γ-谷氨酰羧化酶(γ-glutamyl carboxylase, GGCX)又称维生素K依赖性谷氨酰羧化酶，通过对维生素K依赖性蛋白特定的谷氨酸残基进行γ-羧基化修饰，参与凝血、骨代谢、血管钙化和细胞增殖等多种生物学过程。早期研究发现 GGCX基因致病性变异导致凝血缺陷，该表型被称为维生素K依赖性凝血因子缺乏症1。近年来发现 GGCX突变还可以导致其它多种临床表型，包括皮肤、眼科、骨和心脏的异常。其中皮肤异常表型最为常见，该表型被称为类弹性假黄瘤样综合征。本文就 GGCX基因致病性变异相关表型进行综述，以期提高对相关遗传病的认识，从而有助于诊断和治疗。

基于脂质组学研究黄芩-黄连药对干预非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠的作用机制.将36 只SD大鼠分为空白组、模型组、不同剂量黄芩-黄连组和辛伐他汀组,每组 6 只.除空白组给予普通饲料外,其余各组给予高脂饲料,饲喂 4 周后,开始给予药物干预,12 周后处理.使用试剂盒检测血清肝功能和血脂指标,通过HE染色与油红O染色法评价肝组织的病理形态.使用LC-MS/MS技术检测大鼠脂质水平变化,采用多元统计分析筛选其中的差异脂质代谢物,并绘制脂质代谢通路.进一步通过Western blot验证脂质相关的蛋白水平变化.结果表明,与空白组比较,模型组大鼠谷丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-c)水平显著升高(P<0.01),γ-谷氨酰基转移酶(gamma-glutamyl transferase,γ-GT)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-c)含量显著降低(P<0.01);黄芩-黄连干预后显著回调.HE染色与油红O染色表明不同剂量的黄芩-黄连均可逆转大鼠肝脏的脂肪性病变,且呈剂量依赖性.脂质组学分析发现模型组与空白组大鼠的脂质代谢存在明显差异,有 54 个脂质发生了显著改变,主要有甘油脂类、磷脂酰胆碱类、鞘脂类等.给药后,有 44 个脂质差异物趋于正常水平,这表示不同剂量的黄芩-黄连给药后显著改善了NAFLD大鼠的脂质代谢水平.Western blot结果表明,黄芩-黄连能显著降低甘油三酯合成酶1(TG-synthesis en-zyme 1,DGAT1)、脂素 1(recombinant lipin 1,LPIN1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)和乙酰辅酶a羧化酶 1(acetyl-CoA carboxylase 1,ACC1)蛋白的水平,升高ACC1 的磷酸化水平,这些变化可显著降低TG的合成,且提高其分解速度,提升机体的脂质代谢水平,最终实现降脂的作用.黄芩-黄连能够通过抑制脂肪酸和TG的合成改善NAFLD.

目的 建立适合山西人群的华法林稳定剂量预测模型.方法 选取符合入组标准的山西籍汉族患者,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测基因VKOR复合体(VKORC1)、细胞色素P450(CYP)2C9、γ-谷氨酰羧化酶(GGCX)、环氧化物水解酶(EPHX1)多态性.记录患者临床信息,采用逐步多元回归分析法计算华法林稳定剂量预测模型公式.结果 华法林稳定剂量预测模型包括VKORC1、CYP2C9、GGCX、EPHX1 及患者的身高等因素(R2=0.284);在模型中加入GGCX、EPHX1 基因型后,模型的总体R2 从0.257 提升至 0.284,GGCX、EPHX1 基因型在模型中解释了 2.7%的剂量差异.维生素K的日均摄入量未对华法林稳定剂量有显著影响,但是男性每天维生素K摄入量明显低于女性.将服用华法林患者国际标准化比值(INR)值分为低INR值组、正常组、高INR值组,显示随着INR值升高,患者日均维生素K摄入量降低.结论 基于6种基因多态性的剂量预测模型可以帮助预测山西汉族患者华法林稳定剂量.

华法林是最常应用的口服抗凝药物之一.许多研究已证实华法林维持剂量的个体差异与基因型密切相关,尤其是细胞色素P450 2C9 (CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合物1(VKORC1)的基因型对华法林的影响受到广泛认同;尽管还有其他很多基因型被报道与华法林剂量有关,但其具体影响结论不一.研究发现纳入基因信息和临床数据的剂量计算公式可预测华法林的维持剂量,由于目前已开展的临床试验结果不一,其实用性亦受到质疑.下一步研究需要更大样本量及多中心的研究,以期进一步阐释遗传与非遗传因素对华法林剂量的影响,同时对已构建的模型进行验证或构建新模型,提高对华法林个体差异的解释百分比.

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对肝动脉化疗栓塞术(TACE)肝癌患者脱γ-羧基凝血酶原(DCP)、总胆红素(TBil)和谷丙转氨酶(ALT)的影响.方法 纳入2016年1月至2018年1月于我院收治的60例TACE肝癌患者为研究对象,按照抽签随机方法分为两组,各30例,其中对照组予以常规护肝治疗,观察组在此基础上予以NAC治疗.对比两组治疗前后DCP及氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,并分析治疗前后TBil、ALT及谷草转氨酶(AST)、清蛋白(ALB)水平.结果 观察组治疗后DCP、MDA水平显著低于治疗前及对照组治疗后(P＜0.05),SOD水平显著高于治疗前及对照组治疗后(P＜0.05).观察组治疗后TBil、ALT、AST水平较术前均无统计学意义(P＞0.05),但均显著低于对照组治疗后(P＜0.05);观察组治疗后ALB水平较治疗前及对照组治疗后均无统计学意义(P＞0.05).结论 NAC能减轻TACE肝癌患者脂质过氧化反应,改善肝功能.

目的:研究大鼠的肝肾功能、血脂和血清骨转化因子的增龄性改变及平补阴阳中药淫羊藿女贞子配伍的影响作用.方法:8月龄SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表法分为7组,包括9月龄组、12月龄组、15月龄组、17月龄组、淫羊藿女贞子组(4:3,3.5 g/kg)、淫羊藿组(2 g/kg)、女贞子组(1.5 g/kg).3月龄、6月龄SPF级雄性大鼠为青年对照组.各给药组饲养至15月龄开始灌胃给药至17月龄时处死,其他各组分别饲养至相应月龄时处死取血清进行检测.结果:与青年大鼠比较,17月龄大鼠血清谷氨酰转肽酶(Glutanyl transpeptidase,γ-GT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、胆固醇与甘油三酯含量均升高(P＜0.05或0.01);尿素氮、骨转化因子Ⅰ型前胶原羧基端前肽(carboxyterminal propeptide of type Ⅰ pmcollagen,PICP)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(procollagen type Ⅰ Npropeptide,P1NP)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(C-terminal crosslinking telopeptide of typeⅠ collagen,CTX-1)含量均降低(P＜0.05或0.01),尿酸及肌酐含量无统计学差异.与17月龄组大鼠比较,淫羊藿女贞子合用组能显著降低AST、ALT、甘油三酯及BUN的含量(P＜0.05),升高PINP、PICP、CTX-1的水平(P＜0.05或0.01);淫羊藿能显著降低尿素氮、胆固醇及甘油三酯的含量(P＜0.05);女贞子可显著降低肌酐的含量(P＜0.01).基于多层感知(Multi-Layer Perceptron,MLP)神经网络模型,结果显示淫羊藿女贞子合用可使17月龄自然衰老大鼠的上述指标的改变逆转至(9.00±1.55)月.结论:淫羊藿女贞子合用具有延缓衰老的作用,可以改善自然衰老模型大鼠的肝功能异常,降低血脂并促进骨组织的转化.

目的 探讨双相障碍抑郁发作患者外周血清中谷氨酸系统各指标变化的特点及其相关因素.方法 选取50例双相障碍抑郁发作患者及48名正常对照,以汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression scale-17,HAMD-17)和汉密尔顿焦虑量表(Hamilton anxiety scale,HAMA)评估患者抑郁和焦虑症状,以酶联免疫吸附法测定被试血清谷胺酰胺(glutamine,Gln)、谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)及谷氨酸脱羧酶(glutamic acid dehydrogenase,GAD)水平,计算Glu/GABA比值.结果 双相障碍抑郁发作组较之对照组,血清Glu水平[(35.80±6.34)mg/L vs.(28.69±5.73)mg/L,t=4.68,P＜0.01]及Glu/GABA[(6.18±1.40)vs.(5.06±1.29),t=3.44,P＜0.01]增高,血清GABA水平[(5.09±0.71)μmol/L vs.(5.83±1.17)μmol/L,t=3.10,P=0.01]、GAD水平[(28.72±5.39)U/L vs.(35.78±7.22)U/L,t=4.46,P＜0.01]降低.双相障碍抑郁发作组血清Glu水平与HAMD总分呈正相关(r=0.52,P=0.03),血清GABA水平与HAMD睡眠障碍因子分呈负相关(r=-0.38,P=0.04).结论 双相障碍抑郁发作患者存在Glu能神经元活性增强,GABA能神经元活性降低,兴奋性神经元与抑制性神经元功能失平衡.

通过将GGCX慢病毒转染软骨细胞,探讨骨关节炎患者软骨组织中γ-谷氨酰羧化酶(GGCX)基因过度表达对兔骨关节炎(OA)软骨细胞分化的影响及其机制.首先从OA兔体内分离软骨细胞,用茜素红染色标记软骨细胞.然后将分离的软骨细胞分为正常对照组、GGCX过表达组和载体组3组.编码GGCX的慢病毒用于过表达GGCX,流式细胞分析检测出病毒转染后细胞凋亡.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法用于检测GGCX、基质金属蛋白酶13 (MMP13)、Ⅹ型胶原、Ⅱ型胶原、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1β.慢病毒编码GGCX提高了OA软骨细胞中中GGCS的表达水平,mRNA和蛋白水平都显著升高(P＜0.05).GGCX过表达显著增加Ⅱ型胶原,而mRNA和蛋白水平均降低MMP13、X型胶原、TNF和IL-1β表达(p＜0.05).相对于载体,GGCX过表达抑制了OA软骨细胞的细胞凋亡.GGCX过表达可调节细胞外基质的平衡,促进软骨细胞蛋白多糖合成,这与细胞凋亡减少有关.

通过将GGCX慢病毒转染软骨细胞,探讨骨关节炎患者软骨组织中γ-谷氨酰羧化酶(GGCX)基因过度表达对兔骨关节炎(OA)软骨细胞分化的影响及其机制.本研究首先从OA兔体内分离软骨细胞,用茜素红染色标记软骨细胞.然后将分离的软骨细胞分为正常对照组、GGCX过表达组和载体组3组.编码GGCX的慢病毒用于过表达GGCX,流式细胞分析检测出病毒转染后细胞凋亡.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法用于检测GGCX、基质金属蛋白酶13 (MMP13)、Ⅹ型胶原、Ⅱ型胶原、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1β.慢病毒编码GGCX提高了OA软骨细胞中中GGCS的表达水平,mRNA和蛋白水平都显著升高(p＜0.05).正常对照组的凋亡率为26.12％,载体组的凋亡率为26.12％左右,GGCX过表达组的凋亡率为18.17％,GGCX过表达可明显减少软骨细胞细胞凋亡(p＜0.05).GGCX过表达显著增加Ⅱ型胶原,而mRNA和蛋白水平均降低MMP13、Ⅹ型胶原、TNF和IL-1β表达(p＜0.05).相对于载体,GGCX过表达抑制了OA软骨细胞的细胞凋亡.GGCX过表达可调节细胞外基质的平衡,促进软骨细胞蛋白多糖合成,这与细胞凋亡减少有关.

目的 探讨维生素K2(vitamin K2,VK2)补充对血清VK2以及相关标志物的作用.方法 募集215名50～75岁的哈尔滨市居民为对象.采用随机数字表法将其分入安慰剂组(60例),低剂量组(79例)和高剂量组(76例).安慰剂组服用安慰剂,低剂量组每日补充50μg的VK2,高剂量组每日补充90μg的VK2,为期1年.在干预前后采集空腹血清,检测VK2、γ-谷氨酰基羧化酶(γ-glutamyl carboxylase GGCX)、羧化骨钙素(carboxylated osteocalcin,cOC)、羧化不全骨钙素(undercarboxylated osteocalcin,ucOC)、羧化基质Gla蛋白(carboxylated matrix Gla protein,cMGP)以及羧化不全基质Gla蛋白(uncarboxylated matrix Gla protein,ucMGP)水平.结果 干预之后,与安慰剂组相比,VK2干预组的血清cOC水平上升(P<0.05),血清ucOC水平下降(P<0.05),血清VK2和cMGP水平呈上升趋势,但差异无统计学意义.结论 补充VK2对能够一定程度改善血清VK2以及相关血清标志物,但两个干预剂量的效果并未表现出显著的差异.