[目的]旨在建立一种基于重组聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)检测技术结合测流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)快速鉴别检测羊痘病毒(capripox virus,CaPV)与羊口疮病毒(orf virus,ORFV)的双重RPA-LFD检测方法.[方法]选取CaPV P32 基因及ORFV 011 基因的保守片段,进行目的片段扩增并构建重组质粒;设计CaPV及ORFV RPA引物各 3 对,CaPV-HP、ORFV-HP探针各 1 条;进行单重基础RPA引物筛选试验;对双重RPA-LFD的反应时间及反应温度进行优化;探索双重RPA-LFD最佳引物配比体系及最佳探针配比体系;进行双重RPA-LFD灵敏度、特异性及重复性试验;用所建立的方法对采集的 55 份临床样品进行检测.[结果]引物筛选试验结果显示,引物对CaPV-RPA-F3/R3、ORFV-RPA-F1/R1 的特异性最强、扩增效率最高;该方法在反应温度为 39℃、反应时间为 11 min的反应条件下扩增效率最佳;CaPV-RPA-F3/R3、ORFV-RPA-F1/R1的最佳引物配比为 0.8 μL∶1.6 μL,CaPV-HP、ORFV-HP的最佳探针配比为 0.1 μL∶0.9 μL;双重RPA-LFD灵敏性试验最低检出限为CaPV/ORFV 4.65/3.94×100 copies/μL;特异性试验结果显示与PPRV、IBRV、Sau、SPN均无交叉反应;临床样品检测结果显示RPA-LFD检测阳性率与PCR检测阳性率相符合.[结论]成功建立了CaPV与ORFV双重RPA-LFD快速检测方法,可用于临床中CaPV与ORFV混合感染的快速鉴别诊断.

[目的]总结余土根教授治疗口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的临床经验.[方法]通过跟师随诊,记录医案资料,整理分析,同时结合国内外有关病因机制的研究文献,归纳整理余土根教授治疗OLP的经验,概括总结其对OLP病因病机、治则治法、日常调护的认识,并附验案一则加以佐证.[结果]OLP与多种因素相关,余土根教授谓之内外相因,虚实夹杂,根源于脾胃之间,积热、阴虚、情乱等皆可致病.疗疾以清热祛湿为先,健脾护胃为本,滋阴润燥为务,解郁化瘀为要,用药灵活加减.重视患者心理因素,兼参"治未病",日常积极宣导,实行善防.验案中患者知命之年,诊为脾虚湿热之口疮,治拟健脾祛湿、清热敛疮,标本兼治,疗效显著.[结论]余土根教授治疗OLP,清热祛湿先行,强调健脾为本,关注情志因素,辅以滋阴润燥、解郁化瘀之法,收效甚佳,值得学习与借鉴.

目的 为快速、高效、准确地检出羊口疮病毒(ORFV),并进一步明确皖北地区羊群ORFV流行毒株的遗传变异情况.方法 本研究基于ORFV F1L基因建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法,对皖北地区羊场开展ORFV检测,并从阳性病料中PCR扩增ORFV的完整VIR基因,直接测序后进行遗传演化分析.结果 所建立ORFV SYBR Green Ⅰ qPCR方法的线性关系良好,R2=0.994;扩增效率高,E％=95.62％;检测速度快,理论反应时间约15 min;灵敏度较高,检测下限为10 copies/μL,是普通PCR法的100倍;重复性良好,组内和组间变异系数分别为0.44％～1.14％和2.82％～3.16％.用该qPCR方法对采集自皖北地区的168份羊临床样本进行检测,其ORFV阳性率为37.5％(63/168).PCR扩增阳性样本中ORFV的完整VIR基因并直接测序,共获得52条全长VIR基因序列,其中21条来源于山羊,31条来源于绵羊.52条VIR基因间核苷酸序列及氨基酸序列的一致性分别为95.8％～100.0％和93.5％～100.0％,与参考毒株VIR基因核苷酸序列及氨基酸序列的一致性分别为95.1％～100.0％和91.3％～100.0％.基于ORFVVIR基因的遗传进化树分析显示,本次检测的21株山羊源ORFV毒株与8株国内外山羊源参考毒株和1株人源hChi17.2017参考毒株位于同一大分支,而本次检测的31株绵羊源ORFV毒株与7株国内外绵羊源参考毒株、1株人源hMbu15参考毒株及1株OV-V疫苗毒株位于遗传距离较远的另一大分支.结论 建立了用于检测ORFV的高效、快捷、特异、灵敏、稳定的SYBR GreenⅠqPCR方法.从临床样本中检测到的不同宿主来源ORFV的VIR基因间存在较大遗传差异.该研究结果可为ORFV的临床监测、检测、诊断及防控提供参考和指导.

目的:研究口疮灵方局部贴敷联合氨来呫诺治疗复发性口腔溃疡疗效及对患者免疫功能的影响.方法:将复发性口腔溃疡患者108例作为研究对象,按照随机数字法分为对照组和观察组,每组各54例.对照组患者仅给予氨来呫诺治疗,观察组在对照组的基础上加用口疮灵方局部贴敷,治疗时间为1个月.治疗结束后观察并记录治疗前后口疮疼痛评分、口疮大小、数目等,并根据中医症候疗效判断标准对两组的临床疗效进行评定.同时比较两组免疫功能包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+各项指标的变化情况.结果:观察组疮疼痛评分、口疮大小、数目均低于对照组,治疗总有效率(88.9％)高于对照组总有效率(77.8％),差异具有统计学意义(P<0.05).且观察组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明显高于对照组,而CD8+低于对照组,且不良反应发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:口疮灵方局部贴敷联合氨来呫诺治疗复发性口腔溃疡的临床效果显著,有助于溃疡的愈合,提高了患者的免疫功能,值得临床上使用.

目的 分析多层螺旋CT (MSCT)小肠造影、消化内镜对炎症性肠病的诊断价值.方法 将2017年5月至2018年5月于我院就诊治疗的84例炎症性肠病患者临床及影像学资料进行回顾性分析,总结不同检查方法对诊断炎症性肠病的检出率、灵敏度和特异性,并整理分析该疾病在不同检查中的影像学图像表现.结果 MSCT小肠造影检查对诊断克罗恩病和溃疡性结肠炎的检出率、灵敏度和特异性均较消化内镜检查高,但比较差异间均无统计学意义(P＞ 0.05).在MSCT小肠造影检查中有68例显示肠腔狭窄,多节段病变42例,56例表现为肠壁异常强化,48例显示肠壁明显增厚,仅有10例表现为结肠带消失和8例出现腹腔脓肿或瘘管形成,未显示明显肠壁溃疡和卵石征.消化内镜检查中显示54例克罗恩病均在肠粘膜出出现膜充血、水肿,其中46例表现为纵行、口疮样或不规则溃疡,28例粘膜以卵石征呈现,且表现为肠腔狭窄40例,多发性炎性息肉14例.消化内镜检查中显示26例溃疡性结肠炎均表现为粘膜水肿、血管纹理模糊,其中22例出现粘膜糜烂和多发浅表性溃疡,10例表现为粘膜粗糙和颗粒样改变,5例出现多发炎性息肉.且在消化内镜检查中未见腹腔病变和肠壁增强和增厚情况.结论 MSCT小肠造影和消化内镜对诊断炎症性肠病均具有一定的临床价值,但MSCT小肠造影有利于观察肠壁增厚和异常强化以及肠外其他合并症,而消化内镜对于肠壁溃疡、息肉的诊断更好,故将MSCT小肠造影与消化内镜联合检查对炎症性肠疾病的诊断更具有临床价值.

本文介绍了补脾胃泻阴火升阳汤治疗常见肝胆脾胃系统疾病验案四则.补脾胃泻阴火升阳汤出自李东垣《脾胃论》,主治脾虚阴火内盛之证,笔者临证化裁用此方治疗一些疑难杂症,疗效显著.本方列为《脾胃论》诸方之首,是李东垣学术思想的代表性方剂之一,以柴胡升胆气,利疏泄,促进脾胃运化及升降;以升麻、羌活风药助升发脾胃之气,复运化,利枢机,治脾阳下陷;以黄芪、人参、苍术、炙甘草益气健脾,借风药之力上行,脾旺则清阳不陷、阴火不生;黄芩、黄连、石膏清热燥湿泻阴火.文中"头痛"一案,证属脾虚肝郁、阴火上乘;"口疮"一案,证属脾虚阴火、热陷阳明;"胃痛"一案,证属脾虚阴火、湿热相搏;"泄泻"一案,证属脾虚湿盛、阴火内蕴;均采用补脾胃泻阴火升阳汤加减治疗,充分抓住"阴火"病机,审证求因,有所侧重使用补脾胃、升阳气、泻阴火之法,通过变化药物剂量和随证加减,灵活审慎,取得良效.

刘保和教授是河北省名中医,第五、六批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师,熟读经典,临证五十余年,诊病时辨证求因,抓病机,充分体现了中医学辨证论治思想,灵活运用古方治疗疑难杂症、肿瘤等病,常力起沉疴,誉满石门.笔者跟诊一年余,常感慨刘保和教授才思敏捷,辨证不囿于常规,付诸临床每有奇效.跟诊期间,略有心得,现整理刘保和教授临证医案4则,供临床医师借鉴.

结合临床病例介绍舒鸿飞运用验方经验,一是主症为疾病本质的反映,抓住主症就抓住了疾病的本质,如口疮迳用引火归原法而愈,肠梗阻借用舒肝开肺方而解;二是要辨明所治疾病病机与验方功效是否吻合,如呃逆除肝胃百合汤外,加大剂量芍药和威灵仙更效;对病位固定的病症要辨经络论治,如足跟痛初用白芍木瓜汤少效,合用峻补肾精法大效;三是单用验方不能适应病情需要时,要与有互补作用或相须作用的其他方药合用能够提高疗效,如牙痛以石辛汤与地骨汤合用能达到标本兼治的目的,鼻衄用镇衄汤外加童便可迅速止血,快速性心房纤颤用转律汤合仙鹤草疗效大增.

明代医家薛己认为口疮发病是"上焦实热,中焦虚寒,下焦阴火,各经传变所致",立论虽重视温补脾肾,仍不离辨证施治之则.或先清后补,或先和后补,或先补气血后补肾,分病程,遣药组方,注重情志内因和善后调养,充分体现中医治疗的灵活多变.通过对薛己经验探析,结合临床应用体会,以期对同道有所启发.