软件TargetScan,miRanda和PITA对差异miRNAs和与之对应的同组mRNAs进行匹配,预测其信号通路和相关靶基因.结果 (1)对各组mRNAs测序结果进行富集分析发现,与同时间段假手术组比较,0 h组缺氧缺血大鼠mRNAs的生物学特征主要体现在细胞定位,细胞增殖迁移以及血管发育等方面,与补体、抗原呈递,肿瘤坏死因子信号通路以及细胞因子受体作用有关;1 d组缺氧缺血大鼠生物学特征主要体现在单一生物体信号,应对外界刺激以及血管发育等方面,与补体、抗原呈递,粘附以及细胞外基质受体作用有关;7 d组缺氧缺血大鼠生物学特征主要体现在细胞定位,单一生物体信号以及细胞粘附等方面,与补体、抗原呈递以及细胞因子受体作用相关.(2)将miRNAs测序中差异表达的miRNAs与同组mRNAs测序结果比对后发现rno-miR-181b-5p,rno-miR144-3p,rno-miR-873-5p,rno-miR-411-5p,rno-miR-132-3p,rno-miR-486,rno-miR-127-5p,rno-miR-6321的表达存在差异,且这些miRNAs主要参与HIE不同阶段的炎症反应及神经功能调节.结论 miRNAs可能通过复杂的负性调控网络调节炎症反应和神经功能,进而参与HIE的发生发展.