目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4(Nox4)在草酸钙结石患者肾乳头中的表达及其作用机制。方法:通过GEO数据库检索Randall钙斑芯片，按照GSE73680的样本描述，将样本分为无结石对照组(6例)和草酸钙结石组(24例)。采用GEO2R分析正常人肾乳头和草酸钙肾结石患者肾乳头组织中Nox4及成骨相关蛋白基因的表达差异变化。采用高钙处理大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)，免疫荧光技术(IF)检测Nox4的表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测Nox4和骨形态发生蛋白(BMP-2)的表达，化学发光法测定氧化应激标志物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。组间比较采用 t检验。 结果:GEO2R分析结果显示Nox4在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.726倍( t＝2.040， P<0.05)，基质Gla蛋白(MGP)在草酸钙结石组表达下降，差异表达倍数为-1.228倍( t＝-1.230， P>0.05)，骨钙素(OCN)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.439倍( t＝1.241， P>0.05)，骨保护素(OPG)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.639倍( t＝0.888， P>0.05)，骨桥蛋白(OPN)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为1.664倍( t＝1.171， P>0.05)。免疫荧光结果显示高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的平均荧光吸光度明显高于对照组(0.651、1.446、1.480， t＝8.023、6.477， P<0.05)。Western blot显示相对于未处理的正常对照组，高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的表达明显增加(0.426、0.594、0.734， t＝28.954、53.082， P<0.01)，BMP-2表达也呈增高趋势(0.242、0.472、0.676， t＝12.765、14.257， P<0.01)。此外，高钙处理NRK-52E细胞后，MDA含量增加(0.188、0.390、0.650， t＝2.679、6.686， P<0.05)，SOD活性下降(40.630、38.060、36.230， t＝4.079、10.390， P<0.05)。 结论:Nox4在肾结石患者肾乳头中表达明显增加，Nox4介导的氧化应激可能在肾结石形成过程中发挥重要作用。

目的:探究血清组织蛋白酶K（cathepsin K，Cathe K）、基质gla蛋白（matrix gla protein，MGP）、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（insulin-like growth factor binding protein3，IGFBP-3）预测乳腺癌根治术后骨质疏松发生风险的价值。方法:收集2019年6月至2021年6月于临沂市人民医院完成乳腺癌根治术及术后1年随访的150例女性乳腺癌患者作为研究对象，统计骨质疏松发生率。比较发生与未发生骨质疏松患者的临床资料、骨转换标志物[Ⅰ型前胶原氨基末端肽（typeⅠprocollagenamino-terminal peptide，PINP），Ⅰ型胶原交联C-末端肽（type Ⅰcollagen carboxy-terminal peptide，CTX）]、血清Cathe K、MGP、IGFBP-3水平，分析血清Cathe K、MGP、IGFBP-3水平与骨转换标志物的相关性，并分析各指标预测乳腺癌根治术后骨质疏松发生风险的价值，对比血清Cathe K、MGP、IGFBP-3与骨转换标志物预测骨质疏松发生风险的价值。结果:150例女性乳腺癌患者乳腺癌根治术后骨质疏松发生率为34.67%（52/150）；发生骨质疏松患者血清Cathe K水平为（31.86±9.52）ng/L，高于未发生骨质疏松患者的（24.87±5.34）ng/L，血清MGP、IGFBP-3、PINP、CTX水平分别为（8.64±1.33）ng/ml、（10.13±2.29）μg/ml、（44.13±4.87）μg/L、（0.42±0.13）μg/L，低于未发生骨质疏松患者的（12.39±1.71）ng/ml、（13.10±2.63）μg/ml、（93.25±29.71）μg/L、（1.65±0.50）μg/L，均差异有统计学意义（ t=5.77、13.75、6.88、11.82、17.41，均 P<0.05）。乳腺癌患者血清PINP、CTX水平与Cathe K水平呈负相关（ r=-0.39、-0.47），与MGP、IGFBP-3水平呈正相关（ r=0.51、0.60、0.42、0.49， P<0.05）；血清Cathe K、MGP、IGFBP-3、PINP、CTX预测女性乳腺癌患者术后发生骨质疏松的曲线下面积（area under the curve，AUC）分别为0.74（95% CI：0.665~0.810）、0.81（95% CI：0.733~0.865）、0.83（95% CI：0.762~0.887）、0.82（95% CI：0.749~0.878）、0.77（95% CI：0.698~0.838），血清Cathe K、MGP、IGFBP-3联合的AUC最大，为0.92（95% CI：0.86~0.96）。 结论:血清Cathe K、MGP、IGFBP-3水平与绝经后女性乳腺癌患者术后骨转换密切相关，各指标联合在预测骨质疏松发生风险方面有一定价值。

目的:分析基质Gla蛋白（MGP）与溃疡性结肠炎（UC）患者临床特征之间的关系。方法:纳入2015年7月1日至2017年5月31日期间在北京协和医院消化内科就诊的UC患者51例，以及同时期健康体检者27例，采用实时荧光定量PCR检测其结肠黏膜中MGP mRNA的表达，收集患者的临床资料，并进行随访。从GEO数据库中下载包含有UC患者MGP基因表达谱的公共数据集，按照内镜下Mayo评分分为Mayo 0、1、2、3分4个组。分析MGP在各组间差异表达情况。结果:纳入的所有UC患者完成随访，随访中位时间23个月（17~53个月）。UC活动组中MGP mRNA的表达高于缓解组和对照组。使用糖皮质激素及免疫抑制剂或生物制剂、手术治疗的UC患者，其结肠黏膜中MGP mRNA表达量高于使用美沙拉嗪治疗的患者。UC患者结肠黏膜MGP mRNA表达量与炎症指标C反应蛋白水平呈正相关（ r=0.517）。合并难辨梭菌或巨细胞病毒感染的UC患者结肠黏膜中MGP mRNA表达量高于无机会性感染的患者。GEO公共数据集中MGP在各组间表达差异有统计学意义（ P<0.01），随炎症程度加重MGP表达逐渐增加。组织MGP表达水平与内镜下Mayo评分存在中度相关。MGP mRNA表达与UC患者的生活方式、病变范围、肠外表现、随访期间有无复发的关系不明显。 结论:MGP与UC患者结肠炎症有关，其表达异常可以帮助预测UC患者病情活动度。

目的:寻找颈椎后纵韧带骨化（OPLL）患者骨化后纵韧带组织与邻近未骨化的后纵韧带组织的差异表达蛋白，探讨OPLL发生的病理生理学机制。方法:选取5例2018年1至3月在北京大学第三医院骨科接受颈椎前路减压手术的颈椎OPLL患者，手术中切除的骨化的后纵韧带组织作为OPLL组，手术中切除的临近未骨化的后纵韧带组织作为对照组，采用基于数据非依赖采集的蛋白质组学技术筛选差异表达的蛋白，通过文献查询明确差异表达蛋白功能，找到在OPLL发生发展中起作用的蛋白质。结果:OPLL组与对照组相比，共有9个蛋白有差异表达（差异倍数≥2和 P<0.05），在骨化后纵韧带组织中的表达均上调，主要与核苷酸转运与代谢、细胞外结构、翻译、核糖体结构与生物发生、一般功能预测、信号转导机制等相关。文献查询后发现其中5个蛋白的功能可能与OPLL的发生发展相关，包括胶原α-1（Ⅱ）链（COL2A1）、基质Gla蛋白（MGP）及信号肽、CUB和EGF-样结构域包含蛋白1（SCUBE1）、骨调节蛋白（OMD）、成纤维细胞生长因子结合蛋白2（FGFBP2）。 结论:本研究筛选到的与OPLL相关的差异表达蛋白，对OPLL病理生理学研究及其生物标志物的发现提供了基础。

目的:探讨血清非磷酸化未羧化基质Gla蛋白(dp-ucMGP)与绝经后骨质疏松症(PMOP)及骨代谢指标的关系。方法:选取2017年12月至2019年12月在赣南医学院第一附属医院健康体检中心就诊或内分泌代谢科住院的绝经后女性共248名作为研究对象。采用双能X线吸收骨密度仪(DXA)测定骨密度(BMD)。根据BMD将研究对象分为骨量正常组( n＝86)、骨量减少组( n＝64)和PMOP组( n＝98)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清dp-ucMGP水平。并检测血钙、血磷、血β胶原降解产物Ⅰ型胶原羧基端肽(β-CTX)和Ⅰ型前胶原N-端前肽(PINP)等骨代谢指标。 结果:3组间年龄、绝经年限、体重指数(BMI)、骨钙素、β-CTX、PINP和dp-ucMGP差异有统计学意义( P<0.05)。 Pearson相关分析表明血清dp-ucMGP与年龄( r＝0.254， P＝0.042)、绝经年限( r＝0.343, P＝0.036)、β-CTX( r＝0.023, P＝0.025)呈正相关，与BMI( r＝-0.169， P＝0.041)、腰椎BMD( r＝-0.176， P＝0.031)、股骨颈BMD( r＝-0.234, P＝0.025)和骨钙素( r＝-0.176, P＝0.034)呈负相关。二元 logistic回归分析提示年龄( OR＝1.164, P＝0.024)、绝经年限( OR＝1.151, P＝0.031)、β-CTX( OR＝1.122, P＝0.037)和dp-ucMGP( OR＝1.244, P＝0.033)为PMOP的危险因素，校正年龄和绝经年限后，dp-ucMGP( OR＝1.237， P＝0.045)仍为PMOP的危险因素。 结论:血清dp-ucMGP可能成为PMOP的潜在生物标志物。

目的:探究高压氧(HBO)联合富血小板血浆(PRP)应用于膝关节前交叉韧带损伤(ACLI)重建术患者的临床疗效。方法:选取2018年1月至2019年6月在青岛市胶州中心医院关节创伤外科接受治疗的ACLI患者100例，按照随机数字表法分为观察组和对照组，每组50例。对照组患者采用PRP法进行关节注射治疗，观察组在对照组的基础上加用HBO治疗。连续治疗3个疗程后，观察2组患者的临床疗效，膝关节Lysholm、Tegner、IDKC评分，血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、骨钙素(BGP)及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)水平的变化。结果:治疗3个疗程后，观察组总有效率(90.0%)明显高于对照组(68.0%)，差异有统计学意义( P<0.05)；治疗后2组患者膝关节Lysholm、Tegner及IDKC评分均明显高于治疗前，且观察组患者治疗后评分均显著高于对照组(均 P<0.05)；2组患者血清中IGF-1、BGP和MMP-1含量较治疗前均明显降低，且观察组患者治疗后血清中IGF-1、BGP和MMP-1含量明显低于对照组(均 P<0.05)。 结论:HBO联合PRP应用于ACLI重建术可以有效提高患者的治疗效果，降低患者血清中IGF-1、BGP和MMP-1水平，值得临床推广应用。

目的 探讨三乌胶丸治疗寒湿痹阻证膝骨关节炎的疗效.方法 按照随机数表法将304例膝骨关节炎患者分为对照组和研究组,各152例.对照组给予美洛昔康片、硫酸氨基葡萄糖片治疗,研究组在对照组基础上加用三乌胶丸治疗,均治疗28d.比较2组治疗28d后的疗效,治疗前和治疗28 d后的中医症状、膝关节功能、疼痛情况、骨代谢指标、血清基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、Smad-1水平及治疗期间的安全性.结果 研究组治疗28 d后的总有效率(93.42％,142/152)高于对照组(78.95％,120/152)(P＜0.05).治疗28 d后,2组中医症状、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index,WOAMC)、视觉模拟评分法(visual analog scale,VAS)评分及血清 MMP-1、MMP-3 水平与治疗前比较降低,研究组低于对照组(P＜0.05);血清骨特异性碱性磷酸酶(bone-specific alkaline phosphatase,BALP)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨钙素(bone gla-protein,BGP)、Smad-1 水平升高,研究组高于对照组(P＜0.05).研究组治疗期间不良反应总发生率低于对照组(P＜0.05).结论 三乌胶丸可调节寒湿痹阻证膝骨关节炎患者血清MMP-1、MMP-3、Smad-1及骨代谢指标水平,促进软骨修复,改善患者中医症状、膝关节功能,减轻疼痛程度,提高疗效和安全性.

目的 观察腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者冠状动脉钙化(coronary artery cal-cification,CAC)的临床特征,筛选用于评估CAC的血清学标志物,并探讨其在CAC诊断中的应用价值.方法 选取2022年3月—2023年3月在南京市高淳人民医院肾内科行PD治疗的患者,收集临床资料,完善实验室检查,ELISA法检测血清骨硬化蛋白(sclerostin)、去磷酸化未羧化基质Gla蛋白(dephospho-uncarboxylated matrix glaprotein,dp-ucMGP)、可溶性生长刺激表达基因 2 蛋白(soluble growth stimulation expressed gene2,sST2)水平,螺旋CT检测冠状动脉钙化积分(coronary artery calci-um scoring,CACS),根据CACS将患者分为无钙化组(CACS=0)、轻度钙化组(0＜CACS＜100)、中度钙化组(100≤CACS≤400)、重度钙化组(CACS＞400).比较4组患者临床资料及血检指标,筛选出可用于评估CAC的血清学标志物.结果 共纳入103例PD患者,其CAC发生率为67.96％(70/103).4组间患者的年龄(F=9.644,P＜0.001)、透析龄(F=8.141,P=0.043)、心血管病占比(F=8.424,P=0.038)、总 Kt/V(F=3.775,P=0.013)、碱性磷酸酶(F=7.909,P=0.048)、sclerostin(F=31.513,P＜0.001)、dp-ucMGP(F=24.188,P＜0.001)、sST2(F=8.691,P=0.034)、B型钠尿肽前体(F=13.922,P=0.003)水平均有差异.Logistic 回归分析显示:高龄(OR=1.192,95％CI:1.070～1.327,P=0.001)、低 Kt/V(OR=0.006,95％CI:0.000～0.418,P=0.018)、高 sclerostin(OR=1.826,95％CI:1.194～2.792,P=0.006)、高 dp-ucMGP(OR=1.990,95％CI:1.235～3.207,P=0.005)是CAC发生的独立危险因素.ROC曲线分析显示血清sclerostin、dp-ucMGP及两者联合预测PD患者CAC的曲线下面积分别为0.817(95％CI:0.715～0.919,P＜0.001)、0.797(95％CI:0.705～0.889,P＜0.001)、0.855(95％CI:0.776～0.935,P＜0.001).结论 血清 sclerostin、dp-uc-MGP 是预测PD患者发生冠状动脉钙化潜在敏感的血清学标志物,有重要的临床应用价值.

目的:探讨草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征.方法:应用乙二醇氯化铵诱导法构建草酸钙肾结石大鼠模型,通过Von Kossa's组织染色验证模型构建成功.单细胞测序方法鉴定髓袢细胞,对比分析草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征,应用生物信息学方法进行差异表达基因的GO、KEGG以及GSEA富集分析.结果:相较于对照组,实验组大鼠肾脏组织中发现钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,表明草酸钙肾结石大鼠模型构建成功.单细胞测序分析发现,在实验组髓袢细胞亚群共有差异表达基因3 510个,其中880个表达上调,2 630个表达下调;其中LOC499584,白介素7(interleukin 7,Il7),双特异性磷酸酶1(dual specificity phosphatase 1,Duspl)以及基质 Gla 蛋白(matrix Gla protein,Mgp)表达上调最为显著;HORMA 结构域蛋白质 2(HORMA domain containing 2,Hormad2),LOC361914,JUN 二聚体蛋白 2(Jun dimerization protein 2,Jdp2)以及生长抑素-B和血小板反应蛋白1型结构域蛋白(somatomedin-B and thrombospondin type-1 domain-containing protein,Sbspon)表达下调最为显著.KEGG分析发现实验组髓袢细胞亚群氧化磷酸化、代谢途径、丙酸代谢、自噬、溶酶体以及胞吞作用等信号通路发生显著改变.结论:本研究首次揭示了草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征,为肾结石的形成及其介导的肾损伤研究提供了一定的参考依据.

目的 观察关节镜清理联合阿西美辛加尪痹胶囊治疗老年膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)疗效及对患者骨代谢指标和滑膜液中炎性因子的影响.方法 2018年12月—2021年12月该院收治的106例老年肝肾亏虚证KOA患者以随机数字表及随机余数分组法分为联合组和对照组各53例.联合组给予关节镜清理,术后联合使用阿西美辛+尪痹胶囊治疗,对照组给予关节镜清理,术后联合使用阿西美辛治疗.比较两组临床疗效,记录治疗前、治疗2个月后两组病情严重程度[Lequesne膝关节严重程度指数(ISOA)]、膝关节超声指标(滑膜厚度、髌上囊积液)、骨代谢指标[骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG)、寡聚基质蛋白(COMP)]、关节滑膜液中炎性因子[白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、脂联素(APN)、前列腺素(PGE-2)]水平差异.结果 联合组临床总有效率为96.23％(51/53),高于对照组的84.91％(45/53)(P＜0.05).治疗2个月后,两组Lequesne评分、关节超声指标(滑膜厚度、髌上囊积液厚度)、关节滑液中炎性因子水平(IL-17、TNF-α、APN、PGE-2)、血清COMP水平均较治疗前明显降低,且联合组低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);两组血清骨代谢指标(BGP、OPG)较治疗前明显升高,且联合组高于对照组(P＜0.05).结论 关节镜清理联合阿西美辛+尪痹胶囊治疗老年KOA疗效显著,能有效改善患者临床症状,降低炎性反应,改善骨代谢状态.