目的:探究β羟基丁酸（β-hydroxybutyrate，β-HOB）对顺铂（cisplatin，CP）所致肾损伤的保护作用及其机制。方法:10周龄雄性C57BL/6J小鼠被随机分为对照组、CP组和β-HOB+CP组：对照组不做任何处理；CP组和β-HOB+CP组于实验第8天一次性腹腔注射20 mg/kg顺铂制备肾损伤模型；β-HOB+CP组小鼠自实验第1天接受连续10 d的20 mmol/kg β-HOB腹腔注射，CP组连续10 d注射同体积生理盐水；第10天结束实验。HE染色评价肾组织损伤情况；取小鼠外周血测定血清尿素氮、肌酐水平；免疫组化法检测小鼠肾组织丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）及凋亡指标胱天蛋白酶（Caspase3）、剪切型（Cleaved）-caspase3的蛋白表达；Western印迹法检测磷酸化（p）-MAPK/MAPK和p-NF-κB/NF-κB的蛋白相对表达量。体外细胞（HK-2细胞）实验分组：对照组、CP组、β-HOB+CP组及β-HOB+CP+Sappanone A（MAPK-p38激活剂）组。细胞免疫荧光法检测细胞p-MAPK、p-NF-κB、Caspase3和Cleaved-caspase3蛋白表达；流式细胞术检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡；TUNEL染色法检测细胞DNA损伤情况。结果:体内实验结果显示，CP组小鼠肾组织病理损伤评分、血清尿素氮和血清肌酐水平均显著高于对照组（均 P<0.05）；β-HOB+CP组肾组织病理损伤评分、血清尿素氮和血清肌酐水平均显著低于CP组（均 P<0.05）。CP组小鼠肾组织p-MAPK、p-NF-κB、Caspase3及Cleaved-caspase3蛋白表达均显著高于对照组，β-HOB+CP组上述蛋白表达均显著低于CP组（均 P<0.05）。体外实验结果显示，β-HOB+CP组细胞线粒体膜电位显著高于CP组，Caspase3、Cleaved-caspase3、p-MAPK和p-NF-κB蛋白表达、凋亡细胞比例及TUNEL染色阳性细胞数量均显著低于CP组（均 P<0.05）；β-HOB+CP+Sappanone A组细胞线粒体膜电位显著低于β-HOB+CP组，Caspase3和Cleaved-caspase3蛋白表达量、凋亡细胞比例及TUNEL染色阳性细胞数量均显著高于β-HOB+CP组（均 P<0.05）。 结论:β-HOB可减轻顺铂所致的肾损伤，其机制可能与抑制MAPK/NF-κB通路及减少细胞凋亡有关。

目的:探讨3例β-酮硫解酶缺乏症(BKTD)患儿的临床特征和基因变异。方法:回顾性分析河南省儿童医院2018年1月至2022年10月诊治的3例BKTD患儿的临床表现、实验室检查及基因检测资料，分析其临床和基因变异特点。结果:3例患儿均为男性，年龄为7 ～ 11个月，表现为外伤应激、感染后出现精神差、气促、呕吐、抽搐等，均存在重度代谢性酸中毒、血和尿中酮体升高、低血糖、血异戊烯酰肉碱和3-羟基异戊酰肉碱升高、尿2-甲基-3-羟基丁酸和甲基巴豆酰甘氨酸增多。基因检测提示患儿1的 ACAT1基因存在c.1183G>T杂合变异与1个涉及 ACAT1基因的大片段缺失(chr11：102980303_110501515)，患儿2的 ACAT1基因存在c.121-3C>G与c.826＋5_826＋9delGTGTT复合杂合变异，患儿3的 ACAT1基因存在c.928G>C与c.1142T>C复合杂合变异。患儿2与患儿3的4种变异均为已知的致病性或可能致病性变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会变异相关指南，患儿1的c.1183G>T被评级为意义不明变异(PM2_Supporting＋PP3＋PP4)，11q22.3-11q23.1大片段缺失查询DGV正常人群拷贝数变异数据库未见收录，被评级为致病性拷贝数变异。 结论:ACAT1基因的变异考虑为3例BKTD患儿的遗传学病因。

目的:总结β酮硫解酶缺乏症（BKTD）患儿的临床表型及基因变异特点。方法:回顾性分析2018年10月至2022年12月在重庆医科大学附属儿童医院诊断及随访的5例BKTD患儿的临床特征，血液生化指标、血和尿质谱检测结果及ACAT1基因变异数据。结果:5例BKTD患儿中男4例、女1例，首次发病年龄为9.7~28.0月龄。急性期均表现出严重代谢性酸中毒，pH值为6.9~7.1，血糖2.3~3.4 mmol/L，尿酮体阳性（+~++++）。血串联质谱分析提示甲基巴豆酰基肉碱、甲基丙二酰基肉碱与丙二酰基肉碱明显升高，分别为0.03~0.42、0.34~1.43及0.83~3.53 μmol/L，尿气相色谱质谱检测提示2-甲基-3羟基丁酸、3-羟基丁酸明显升高，伴甲基巴豆酰甘氨酸轻度升高，分别为22~202、4~6 066和0~29，但经过治疗后血和尿质谱代谢产物明显降低。5例患儿ACAT1基因错义变异比例8/9，发现4种未报道变异：c.678G>T（p.Trp226Cys）、c.302A>G（p.Gln101Arg）、c.627_629dupTGA（p.Asn209_Glu210insAsp）、c.316C>T（p.Gln106Ter），前2种变异经过SIFT、PolyPhen-2和Mutation Taster软件预测为有害，c.316C>T（p.Glu106Ter）为终止变异。结论:BKTD相对罕见，缺乏特异性临床表现，急性发病期常出现严重代谢性酸中毒、低血糖及酮症，ACAT1基因错义变异为BKTD的主要遗传学病因。

目的:探讨3例 HSD17B10和 ACAT1基因变异所致异亮氨酸代谢障碍性疾病患儿的临床、生化及基因特点。 方法:选取2014年至2021年于上海市儿童医院就诊的2例17β羟基类固醇脱氢酶10(HSD17B10)缺乏症和1例β酮硫解酶缺乏症(BKD)患儿为研究对象。收集患儿的临床资料，对其进行血酰基肉碱、尿有机酸及基因检测，对候选变异进行生物信息学分析。结果:3例患儿的主要临床症状包括癫痫、发育落后、肌张力减退和酸中毒等。血酰基肉碱谱中甲基巴豆酰基肉碱(C5：1)、3-羟基异戊酰基肉碱(C5-OH)、3-羟基丁酰肉碱(C4OH)均有不同程度的升高，尿有机酸检测甲基巴豆酰甘氨酸和2-甲基-3-羟基丁酸均显著增高。患儿1检出 HSD17B10基因c.347G>A(p.R116Q)杂合变异，患儿2检出 HSD17B10基因c.274G>A(p.A92T)杂合变异，患儿3检出 ACAT1基因c.547G>A(p.G183R)和c.331G>C(p.A111P)复合杂合变异，其中c.274G>A(p.A92T)与c.331G>C(p.A111P)既往均未见报道。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南，二者被分别判定为临床意义未明(PP3_Strong＋PM2_supporting)和疑似致病性变异(PM3＋PM2_Supporting＋PP3_Moderate＋PP4)。 结论:HSD17B10缺乏症与BKD均可能导致异亮氨酸代谢障碍，临床难以鉴别，而基因检测可明确诊断。上述发现的 HSD17B10基因c.274G>A(p.A92T)与 ACAT1基因c.331G>C(p.A111P)变异丰富了该2种疾病的变异谱。

目的:探讨因重症重型手足口病诱发急性代谢危象的β-酮硫解酶缺乏症患儿的临床特点及治疗方法。方法:回顾性分析厦门大学附属第一医院儿科重症监护室2021年6月收治的1例β-酮硫解酶缺乏症合并重症重型手足口病患儿的临床特点、辅助检查、治疗经过以及近期随访结果，并复习相关文献。结果:患儿，男，2岁8个月，临床以发热、皮疹、昏迷、气促、肌张力低下、重度代谢性酸中毒、尿酮体阳性为主要表现，相关检查提示柯萨奇病毒16型阳性，血串联质谱3-羟基丁酰肉碱(1.74 μmol/L)增高，尿气相质谱示3-羟基丁酸(1965.6 μmol/L)显著增高，2-羟基丁酸(10.4 μmol/L)和乙酰乙酸(70.7 μmol/L)增高，提示酮尿； ACAT1基因分析发现2个杂合突变，其中c.1160T>C为已知突变，c.163T>A为未报道的新突变。患儿入院后予补充葡萄糖、呼吸机辅助通气、降颅压、连续性血液透析滤过、左卡尼汀静滴等治疗后，患儿神志恢复、呼吸平稳、酸中毒纠正，病情好转。 结论:尿气相色谱质谱、血串联质谱检测联合基因检测有利于β-酮硫解酶缺乏症诊断。β-酮硫解酶缺乏症合并重症重型手足口病时，连续性血液透析滤过治疗可能有利于改善预后。

目的 采用双向两样本孟德尔随机化(MR)方法来探究酮体与认知表现之间的因果关系.方法 采用欧洲全基因组关联研究汇总数据中的单核苷酸多态性(SNPs)作为工具变量.将逆方差加权法作为主要方法来评估酮体工具变量与认知表现的因果关系,并进行通路和功能富集分析预测潜在的机制.使用Bonferroni法校正显著性阈值确定显著性(P=0.017).结果 两样本孟德尔随机化分析显示,乙酰乙酸(β=0.075,95％CI:0.002～0.148,P=0.045)和β-羟基丁酸(β=0.082,95％CI:0.039～0.126,P=2.36 × 10-4)与认知表现有因果关系,但经Bonferroni法校正后,乙酰乙酸与认知表现的因果关系不再显著.此外,发现丙酮与认知表现之间不存在因果关系(β=0.041,95％CI:-0.018～0.099,P=0.175).通路和功能富集分析表明,β-羟基丁酸对认知表现的影响机制可能通过多种方式,如胆固醇代谢和胰岛素抵抗.在反向孟德尔随机化分析中,我们没有发现认知表现对酮体方向上的因果关系.结论 β-羟基丁酸水平与更好的认知表现之间存在因果关系.

目的 观察生酮饮食对人肺腺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变型细胞株PC9和Kirsten大鼠肉瘤病毒基因同源物(KRAS)基因突变型细胞株A549裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨相应机制.方法 将处于对数生长期的A549、PC9细胞分别接种于裸鼠右前肢皮下,制作A549、PC9细胞裸鼠移植瘤模型.于瘤体直径达到2 mm时,将每种荷瘤裸鼠分为标准饮食组(SD组)和生酮饮食组(KD组),每组6只,分别采用标准饮食和生酮饮食,连续饮食干预30 d.定期测量裸鼠体质量、血糖、血酮体、肿瘤体积,于饮食干预第30天处死裸鼠,取肿瘤组织测量瘤重并计算抑瘤率,观察裸鼠心、肝、肺、肾、脑组织的病理变化.分析酮代谢关键酶3-琥珀酰辅酶A转移酶1(OXCT1)、β-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)基因在A549、PC9细胞株的表达.筛选KD组与SD组的差异表达基因,并进行KEGG通路富集分析.结果 第10天起两种荷瘤裸鼠KD组血酮体水平均高于SD组(P均<0.05).与SD组相比,KD组A549细胞移植瘤体积变小、质量变轻,KD组PC9细胞移植瘤体积增大、质量增加(P均<0.05).KD组A549、PC9细胞移植瘤的抑瘤率分别为58%、-133%.两种荷瘤裸鼠在不同干预条件下各脏器未见明显病理改变.PC9细胞中OXCT1、BDH1基因表达高于A549细胞.不同饮食干预条件下,A549、PC9细胞裸鼠移植瘤中基因表达存在明显差异,且A549和PC9细胞荷瘤裸鼠相比,其肿瘤组织中基因表达也存在差异.KD组与SD组A549细胞裸鼠移植瘤中差异表达基因主要富集在细胞周期和JAK-STAT等信号通路,而在PC9细胞裸鼠移植瘤中差异表达基因主要富集在IL-17、Relaxin、AGE-RAGE和NF-κB等肿瘤信号通路.结论 生酮饮食可抑制A549细胞裸鼠移植瘤生长但可促进PC9细胞移植瘤生长,生酮饮食干预导致两种肺癌细胞裸鼠移植瘤基因表达谱和信号通路改变,其中OXCT1基因表达升高和肿瘤信号通路富集可能是生酮饮食促进PC9细胞移植瘤生长的原因.

目的 探究β-羟基丁酸(BHB)对肺腺癌细胞(A549细胞、LLC细胞)的作用及其调控机制.方法 分别用0 mmol/L(PBS)、5 mmol/L、10 mmol/L的BHB处理人肺腺癌A549细胞和LLC细胞,用CCK-8、EdU染色、细胞划痕和transwell实验检测细胞的活性、增殖、迁移和侵袭.GEPIA在线分析GPR109A在正常和肺腺癌样本之间的表达差异.RT-PCR和Western blot检测不同剂量BHB处理对GPR109A表达的影响.敲低GPR109A后观察A549细胞和LLC细胞对BHB的反应,探究GPR109A是否参与介导BHB的抑癌作用.在裸鼠和Balb/c小鼠右腋皮下分别接种A549细胞、LLC细胞及相应系的GPR109A敲低细胞,给予BHB或等体积无菌水灌胃21 d,观察肿瘤生长情况.结果 BHB以浓度依赖方式抑制A549细胞和LLC细胞的活性、增殖、迁移和侵袭(P<0.05).GEPIA在线分析发现GPR109A在肺腺癌病人中表达下调,且体外验证发现GPR109A的mRNA表达量和蛋白表达量随BHB浓度升高而上升(P<0.05).BHB对A549细胞和LLC细胞的抑制作用是由GPR109A部分介导,体内实验结果进一步显示BHB可通过介导GPR109A的表达来抑制裸鼠和balb/c小鼠体内肿瘤的生长(P<0.05).结论 BHB可部分介导GPR109A的表达来抑制肺腺癌细胞的恶性行为,并抑制小鼠体内的肿瘤生长.

聚-β-羟基丁酸酯(polyhydroxybutyrate,PHB)是一种可完全生物降解和具有良好生物相容性的高分子材料,可作为传统塑料的替代品,在塑料、化学药品和饲料市场上具有巨大的商业应用价值.近年来,用植物生产新型生物聚合物PHB的技术取得一定进展,可望通过农业生产提供可再生的工业原料,这使得它具有广泛的发展前景.采用转基因方法可以大幅度提高用植物生产PHB的产量,包括控制启动子来驱使转基因表达,减少内源性酶在竞争性代谢途径中的活性,通过插入的基因来增加聚合物的碳含量.这些研究成果增加了我们对碳的可获取性的了解和区分不同的植物细胞器、细胞和器官类型的能力,推动了用植物生产PHB及其他产物的进展.

目的 检测病情严重程度不同的急性胰腺炎(AP)患者尿液小分子代谢物谱,筛选对AP及其严重程度具有潜在诊断价值的差异代谢物.方法 收集苏州大学附属第一医院65例AP患者,其中中、重症AP(MSAP+ SAP) 29例,轻症AP(MAP) 36例,以25名健康志愿者作为对照组.采用液相色谱与质谱(LC-MS)结合方法检测AP患者及健康对照者尿液中小分子代谢物.采用多元统计分析,构建主成分分析(PCA)及偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)模型并验证,筛选差异代谢物.结果 PCA模型具有很好的可解释度(R2X＞0.5),各组尿液样本具有较好的区分聚类趋势,获得了较好的分类模型.各组间PLS-DA模型的对比使差异进一步凸显,各组样本呈明显的区分聚类,具有较高的可预测性(Q2＞0.7),PLS-DA置换检验图提示评估模型可靠有效.AP组与对照组对比,从尿液中筛选出17个差异代谢物,其中壬二酸、琥珀酸半醛、D-β-羟基丁酸、乙酰肉碱、当归酸、癸二酸、马尿酸7个差异代谢物整合对AP的诊断敏感性为100％,特异性为94％.对照组、MAP组、MSAP+SAP组两两对比,尿液琥珀酸半醛、D-β-羟基丁酸、乙酰肉碱、苹果酸、当归酸5个差异代谢物整合对SAP的诊断敏感性、特异性均为90％.结论 LC-MS代谢组学技术可以有效地识别不同严重程度AP患者尿液代谢物的变化,筛选出的差异代谢物对AP的诊断及分级具有潜在的临床应用价值.