乙型肝炎已成为严重威胁人类健康的世界性疾病，也是我国当前流行广泛、危害性严重的传染病之一。据《中国卫生健康统计年鉴（2022）》数据显示，2021年，我国乙型肝炎发病率为69.25人/10万人。为了使感染科临床工作者获得乙型肝炎研究的前沿信息，本文对乙型肝炎的靶点和新型诊断标志物与病毒复制的相关性、临床意义及检测技术改进等作了重点介绍，建议有条件单位逐步扩大检测，这将对临床诊断率及抗病毒药物评估有帮助，并有助于实现世界卫生组织提出“到2030年乙型肝炎诊断率要提升至90%”的目标。

直接抗病毒药物（DAAs），是治疗慢性乙型肝炎的重要手段。DAAs能直接干扰病毒的感染复制过程，减少子代病毒产率，继而影响体内乙型肝炎病毒（HBV）的两种动态平衡，即肝细胞中病毒复制-循环中病毒衰减之间的平衡，共价闭合环状DNA（cccDNA）池补充-cccDNA衰减之间的平衡。现有核苷（酸）类似物足以影响第一种平衡，却难以撼动第二种平衡。因此，靶向HBV感染复制的不同环节，开发新型DAAs十分必要。现从cccDNA池补充-cccDNA衰减这一平衡的两个方面，探讨近期DAAs研发的主要进展。

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染可以导致严重的肝脏疾病，是肝纤维化、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)病死率高的主要原因。尽管已经拥有有效的疫苗，但三联乙肝疫苗的全球覆盖率为84%，未达100%，现有感染人数与新增人数仍然很多。目前主要的抗HBV药物为核苷/核苷酸类似物(nucleotide analogues，NAs)以及干扰素(interferon，IFN)。但二者对病毒持续存在的根本因素——共价、闭合、环状DNA分子(covalently closed circular DNA，cccDNA)无效，故现有的抗病毒药物并不能彻底治愈HBV感染。HBV的新型治疗方法可以通过靶向cccDNA而使其失效，为治愈慢性HBV感染带来了希望。文章对当前新型治疗方法中研究较多的RNA干扰、基因编辑和表观遗传修饰方法在治疗HBV感染中的作用和新发展进行概述。

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球持续关注的重大公共健康问题之一。由于对HBV生命周期的认识还不够充分，目前尚缺乏有效治愈慢性乙型肝炎的药物。在HBV复制过程中，共价闭合环状DNA作为病毒复制的模板，可转录产生长度为3.5、2.4、2.1 kb以及0.7 kb的5种病毒RNA，分别翻译产生HBeAg、core蛋白、聚合酶（P）蛋白、HBsAg和HBx蛋白。其中，3.5?kb的前基因组RNA（pgRNA）也是病毒逆转录的模板，P蛋白可识别并结合pgRNA上的衣壳组装信号，启动衣壳组装和逆转录。近年来研究发现，HBV RNA的剪接、核输出、稳定性、翻译以及pgRNA衣壳化等过程均受到宿主细胞内的转录后调控网络调控，并依赖HBV RNA结构中独特的转录后调节元件。现对HBV RNA的转录后调控机制及其在HBV抗病毒治疗药物研究中的应用进行综述，以期为靶向HBV RNA的新药研发提供新思路。

慢性乙型肝炎（CHB）严重威胁国人健康。病毒学指标在患者抗病毒治疗、新药研发中意义重大。然而，传统的血清病毒学指标如HBV DNA和乙型肝炎表面抗原（HBsAg）在评估抗病毒治疗效果和准确反映患者共价闭合环状DNA（cccDNA）的转录活性方面存在一定的局限。近年来HBV RNA、乙型肝炎核心相关抗原（HBcrAg）及核心抗体定量（qAnti-HBc）等新病毒学指标在准确反映cccDNA转录活性、判定患者治疗效果以及预测停药后复发风险等方面的作用越来越受到关注。现简要介绍在CHB患者抗病毒治疗的各阶段新、旧指标的应用情况，并结合新型病毒学新指标在药物疗效评价中的应用，阐述其在抗病毒新药研发中可能发挥的作用。

目的:使用preS1-tp融合蛋白作为新型的载体，介导针对乙型肝炎病毒（HBV）核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区的小干扰RNA(siRNA)进入感染HBV的肝细胞，从而抑制HBV复制和共价闭合环状DNA的形成。方法:以慢病毒感染系统为基础，建立表达人牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽的HepG2.2.15细胞；针对HBV NLS区设计合成siRNA；表达纯化preS1-tp融合蛋白，检测其进入细胞和与DNA结合的能力；以preS1-tp融合蛋白为载体，介导NLS siRNA递送至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞中,观察其对HBV复制和共价闭合环状DNA水平的影响。多组间比较采用方差分析，计量资料用 t检验分析组间差异。 结果:成功构建HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞株并合成筛选出显著抑制HBV复制的HBV NLS siRNA。纯化并大量表达preS1-tp融合蛋白，以该融合蛋白为载体靶向输送HBV NLS siRNA，结果显示，融合蛋白可以有效靶向输送siRNA至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞，不仅可有效抑制细胞中HBV mRNA，HBsAg和HBeAg表达，还能显著降低HBV DNA和共价闭合环状DNA的水平。结论:preS1-tp融合蛋白利用preS1与肝细胞HBV受体结合，tp与核酸结合的双功能特点，将针对HBV NLS的siRNA靶向至感染HBV的靶细胞，靶向阻断rcDNA转运入细胞核，使siRNA发挥抑制HBV复制和共价闭合环状DNA合成的作用，为HBV感染所致慢性乙型肝炎治疗提供新策略，为彻底清除体内HBV提供新的研究视角。

乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）是HBV复制的模板，在缺乏直接靶向cccDNA治疗药物的情况下，阻断cccDNA的补充并尽快耗竭已有的cccDNA是实现慢性乙型肝炎彻底治愈的关键。既往研究认为cccDNA的半衰期很长，但近期的一项研究结果提示cccDNA池的更新周期仅为数月，远低于之前的预测。未来，随着新的、能够完全抑制HBV复制的抗病毒药物出现，cccDNA池将有望因其补充被完全阻断而被彻底清除，进而实现慢性乙型肝炎的病毒学治愈。

核衣壳组装调节剂作为新型抗HBV药物，能影响HBV复制，使共价闭合环状DNA（cccDNA）暴露而便于其被降解酶降解，从而同时减少cccDNA库。本文对主要的核衣壳组装调节剂及其与HBV核心蛋白之间相互作用方面的研究进展作一综述。

慢性乙型肝炎(CHB)患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)自发清除率较低，在HBsAg清除较长时间后，由于体内共价闭合环状DNA(cccDNA)的存在，部分患者仍可以检测到HBsAg。能够准确反映cccDNA的指标对患者的治疗具有重要的临床意义。乙型肝炎核心相关抗原(HBcrAg)是新型血清标志物，其低水平与较高的乙型肝炎病毒特异性T细胞反应和HBsAg清除率相关，能更好地反映CHB患者体内cccDNA的转录活性。HBcrAg在乙型肝炎e抗原血清学转换、病毒学与临床复发、疾病进展方面也有较好的预测价值，监测HBcrAg可有效提高对CHB患者疾病进展情况的判断。

乙型肝炎治疗的理想目标是实现功能性治愈,但肝内持续存在的共价闭合环状DNA（cccDNA）是HBV长期感染的关键因素，也是难以实现彻底治愈的原因。当前以聚乙二醇干扰素α和核苷（酸）类似物为代表的抗病毒药物均不能消除cccDNA，因此难以实现功能性治愈。随着对各种机制和药物靶点的探索不断深化，许多针对乙型肝炎病毒生命周期和免疫系统的新药研发取得显著进展，为乙型肝炎的功能性治愈带来了希望。现结合近年发表的文献和国际会议资料，概述慢性乙型肝炎抗病毒治疗新药临床研究的最新进展。