目的:评价活性氧(ROS)在缺氧后处理激活大鼠心肌细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路中的作用。方法:分离、培养成年大鼠原代心肌细胞，采用随机数字表法分成4组( n＝20)：正常组(N)、缺氧复氧组(HR组)、缺氧后处理组(HPO组)及HPO+ROS清除剂组(HPO+MPG)。采用缺氧45 min复氧60 min的方法制备心肌细胞缺氧复氧损伤模型；HPO组缺氧45 min后，行3个循环的氧合5 min-缺氧5 min处理，再复氧60 min；HPO+MPG组缺氧35 min时加入ROS清除剂N-(2-硫基丙酰)-甘氨酸(终浓度2 mmol/L)继续缺氧处理10 min，余同HPO组。于复氧末，检测心肌细胞内Ca 2+水平和Nrf2活性，观察心肌细胞超微结构并进行线粒体Flameng评分；采用Western blot法和RT-PCR法分别检测心肌细胞Nrf2、醌氧化还原酶(NQO1)、SOD1、血红素加氧酶1(HO-1)及其mRNA表达。 结果:与N组比较，HR组心肌细胞内Ca 2+水平、Nrf2活性和Flameng评分升高，Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)；与HR组比较，HPO组心肌细胞内Ca 2+水平和Flameng评分降低，Nrf2活性升高，Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达上调( P<0.05)；与HPO组比较，HPO+MPG组心肌细胞内Ca 2+水平和Flameng评分升高，Nrf2活性降低，Nrf2、NQO1、SOD1、HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)。 结论:缺氧后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2/ARE信号通路的机制可能与ROS有关。

[目的]超氧化物歧化酶(SOD)是植物体内氧自由基的天然清除剂,对于保护植物免受环境胁迫起着关键作用,了解其在刺梨响应干旱胁迫中的作用,为深入研究刺梨SOD基因家族的功能提供基础.[方法]通过生物信息学对刺梨SOD基因家族进行系统鉴定和分析,对其理化性质、染色体位置、基因结构、亚家族进化、顺式作用元件和WGCNA进行全面分析,并利用RT-qPCR分析刺梨SOD基因家族在干旱胁迫下的表达模式.[结果]刺梨SOD基因家族有 9 个成员,包括 4 个Cu/ZnSOD基因、3 个MnSOD基因和 2 个FeSOD基因,分布在 5 条染色体上.基因结构显示,同一亚家族成员的基序组成较为相似,但内含子/外显子排列和数量差异较大.亚家族进化分析发现,MnSOD亚家族较原始,其在所有蛋白质位置都表现出高度保守性,其次是FeSOD和Cu/ZnSOD,Cu/ZnSOD亚家族各序列之间差异较大,又可以分为 3 个亚类.顺式作用元件分析显示,该家族基因参与多种植物激素、生长发育以及胁迫响应,特别是RrCSD2 启动子区含有类黄酮生物合成元件(MBSI).进一步通过转录组和WGCNA分析发现,RrCSD2 所在模块的基因显著富集到黄酮和黄酮醇生物合成、类黄酮生物合成和花生四烯酸代谢等途径,表明RrCSD2可能参与类黄酮代谢过程.RT-qPCR结果显示,在干旱胁迫下,除RrMSD1 和RrMSD2 的表达水平显著下降外,其余 7 个基因的表达水平总体呈现上升趋势,特别是RrCSD2和RrCSD3的表达水平显著上调.[结论]刺梨SOD基因在干旱胁迫中起到重要作用.

目的 探究沙棘果不同极性部位体外抗氧化能力及体内抗氧化作用,明确有效部位,为拓展沙棘果研发利用、优化制备工艺提供依据.方法 以沙棘果为原料,95%乙醇提取后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到不同极性部位提取物,采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)法、超氧阴离子自由基(O2·-)法及羟自由基(·OH)法,比较不同极性部位体外抗氧化作用.将110只小鼠随机分为空白组(Control),模型组(Model),沙棘果乙酸乙酯层低剂量组(YD,0.015 g/kg)、沙棘果乙酸乙酯层中剂量组(YZ,0.045 g/kg)、沙棘果乙酸乙酯层高剂量组(YG,0.135 g/kg),沙棘果正丁醇层低剂量组(ZD,0.04 g/kg)、沙棘果正丁醇层中剂量组(ZZ,0.13 g/kg)、沙棘果正丁醇层高剂量组(ZG,0.39 g/kg)及沙棘果醇提取物低剂量组(SD,0.16 g/kg)、沙棘果醇提取物中剂量组(SZ,0.5 g/kg)、沙棘果醇提取物高剂量组(SG,1.5 g/kg),每组10只.除Control外,其余各组每日腹腔注射浓度为0.05 g/mL D-半乳糖(D-gal)溶液,剂量为10 g/0.1 mL,Control注入等量生理盐水,连续60 d.造模第11天开始灌胃给药,给药组分别灌胃沙棘果不同极性部位提取物低、中、高剂量,Control与Model灌胃蒸馏水.末次给药后,考察小鼠体质量变化、脏器指数,对比各组小鼠的血清抗氧化能力,包括血清总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,观察心脏、肺脏、肾脏的病理变化.结果 沙棘果不同极性部位均可清除DPPH·、O2·-、·OH,具有体外抗氧化活性,其中沙棘果醇提取部位对DPPH·清除率高达76.09%,清除效果最强;体内实验结果显示,YG、ZZ、ZG、SZ、SG血清GSH-PX、SOD、T-AOC水平增高(P<0.05),且均可抑制MDA的积累(P<0.01).其中SG血清GSH-PX抗氧化水平为(872.73±165.39)U/mL、SOD为(180.02±12.33)U/mL、T-AOC为(9.25±1.45)U/mL,高于Model(P<0.01),MDA水平为(4.93±2.07)nmol/mL,相比于Model有所下降(P<0.05).HE染色结果表明,沙棘果不同极性部位对心脏、肺脏、肾脏组织细胞及结构损伤具有较好的修复作用.结论 沙棘果不同极性部位均具有一定的抗氧化作用,其中沙棘果醇提取物抗氧化能力最强,其余各部位抗氧化能力与极性呈正相关.

背景:细菌感染和血管生成功能受损一直是糖尿病创面愈合的障碍,多药耐药的问题同样不容忽视,因此迫切需要寻找一种新的治疗策略.目的:制备血小板伪装银纳米颗粒水凝胶,观察其对糖尿病创面的治疗作用.方法:①体外实验:通过回流加热的方式制备超小银纳米颗粒(ultra-small silver nanoparticles,usAgNPs),将其与血小板(platelets,PL)偶联后加入羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)水凝胶中,制备usAgNPs-PL/CMC水凝胶,表征水凝胶的微观结构、溶胀性能及力学性能,采用二甲氧唑黄比色法、活性氧法、细菌生物膜法、细菌活性等方法检测该水凝胶的抗菌能力.②体内实验:将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、CMC水凝胶组、usAgNPs/CMC水凝胶组和usAgNPs-PL/CMC水凝胶组,每组8只,除假手术组外,其余4组建立1型糖尿病模型,造模成功后在5组大鼠背部制作1个深达筋膜层的皮肤创面(直径20 mm),假手术组、模型组大鼠创面注射生理盐水,CMC水凝胶组、usAgNPs/CMC水凝胶组和usAgNPs-PL/CMC水凝胶组大鼠创面分别植入对应的水凝胶.治疗14 d后,观察创面愈合情况与愈合质量.结果与结论:①体外实验:usAgNPs-PL/CMC水凝胶具有均匀的三维网状结构、良好的力学性能与较强的吸水能力,可明显抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,并且对两细菌生物膜形成具有良好的抑制和清除作用,具有良好的抗菌能力;②体内实验:治疗14 d后,usAgNPs-PL/CMC水凝胶组创面基本闭合,创面愈合率最高,创面菌落数量明显少于模型组;治疗14 d的苏木精-伊红、Masson染色显示,usAgNPs-PL/CMC水凝胶组、usAgNPs/CMC水凝胶组和CMC水凝胶组创面出现再生真皮的组织结构,新生肉芽组织表皮均完整且厚,其中usAgNPs-PL/CMC水凝胶组可见堆积的平行的成熟胶原纤维;治疗7 d的CD31免疫组化及Ki67免疫荧光染色显示,usAgNPs-PL/CMC水凝胶组创面微血管数量、成纤维细胞数量最多;③结果表明:usAgNPs-PL/CMC水凝胶可通过快速抑菌和促进血管生成来加速1型糖尿病大鼠创面的愈合.

目的 探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)联合万古霉素(Vancomycin,VA)对体外建立的耐甲氧金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)生物膜的影响.方法 (1)以实验室标准菌株耐甲氧金黄色葡萄球菌(BAA-1556,ATCC)作为研究对象,通过结晶紫染色法,确定其最大面积生物膜生成时间.(2)建立实验分组,分别为空白对照组、万古霉素组、乙酰半胱氨酸组、万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组、万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组.通过结晶紫染色法评价生物膜相对面积大小.通过LB-琼脂培养板计数法测算生物膜内残余细菌数量.通过扫描电镜以及激光共聚焦显微镜下观察不同组MRSA细菌生物膜形态变化.结果 (1)MRSA菌在48 h可形成成熟的生物膜结构.(2)MRSA菌在各分组载体表面形成生物膜的半定量结果(波长=590 nm)分别为空白对照组1.32±0.60,万古霉素组1.05±0.15,乙酰半胱氨酸组0.53±0.20,万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组0.35±0.11,万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组0.29±0.10.证实NAC可显著减少生物膜面积.(3)24、48、72 h时间段生物膜内残余细菌量为空白对照组＞乙酰半胱氨酸组＞万古霉素组＞万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组＞万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).证实VA与NAC联合应用可以提高生物膜内细菌的清除率.(4)空白对照组存在大量活/死细菌共同构成的细菌生物膜;乙酰半胱氨酸组虽有较多活菌分布,但死菌黏附以及生物膜面积明显减少;万古霉素组存在着大量死菌黏附于载体表面,构成生物膜,与部分活菌共存;万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组活/死细菌分布明显减少;万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组生物膜面积极少,仅有少量活菌黏附于载体表面,且呈单个分布.结论 NAC对体外生成的MRSA菌生物膜有着清除作用,与VA联合应用可显著提升对生物膜内细菌的清除率.

重金属是当今环境污染物中关注度最高的毒物类别之一,其可对人体多个系统和器官造成严重的损伤.氧化损伤是重金属中毒的发生机制之一.核转录相关因子-2(nuclear factor-erythroid 2-related factor2,Nrf2)作为一类具有抗氧化功能的转录因子,通过识别并结合抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE),进一步启动多种抗氧化酶类的转录,清除多余的自由基,在重金属中毒的防治中起到重要作用.该文对Nrf2信号通路结构与作用及其在重金属锰、汞、镉、铅中毒发生过程中的调控作用进行综述,为重金属中毒防治提供新思路.

目的 研究西洋参对X线辐射所致小鼠肺过氧化损伤的防护作用.方法 将60只昆明小鼠常规饲养7d后,随机分为空白组,模型组,西洋参水煎剂低、中、高剂量组,干预组每日分别以不同浓度的西洋参水煎剂0.4 mL灌胃1次,空白组及模型组用等量蒸馏水代替,连续灌胃14 d.第15天除空白组以外其余各组小鼠均在灌胃后lh用X线仪进行肺部照射,照射总剂量为20 Gy,照射后72 h眼球采血并处死小鼠.测量肺指数,HE染色观察肺组织的形态变化,比色法检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含有量,免疫印记法(Western blot)检测肺组织中核转录因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)的表达情况.结果 与空白组比较,模型组小鼠肺指数升高,MDA含有量明显升高、SOD含有量明显降低,Nrf2蛋白表达上调,差异具有统计学意义(P＜0.05),与模型组比较,西洋参水煎剂低、中、高剂量组小鼠肺指数有所降低,MDA含有量明显下降、SOD含有量明显升高,Nrf2蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色可见:空白组小鼠肺组织结构清楚,肺泡腔整齐,无炎性渗出,肺泡壁薄而光滑;模型组小鼠肺组织结构模糊,肺泡充气不良、水肿明显,肺泡腔内大量炎性渗出;西洋参干预的三组小鼠肺组织损伤程度较模型组减轻,且减轻的程度与西洋参用量呈正相关.结论 西洋参对X线辐射所致小鼠肺过氧化损伤具有防护作用,其机制可能是通过减少肺组织中自由基的产生,并提高肺组织对自由基的清除能力实现的.

0引言高压氧治疗在临床应用中发挥着重要作用,特别是对于脑血管等缺血、缺氧疾病的治疗有显著的疗效[1-2].患者行高压氧治疗时,以空气为介质,将舱内环境压力升高到一定的高度,舱内患者通过面罩呼吸由专门的管道提供的高体积分数氧气,达到治疗疾病的目的.由于提供的是高体积分数氧气,该环境中的氧气体积分数超过23%[3],同时又存在易燃物和火种,舱内就可能发生严重的爆燃事故[4],造成严重的医疗事故,从而威胁到舱内人员的生命安全,国内已经有多起医用空气加压氧舱发生爆燃事故的报道[5-6].为防止舱内发生爆燃事故,就应该严格控制易燃物、火种和氧气体积分数.本文重点讨论氧气体积分数的控制.舱内的氧气体积分数升高的因素是多方面的,如患者的呼吸面罩没有戴严实、舱内氧气管道中的氧气发生泄漏等都会造成氧气体积分数的上升.为此,我们强调患者将面罩戴严实的同时并对高压氧舱舱内供氧管路系统进行分析研究,对可能发生泄漏的部分进行改进,使氧气管道中的氧气不发生泄漏,以减少舱内氧气体积分数进一步升高而导致的危险.

长寿因子5 (Sirtuin 5),也叫SIRT5,是长寿因子(Sirtuins)家族成员之一.除具有去乙酰化酶活性外,还具有很强的去琥珀酰化、去丙二酰基化及去戊二酰基化活性.现已明确的SIRT5的底物仅有十余种,通过对不同底物发挥相同的酶活性,或对同一底物发挥不同的酶活性,参与调控葡萄糖氧化、脂肪酸氧化、氨解毒等物质代谢和活性氧自由基(ROS)清除、抗凋亡、炎性反应等多种生命活动.SIRT5表达异常与肿瘤的发生及发展密切相关,但其作用尚无定论.SIRT5可促进肿瘤增殖、转移、耐药及代谢重编程,发挥促癌基因作用;也可抑制肿瘤细胞生长和凋亡,发挥抑癌基因作用.此外,SIRT5异常还与肥厚性心肌病和心肌梗塞等心血管疾病,及帕金森病和阿尔兹海默症等神经代谢性疾病密切相关.本文将从SIRT5的结构与调控、酶活性与生物学功能、及SIRT5与疾病的关系等方面进行综述,以全面了解SIRT5的研究现状.

目的 通过复制糖尿病肾病大鼠模型,以药物干预改变糖尿病肾病大鼠肾脏中血红素加氧酶1(HO-1)水平,从而探讨HO-1对2型糖尿病肾病大鼠肾脏功能的影响.方法 32只SD大鼠适应性喂养1周后,随机分成正常对照组、糖尿病肾病(DN)组、DN氯化血红素组和DN锌原卟啉组.除正常对照组外,其他3组复制糖尿病肾病模型,进行药物干预.各组大鼠用药4周后进行取材,大鼠处死前禁食收集24 h尿液,测定大鼠24 h尿量和尿肌酐(Ucr).大鼠麻醉后心脏取血,分别检测血肌酐(Scr)和血胱抑素C(Cys-c)的浓度,计算内生肌酐清除率(Ccr).肾脏组织HE染色观察大鼠肾脏组织结构是否异常,电镜下观察肾小球和肾小管超微结构的改变,应用免疫组织化学和Western blot技术对肾脏中HO-1进行定位和定量分析.结果 ①DN组、DN氯化血红素组和DN锌原卟啉组Scr、Cys-c、Ucr、Ccr与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),DN组、DN氯化血红素组和DN锌原卟啉组Scr和Cys-c升高,Ucr、Ccr降低,DN锌原卟啉组Scr和Cys-c增加幅度较DN组和DN氯化血红素组高.②HE染色及电镜结果显示,正常对照组大鼠肾脏组织结构无明显变化,其余3组大鼠肾脏组织结构均有改变.肾脏组织结构破坏程度,DN锌原卟啉组>DN组>DN氯化血红素组.③Western blot结果显示,DN氯化血红素组肾脏中HO-1表达水平高于DN组,DN锌原卟啉组肾脏中HO-1表达水平低于DN组.结论 DN氯化血红素组大鼠肾脏中HO-1表达水平升高,而DN锌原卟啉组大鼠肾脏中HO-1表达水平下降,DN氯化血红素组大鼠肾脏的损伤指标以及肾脏组织形态学的损伤程度轻于DN锌原卟啉组,实验结果说明提高2型糖尿病肾病大鼠肾脏中HO-1表达水平可以减轻肾脏损伤.