目的 制备经典名方沙参麦冬汤颗粒,并建立沙参麦冬汤颗粒的质量标准.方法 以熵权法及正交实验优选沙参麦冬汤回流提取工艺,与古法煎煮工艺进行对比,并进一步筛选颗粒的成型工艺.采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatogra-phy,HPLC)建立沙参麦冬汤颗粒的指纹图谱和甘草苷、甘草酸的含量测定方法,并考察基准样品(煎液、冻干粉)、颗粒剂生产各环节(提取液、中间体、成品)指纹图谱的相似度和甘草苷的转移率.采用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)对方中麦冬、桑叶、天花粉、白扁豆、甘草 5味药材进行鉴别.结果 优化的回流提取工艺为浸泡 0h,提取两次,加水量分别为 10、8 倍,提取时间分别为 2.0、1.5 h;成型工艺为以 90%乙醇为润湿剂,加入 20%的糊精制软材,经 16 目筛挤压制粒,60℃下干燥,过 80 筛整粒制备沙参麦冬汤颗粒.10批沙参麦冬汤颗粒、基准样品与颗粒生产各环节的指纹谱图相似度均大于 0.90;基准煎液、冻干粉、提取液、中间体、成品的甘草苷转移率分别为75.60%、75.24%、91.67%、90.22%、73.57%.5味中药的TLC特征斑点清晰,且阴性无干扰.结论 指纹图谱相似度结果表明,各批次、各生产环节沙参麦冬汤颗粒的质量相对稳定,且与基准样品保持一致.经回流提取、浓缩、干燥、制粒后,甘草苷的转移率有所下降,颗粒的甘草苷转移率与原方汤剂的较为接近.本研究所建立的沙参麦冬汤颗粒制备工艺稳定可靠,质量标准检测方法简便可行,重复性好,以期为沙参麦冬汤颗粒的规模生产及其质量控制提供参考.

目的:探讨不同生产工艺对人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)可能存在的致敏反应的影响。方法:在4种不同生产工艺人用狂犬病疫苗免疫后的临床血清中随机选取360份血清样本，ELISA法检测不同生产工艺疫苗和不同采血时间点血清样本中的总IgE水平，采用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果:总IgE检测结果显示，4种疫苗免疫后的血清总IgE阳性率均为20% (6/30)，总IgE的均值最低为9 IU/ml，最高为210 IU/ml，重复测量的方差分析显示不同时间采血检测的总IgE水平差异无统计学意义( P＝0.284)，多步浓缩纯化的人二倍体细胞疫苗的总IgE水平明显低于Vero细胞疫苗( P＝0.024)。 结论:免疫剂量的增加不会导致总IgE水平的升高，人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)的生产工艺能够对可能的致敏性杂质进行去除，具有良好的安全性。

目的:研究山萸肉饮片中马钱苷的浓缩工艺。方法:以马钱苷为指标，采用超滤-纳滤联用技术，在明确跨膜压力差、pH值因素影响的基础上，采用Box-Behnken中心组和设计建立数学模型，考察膜孔径、跨膜压力差、pH值，优选山萸肉提取液的浓缩工艺。结果:超滤可去除多糖，改善溶液可滤性；马钱苷纳滤浓缩工艺为膜孔径400 Da，pH值6.7，跨膜压力差1.20 MPa，马钱苷平均截留率为(91.9±1.7)%，与理论截留率93.6%相近。结论:超滤-纳滤联用精制山萸肉提取液中马钱苷，工艺稳定可行，可避免热处理引起的成分转化损失。

目的:优选消癌平胶囊的最佳水提醇沉工艺。方法:采用正交试验法，以通关藤苷G含量和干浸膏率为指标，考察煎煮次数、煎煮时间、加水量对消癌平胶囊水提取工艺的影响；考察醇沉浓度、相对密度、静置时间对其醇沉工艺的影响。结果:优选的水提工艺为加6倍量的水煎煮3次，每次1.5 h；优选的醇沉工艺为水提液浓缩至相对密度为1.15(60 ℃)，冷却后加入乙醇，使含醇量为70%，静置12 h，除去沉淀。结论:优选的水提醇沉工艺稳定可行、重现性好，可为消癌平胶囊的提取纯化提供参考。

目的:分别用新型复合层析介质Capto Core700和传统分子筛介质Sepharose 4FF纯化MDCK细胞制备的H5N1型流感病毒浓缩液，并比较分离纯化效果。方法:用Capto Core700与Sepharose 4FF纯化灭活H5N1型流感病毒浓缩液，透射电镜分析不同样品中病毒颗粒的形态；分别用单向免疫扩散法(single radial immunodiffusion, SRID)、福林酚法(Lowry法)、双抗体夹心ELISA、qPCR检测不同层析介质纯化前后病毒血凝素含量、总蛋白质含量、宿主细胞蛋白质(host cell protein, HCP)含量和宿主细胞DNA(host cell DNA, HCD)含量，计算病毒抗原回收率和杂质去除率；用动物实验检测不同纯化病毒的免疫原性，并用 t检验分析两种层析介质纯化效果差异。 结果:Capto Core700与Sepharose 4FF纯化的H5N1型流感病毒在透射电镜下均呈典型的流感病毒形态；两种层析介质纯化后病毒血凝素回收率差异无统计学意义( P>0.05)，但前者的杂质(总蛋白质、HCP、HCD)去除率均高于后者，且差异有统计学意义( P<0.05)；动物实验表明两种层析介质纯化的病毒样品均具有良好的免疫原性。 结论:相对于Sepharose 4FF层析介质，Capto Core700在保证病毒抗原蛋白回收率的基础上可以更有效地去除HCP、HCD和总蛋白质等工艺相关杂质。本研究为MDCK细胞生产H5N1型流感病毒疫苗纯化工艺开发提供了参考。

目的:优化祛寒逐风颗粒的醇沉工艺。方法:以醇沉终点乙醇体积分数、浓缩液相对密度、醇沉时间为考察因素，以秦艽中龙胆苦苷含量、威灵仙中齐墩果酸含量、干膏率3个指标的总评归一值（Z值）为评价指标，采用星点设计-响应面法优化醇沉工艺。结果:祛寒逐风颗粒最佳醇沉工艺为：浓缩液相对密度1.08 g/ml（90~95 ℃），醇沉终点乙醇体积分数为62%，静置16 h。结论:采用总评归一化法结合响应面设计优选的醇沉工艺稳定可行，预测性良好，可为其规模化生产提供依据。

目的 优选肺炎合剂的制备工艺.方法 以盐酸麻黄碱含量及干膏率的综合评分为评价指标,以加水量、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,采用L9(34)正交试验法优选肺炎合剂水提取工艺,采用单因素试验法考察其浓缩温度及纯化工艺,并进行验证试验.结果 优选最佳制备工艺为煎煮 2 次,第 1 次加 8 倍量水,第 2 次加 6 倍量水,每次煎煮 1.5h,煎液减压(压强为 0.05 mbar)浓缩温度控制在55～85℃,采用离心机(转速为 10 000 r/min,离心半径为 92 mm)过滤.按优选工艺制备的3份样品中,盐酸麻黄碱含量为0.14 mg/mL,干膏率为 10.66%.结论 优选工艺科学、合理,操作简便,且稳定性、重复性好,可为肺炎合剂的工业化生产提供试验依据.

目的 考察提取、浓缩、离心、灭菌工艺对养肝降草合剂整体质量的影响.方法 分析采用菲罗门Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温20℃.建立HPLC指纹图谱,测定红景天苷、栀子苷、连翘酯苷A、特女贞苷、甘草酸、白术内酯Ⅲ的含量,并计算其转移率.结果 15批不同工艺下样品指纹图谱中有 20 个共有峰,相似度大于 0.950.6 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率 96.96%～106.69%,RSD 0.97%～2.87%,转移率大于 80%,总转移率大于 90%.结论 养肝降草合剂在不同工艺下均具有较好的稳定性.

目的 建立一种从废弃的Cohn法组份Ⅳ沉淀中提取制备人抗凝血酶Ⅲ浓缩制剂的工艺,并通过与国外已上市人抗凝血酶-Ⅲ产品进行质量及相关药代动力学参数对比,评价制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂的质量情况.方法 对制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂和国外已上市人抗凝血酶-Ⅲ产品Thrombate Ⅲ?进行活性、纯度、肝素亲和力等关键质量属性的检测对比,并进行小鼠体内消除半衰期对比研究,评价 2 种制品的质量相似性.结果 制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂活性为 56.7 IU/mL,Thrombate Ⅲ?活性为 53.4 IU/mL;制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂的纯度为 99.1％,Thrombate Ⅲ?的纯度为 97.3％;制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂中具肝素亲和活性的分子约为89.1％,Thrombate Ⅲ?分子中具肝素亲和活性的分子约为 84.6％;制备的人抗凝血酶-Ⅲ 浓缩制剂的比活为10.98 IU/mg,Thrombate Ⅲ?的比活为 9.98 IU/mg;制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂在小鼠体内的消除半衰期为5.19 h,Thrombate Ⅲ?在小鼠体内的消除半衰期为 4.85 h;经t检验分析,制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂中的hAT-Ⅲ与Thrombate Ⅲ?中的hAT-Ⅲ在小鼠血清中的药物消除速率差异无统计学意义(P=0.253 1).结论 与国外已上市同类产品Thrombate Ⅲ?相比,制备的人抗凝血酶-Ⅲ浓缩制剂的各项关键质量指标均非劣于Thrombate Ⅲ?,说明本文所述人抗凝血酶-Ⅲ的制备工艺能有效从废弃的Cohn法组份Ⅳ沉淀中提取高质量的人抗凝血酶-Ⅲ制剂,能有效提高人血浆综合利用效率.

为优化川芎挥发油提取工艺,建立以新鲜川芎为原料提取制备挥发油的新方法,采用正交试验设计对乙醇回流提取工艺条件进行优化,并进一步考察优选回收浓缩、油水分离等关键工艺参数.以藁本内酯和洋川芎内酯A作为指标成分,应用HPLC一测多评法进行含量测定.以提取量、油收率、油含量为评价指标,最终确定川芎挥发油提取制备新方法为:鲜川芎切片,加8倍量70％乙醇回流提取2次(以干药材计,第一次需测定鲜川芎水分,调节乙醇浓度为70％),每次1.5 h,滤液回收浓缩至2.0～3.0g生药/mL,静置过夜,弃去水层,上层乳化层加热至60℃离心,分取油层,余下乳化层再加氯化钠至饱和并加热至60 ℃离心,合并油层,即得川芎挥发油.新方法所得川芎挥发油收率约为3％,藁本内酯和洋川芎内酯A含量达70％.该研究所建立的新方法生产设备要求低、操作简便易行,可实现川芎挥发油的高效制备,且含量高、品质优,为川芎挥发油的工业化生产提供了新思路和新方法.