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基于尿液的脂阿拉伯甘露聚糖抗原检测对肺结核的诊断价值
编辑人员丨1周前
目的:分析尿液的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原检测方法对肺结核患者的诊断价值,为尿液LAM抗原试剂盒在中国地区的推广提供依据。方法:2023年3—5月,前瞻性收集首都医科大学附属北京胸科医院诊治肺部疾病患者228例[男134例,女94例,年龄20~82(44.8±16.7)岁],其中肺结核患者143例,非结核病患者85例。收集所有患者的痰标本和尿液,进行传统病原学检测和尿液LAM抗原检测,分析各检测阳性组合的筛查结果,并通过卡方检验等统计学方法对结果进行进一步分析。结果:尿液LAM试剂盒的检测敏感度为46.2%(95% CI:37.9%~54.7%),检测特异度为96.5%(95% CI:89.3%~99.1%),总体符合率为64.9%。联合应用尿液LAM抗原检测和结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert)两种方法检测阳性样本的检出率(60.8%,87/143)高于单独应用Xpert检测阳性样本的检出率(49.7%,71/143),差异有统计学意义( P<0.05)。风险因素分析结果表明,尿液LAM抗原检测结果阴性的风险随着细菌载量的降低而增加。 结论:尿液LAM抗原检测方法特异度高,与传统病原学联用可有效提高检出率。尿液LAM抗原检测法仍具有受细菌载量影响和区分非结核分枝杆菌样本能力不强等局限性,需进一步试验验证。
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编辑人员丨1周前
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A群链球菌抗原快速检测法在儿童A群链球菌感染性疾病诊断中的应用
编辑人员丨1周前
目的:探讨A群链球菌(GAS)抗原快速检测法在儿童GAS感染中的临床应用价值。方法:收集2015年1月至2019年12月在深圳市儿童医院门诊和住院部就诊的疑为GAS感染的患儿44 733例。采集所有患儿的咽拭子标本,用BinaxNOW Strep A Test试剂进行GAS抗原快速检测,其中有346例患儿的咽拭子先接种血培养基进行传统的细菌培养,再行GAS抗原快速检测,比较2种方法的灵敏度和特异度,并根据GAS抗原快速检测结果,分析其年龄、性别及季节变化趋势。应用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。结果:346例同时用2种方法检测的患儿中,以细菌培养法结果作为参考方法,GAS抗原快速检测法敏感度为89.41%(152/170例),特异度为94.32%(166/176例)。共检测GAS抗原44 733例,其中阳性10 024例,阳性检出率为22.41%。GAS抗原快速检测法阳性率5年的曲线趋势一致,均以3~8岁阳性率较高,其中4~6岁阳性率最高。2个季节性高峰明显,分别出现于每年的4-6月,11月-次年1月。男女检出率比例为1.74∶1,性别差异有统计学意义( χ2=27.93, P<0.000 1)。GAS抗原快速检测在不同病区阳性检出率由高到低依次为皮肤科门诊(52.34%)、急诊科门诊(47.74%)、内科门诊(37.36%)、感染病区(19.71%)、五官科病区(10.27%)、内科病区(8.63%)、外科病区(7.34%)、新生儿病区(0)。 结论:GAS抗原快速检测法和细菌培养法结果符合率高,且具有较高的敏感度和特异度,可在儿童GAS感染性疾病诊断中推广使用。GAS检出率在急诊科门诊和皮肤科就诊患儿较高。GAS抗原阳性检出率存在明显的季节性和人群(年龄和性别)差异,未发现新生儿感染者。
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编辑人员丨1周前
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试剂信息化管理系统在当代病理科建设中的应用
编辑人员丨1周前
南京大学医学院附属鼓楼医院病理科致力于建立并持续改进质量管理体系,自2017年5月试运行ISO15189管理体系以来,试剂管理的传统手工作业模式暴露了诸多问题。科室决定基于试剂管理需求,依靠信息化手段,引入试剂信息化管理系统,以期提升试剂耗材管理效率。试剂系统采用Java作为开发工具,通过B/S结构针对试剂管理的全流程功能模块进行设计,维护简便。试剂系统功能模块的实现需导入自购试剂信息合理规划建立4大库,即供应商基本信息库、试剂信息库、人员权限库及存放位置库。运行以来不断优化升级,一方面可实时追踪以保证体外诊断试剂的可溯源性,同时能够避免和减少试剂在购、销、用环节中的损失进而提高科室经济效益;最终实现更好地保障检查、检测结果的可靠性,为精准医学时代下的精准诊断提供保障。
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编辑人员丨1周前
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核酸快速检测系统在新型冠状病毒检测中的应用评价
编辑人员丨1周前
目的:探讨核酸快速检测系统在新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测中的性能与应用评价。方法:收集北京市疾病预防控制中心和中日友好医院检验科2020年2至7月的临床样本,评价核酸快速检测系统对SARS-CoV-2检测的敏感度、特异度、抗干扰能力、精密度以及临床样本检测符合率。分析敏感度的评价通过检测浓度梯度稀释的SARS-CoV-2样本,每个样本重复检测20次;分析特异度的评价是使用该系统检测与SARS-CoV-2感染部位相同或症状相似的病原体或假病毒及人源DNA和RNA;抗干扰能力研究是通过检测具有潜在干扰物质的样本进行评价;精密度研究通过评价试剂批内及批间的检测差异;临床样本检测符合率研究使用该系统检测230例咽拭子样本和95例痰液样本,并与传统实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果及临床诊断结果比较。结果:核酸快速检测系统对SARS-CoV-2核酸检测的分析敏感度为400拷贝/ml;核酸快速检测系统对感染部位相同或感染症状相似的病原体和人源核酸的检测结果均为阴性,分析特异度表明该系统与相关病原体及人源核酸无交叉反应;精密度表明批内/批间试验的高、中、低浓度样本的Ct值变异系数为1.90%~3.92%,均小于5%;加入潜在干扰物质后样本检测结果仍为阳性,说明样本中可能存在的干扰物质对检测结果无影响;与RT-qPCR结果及临床诊断结果符合率分别为98.46%和97.85%。结论:基于分子并行反应的核酸快速检测系统可作为一种快速检测SARS-CoV-2的选择方法。
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编辑人员丨1周前
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北京市男男性行为人群"互联网+"HIV尿液自检情况及影响因素分析
编辑人员丨1周前
目的:了解"互联网+"HIV尿液自检在北京市男男性行为(men who had sex with men,MSM)人群中的检测情况及影响因素,为促进该人群HIV主动检测提供科学依据。方法:采用横断面调查研究方法,在2020年7月至9月通过互联网招募MSM人群申请HIV尿液自检试剂并进行问卷调查,采用卡方检验和多因素logistic回归分析自检结果的影响因素。结果:研究对象801名,平均(31.41±6.38)岁,汉族占95.1%,外省及外籍占63.5%,在京居住时间超过12个月的占91.9%,未婚占85.6%,大专/本科及以上文化程度占90.4%。近6个月发生过肛交、口交行为的分别占79.8%、80.3%,发生过肛交、口交行为者坚持使用安全套的分别占61.5%、8.1%。近12个月内进行过HIV检测的占59.4%。11人自检结果为HIV-1抗体阳性,新发现HIV感染者共5人,应用"互联网+"HIV尿液自检发现的自检阳性率为1.4%,新发现HIV感染率为0.6%。单因素分析结果显示文化程度( P=0.015)、近12个月是否进行HIV检测差异有统计学意义( P=0.009)。多因素分析结果显示文化程度低( OR=4.891,95% CI:1.372~17.439)、近12个月未进行HIV检测( OR=6.111,95% CI:1.300~28.718)为HIV抗体阳性发现的影响因素。 结论:"互联网+"HIV尿液自检模式以扩大检测为预防手段,是现行传统检测的有效补充策略,需要开发针对低文化、无定期检测习惯MSM人群的干预措施。
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编辑人员丨1周前
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白癜风样小鼠皮肤脱色模型研究进展与思考
编辑人员丨1周前
白癜风的病因及发病机制均未明确,动物模型是白癜风研究的重要工具。除传统的白癜风小鼠模型外,许多新模型逐渐建立,如表达表皮黑素细胞、黑素细胞反应性T细胞的小鼠模型、K14-SCF/h3TA2/HLA-A2三转基因(Vitesse鼠)小鼠模型、自身免疫诱导的小鼠模型、化学试剂诱导的小鼠模型等,这些模型与人白癜风高度相似,在可重复性和稳定性等方面都有不同程度提高,已成为研究白癜风发病机制、探索治疗靶点和评判疗效的良好模型。本文综述目前白癜风样小鼠脱色模型的研究进展,并分析存在的问题。
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编辑人员丨1周前
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传统开颅血肿清除术和神经内镜血肿清除术对高血压性基底节脑出血的术后炎症、神经功能以及治疗效果影响
编辑人员丨1周前
目的:探讨传统开颅血肿清除术和神经内镜血肿清除术对高血压性基底节区脑出血的治疗效果及其对患者炎症水平和神经功能的影响。方法:选取2021年10月至2023年5月在商丘市第一人民医院接受诊断治疗的首次高血压性基底节区脑出血患者82例,采用抽签法将所有患者分为对照组(41例)和观察组(41例)。对照组给予传统开颅血肿清除术,观察组给予神经内镜血肿清除术。比较两组患者的术中出血量、血肿清除率、术后并发症发生率;患者术后外周血白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平采用酶联免疫吸附法检测;采用中枢神经特异性蛋白(S100)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)电化学发光试剂盒检测患者术后S100、NSE血清水平;采用美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评价脑出血患者治疗前后神经功能障碍;采用格拉斯哥昏迷量表(GCS)评价脑出血患者治疗前后意识水平。组间计量数据比较采用独立样本 t检验。 结果:观察组患者的血肿清除率[(90.02±3.95)%]明显高于对照组[(82.07±5.16)%],术中出血量[(33.70±4.16) ml]和术后并发生发生率[4.88%(2/41)]明显低于对照组[(49.67±5.70) ml、21.95%(9/41)],差异有统计学意义( t=7.83、14.49、5.15, P<0.05)。术后3 d,观察组患者的血清TNF-α[(249.41±20.38) pg/ml]、IL-6[(65.56±6.35) pg/ml]、IL-1β[(201.77±19.84) pg/ml]水平均明显低于对照组患者[(312.77±24.20)、(88.40±7.37)、(284.31±19.27) pg/ml],差异有统计学意义( t=12.82、15.03、19.11, P<0.05)。术后3 d,观察组患者的血清S100[(0.29±0.03) μg/L]、NSE[(26.31±3.70) ng/ml]水平均明显低于对照组患者[(0.35±0.04) μg/L、(32.97±4.57) ng/ml],差异有统计学意义( t=8.83、7.25, P<0.05)。治疗前观察组和对照组的NIHSS评分[(28.27±2.39)、(28.78±2.07)分]和GCS评分[(7.80±1.75)、(8.05±1.61)分]比较,差异无统计学意义( t=1.04、0.66, P>0.05)。治疗后观察组患者的NIHSS评分[(15.15±1.13)分]明显低于对照组[(18.17±1.86)分, t=8.91, P<0.05];GCS评分[(15.07±1.98)分]明显高于对照组[(12.07±1.59)分],差异均有统计学意义( t=7.57, P<0.05)。 结论:神经内镜下血肿清除术具有良好的血肿清除效果,能有效降低高血压性基底节区脑出血患者的术中出血量、术后并发症发生率和炎症水平,改善患者的术后神经功能缺损。
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编辑人员丨1周前
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基于甲基丙烯酸酐化明胶悬滴培养小鼠毛乳头细胞制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能
编辑人员丨1周前
目的:探讨基于甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠毛乳头细胞(DPC)制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能。方法:采用实验研究方法。采用酶消化法获取雄性5~6周龄C57BL/6J小鼠触须毛的DPC以及1 d龄C57BL/6J小鼠皮肤角质形成细胞(KC),经免疫荧光法鉴定前者第3代细胞稳定表达DPC标志物神经细胞黏附分子、碱性磷酸酶(ALP)、β连环蛋白及α平滑肌肌动蛋白,后者原代细胞稳定表达KC标志物角蛋白15。取第8代DPC,用GelMA重新悬浮并接种至Transwell孔板插件底面,光交联后倒置培养,于光学显微镜下观察培养0(即刻)、3 d GelMA悬滴中DPC聚集情况(聚集成球即仿生毛乳头球),采用活/死染色试剂盒检测培养3 d仿生毛乳头球中细胞活性。将传统二维培养的原代DPC、第8代DPC以及按前述方法制备的仿生毛乳头球分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,利用高通量测序技术平台对每组培养3 d的3个样本中DPC进行转录组测序,利用基迪奥生物信息云工具平台(OmicShare Tools)对转录组数据进行主成分分析、Pearson相似性分析、差异表达基因筛选,利用时间序列趋势分析软件对差异表达基因进行表达模式聚类分析,利用基迪奥生物信息云工具平台对具有特定表达模式的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)富集分析。同前进行细胞分组,采用随机数字表法从差异表达基因中抽取性别决定区Y框蛋白8( SOX8)、基质金属蛋白酶9( MMP- 9)、26型胶原纤维α1( COL26A1)、无翅型MMTV整合位点家族成员6( Wnt6),采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法验证差异表达基因mRNA表达情况与测序结果的一致性(样本数为9);采用实时荧光定量RT-PCR法检测DPC生物功能标志物成纤维细胞生长因子7(FGF7)、Wnt10a、淋巴样增强因子1(LEF1)、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2的mRNA表达情况(样本数为9)。取3只5~6周龄雄性BALB/c裸鼠,分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,将原代DPC、第8代DPC、仿生毛乳头球分别与原代KC以2∶1细胞数比例混合后分别注射至相应组别裸鼠皮下,每只注射6个区域。注射后2周,取注射区域全厚皮,计数再生毛发,行苏木精-伊红染色后观察再生毛囊情况。对数据行单因素方差分析、Tukey检验并进行Bonferroni校正。 结果:培养3 d,DPC在GelMA悬滴中由培养0 d的分散状态聚集成仿生毛乳头球,制备的仿生毛乳头球中细胞活性良好。培养3 d,主成分分析显示,相比于第8代DPC组,原代DPC组、仿生毛乳头球组组内样本间变异程度较低,仿生毛乳头球组与原代DPC组组间样本变异程度最低,3组DPC样本超过90%的基因谱数据变异可由第1个和第2个主要成分来解释;Pearson相似性分析显示,组内样本重复性好,原代DPC组和仿生毛乳头球组样本间的相关系数为0.84~0.95,原代DPC组和第8代DPC组样本间的相关系数为0.72~0.87;3组DPC间差异表达基因分析筛选出642个组间交集差异表达基因,对其进行表达模式聚类显示有2种基因表达模式有显著趋势( P<0.05),分别为第8代DPC组基因表达显著低于原代DPC组/仿生毛乳头球组、第8代DPC组基因表达显著高于原代DPC组/仿生毛乳头球组,共包含411个差异表达基因;KEGG富集分析显示这411个差异表达基因在Wnt信号通路以及磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路显著富集( P<0.05),GO富集分析表明细胞外基质、经典Wnt信号通路、细胞分化等GO术语被显著富集( P<0.05)。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞基因 SOX8、MMP- 9、COL26A1、Wnt6 mRNA表达量均明显下降( q=15.950、8.854、11.890、11.050,9.851、5.884、7.418、4.870, P<0.01),与测序数据一致。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞生物功能标志物FGF7、Wnt10a、LEF1、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2 mRNA表达量均明显下降( q=11.470、9.795、4.165、9.242、10.970、10.570、8.005,7.472、4.976、3.651、4.784、5.236、6.825、5.214, P<0.05或 P<0.01)。注射后2周,第8代DPC组裸鼠无毛发再生,仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠再生毛发数量相近( q=1.852, P>0.05)且均显著高于第8代DPC组( q=18.980、17.130, P<0.01);第8代DPC组裸鼠注射区域皮肤仅形成了坏死灶,而仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠注射区域皮肤均观察到再生毛囊且毛囊横断切面有黑色素沉着。 结论:基于GelMA仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠DPC制备仿生毛乳头球的培养模型可一定程度上恢复高传代DPC在裸鼠中的毛发诱导能力,且其生物特性更加类似于原代DPC,可实现DPC的扩增后特性恢复。
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编辑人员丨1周前
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氯醋甲胆碱与乙酰甲胆碱在支气管激发试验临床应用中的对比分析
编辑人员丨1周前
目的:比较我国首个经国家药监局绿色通道批准优先上市的支气管激发试验(BPT)激发剂氯醋甲胆碱与传统激发剂乙酰甲胆碱在临床诊断应用效果与安全性方面的差异。方法:本研究为单中心横断面研究,收集广州医科大学附属第一医院肺功能室2022年9月至11月的氯醋甲胆碱BPT报告以及2017年3月至2022年4月的乙酰甲胆碱BPT报告,纳入成人(≥18岁)例数:氯醋甲胆碱组2 196例,乙酰甲胆碱组23 729例;儿童(4~17岁)例数:氯醋甲胆碱组365例,乙酰甲胆碱组5 330例。将成年和儿童分别用倾向性匹配法按照氯醋甲胆碱∶乙酰甲胆碱为1∶2匹配,匹配后成人分别为2 196例、4 392例,儿童分别为365例、730例。比较匹配后2组的阳性率、气道高反应性分级、阳性后舒张用药及恢复时间,以及匹配前的不良反应等情况。结果:匹配后的氯醋甲胆碱组和乙酰甲胆碱组在成人的阳性率分别为25.77%(566/2 196)、27.62%(1 213/4 391);儿童的阳性率分别为81.64%(298/365)、80.82%(590/730)。2组激发试剂间在成人及儿童的阳性率差异均无统计学意义(均 P>0.05)。成人2组间的气道高反应性分级差异无统计学意义( P=0.341),儿童2组间的阳性后舒张用药及舒张后恢复时间差异均无统计学意义(均 P>0.05)。匹配前氯醋甲胆碱组中有6例出现极轻、轻度不良反应;乙酰甲胆碱组中有57例极轻、轻度和1例中度不良反应。 结论:与乙酰甲胆碱对比,临床诊断试剂氯醋甲胆碱BPT阳性率、激发后恢复时间没有明显差异,且安全性良好,可在临床推广应用。
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编辑人员丨1周前
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SFTS病毒、登革病毒、汉滩病毒快速荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价
编辑人员丨1周前
目的:建立针对发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)、登革病毒(dengue virus, DENV)、汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)三种常见病毒性出血热病毒的现场应急快速检测方法。方法:基于传统的TaqMan荧光探针技术,利用国产快速一步法RT-PCR试剂盒,结合magnetic induction cycler (Mic) qPCR仪,建立三种常见病毒性出血热病毒的快速荧光定量RT-PCR检测方法。利用三种病毒体外转录RNA及模拟样本、其他相关病毒临床样本及健康人血标本进行灵敏度、特异性、重复性验证。结果:相较于传统的实时荧光定量RT-PCR方法,此方法所需时间大大缩短,可在35 min内完成检测。SFTSV、DENV、HTNV的最低检出限均小于100拷贝/PCR,与模拟对照样本及其他病毒临床样本无交叉反应,模拟阳性样本验证均可检出,且各组验证结果的 Ct值变异系数均小于4%。 结论:本研究建立的快速荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性。对于现场应急检测和媒介生物标本筛查具有一定的应用前景。
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编辑人员丨1周前
