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TcpC在尿路致病性大肠埃希菌引发小鼠膀胱炎中的作用及致病机制研究
编辑人员丨2天前
目的:探究TcpC对尿路致病性大肠埃希菌(uropathogenic Escherichia coli, UPEC)引发小鼠膀胱炎的作用,并初步了解其致病机制。 方法:从尿道向C57BL/6小鼠膀胱滴注10 9 CFU分泌TcpC的UPEC CFT073 wt或敲除 tcpc基因的CFT073 Δ tcpc,构建膀胱炎模型小鼠。3 d后处死小鼠取膀胱观察大体病理变化。膀胱4%多聚甲醛固定24 h后,包埋、切片、HE染色观察膀胱组织病理改变情况,免疫组化法对组织中TcpC进行定位。采集上述UPEC菌株感染的小鼠尿液,十倍稀释法计数尿液中细菌载量,PCR检测CFT073 wt感染组膀胱组织和尿液细菌基因组DNA中是否存在 tcpc基因。实时荧光定量PCR和Western blot检测CFT073 wt菌株感染巨噬细胞后胞内TcpC mRNA和蛋白质水平。Western blot和ELISA分别检测上述UPEC菌株对巨噬细胞NF-κB活化和促炎因子表达水平的影响,激光共聚焦显微镜和荧光显微镜分别观察上述UPEC菌株感染巨噬细胞后细菌和细胞活力。 结果:与CFT073 Δ tcpc组相比,CFT073 wt组小鼠膀胱明显肿大,膀胱组织中有大量中性粒细胞浸润和TcpC。CFT073 wt组小鼠尿液中的细菌数量显著多于CFT073 Δ tcpc组;PCR结果显示,膀胱组织和尿液中的细菌均为CFT073 wt。在CFT073 wt菌株感染巨噬细胞过程中,胞内TcpC的mRNA和蛋白质水平显著升高。CFT073 wt促进巨噬细胞NF-κB信号通路IκBα的蛋白质水平并抑制p65的磷酸化水平和促炎因子的产生。TcpC有利于CFT073 wt在巨噬细胞内的存活和侵袭。 结论:TcpC在CFT073 wt感染及引发小鼠膀胱炎过程中表达水平显著升高,并通过抑制巨噬细胞NF-κB信号通路的活化和促炎因子的产生提高CFT073 wt在巨噬细胞内的存活率,与UPEC致病及逃逸巨噬细胞固有免疫密切相关。
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编辑人员丨2天前
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尿路感染中病原体致病因素的研究进展
编辑人员丨2天前
尿路感染(UTIs)是一种常见的复发性感染,可以表现为临床症状轻微也可以严重到危及生命。尿路感染的高复发率和日益增加的细菌耐药性可能会大大加重这些感染患者的经济负担。因此,它越来越成为一个严重的公共卫生问题。在本综述中,我们介绍了病原菌是如何在宿主细胞黏附和定植,细菌菌毛在尿路感染发生发展中的重要作用,以及不同病原菌在UTIs及导管相关性尿路感染(CAUTIs)中的致病机制。阐明尿路感染中发生在宿主-病原体层面相互作用上的分子机制,以及这些相互作用在感染中导致的病理生理学后果,有助于我们进一步全面深刻理解尿路感染的发病机制。
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编辑人员丨2天前
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尿路致病性大肠埃希菌毒力因子TcpC在其免疫逃逸中的作用及致病机制研究
编辑人员丨2天前
目的:探究尿路致病性大肠埃希菌(uropathogenic Escherichia coli, UPEC)毒力因子TcpC在其免疫逃逸中的作用,并初步了解其相关致病机制。 方法:从C57BL/6小鼠的尿道插管至膀胱,滴注分泌TcpC的UPEC CFT073野生株(CFT073 wt)或 tcpc基因敲除株(CFT073 Δ tcpc)悬液10 9菌落形成单位,构建肾盂肾炎小鼠模型。5 d后处死小鼠取肾脏,观察大体形态变化。HE染色观察肾脏组织病理变化,免疫组织化学法对肾组织中TcpC进行定位。采集感染后的小鼠尿液,十倍稀释法计数尿液中细菌载量,PCR检测小鼠肾脏组织和尿液细菌基因组DNA中的 tcpc基因。实时荧光定量PCR检测CFT073 wt菌株感染树突状细胞后胞内TcpC mRNA水平。Western blot和ELISA分别检测CFT073 wt和CFT073 Δ tcpc菌株对树突状细胞NF-κB活化和促炎因子水平的影响,激光共聚焦显微镜观察UPEC菌株感染树突状细胞后的细菌活力。 结果:与CFT073 Δ tcpc组相比,CFT073 wt组小鼠肾脏有明显脓肿产生,肾脏组织中有大量中性粒细胞浸润和TcpC。CFT073 wt组小鼠尿液中的细菌载量显著高于CFT073 Δ tcpc组;PCR结果显示,肾脏组织和尿液中细菌均能扩增出 tcpc基因。在CFT073 wt菌株感染树突状细胞过程中,胞内TcpC的mRNA和蛋白质水平显著升高。CFT073 wt抑制树突状细胞NF-κB信号通路p50的磷酸化水平和促炎因子的产生。TcpC有利于CFT073 wt在树突状细胞内的存活。 结论:TcpC在CFT073 wt感染及引发小鼠肾盂肾炎过程中表达水平显著升高,并通过抑制树突状细胞NF-κB信号通路的活化和促炎因子的产生有利于CFT073 wt在树突状细胞内的存活,与UPEC致病及抗树突状细胞免疫密切相关。
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编辑人员丨2天前
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急性尿路感染大鼠模型的建立及在中药药效评价中的应用
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立急性尿路感染大鼠模型,并探讨其在药效评价中的应用.方法:SD大鼠采用经尿道膀胱灌注尿路致病性大肠埃希菌CFT073的方法建立尿路感染模型:大鼠感染后以尿液中白细胞及潜血为指标优化感染条件;使用优化后的条件造模并给予三金片治疗,检测模型组白细胞及潜血分级,尿液及肾脏中的细菌数,并称取膀胱组织重量,检测膀胱组织病理变化并观察三金片对模型组的治疗作用.结果:以大鼠尿液中白细胞及潜血的阳性率为指标优化感染条件为CFT073细菌1×107 CFU/只的浓度感染3天;以优化后的条件造模,模型组尿液中白细胞及潜血水平明显升高,尿液及肾脏中有大量细菌,膀胱指数增加,炎性损伤明显;三金片250 mg/kg给药三天后可明显降低尿路感染大鼠尿液中的白细胞水平,降低尿液及肾脏细菌,减轻膀胱组织损伤.结论:本实验成功建立与临床症状相似的尿路感染大鼠模型,可用于评价药物对急性尿路感染的治疗作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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尿道致病性大肠埃希菌研究进展
编辑人员丨2023/8/6
Brady等[1]一项流行病学研究显示,尿路感染( urinary tract infections, UTI)发病率位居感染性疾病第二位,仅次于呼吸道感染,且以妇女和儿童高发. 大肠埃希菌为革兰阴性条件致病菌,广泛存在于自然界中,当患者出现UTI、肺部感染、消化道感染、胆道感染、腹膜炎、脓毒血症及脑膜炎等疾病时,特别是机体抵抗力下降或免疫功能受损的情况下,易发生院内感染[2]. UTI分为有症状UTI和无症状UTI,分别表现为尿路致病性大肠埃希菌( uropatho-genic E coli, UPEC)感染和无症状性菌尿( asympto-matic bacteriuria, ABU ) ,其中多数为 UPEC[3].UPEC是引起UTI的主要致病菌,且90%以上的UTI由大肠埃希菌引发[4]. 近年由于抗生素的过度使用,导致大肠埃希菌耐药性明显增强,多重耐药现象十分普遍,加之大肠埃希菌特殊的耐药性及毒力因子,故临床预防和控制比较困难. Johnson与Stell[5]研究发现毒力因子与UPEC致病性密切相关,其在细胞黏附、杀伤宿主细胞等方面发挥重要作用. 本文对UPEC的临床特点、发病原因、种系分型、毒力因子、疫苗治疗及大肠埃希菌致病性、耐药性与毒力因子进行相关性总结,以加强临床医生对UPEC的认识,为防治 UPEC 提供科学依据,现进行综述如下.
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编辑人员丨2023/8/6
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儿童泌尿系大肠埃希菌感染的耐药性及产ESBLs大肠埃希菌感染危险因素分析
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨儿童泌尿系大肠埃希菌感染的现状及耐药性,分析儿童产超广谱β内酰胺酶(ex-pended spectrumβ-lactamase,ESBLs)大肠埃希菌感染的危险因素.方法 回顾性分析我院2016年7月—2018年9月收治的280例泌尿系感染患儿尿液标本,观察大肠埃希菌检出及耐药情况,并进一步通过回顾产ESBLs大肠埃希菌感染患儿和非产ESBLs大肠埃希菌感染患儿的临床资料,寻找产ESBLs大肠埃希菌感染的危险因素.结果 280例尿液标本中共检出大肠埃希菌128株,检出率为45.71%,其中产ESBLs菌株48株,非产ESBLs菌株80株.128株大肠埃希菌对大部分常用抗菌药物耐药,产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林完全耐药,对厄他培南、美罗培南不耐药,非产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林耐药率较高;产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、氨苄西林钠-舒巴坦钠、氨曲南、环丙沙星、头孢曲松、头孢唑林、头孢吡肟、左氧氟沙星、头孢呋辛、头孢他啶、妥布霉素的耐药率均高于非产ESBLs大肠埃希菌(P<0.05或P<0.01).多因素logistic回归分析结果显示:尿路梗阻、留置导尿管及近1个月抗菌药物应用史是泌尿系产ESBLs大肠埃希菌感染的独立危险因素.结论 儿童泌尿系大肠埃希菌对氨苄西林耐药率最高,对多数头孢菌素类抗菌药物耐药,对碳青霉烯类抗菌药物耐药率较低.儿童泌尿系大肠埃希菌耐药以产ESBLs大肠埃希菌耐药为主,碳青霉烯类抗菌药物治疗产ESBLs大肠埃希菌感染效果最佳.对有尿路梗阻、留置导尿管及近1个月抗菌药物应用史的患儿应警惕泌尿系产ESBLs大肠埃希菌感染.
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编辑人员丨2023/8/6
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老年尿路感染耐碳青霉烯类大肠埃希菌整合子分布情况及耐药性分析
编辑人员丨2023/8/5
[目的]探讨老年尿路感染(UTI)患者耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREco)的整合子分布情况及耐药性分析.[方法]收集2016年1月至2020年1月在本院老年UTI患者尿液分离大肠埃希菌(E.coli),采用VITEK-2系统鉴定及检测药敏情况;采用改良Hodge试验确证产碳青霉烯酶菌株表型,聚合酶链反应(PCR)方法检测整合子分布情况.[结果]从患者尿标本中共分离610株E.coli,病例主要分布在重症病房(22.63%)、泌尿外科(16.23%)、康复科(13.93%)、内分泌科(13.13%)、老年科(11.64%);检出CREco共68株,占11.15%(68/610).CREco菌株耐药性均明显高于非CREco菌株(P<0.05);从筛选多重耐药的284株E.coli中,检出Ⅰ类整合子阳性163株,检出率57.39%,未检出Ⅱ、Ⅲ类整合子,其中68株CREco全部检测出Ⅰ类整合子.Ⅰ类整合子在CREco中的分布明显高于非CREco组(P<0.01).[结论]老年UTI患者CREco耐药情况严重,这与Ⅰ类整合子在患者中分布较高有关系,临床需严格合理用药,避免CREco的传播与爆发.
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编辑人员丨2023/8/5
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不同菌量感染大鼠尿路对尿道上皮组织CNF1、CD36蛋白表达水平的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)的量与尿路感染模型大鼠尿道上皮组织细胞毒性坏死因子(CNF)1蛋白及CD36蛋白表达水平的关系.方法 将50只6~8周龄雌性SD大鼠作为研究对象,随机选取10只作为对照组,其余40只用于感染不同梯次的UPCE建立尿路感染模型,分别为101 CFU组、102 CFU组、103 CFU组和104 CFU组,每组10只.感染5 d后,定量大鼠尿道上皮组织与尿液菌量,qRT-PCR检测CNF1 mRNA和CD36 mRNA水平,Western印迹检测CNF1蛋白和CD36蛋白表达水平.结果 各组尿道上皮组织和尿液菌量均有显著差异(P<0.05),在101CFU组、102CFU组、103CFU组和104CFU组中,尿道上皮组织和尿液菌量依次升高,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).对照组、101CFU组、102 CFU组、103 CFU组和104 CFU组中,CNF1和CNF1 mRNA表达水平依次升高,CD36和CD36 mRNA表达水平依次降低,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).尿道上皮组织和尿液菌量与CNF1表达呈正相关(P<0.05),与CD36表达呈负相关(P<0.05).结论 感染大鼠尿路菌量越高,其尿道上皮组织菌量、尿液菌量和CNF1表达越高,CD36表达越低,尿道感染可能与高菌量影响CNF1和CD36表达相关.
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编辑人员丨2023/8/5
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尿路感染患者病原菌分布情况及耐药性分析
编辑人员丨2023/8/5
[目的]探讨尿路感染患者病原菌分布情况及耐药性分析.[方法]选取2018年5月至2019年5月在本院治疗的100例尿路感染患者,从其中段尿标本中分离出120株病原菌,对主要病原菌进行耐药性分析.[结果]尿路感染病原菌主要以大肠埃希菌、粪肠球菌和屎肠球菌为主,分别占35.00%、15.00% 和11.67%;不同性别大肠埃希菌、粪肠球菌和屎肠球菌检出率比较,差异无显著性(P>0.05);>60岁患者大肠埃希菌和粪肠球菌检出率分别为56.36% 和27.27%,明显高于≤60岁患者的24.44% 和6.67%(P<0.05).大肠埃希菌对阿米卡星、呋喃妥因、亚胺培南耐药性低,均低于10.00%;粪肠球菌对呋喃妥因、万古霉素无耐药性;屎肠球菌对万古霉素无耐药性.[结论]尿路感染病原菌主要以大肠埃希菌、粪肠球菌和屎肠球菌为主,在临床治疗时应根据临床经验和药敏试验个性化选择药物.
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编辑人员丨2023/8/5
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天津市某三级医院2015-2019年尿路致病性大肠埃希菌的耐药变迁
编辑人员丨2023/8/5
目的 回顾性分析某三级医院临床患者尿样本中分离的大肠埃希菌耐药情况,评估其耐药趋势变化,为尿路感染诊疗提供理论依据.方法 收集2015年1月至2019年12月疑似尿路感染患者的尿样本进行尿培养和药敏试验.用Vitek 2 Compact进行细菌鉴定和药敏试验,将所有大肠埃希菌分离株的耐药数据纳入该研究.结果 尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)所致尿路感染人群以老年人为主,年龄段分布以50~<70岁年龄段为主.UPEC耐药率最高的抗菌药物分别为氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星和复方磺胺甲噁唑,分别为87.80%,71.40%,67.50%,64.70%.耐药率最低的抗菌药物为美罗培南、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦.所检测的抗菌药物中,哌拉西林、头孢唑林、头孢呋辛、呋喃妥因5年间的耐药率比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 大肠埃希菌所致泌尿道感染以50岁以上老年人为主,UPEC对氟喹诺酮类抗菌药物耐药率较高,临床上在治疗尿路感染时应当参考药敏结果给予合适的药物,在经验性治疗时要慎重选择氟喹诺酮类药物.
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编辑人员丨2023/8/5
