目的 探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中对HK-2细胞氧化炎性反应和细胞焦亡的作用及其机制.方法 建立肾脏HK-2细胞缺氧复氧模型,将HK-2细胞随机分为缺氧复氧组、对照组、沉默PCSK9组、沉默PCSK9的对照组.采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同复氧损伤时间点PCSK9的表达变化;使用商业试剂盒检测转染PCSK9后对HK-2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响;使用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测转染PCSK9后对HK-2细胞的炎性因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测转染PCSK9后对HK-2细胞焦亡相关蛋白Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1表达水平的影响.组间比较采用配对样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 qRT-PCR结果显示对照组及缺氧复氧组(0、2、4、6、8 h)PCSK9的mRNA表达水平分别为(1.00±0.18、3.24±0.31、3.61±0.36、3.79±0.39、4.26±0.43、4.08±0.39)高于未缺氧 HK-2 细胞的对照组(1.00±0.18、1.02±0.11、1.01±0.15、1.00±0.12、1.05±0.11、0.99±0.12),随着复氧损伤时间的增加,PCSK9表达逐渐增高,并在复氧6 h达到峰值(F=34.47,P＜0.05).SOD和MDA检测结果显示缺氧复氧组的SOD含量低于对照组,而MDA含量高于对照组[SOD:(5.23±0.46)U/mg比(13.18±1.02)U/mg,t=12.306,P＜0.05;MDA:(3.53±0.27)nmol/mg 比(1.66±0.18)nmol/mg,t=-9.981,P＜0.05].沉默PCSK9 组中 SOD 含量高于其对照组[(10.12±0.98)U/mg 比(5.19±0.50)U/mg,t=-7.762,P＜0.05].沉默 PCSK9 组中 MDA 含量低于对照组[(2.09±0.18)nmol/mg 比(3.54±0.29)nmol/mg,t=7.358,P＜0.05].ELISA 试剂盒检测结果显示缺氧复氧组的 IL-1β 和 IL-18 含量均高于对照组[IL-1β:(35.12±3.21)pg/ml 比(15.64±1.88)pg/ml,t=-9.070,P＜0.05;IL-18:(98.76±9.71)pg/ml 比(52.17±5.09)pg/ml,t=-7.361,P＜0.05].沉默PCSK9组中IL-1β 和IL-18 含量均低于对照组[IL-1β:(22.31±1.98)pg/ml 比(35.24±3.46)pg/ml,t=5.618,P＜0.05;IL-18:(71.36±6.98)pg/ml 比(99.23±9.78)pg/ml,t=4.018,P＜0.05].Western blot结果显示缺氧复氧组中NLRP3和Caspase-1表达水平均高于对照组(NLRP3:0.57±0.05 比 0.27±0.02,t=-9.649,P＜0.05;Caspase-1:0.47±0.04 比 0.20±0.03,t=-9.353,P＜0.05).沉默 PCSK9 组中 NLRP3 和 Caspase-1 表达水平均低于对照组(NLRP3:0.31±0.03 比 0.55±0.05,t=7.129,P＜0.05;Caspase-1:0.25±0.02 比 0.48±0.04,t=8.908,P＜0.05).结论 PCSK9在HK-2细胞中呈高表达,其可能是通过增加HK-2细胞氧化炎症水平以及促进细胞焦亡,从而影响肾脏IRI的发生发展.

前蛋白转化酶枯草溶菌素/Kexin 9型(PCSK9)抑制剂已成为治疗高胆固醇血症和动脉粥样硬化性心血管疾病的新药物。近年来研究表明，PCSK9在动脉粥样硬化性心血管疾病方面的作用机制十分复杂，与血浆低密度脂蛋白胆固醇水平升高、细胞凋亡、自噬、炎症、泡沫细胞形成和血管平滑肌细胞钙化等密切相关，这有助于我们更好地理解PCSK9抑制剂的"作用多效性"。本综述旨在分析PCSK9在分子结构、细胞功能、心血管疾病治疗方面的研究现状，这将进一步巩固针对动脉粥样硬化新治疗策略的成功。

目的:探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）对脓毒症相关血小板活化的作用。方法:①临床试验：采用前瞻性研究方法，选择2021年1月至10月滨州医学院附属医院重症医学科收治的年龄≥18岁且符合脓毒症3.0诊断标准的脓毒症及脓毒性休克患者作为研究对象；以同期健康体检者作为对照。记录患者入院后第1次血常规中血小板计数（PLT）；并于确诊1 d取静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清PCSK9水平。比较两组PCSK9水平及PLT的差异，并针对脓毒症患者根据PLT进行亚组分析；采用Pearson相关法分析脓毒症患者PCSK9水平与PLT的相关性。②动物实验：将80只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、脓毒症模型组〔脂多糖（LPS）组〕、PCSK9抑制剂预处理组（PCSK9 inhibitor+LPS组）及PCSK9抑制剂对照组（PCSK9 inhibitor组），每组20只。腹腔注射LPS 12 mg/kg制备脓毒症小鼠模型；对照组和PCSK9 inhibitor组注射等量无菌生理盐水。PCSK9 inhibitor+LPS组及PCSK9 inhibitor组分别于注射LPS或生理盐水前腹腔注射PCSK9抑制剂5 mg/kg预处理7 d；对照组及LPS组注射等量无菌生理盐水。制模后24 h取肺组织进行病理学及免疫组化观察；取心脏血检测PLT；采用流式细胞仪检测血小板活化情况；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测血小板活化标志物CD40L的蛋白表达。结果:①临床试验：最终共纳入脓毒症患者57例，同期27例健康体检者作为对照。脓毒症组血清PCSK9水平较健康对照组明显升高（μg/L：232.25±72.21比191.72±54.92， P<0.05），PLT较健康对照组明显降低〔×10 9/L：146.00（75.50，204.50）比224.00（194.00，247.00）， P<0.01〕；进一步亚组分析显示，脓毒症血小板减少者（ n＝20）血清PCSK9水平较非血小板减少者（ n＝37）明显升高（μg/L：264.04±60.40比215.06±72.95， P<0.01）。相关分析显示，脓毒症患者血清PCSK9水平与PLT呈显著负相关（ r＝-0.340， P＝0.010）。②动物实验：光镜下显示，对照组与PCSK9 inhibitor组肺组织均无明显病理学改变，且两组PLT、血小板活化情况及血浆CD40L蛋白表达差异均无统计学意义；LPS组小鼠肺间质可见大量炎症细胞浸润，肺泡结构破坏明显，肺泡间隔增厚，肺泡腔内广泛出血，毛细血管扩张并存在出血及血小板聚集，PLT明显降低，血小板活化及血浆CD40L蛋白表达水平显著增加；而给予PCSK9抑制剂预处理后，小鼠肺组织炎症细胞浸润较LPS组有一定程度减少，肺泡间隔增厚减轻，肺组织血小板聚集减少，PLT显著升高（×10 9/L：515.83±46.60比324.83±46.31， P<0.05），血小板活化及血浆CD40L蛋白表达水平显著降低〔血小板α颗粒膜糖蛋白CD62P阳性表达率：（12.15±1.39）%比（18.33±2.74）%，CD40L蛋白（CD40L/β-actin）：0.77±0.08比1.18±0.10，均 P<0.05〕。 结论:脓毒症中PCSK9水平对促进血小板活化有一定的作用，抑制PCSK9水平对于改善脓毒症血小板减少致不良结局的效果可能具有潜在研究价值。

目的:探究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)在幽门螺杆菌( H. pylori)感染导致炎症反应中的作用机制。 方法:收集2020年5月1日至2021年1月31日初次就诊于十堰市太和医院消化内科的60例胃炎患者( H. pylori阳性和阴性患者各30例)与30例健康体检者，检测其血清PCSK9水平。选取 H. pylori标准菌株、4种 H. pylori临床分离菌株、正常胃上皮细胞系GES-1与THP-1细胞经诱导形成的巨噬细胞。将 H. pylori菌株与胃上皮细胞系GES-1共培养以制备不同上清液培养基，设立磷酸盐缓冲液空培养基即阴性对照培养基(阴性对照组)、 H. pylori与GES-1细胞共培养上清液培养基( H. pylori感染GES-1组)、正常GES-1细胞上清液培养基( H. pylori未感染GES-1组)、 H. pylori与GES-1细胞共培养上清液+PCSK9中和抗体培养基(抗PCSK9组)、 H. pylori与GES-1细胞共培养上清液+人免疫球蛋白G2培养基(同型对照组)。采用Transwell迁移实验、实时荧光定量聚合酶链反应、平板集落形成实验、 H. pylori吞噬溶酶体共定位实验等比较 H. pylori感染GES-1组、 H. pylori未感染GES-1组和阴性对照组，以及抗PCSK9组和同型对照组的巨噬细胞迁移数、CC趋化因子受体( CCR2)mRNA相对表达水平、白细胞介素(IL)-6和细胞坏死因子(TNF)-α释放水平、CD8 + T细胞胞膜磷酸化水平、巨噬细胞菌落数，分析PCSK9对 H. pylori感染导致炎症反应的调控机制。统计学方法采用独立样本 t检验。 结果:H． pylori阳性胃炎患者的血清PCSK9水平高于 H. pylori阴性胃炎患者和健康体检者[(384.00±57.57) μg/L比(208.80±48.89)、(176.10±47.14) μg/L]，差异均有统计学意义( t＝12.71、15.31，均 P<0.001)。与阴性对照培养基相比， H. pylori标准菌株和4种分离菌株均可诱导正常胃上皮细胞系GES-1分泌PCSK9[(1 267.00±287.50] g/L比(2 717.00±199.20)、(4 858.00±302.40)、(3 167.00±334.20)、(6 075.00±597.30)、(4 283.00±331.20) g/L]，差异均有统计学意义( t＝10.15、21.09、10.56、17.77、16.85，均 P<0.001)。 H. pylori感染GES-1组的巨噬细胞迁移数、巨噬细胞 CCR2 mRNA相对表达水平、IL-6水平、TNF-α水平和巨噬细胞菌落数均高于 H. pylori未感染GES-1组和阴性对照组[132.20±5.67比84.83±4.62、39.83±4.12，8.66±0.94比6.52±0.47、1.00±0.09，(281.00±8.56) ng/L比(115.00±7.72)、(64.00±5.44) ng/L，(619.80±18.47) ng/L比(373.30±12.85)、(225.70±6.44) ng/L，(357.00±16.31)菌落形成单位(CFU)比(134.80±8.64)、(74.17±9.68) CFU]，差异均有统计学意义( t＝15.85、32.27，4.96、19.79，35.28、52.43，26.84、49.37，29.49、36.53；均 P<0.001)。 H. pylori感染GES-1组的 H. pylori吞噬溶酶体共定位百分比，以及CD8 + T细胞胞膜CD3ζ Tyr142、杀伤分子颗粒酶B和穿孔素表达水平均低于 H. pylori未感染组和阴性对照组[(15.33±1.86)%比(34.50±3.72)%、(65.67±3.56)%，464.20±120.80比1 924.00±262.10、2 390.00±484.10，(6.41±0.42)%比(17.37±0.73)%、(26.60±1.57)%，(6.84±1.37)%比(14.53±0.48)%、(26.22±1.21)%]，差异均有统计学意义( t＝11.27、30.70，12.39、9.45，30.50、31.90，25.96、13.00；均 P<0.001)。抗PCSK9组的巨噬细胞迁移数、 CCR2 mRNA相对表达水平、IL-6水平、TNF-α水平和巨噬细胞内菌落数均低于同型对照组[72.50±4.97比128.30±6.74、0.82±0.06比1.00±0.08、(85.50±4.37) ng/L比(277.70±8.98) ng/L、(291.80±13.69) ng/L比(615.30±12.65) ng/L、(111.50±10.21) CFU比(346.20±18.04) CFU]，差异均有统计学意义( t＝16.33、4.40、47.13、42.50、27.73，均 P<0.001)。抗PCSK9组的 H. pylori吞噬溶酶体共定位百分比，以及CD3ζ Tyr142、杀伤分子颗粒酶B和穿孔素的表达水平均高于同型对照组[(51.05±3.03)%比(16.71±1.91)%、2 948.00±384.00比1 156.00±178.60、(53.88±3.86)%比(5.88±0.93)%、(32.80±2.07)%比(6.83±0.54)%]，差异均有统计学意义( t＝23.49、10.36、29.60、29.76，均 P<0.001)。 结论:H． pylori通过诱导胃上皮细胞释放PCSK9抑制CD8 +T活化和细胞毒作用，还可招募巨噬细胞，激活核因子κB信号轴上调巨噬细胞炎症因子释放水平，抑制巨噬细胞的吞噬杀伤作用，调控炎症反应。

血脂管理需根据动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）危险分层进行。该共识将发生过≥2次严重的ASCVD事件或发生过1次严重的ASCVD事件合并≥2个高风险因素的患者，定义为超高危ASCVD患者。低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是降脂治疗的首要干预靶点。建议对符合中国超高危ASCVD定义的患者，LDL-C水平的干预靶标为降低至1.4 mmol/L以下且较基线降幅超过50%；所有超高危ASCVD人群，应在控制饮食和改善生活方式的基础上，尽早开始并长期进行降脂治疗。降脂治疗方案包括他汀类药物、依折麦布、前蛋白转化酶枯草溶菌素/kexin 9型（PCSK9）抑制剂等单药或联合治疗。根据LDL-C水平的干预靶标以及超高危ASCVD患者的血脂管理路径，临床医生需识别超高危ASCVD患者，选择合理的降脂治疗，达到血脂管理及预防不良心血管事件再发的目标。

目的:探讨肥胖性多囊卵巢综合征患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）、分泌型卷曲相关蛋白-4（SFRP-4）表达与性激素、糖脂代谢的相关性。方法:回顾性选取2021年4月至2022年10月徐州市妇幼保健院诊治的130例多囊卵巢综合征患者作为研究对象，根据体质量指数将患者分为肥胖组60例，非肥胖组70例。采用酶联免疫吸附法检测血清PCSK9、SFRP-4水平。对肥胖性多囊卵巢综合征患者血清PCSK9、SFRP-4水平与性激素（促黄体生成素、睾酮、卵泡刺激素）、糖代谢指标[空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA lc）、空腹胰岛素（FINS）、稳态模型评估法胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）]、脂代谢指标[总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）]的相关性进行Pearson法分析。 结果:肥胖组较非肥胖组多囊卵巢综合征患者血清PCSK9、SFRP-4水平均显著升高[（679.36 ± 162.21） μg/L比（421.68 ± 103.74） μg/L、（302.87 ± 70.58） μg/L比（184.21 ± 52.45） μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）；与非肥胖组相比，肥胖组患者促黄体生成素、睾酮水平明显升高[（18.36 ± 5.34） U/L比　（9.47 ± 2.21） U/L、（3.61 ± 0.97） nmol/L比（3.02 ± 0.84） nmol/L]（ P<0.05），卵泡刺激素水平明显降低[（7.28 ± 1.62） U/L比（8.03 ± 2.10） U/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）；肥胖组多囊卵巢综合征患者FPG、HbA lc、FINS水平及HOMA-IR均显著高于非肥胖组[（5.46 ± 0.67） mmol/L比（5.04 ± 0.49） mmol/L、（7.96 ± 0.98）%比（6.68 ± 0.77）%、（34.08 ± 3.64） U/L比（23.67 ± 2.52） U/L、8.27 ± 1.84比5.30 ± 1.52]，差异有统计学意义（ P<0.05）；与非肥胖组相比，肥胖组多囊卵巢综合征患者TC、TG、LDL-C水平均显著升高[（4.86 ± 0.67） mmol/L比（4.12 ± 0.54） mmol/L、（1.64 ± 0.36） mmol/L比（1.06 ± 0.21） mmol/L、（2.81 ± 0.56） mmol/L比（2.14 ± 0.42） mmol/L]（ P<0.05），HDL-C水平明显降低[（1.11 ± 0.25） mmol/L比（1.52 ± 0.40） mmol/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）；肥胖性多囊卵巢综合征患者血清PCSK9、SFRP-4水平与促黄体生成素、睾酮、FPG、HbA lc、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C呈正相关（ P<0.05），与卵泡刺激素、HDL-C呈负相关（ P<0.05）。 结论:肥胖性多囊卵巢综合征患者血清PCSK9、SFRP-4水平升高，与患者性激素、糖脂代谢有关。

目的:通过分析不同等位基因分级的家族性高胆固醇血症（FH）患者前蛋白转化酶枯草溶菌素/kexin9型（PCSK9）抑制剂治疗前后低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的变化，探讨FH表型分子病因分类对PCSK9抑制剂降脂疗效的提示作用。方法:选取2019年1月至2020年10月就诊于北京安贞医院的FH表型患者，收集其年龄、性别等临床信息，经二代测序技术进行致病基因检测。依据受累等位基因数量及基因受损程度将患者分为单等位基因-缺失突变组、单等位基因-缺陷突变组、多等位基因-缺失突变组、多等位基因-缺陷突变组以及无主要致病基因突变组。检测不同等位基因分级的患者干预前、4~6周的强化他汀治疗后、联合PCSK9抑制剂治疗1个月后的LDL-C水平和降幅，分析基线LDL-C水平与降幅的相关性以及各基因型分组治疗后LDL-C水平达到靶目标值的比例。结果:共纳入66例FH表型患者，其中男性47例（71.2%），女性19例（28.8%），年龄（43.1±13.4）岁。单等位基因-缺失突变组7例（10.6%），单等位基因-缺陷突变组25例（37.9%），多等位基因-缺失突变组8例（12.1%），多等位基因-缺陷突变组18例（27.3%），无主要致病突变组8例（12.1%）。PCSK9抑制剂联合治疗的LDL-C降幅由大到小依次是单等位基因组>无主要致病突变组>多等位基因组，整体分布于0~90%范围内，单等位基因2个分组和无主要致病基因组>50%>多等位基因2个分组。PCSK9抑制剂联合治疗下LDL-C进一步降幅由大到小依次为单等位基因组>无主要致病突变组>多等位基因组。总体FH表型患者中高强度他汀联合PCSK9抑制剂治疗后LDL-C降幅随基线LDL-C的水平升高而减小（ r=0.46， P<0.001），高强度他汀治疗基础上PCSK9抑制剂的进一步LDL-C降幅随基线LDL-C水平升高而减小（ r=0.40， P=0.001）。与其他组相比，单等位基因组高强度他汀联合PCSK9抑制剂治疗后LDL-C降幅较高且稳定，其中单等位基因-缺陷突变组LDL-C降幅随基线LDL-C水平升高而增大（ r=0.54， P=0.009），PCSK9抑制剂的进一步LDL-C降幅随基线LDL-C水平升高而减小（ r=0.43， P=0.040）。多等位基因组治疗前后LDL-C降幅因致病基因位点及组合方式不同而异。不同基因型FH表型患者LDL-C的达标率：为单等位基因组26例（86.7%）、无主要致病基因突变组6例（6/8）、多等位基因组1例（3.8%）。 结论:所有基因型患者均可以从他汀联合PCSK9抑制剂的强化降脂治疗中受益，不同分子病因的中国FH表型患者PCSK9抑制剂疗效存在显著差异，致病基因分析对FH患者PCSK9抑制剂降脂疗效具有提示作用。

前蛋白转化酶枯草溶菌素-kexin9型抑制剂(PCSK9抑制剂)不仅具有良好的降脂作用,还具有改善心血管结局、减轻氧化应激及改善血管内皮等多效性作用.近年来,PCSK9抑制剂的不断研发为心血管疾病治疗提供了新思路,本文就PCSK9抑制剂的多效性作用机制研究,尤其是对于血管内皮功能的作用机制研究予以综述.

由脂质代谢紊乱引起的动脉粥样硬化是动脉粥样硬化性心血管疾病的主要病理基础.他汀类药物是这类疾病调脂治疗的基石,但在实际应用中部分患者仍存在血脂管理不达标的状况.前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制药作为一类新型调脂药物被逐渐应用于该类患者治疗,近年来的研究表明PCSK9抑制药除了能调节脂质代谢,还具有潜在的抗炎、抗血小板活化等作用.本文梳理了 PCSK9抑制药多个药理作用机制及临床研究现状,探讨可能影响PCSK9抑制药疗效的因素,以期为PCSK9抑制药的安全合理用药提供参考.

目的 观察不稳定型心绞痛患者药物球囊介入治疗后应用前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂治疗的效果及安全性.方法 2021年1月-2022年1月阜外华中心血管病医院诊治不稳定型心绞痛患者280例,随机分为观察组和对照组各140例,均行药物球囊介入治疗.术后对照组给予瑞舒伐他汀(10 mg/次,1次/d,口服)治疗,观察组在对照组基础上联合PCSK9抑制剂依洛尤单抗(140 mg/次,1次/2周,皮下注射)治疗.治疗前、治疗12个月时,检测血脂水平;行血管内超声检查,记录治疗后最小管腔面积.治疗12个月时评价疗效,观察主要心血管不良事件发生情况.结果 观察组治疗后最小管腔面积[(4.89±0.92)mm2]大于对照组[(4.15±0.82)mm2](t=7.105,P＜0.001).治疗前观察组 TC[(4.50±1.20)mmol/L]、TG[(2.12±0.54)mmol/L]、LDL-C[(2.76±0.76)mmol/L]、HDL-C[(1.13±0.24)mmol/L]、Lp(a)[(320.20±76.33)mg/L]、apoA[(1.32±0.34)g/L]、apoB[(1.04±0.22)g/L]水平与对照组[(4.43±1.12)mmol/L、(2.14±0.51)mmol/L、(2.72±0.71)mmol/L、(1.12±0.21)mmol/L、(328.18±74.45)mg/L、(1.31±0.28)g/L、(1.03±0.20)g/L]比较差异均无统计学意义(t=0.505、-0.319、0.455、0.371、-0.886、0.269、0.398,P 均＞0.05);治疗 12 个月时观察组 TC[(3.34±1.01)mmol/L]、TG[(1.30±0.38)mmol/L]、LDL-C[(1.59±0.27)mmol/L]、Lp(a)[(199.45±75.50)mg/L]、apoB[(0.65±0.19)g/L]水平均低于对照组[(3.78±0.98)mmol/L、(1.66±0.34)mmol/L、(1.80±0.26)mmol/L、(231.10±76.62)mg/L、(0.78±0.17)g/L](t=-3.699、-8.354、-6.629、-3.481、-6.033,P 均＜0.05),HDL-C[(1.27±0.24)mmol/L]、apoA[(1.53±0.34)g/L]水平均高于对照组[(1.17±0.17)mmol/L、(1.36±0.31)g/L](t=4.023,P＜0.001;t=4.372,P＜0.001);2 组治疗 12 个月时 TC、TG、LDL-C、Lp(a)、apoB水平均低于治疗前(P＜0.05),HDL-C、apoA水平均高于治疗前(P＜0.05).观察组治疗总有效率(95.7％)高于对照组(85.7％)(x2=2.633,P=0.008),主要心血管不良事件发生率(2.9％)低于对照组(10.7％)(x2=6.832,P=0.009).结论 不稳定型心绞痛患者药物球囊介入治疗后在他汀类药物基础上联合PCSK9抑制剂治疗可明显改善临床症状,降低血脂水平,减少主要心血管不良事件发生.