目的:探讨特女贞苷对高糖诱导人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)损伤的抑制作用及其机制。方法:将hRMECs分为正常对照组、高渗组、高糖组、高糖+低浓度特女贞苷组、高糖+中浓度特女贞苷组和高糖+高浓度特女贞苷组，分别用含5.5 mmol/L葡萄糖、5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇、30 mmol/L葡萄糖、30 mmol/L葡萄糖+25、50、100 μmol/L特女贞苷的培养液培养24 h。另将hRMECs分为高糖+小干扰RNA阴性序列(si-NC)组、高糖+si-叉头框转录因子O4(FOXO4)组、高糖+特女贞苷+pcDNA组、高糖+特女贞苷+pcDNA-FOXO4组，转染相应试剂后分别用含30 mmol/L葡萄糖或100 μmol/L特女贞苷+30 mmol/L葡萄糖的培养液培养24 h。采用流式细胞术检测hRMECs细胞凋亡情况；采用硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)质量浓度；采用黄嘌呤氧化酶法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性；采用ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β和TNF-α质量浓度；采用Western blot法检测细胞中FOXO4蛋白表达水平。结果:正常对照组、高渗组、高糖组、高糖+低浓度特女贞苷组、高糖+中浓度特女贞苷组和高糖+高浓度特女贞苷组细胞凋亡率分别为(7.32±0.72)%、(7.44±0.70)%、(23.96±1.32)%、(19.84±1.09)%、(14.13±0.85)%和(9.84±0.70)%。各组细胞凋亡率、MDA质量浓度、SOD活性值、IL-1β质量浓度、TNF-α质量浓度和FOXO4蛋白相对表达量总体比较，差异均有统计学意义( F＝498.545、1 186.693、516.629、654.247、638.238、472.655，均 P<0.001)，其中与高糖组相比，高糖+低、中、高浓度特女贞苷组细胞凋亡率、MDA浓度、IL-1β和TNF-α质量浓度、FOXO4蛋白相对表达量均明显降低，SOD活性值明显升高，且呈剂量依赖性；与高糖+si-NC组相比，高糖+si-FOXO4组FOXO4蛋白相对表达量、细胞凋亡率、MDA浓度、IL-1β和TNF-α质量浓度降低，SOD活性值升高；与高糖+特女贞苷+pcDNA组相比，高糖+特女贞苷+pcDNA-FOXO4组细胞凋亡率、MDA浓度、IL-1β和TNF-α质量浓度、FOXO4蛋白相对表达量均明显升高，SOD活性值明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:特女贞苷可保护hRMECs免受高糖损伤，作用机制与其下调FOX4表达抑制hRMECs凋亡、氧化应激和炎症反应有关。

目的 建立测定肝胆双清口服液中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和特女贞苷含量的高效液相色谱法.方法 牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量测定,色谱柱为Agilent Extend-C18 柱(150 mm×4.6 mm,3.5 μm),流动相为 0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液(用三乙胺调pH至 6.0)-乙腈(梯度洗脱),流速为 1 mL/min,检测波长为 205 nm,柱温为 40℃,进样量为 10μL;特女贞苷的含量测定,色谱柱为Thermo AcclaimTM 120A C18 柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为 1 mL/min,检测波长为 224 nm,柱温为 40℃,进样量为 10μL.结果 牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和特女贞苷的质量浓度分别在 0.040 0～1.000 5 mg/mL、0.031 0～0.776 0 mg/mL、0.029 3～0.731 5 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于 2.0%(n=6);加样回收率分别为 98.49%,99.49%,99.78%,RSD分别为 3.04%,2.20%,1.15%(n=6).3批样品中3种成分的含量分别为0.3231～0.3258 mg/mL、0.2858～0.2876 mg/mL、0.2688～0.3055 mg/mL.结论 所建立的方法操作简便快速、重复性好、结果准确,可用于肝胆双清口服液中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和特女贞苷的含量测定.

目的 考察提取、浓缩、离心、灭菌工艺对养肝降草合剂整体质量的影响.方法 分析采用菲罗门Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温20℃.建立HPLC指纹图谱,测定红景天苷、栀子苷、连翘酯苷A、特女贞苷、甘草酸、白术内酯Ⅲ的含量,并计算其转移率.结果 15批不同工艺下样品指纹图谱中有 20 个共有峰,相似度大于 0.950.6 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率 96.96%～106.69%,RSD 0.97%～2.87%,转移率大于 80%,总转移率大于 90%.结论 养肝降草合剂在不同工艺下均具有较好的稳定性.

目的 建立3个不同批次九制女贞子样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及多成分含量测定方法,结合化学模式识别分析评价九制女贞子的质量差异.方法 采用HPLC法建立不同批次九制女贞子的指纹图谱并进行5种成分的含量测定,通过相似度分析、主成分分析(PCA)和最小偏二乘法-判别分析(PLS-DA)评价不同批次九制女贞子质量差异,找寻炮制过程中成分含量的动态变化情况.结果 建立了九制女贞子的HPLC指纹图谱,标定了 26个共有峰,指认了其中5个成分,分别是羟基酪醇(峰9)、红景天苷(峰10)、特女贞苷(峰19)、女贞苷G13(峰24)、Oleonuezhenide(峰25),含量变化明显.方法学考察结果显示,各成分的线性关系良好(r≥0.990),平均回收率为99.90％～103.19％.27批样品的指纹图谱与对照指纹图谱相似度均＞0.953.PCA结果提取了 4个主成分,PLS-DA能将3批不同批次九制女贞子明显区分,并根据变量重要性投影值(VIP)＞1的原则筛选出了 7个主要差异成分,并指认了 Oleonuezhenide、女贞苷G13、特女贞苷这3个是与九制女贞子相关性较强的化学成分.不同批次之间九制女贞子质量差异较大.结论 建立的九制女贞子HPLC指纹图谱方法简便,与模式识别方法相结合可为九制女贞子药材质量评价提供参考,炮制过程中含量呈现动态变化,羟基酪醇整体呈现不变趋势,红景天苷整体呈现增加趋势、特女贞苷、女贞苷G13、Oleonuezhenide整体呈现减少趋势,在炮制过程中,特女贞苷、女贞苷G13、Oleonuezhenide发生了转化,但具体转化机制有待后续研究发现,九制女贞子的指纹图谱结合化学模式识别方法,不仅为九制女贞子质量提供参考也可继续深入探讨九制女贞子潜在的质量标志物.

氧化应激(OS)是指机体遭受各种有害刺激时产生过多的活性氧自由基而无法及时清除,导致氧化系统和抗氧化系统平衡失调,引起组织或细胞功能紊乱和损伤的一种状态.OS与男性不育症(MI)关系密切,OS通过影响精子发生,损伤精子膜、脱氧核糖核酸(DNA)、线粒体,降低精子运动能力,加速细胞凋等途径使精子质量下降,导致MI.研究发现,单味中药的有效成分多糖类化合物(黄芪多糖、党参多糖、枸杞多糖、黄精多糖、山茱萸多糖、当归多糖、女贞子多糖、石斛多糖),黄酮类化合物(菟丝子总黄酮、槲皮素、紫云英苷、羊藿苷、金丝桃苷),皂苷类化合物(人参皂苷、蒺藜皂苷、薯蓣皂苷元),苯丙素类化合物(五味子甲素、姜黄素、白藜芦醇),环烯醚萜苷类化合物(桃叶珊瑚苷),氮苷类化合物(红景天苷),低聚糖类化合物(巴戟甲素),苯乙醇苷类化合物(肉苁蓉苯乙醇苷)多肽类化合物(牡蛎肽)具有抗氧化作用,可提升雄性动物MI模型的生殖功能.

贞芪扶正颗粒主要由黄芪和女贞子组成,在临床中主要用于治疗肿瘤性疾病(如肺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌等),能够提高患者细胞免疫功能,减轻放化疗不良反应,改善一般状况.黄芪有效活性成分[黄芪总黄酮(TFA)、黄芪甲苷(AS-Ⅳ)、黄芪多糖(APS)等]和女贞子有效活性成分[女贞子多糖(LVFP)、特女贞苷(SPN)、齐墩果酸(OA)等]在免疫调节、抗肿瘤、心血管保护、抗氧化、改善代谢及抗炎镇痛等方面具有一定疗效.近年来,较多研究发现贞芪扶正颗粒可用于其他疾病(如重症肺炎、肺结核、乙型病毒性肝炎、心力衰竭等)的辅助治疗.现将贞芪扶正颗粒在不同疾病治疗中的作用进行综述.

肝纤维化为"肝病-肝纤维化-肝硬化/肝癌"的中间环节,存在于大部分肝病的发展过程中.有效逆转肝纤维化是防止其进一步发展的重要手段,但是目前还没有治疗肝纤维化的特效药,而女贞子Ligustri Lucidi Fructus作为一种天然药用植物,其活性成分具有抗肝纤维化功能.通过归纳梳理女贞子活性成分通过调控相关信号通路抗肝纤维化作用机制进行综述,为进一步对女贞子靶向治疗肝纤维化的研究提供理论参考.

目的 优化黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺.方法 在单因素试验基础上,以蒸制时间、蒸制次数、烘制温度为影响因素,外观性状,红景天苷、特女贞苷、女贞苷G13、醇溶性浸出物含量,DPPH、ABTS自由基清除率的总评"归一值"(OD值)为评价指标,星点设计-响应面法优化炮制工艺.结果 最优工艺为蒸制时间 70 min,蒸制次数 7次,烘制温度 90℃,OD值为 0.841 5.结论 该方法简便可靠,稳定可行,可用于黑豆黄酒共制女贞子.

目的 建立尿毒康的HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别,比较中药汤剂与配方颗粒的差异,为两者等效性研究提供一定的理论依据.方法 采用Thermo 5005-254630 C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速:0.8 mL·min-1,检测波长:254 nm,柱温:22℃,进样量:20 μL.建立 9 批尿毒康颗粒指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"考察色谱图相似度,结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对结果进行分析,并以变量重要性投影(VIP)值大于 1 为标准,综合评价汤剂、配方颗粒混冲及配方颗粒混煎的差异.结果 建立了 9 批次尿毒康HPLC指纹图谱,相似度在 0.754～0.993 之间.确定了 21 个共有峰,并指认了其中 8 个色谱峰;通过HCA、PCA和OPLS-DA均可明显将样品分为 2 类,同时筛选出了导致各批次之间产生差异的 7 个标志物,分别为 3 号峰、1 号峰、5 号峰(毛蕊异黄酮苷)、7 号峰(女贞子苷)、16 号峰(芦荟大黄素)、13 号峰(肉桂醛)、2 号峰.结论 尿毒康传统汤剂和配方颗粒在化学成分上存有一定的差异,配方颗粒混冲与混煎相似度良好,同时筛选出差异成分,可为生产工艺优化及质量评价提供依据.

目的 建立景参浓缩丸高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并对丹酚酸B、柚皮苷、新橙皮苷进行含量测定.方法 采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.1％磷酸水,梯度洗脱;检测波长278 nm;流速1.0 mL·min-1;柱温35℃;进样量10μL,根据11批样品的色谱图数据建立景参浓缩丸的指纹图谱并确立共有峰;通过HPLC法测定基准样品中丹酚酸B、柚皮苷、新橙皮苷的含量.结果 11批景参浓缩丸的HPLC图谱中有23个共有峰,相似度＞0.99,指认了其中红景天苷、特女贞苷、丹酚酸B、柳穿鱼叶苷、柚皮苷、新橙皮苷、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA 9个色谱峰成分;所建立的3种指标成分含量测定方法稳定性、重复性、线性关系、加样回收率良好,符合要求.结论 所建立的景参浓缩丸HPLC指纹图谱和指标成分的含量测定方法具有良好的稳定性和重复性,可为景参浓缩丸质量控制提供参考.