目的 研究淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)对长双歧杆菌生长代谢的调控影响与长双歧杆菌发酵液的抗炎活性.方法 葡萄糖缺乏的MRS培养基中分别加入浓度为0.5％、1.0％、2.0％的淫羊藿总黄酮作为培养基,设置2.0％葡萄糖和2.0％低聚果糖培养基作为对照,测定发酵后长双歧杆菌的活菌数(CFU)、吸光度值等指标,以明确淫羊藿总黄酮对长双歧杆菌生长的影响,并使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)测定发酵液的体外抗氧化活性.以LPS诱导的RAW264.7为炎症模型,评价培养前后发酵液对造模前后相关炎症因子水平以确定抗炎作用.结果 TFE能够显著促进长双歧杆菌的增殖,5mg/mL、0.5 mg/mL、0.05mg/mL TFE的促生长率分别为59％、23％、20％,24h生长曲线也表明TFE的促增殖作用.胃肠道耐受性能研究发现,在长双歧杆菌生长环境中添加2％TFE能够提高菌株在0.3％胆盐(t=6.008,P＜0.01)、人工胃液(t=4.371,P＜0.05)和pH值为3的酸性环境(t=9.645,P＜0.001)中的稳定性,并提高了菌株在含有氯四环素、克林霉素、卡那霉素、甲硝唑、万古霉素的培养基中的生长浓度和体外抗氧化能力(t=15.141,P＜0.001).此外,添加TFE的长双歧杆菌发酵液可降低LPS诱导下的巨噬细胞表达促炎因子 TNF-α(t=4.655,P＜0.01)、IL-1β(t=7.775,P＜0.01)和 IL-6(t=7.775,P＜0.01)的水平,进而改善LPS诱导的炎症反应.结论 淫羊藿总黄酮可促进长双歧杆菌的生长与菌株稳定性,并增强长双歧杆菌的抗炎活性,有成为新型中药来源益生元的潜力.

目的 探究以燕麦 β-葡聚糖为基础的不同益生元组合配方对肠道健康的影响.方法 采用人体粪便体外发酵方法,对两个以燕麦β-葡聚糖为基础的益生元组合配方进行 24 h和 48 h发酵,通过qPCR和 16S rDNA的方法探究配方对肠道菌群的影响.之后采用双中心平行双盲随机对照人群试验,选取 192 名排便困难的 18～65 岁的健康成人,随机分为 3 组,分别干预 28 d,试验期间收集受试者的粪便,并记录受试者排便情况.采用线性混合效应模型、t检验和协方差分析探讨益生元组合配方对肠道菌群、排便状况和肠道健康状况的影响.结果 体外试验和人群试验显示,相比于对照组,以燕麦β-葡聚糖为基础的益生元组合配方可以促进肠道有益菌普拉梭菌(Faecalibacterium prausnitzii)、黏蛋白艾克曼氏菌(Akkermansia muciniphila)、霍尔德曼氏菌属(Holdemania)和布劳特氏菌属(Blautia)的增殖(P<0.05).经人群试验验证,相比于普通膳食纤维,燕麦β-葡聚糖为基础的两个益生元组合能改善排便,以及腹胀、消化不良等肠道健康问题(P<0.05).结论 以燕麦β-葡聚糖为基础的益生元组合配方,可促进肠道有益菌增殖,改善肠道健康.

目的 对副干酪乳杆菌(L.paracasei TK1501)发酵大豆产物中的后生元进行分离提取和体内外抑菌活性进行研究,评估该后生元在治疗幽门螺旋杆菌(Hp)感染的作用.方法 L.paracasei TK1501在无氧密闭的环境内以37℃、固态发酵参数中料水比1∶1.5,接种量5×107 CFU/mL,培养发酵32 h后,通过大孔树脂XAD-16N吸附法、阳离子交换色谱法、高效液相色谱法分离纯化,对L.paracasei TK1501后生元进行稳定性及抗菌效果分析.将50只C57雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阴性对照组、低剂量组(0.02 mL/只)和高剂量组(0.1 mL/只),10只/组,连续灌胃4周.取血清观察胃部炎症因子TNF-α、IL-1β表达水平变化,取小鼠胃组织进行HE染色.结果 L.paracasei TK1501后生元易被蛋白酶降解,热稳定性好,对酸碱、有机溶剂等不利因素有较好的耐受性(P<0.05);在体外试验中,对金黄色葡萄球菌、Hp等均有较好的杀灭作用;在动物实验中,与模型组相比,L.paracasei TK1501后生元高剂量组明显改善Hp感染(P<0.05),胃部炎症因子TNF-α、IL-1β表达水平变化明显下降(P<0.05).结论 L.paracasei TK1501后生元对Hp、金黄色葡萄球菌等具有较好的抑制和杀灭效果,而在相同条件下对肠道中的正常菌群则无明显影响.

牛樟芝是一种具有良好护肝功能的高等药用真菌,且具有浓郁的芳香.本文利用牛樟芝对碎红茶进行发酵,分析牛樟芝发酵茶风味特征以及对HepG 2细胞酒精损伤的保护作用.研究结果显示,青稞等淀粉质辅料能够促进牛樟芝在碎红茶上的生长.GC-MS分析显示牛樟芝发酵茶含有69种风味成分,主要含有醛类23种、醇类14种、酮类13种,酯类4种、呋喃类4种、吡嗪类3种以及其他5种等.HepG2体外活性分析表明,牛樟芝发酵茶水提物能够有效地保护肝细胞酒精损伤,与模型组相比细胞存活率提高了230％,细胞数量、形态以及贴壁性能得到显著改善.

目的 研究发酵工艺和体外消化过程对藜麦芽浓浆营养物质及抗氧化活性的影响.方法 借助体外模拟消化模型,对藜麦芽发酵浓浆进行消化,与未发酵浓浆对比,对蛋白质水解度、还原糖、多酚、黄酮含量进行测定.通过DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率以及铁还原能力和总抗氧化能力五种方法评价藜麦芽发酵浓浆的抗氧化活性.结果 与未发酵样品相比,经过发酵的藜麦芽浓浆蛋白质水解度提高了23.28％,模拟小肠消化后再提高17.14％;经过发酵后,藜麦芽浓浆的快消化淀粉(rapidly digested starch,RDS)和慢消化淀粉(slow digested starch,SDS)含量分别增加了21.22％、5.14％,抗性淀粉(resistant starch,RS)含量减少26.23％;多酚与黄酮经过消化含量明显升高,在模拟小肠消化中升高最明显,尤其发酵浓浆的多酚得到充分释放.在抗氧化活性研究中,对未发酵组、发酵组和发酵消化组分别进行抗氧化实验,均表现出一定抗氧化活性,发酵组和发酵消化组抗氧化能力明显高于未发酵组,同时发酵消化组抗氧化活性最高.结论 发酵可以提高藜麦芽浓浆的消化特性和抗氧化活性,经过消化后营养更易被吸收,且抗氧化活性增强.

目的 研究蛇足石杉内生真菌Penicillium chrysogenum MT-12经固体发酵培养后的代谢产物.方法 利用硅胶、Sephadex LH-20及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质及IR、MS、NMR等光谱数据鉴定化合物的结构;利用体外模型进行抗炎、乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选.结果 从P.chrysogenum MT-12固体发酵培养后的代谢产物中共分离鉴定8个二苯醚类化合物,分别为黄青霉内酯A(1)、黄青霉内酯B(2)、talaromyoneA(3)、isopenicillide (4)、penicillide (5)、hydroxypenicillide (6)、purpactinA(7)、黄青霉内酯C(8).结论 化合物1、2为新化合物,化合物3为首次从青霉属中分离得到,化合物4～8为首次从产黄青霉菌中分离得到;化合物1、2对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO产生有一定抑制活性,半数抑制浓度(IC50)值分别为(72.6±2.3)、(41.2±1.4) μmol/L,而所有化合物在100 μmol/L时对乙酰胆碱酯酶不显示抑制活性.

目的 研究甘草内生茵代谢物的体内外抗炎作用.方法 96孔板中接种巨噬细胞RAW264.7培养,模型组加入1 mg·L-1脂多糖(LPS),各受试药物组分别加入10,20,40 mg·L-1甘草水提液浸膏或内生茵发酵物,2h后再加入LPS1 mg·L-1培养,检测NO、IL-1β、PGE2的含量.Wistar大鼠90只,随机分为9组,空白组、模型组、阳性对照组给予生理盐水0.01 mL·g-1,甘草水煎液组给予甘草水煎液0.95 g·kg-1,各内生茵代谢物组给予甘草内生茵发酵物0.95 g·kg-1,每日1次,连续灌胃给药5d.末次给药后1h,除空白组外,各组大鼠尾静脉注射1 mg·kg-1体质量LPS,制备急性肺炎模型,空白组注射等量生理盐水,阳性对照组按5 mg·kg-1体质量腹腔注射地塞米松给药.6h后大鼠股动脉取血,检测外周血白细胞计数及血清中TNF-α、IL-6、IL-10的含量.结果 与LPS模型组比较,40 mg·L-1时,甘草浸膏组、5组内生菌代谢物组(JTZB006、JTZB018、JTZB059、JTZB060、JTZB063)巨噬细胞RAW264.7分泌的NO、PGE2、IL-1β的含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01);与同一质量浓度(40 mg·L-1)的甘草浸膏组比较,JTZB006、JTZB060组巨噬细胞RAW264.7分泌的PGE2的含量显著降低(P＜0.05).与模型组比较,阳性对照组、甘草水煎液组、3组内生茵代谢物组(JTZB006、JTZB060、JTZB063)大鼠外周血中白细胞数量及血清中TNF-α、IL-6的含量均显著降低,IL-10的含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01);与甘草水煎液组比较,JTZB006、JTZB060、JTZB063组IL-10的含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 3株甘草内生菌代谢物(JTZB006、JTZB060、JTZB063)对LPS诱导的炎症模型具有体外及体内抗炎作用.

目的:缓解白及药用资源压力,分离鉴定白及内生真菌并进行内生真菌胞外多糖活性强弱研究.方法:分离鉴定白及内生真菌,进行液体发酵培养获得胞外多糖,通过建立铁氰化钾法,2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)法,水杨酸法,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)法4种体外模型研究白及内生真菌胞外多糖的抗氧化活性.结果:从白及新鲜根中分离得到10株内生真菌,鉴定合并菌株后得到6株不同的菌株,其中10号菌株胞外多糖(0.1 9·L-1)总还原力最强,其维生素C(VC)当量高达12.01 mg·L-1,其次为6号菌株;清除DPPH自由基活性最强的为1号和6号菌株为16.6％;6号菌株清除羟基自由基活性最强为21.6％,最弱的为10号菌株仅为11.0％;测定其清除ABTS自由基活性时则发现,10号菌株活性最强为13.6％,其次为6号菌株,最弱的为5号仅为1.8％.结论:白及内生真菌胞外多糖具有一定的抗氧化活性,其中6号菌株胞外多糖总还原力,清除DPPH自由基活性,清除羟基自由基活性、清除ABTS自由基均较好,可以加以开发和利用.

通过响应面法优化提取发酵麸皮多糖的工艺,并评价其体外益生和抗氧化活性.以发酵麸皮多糖的得率为响应值,采用纤维素酶酶解与水浴浸提相结合的方法提取发酵麸皮多糖,以纤维素酶添加量、料液比、水浴浸提温度、水浴浸提时间为试验因素建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件.通过测定还原力、DPPH和·OH自由基的清除能力对比发酵和未发酵麸皮多糖的体外抗氧化活性,并通过测定嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、两歧双歧杆菌的生长对比发酵和未发酵麸皮多糖的体外益生活性.结果表明,发酵麸皮多糖最佳提取工艺为:料液比1∶16(w/v),酶添加量1000 U/g,水浴浸提温度90℃,水浴浸提时间60 min,在此条件下发酵麸皮多糖的得率实测值为73.35％.发酵麸皮多糖具有较强的DPPH和·OH自由基的清除能力,可促进嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和两歧双歧杆菌的生长.

采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型对一株球毛壳菌H6的发酵液和菌丝体两种乙酸乙酯提取物进行活性评价,结果表明,发酵液乙酸乙酯提取物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性,其IC50值为(510.76±23.46)μg/mL.采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备高效液相等色谱技术从其发酵液乙酸乙酯提取物中分离得到12个化合物.通过各种光谱分析,依次鉴定为chaetoviridins A-B(1-2),chaetoglobosins A-D(3-6),chaetoglobosin J(7),chaetoglobosin Q(8),prochaetogobosins Ⅰ-Ⅲ(9-11),vibratilicin(12),其中化合物12为首次从毛壳属中分离得到.对化合物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定发现,化合物12显示弱的抑制活性,其IC50为(1182.75±19.14)μg/mL.