维泰醇是从一种真菌诱变株的发酵产物中纯化分离出的新型单体化合物。体外细胞实验研究表明，它可以抑制前列腺癌的细胞分裂和增殖，引起细胞周期停滞；降低肿瘤细胞中Bcl-2等促存活蛋白的表达；激发细胞内氧自由基水平等导致细胞凋亡、减少线粒体有氧呼吸及肿瘤细胞ATP的产生、启动细胞自噬；但是对良性细胞没有显著的致死效应。体内动物实验表明，维泰醇能显著抑制前列腺癌的异植瘤生长，而对正常组织器官的不良反应较小。因此维泰醇有望开发成为新型抗前列腺癌药物。

目的:观察交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)复合体调节亚基Brahma相关基因-1(Brg-1)对结直肠癌血管生成的影响。方法:对结肠癌细胞系LoVo细胞感染sh-Brg-1慢病毒(Lenti-sh-Brg-1组)和对照病毒(Lenti-con组)，通过蛋白质印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测常氧及乏氧状态下乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的蛋白和mRNA水平的变化，运用体外微管形成实验观察低表达Brg-1对结直肠癌血管形成的影响，组间比较采用 t检验。 结果:Western blot结果证明，与Lenti-con组比较，Lenti-sh-Brg-1组细胞中Brg-1蛋白表达量明显降低。在常氧及乏氧状态下低表达Brg-1可以明显降低HIF-1α及VEGF-A在蛋白表达量。在常氧状态下，Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.53±0.08， t＝5.292， P<0.01)，HIF-1α(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.61±0.07， t＝5.380， P<0.01)，VEGF-A mRNA水平低于Lenti-con组(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.38±0.10， t＝6.169， P<0.01)；在乏氧状态下，Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.07±0.02， t＝44.680， P<0.01)，HIF-1α(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.21±0.05， t＝14.280， P<0.01)，VEGF-A mRNA水平低于Lenti-con组(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.15±0.06， t＝13.960， P<0.01)。最后证实在常氧和乏氧条件下，Brg-1低表达细胞条件培养基组的人脐静脉内皮细胞体外成管数目低于对照组(常氧，con 55.67±7.22比sh-Brg-1 22.33±5.36， t＝3.706， P<0.05；乏氧，con 66.33±7.62比sh-Brg-1 35.68±4.91， t＝3.382， P<0.05)。 结论:在LoVo细胞系中低表达Brg-1可以通过下调HIF-1α抑制血管形成。

目的 比较α-1,6葡聚糖和低聚异麦芽糖对益生菌的体外增殖作用,评价2种低聚糖对人体肠道菌群的影响.方法 脆弱拟杆菌在分别含有2种低聚糖的不同培养基中发酵,活菌计数绘制生长曲线;采集12位健康志愿者的新鲜粪便,将肠道菌群悬液按10％的接种量分别接种于Control组(含氮基础培养基)、α-1,6葡聚糖组(含氮基础培养基加1％α-1,6葡聚糖)及低聚异麦芽糖组(含氮基础培养基加1％低聚异麦芽糖),37℃恒温静态厌氧发酵24 h.采用高通量测序技术分析粪便发酵液菌群结构;应用高效液相色谱法检测粪便发酵液中短链脂肪酸(SCFAs)水平.结果 α-1,6葡聚糖促进脆弱拟杆菌增殖的能力较低聚异麦芽糖强[(5.27±0.33)vs(4.80±0.66),×108 CFU/mL];粪便发酵实验显示α-1,6葡聚糖可降低粪便中厚壁菌门/拟杆菌门比值(t=2.821,P=0.0478),显著提升 SCFAs 水平(丙酸:t=3.750,P=0.0092;丁酸:t=5.747,P=0.0018).结论 α-1,6葡聚糖可以改善肠道菌群结构并促进SCFAs产生.

目的:研究老鼠簕来源的内生真菌Diaporthe pseudomagiferae中聚酮类化合物分离纯化及其抗氧化、抗炎活性.方法:利用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱等色谱技术进行分离纯化,结合高分辨质谱、核磁共振波谱技术等综合谱学技术对化合物进行结构解析,对部分化合物进行抗炎活性评价和抗氧化活性筛选.结果:从Diaporthe pseu-domagiferae大米发酵产物中分离鉴定得到7个聚酮类化合物,分别为:[(8-methyl-9-oxabicyclo[4.2.1]nona-2,4-dien-7-yl)-(5-oxo-2H-furan-2-yl)methyl]acetate(1)、2,3-Dihydromycoepoxydiene(2)、Dothiorelone A(3)、Dothiorelone B(4)、Cytosporone B(5)、5,6-dihydroxy-2,3,6-trimethylcyclohex-2-enone(6)、3-(4-Methylphenoxy)propanoic acid(7).1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除实验结果显示,化合物1～5均未表现出抗氧化活性.酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,化合物1～5对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞释放的炎症因子白细胞介素-6(IL-6)有一定的抑制作用.结论:化合物1、3、4和6首次从老鼠簕内生真菌Diaporthe pseudomagiferae中分离得到,化合物1～5具有一定的抗炎活性,为进一步探索相关活性物质的抗炎机制奠定基础.

目的 分离纯化地茶属地衣内生真菌并对其次级代谢产物进行发酵,筛选具有较强抑菌及抗氧化活性的内生真菌菌株.方法 采用组织块法分离纯化地茶属地衣内生真菌,平板打孔法及平板对峙法筛查内生真菌发酵液对病原细菌及真菌的体外抑菌活性,DPPH自由基清除率、羟自由基清除率及总还原力表征内生真菌抗氧化活性.再通过ITS序列及文献对比鉴别真菌.结果 从中共分离鉴定出 7 株活性菌株.抑菌活性试验中,Ts-F016 发酵液粗提物对MRSA、耐药型白色念珠菌及斯氏李斯特菌抑制效果最强;平板对峙试验中,仅Ts-F016 对立枯丝核菌、油菜菌核病菌有一定的抑制效果,且抑菌率均超过 50%;抗氧化试验中,Tv-F008 及Ts-F016 对DPPH自由基、羟自由基的清除率均达 50%以上;总还原力测定中,Ts-F016 的Vc质量浓度最高(0.098 mg/mL).结论 Ts-F016具备良好的抑菌、抗氧化活性,为拟鬼伞属真菌,可为后续相关新型药物的发现奠定物质基础.

目的 以中药固体双向发酵方法,建立至真方的新型发酵工艺.方法 ①通过文献研究拟定候选发酵菌种.对候选发酵菌种进行平板混合实验,考察各菌种间生长兼容性.采用CCK-8 细胞增殖抑制实验,比较不同发酵条件下所得产物对人结直肠癌细胞(HCT-8)的半数抑制浓度(IC50),评判发酵体系的优劣,从而确定发酵菌种、发酵时长等关键发酵参数,建立发酵工艺.②通过 HCT-8 细胞增殖抑制率,以及巨噬细胞(RAW264.7)NO释放率和吞噬活性测定,比较至真方发酵前后的体外药效差异.结果 黑曲霉和酵母菌为最优发酵菌种组合,4 d为最优发酵时长.在此发酵条件下,发酵组对HCT-8 细胞的IC50 为 67.41 μg·mL-1,生药组对HCT-8 细胞的IC50 为 1 032 μg·mL-1;与生药组比较,发酵组能显著抑制RAW264.7 释放炎症因子NO,并显著提升其吞噬活性.结论 该研究建立了至真方固体双向发酵新工艺.在该发酵体系下,至真方的体外抗结直肠癌活性、抗炎活性和促免疫活性得到显著提升.

目的 研究淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)对长双歧杆菌生长代谢的调控影响与长双歧杆菌发酵液的抗炎活性.方法 葡萄糖缺乏的MRS培养基中分别加入浓度为0.5％、1.0％、2.0％的淫羊藿总黄酮作为培养基,设置2.0％葡萄糖和2.0％低聚果糖培养基作为对照,测定发酵后长双歧杆菌的活菌数(CFU)、吸光度值等指标,以明确淫羊藿总黄酮对长双歧杆菌生长的影响,并使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)测定发酵液的体外抗氧化活性.以LPS诱导的RAW264.7为炎症模型,评价培养前后发酵液对造模前后相关炎症因子水平以确定抗炎作用.结果 TFE能够显著促进长双歧杆菌的增殖,5mg/mL、0.5 mg/mL、0.05mg/mL TFE的促生长率分别为59％、23％、20％,24h生长曲线也表明TFE的促增殖作用.胃肠道耐受性能研究发现,在长双歧杆菌生长环境中添加2％TFE能够提高菌株在0.3％胆盐(t=6.008,P＜0.01)、人工胃液(t=4.371,P＜0.05)和pH值为3的酸性环境(t=9.645,P＜0.001)中的稳定性,并提高了菌株在含有氯四环素、克林霉素、卡那霉素、甲硝唑、万古霉素的培养基中的生长浓度和体外抗氧化能力(t=15.141,P＜0.001).此外,添加TFE的长双歧杆菌发酵液可降低LPS诱导下的巨噬细胞表达促炎因子 TNF-α(t=4.655,P＜0.01)、IL-1β(t=7.775,P＜0.01)和 IL-6(t=7.775,P＜0.01)的水平,进而改善LPS诱导的炎症反应.结论 淫羊藿总黄酮可促进长双歧杆菌的生长与菌株稳定性,并增强长双歧杆菌的抗炎活性,有成为新型中药来源益生元的潜力.

目的 探究以燕麦 β-葡聚糖为基础的不同益生元组合配方对肠道健康的影响.方法 采用人体粪便体外发酵方法,对两个以燕麦β-葡聚糖为基础的益生元组合配方进行 24 h和 48 h发酵,通过qPCR和 16S rDNA的方法探究配方对肠道菌群的影响.之后采用双中心平行双盲随机对照人群试验,选取 192 名排便困难的 18～65 岁的健康成人,随机分为 3 组,分别干预 28 d,试验期间收集受试者的粪便,并记录受试者排便情况.采用线性混合效应模型、t检验和协方差分析探讨益生元组合配方对肠道菌群、排便状况和肠道健康状况的影响.结果 体外试验和人群试验显示,相比于对照组,以燕麦β-葡聚糖为基础的益生元组合配方可以促进肠道有益菌普拉梭菌(Faecalibacterium prausnitzii)、黏蛋白艾克曼氏菌(Akkermansia muciniphila)、霍尔德曼氏菌属(Holdemania)和布劳特氏菌属(Blautia)的增殖(P<0.05).经人群试验验证,相比于普通膳食纤维,燕麦β-葡聚糖为基础的两个益生元组合能改善排便,以及腹胀、消化不良等肠道健康问题(P<0.05).结论 以燕麦β-葡聚糖为基础的益生元组合配方,可促进肠道有益菌增殖,改善肠道健康.

目的 研究中国健康女性阴道微环境中分离的乳杆菌对细菌性阴道病患者阴道微环境分离的阴道加德纳菌的抑制效应及其机制.方法 通过体外实验将中国健康女性阴道乳杆菌菌株和细菌性阴道病患者的阴道加德纳菌菌株共培养,观察乳杆菌对加德纳菌增殖活性的影响.将乳杆菌、阴道加德纳菌与阴道上皮细胞共培养,计算加德纳菌与上皮细胞的黏附情况,评价乳杆菌对加德纳菌黏附阴道上皮细胞的影响.比较乳杆菌培养的菌液、菌体、上清、阴道上皮细胞、乳杆菌菌体+阴道上皮细胞对加德纳菌增殖的抑制效应,分析乳杆菌抑制加德纳菌的可能机制.结果 对阴道加德纳菌增殖活性有显著抑制作用的乳杆菌菌株有5个(卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、发酵乳杆菌和德氏乳杆菌)(P＜0.05),其中3个菌株(卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌和詹氏乳杆菌)能够明显干扰加德纳菌对上皮细胞的黏附过程(P＜0.05).菌体、上皮细胞、上清、菌液的抑菌效果逐步递增,而菌体和上皮细胞同时存在时,其抑菌效果明显超过菌液.结论 健康女性阴道乳杆菌菌株可以抑制细菌性阴道病患者阴道加德纳菌的增殖活性,能干扰加德纳菌对阴道上皮细胞的黏附过程.乳杆菌是通过多种机制完成对加德纳菌的抑制效应的.

目的 以三七药渣为原料,通过益生菌发酵比较不同益生菌以及复合益生菌对各指标成分影响的差异,探究最佳发酵工艺.方法 采用单因素、Box-Behnken响应面法优化发酵工艺,并通过体外抗氧化实验评价发酵产物的抗氧化能力.结果 最佳发酵工艺为有氧发酵 48 h、厌氧发酵 36 h,嗜热链球菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌的比例为 2∶3∶1,料液比0.14 g·mL-1,接菌量 5%,温度 33℃.在最佳发酵工艺条件下,三七药渣中性多糖、酸性多糖、总黄酮的含量分别提高了105.64%、96.98%、123.83%,相较于单菌发酵均显著升高.发酵产物清除 DPPH、ABTS 自由基的 IC50 值分别为 1.774、3.065 mg·mL-1,还原Fe3+的能力为 0.138 mmol FeSO4·g-1,较未发酵药渣显著增强.结论 最佳发酵工艺能显著提高三七药渣中各指标成分含量,显著增强其抗氧化能力,相较单菌发酵各指标成分含量均显著提高,提示上述益生菌之间没有明显的拮抗作用.研究结果为三七药渣的资源化利用提供了科学依据和数据支撑.