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活性氧响应性抗菌微针对糖尿病小鼠细菌定植全层皮肤缺损创面的影响
编辑人员丨5天前
目的:研究活性氧响应性抗菌微针对糖尿病小鼠细菌定植全层皮肤缺损创面的影响。方法:采用实验研究方法。合成活性氧响应性交联剂N1-(4-溴苄基)-N3-(4-溴苯基)-N1,N1,N3,N3-四甲基丙烷-1,3-二胺(TSPBA),混合相应成分制成聚乙烯醇-TSPBA(PVA-TSPBA)微针、PVA-ε-聚赖氨酸(ε-PL)-TSPBA微针、PVA-TSPBA-透明质酸钠(SH)微针、PVA-ε-PL-TSPBA-SH微针。将PVA-TSPBA微针分别置于单纯磷酸盐缓冲液(PBS)和含过氧化氢的PBS中,观察浸泡0(即刻)、3、7、10 d微针降解情况,表示其活性氧响应性。将用含过氧化氢的LB培养基培养的金黄色葡萄球菌标准菌株与大肠埃希菌标准菌株各自按随机数字表法(分组方法下同)分为空白对照组(不行任何处理,下同)以及与含相应浓度ε-PL的PVA-ε-PL-TSPBA微针共培养的0 g/L ε-PL组、1.0 g/L ε-PL组、5.0 g/L ε-PL组、10.0 g/L ε-PL组,培养24 h,观察细菌生长情况并计算细菌相对存活率(样本数为3)。将对数生长期的小鼠成纤维细胞系3T3细胞(生长周期下同)分为空白对照组以及用含相应浓度ε-PL的PVA-ε-PL-TSPBA微针浸提液培养的0 g/L ε-PL组、1.0 g/L ε-PL组、5.0 g/L ε-PL组、10.0 g/L ε-PL组,培养24 h,用光学显微镜观察细胞生长情况,用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测并计算细胞相对存活率(以此表示细胞毒性,样本数为6)。取PVA-TSPBA微针与PVA-TSPBA-SH微针,用光学显微镜观察2种微针形貌,用微机控制电子万能试验机检测2种微针机械性能(以临界力表示,样本数为6)。取6只6~8周龄雄性BALB/c小鼠(性别、鼠龄下同),分为PVA-TSPBA组与PVA-TSPBA-SH组(每组3只),用相应微针垂直按压背部皮肤1 min后,观察按压完成后0、10、20 min皮肤情况。另取3T3细胞,分为空白对照组,用含相应浓度ε-PL的PVA-ε-PL-TSPBA微针浸提液培养的0 g/L ε-PL组、单纯5.0 g/L ε-PL组,用含5.0 g/L ε-PL的PVA-ε-PL-TSPBA-SH微针浸提液培养的5.0 g/L ε-PL+SH组,CCK-8法检测并计算培养24、48、72 h细胞相对存活率,以此表示细胞增殖活性(样本数为6)。取18只BALB/c小鼠,通过高糖高脂饮食联合链脲佐菌素注射诱导为糖尿病小鼠模型后,分为无菌敷贴组、0 g/L ε-PL+SH组与5.0 g/L ε-PL+SH组(每组6只),在每只小鼠背部制作全层皮肤缺损创面后滴加金黄色葡萄球菌溶液,制成糖尿病小鼠细菌定植全层皮肤缺损创面模型,0 g/L ε-PL+SH组、5.0 g/L ε-PL+SH组小鼠创面覆盖含相应浓度ε-PL的PVA-ε-PL-TSPBA-SH微针后,3组小鼠创面均外覆无菌手术敷贴。于伤后0、3、7、12 d观察创面愈合情况,计算伤后3、7、12 d创面愈合率;伤后12 d,取创面及创缘皮肤组织行苏木精-伊红染色,观察新生上皮生长及炎症细胞浸润情况。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、Mann-Whitney U检验、Bonferroni法。 结果:随着浸泡时间的延长,置于含过氧化氢PBS中的PVA-TSPBA微针逐渐溶解并于浸泡10 d完全降解,置于单纯PBS中的PVA-TSPBA微针仅发生溶胀而未溶解。培养24 h,5.0 g/L ε-PL组、10.0 g/L ε-PL组金黄色葡萄球菌未见生长,10.0 g/L ε-PL组大肠埃希菌未见生长;1.0 g/L ε-PL组、5.0 g/L ε-PL组、10.0 g/L ε-PL组金黄色葡萄球菌相对存活率较空白对照组明显降低( P<0.05或 P<0.01),5.0 g/L ε-PL组、10.0 g/L ε-PL组大肠埃希菌相对存活率较空白对照组明显降低( P<0.01)。培养24 h,空白对照组、0 g/L ε-PL组、1.0 g/L ε-PL组、5.0 g/L ε-PL组、10.0 g/L ε-PL组细胞生长状态良好,组间细胞相对存活率相近( P>0.05)。PVA-TSPBA微针与PVA-TSPBA-SH微针的针体均呈四棱锥形,排列整齐,其中PVA-TSPBA-SH微针的针体更立体、棱角更分明。PVA-TSPBA-SH微针的临界力明显高于PVA-TSPBA微针( Z=3.317, P<0.01)。PVA-TSPBA-SH组小鼠按压完成后0 min微针穿透皮肤,10 min后针孔部分消失,20 min后针孔完全消失;PVA-TSPBA组微针未能穿透小鼠皮肤。培养24、48、72 h,5.0 g/L ε-PL+SH组细胞增殖活性均明显高于空白对照组( P<0.05或 P<0.01)。无菌敷贴组小鼠创面愈合速度缓慢,渗出较多;0 g/L ε-PL+SH组小鼠创面愈合速度前期与无菌敷贴组相近,后期较无菌敷贴组加快,渗出中等;5.0 g/L ε-PL+SH组小鼠创面愈合较另2组快,渗出不多。5.0 g/L ε-PL+SH组小鼠伤后3、7、12 d创面愈合率分别为(40.6±4.2)%、(64.3±4.1)%、(95.8±2.4)%,明显高于无菌敷贴组的(20.4±2.7)%、(38.9±2.2)%、(59.1±6.2)%与0 g/L ε-PL+SH组的(21.6±2.6)%、(44.0±1.7)%、(82.2±5.3)%( P<0.01);0 g/L ε-PL+SH组小鼠伤后7、12 d创面愈合率明显高于无菌敷贴组( P<0.05或 P<0.01)。伤后12 d,5.0 g/L ε-PL+SH组小鼠创面几乎完全上皮化且炎症细胞浸润较少,0 g/L ε-PL+SH组小鼠创面部分上皮化且伴大量炎症细胞浸润,无菌敷贴组小鼠创面未见明显上皮化且伴大量炎症细胞浸润。 结论:基于TSPBA、聚乙烯醇、ε-PL及SH制备的复合微针可顺利刺穿小鼠皮肤并能通过缓慢响应创面中的活性氧从而溶解释放抗菌物质,抑制创面细菌定植,促进糖尿病小鼠细菌定植全层皮肤缺损创面修复。
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编辑人员丨5天前
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双平面交联透明质酸钠凝胶注射改善面颊部凹陷伴中下面部皮肤松弛的效果
编辑人员丨6天前
目的:探讨采用双平面技术注射交联透明质酸钠凝胶改善面颊部凹陷伴中下面部轻中度皮肤松弛的效果和安全性。方法:回顾性收集2023年2月至2024年1月梅奥整形外科医院(济南)收治的具有面颊部凹陷伴中下面部轻中度皮肤松弛的患者资料。治疗方案均采用双平面技术注射交联透明质酸钠凝胶,进针点位于耳屏前1~2 cm,进针后采用23 G钝针在面颊凹陷部的皮下脂肪浅层与皮下深层脂肪室2个平面进行扇形注射,并于颧弓下缘予适量的皮下注射以弱化突出的颧弓。单侧注射总剂量1.5~3.5 ml。注射过程中密切观察患者皮肤状态,注射后轻按压。术前、术后即刻、术后6个月分别采集患者图像,由盲测研究员采用面部松弛分级量表(FLRS)和中面部容积量表(MMVS)评价患者面部松弛及丰满度,量表评级或评分越高,代表面部越松弛或者丰满度越差,术后较术前评级或评分降低1级(分)即为有效,降低≥2级(分)为显著有效。由患者采用全球美学改善量表(GAIS)自评治疗前后的面部改善效果,满分5分,得分越高表明改善越明显。采用自制量表调查患者满意度及效果持久性。记录患者并发症情况。采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析,计量资料数据用 ± s表示,同一患者术后即刻与术后6个月GAIS评分比较采用配对样本 t检验;计数资料用例数(%)表示。 结果:共纳入80例女性患者,年龄30~50岁,均获得6个月以上随访。FLRS评价显示,与术前相比,术后即刻全部患者均评价为有效(69例,86.3%)或者显著有效(11例,13.8%);与术后即刻相比,术后6个月有74例(92.5%)患者评级无变化,6例(7.5%)患者评级升高1级,即治疗效果有所减弱。患者右、左侧MMVS评分显示,与术前相比,术后即刻全部患者均获得有效(右侧:55例,68.8%;左侧:69例,86.2%)或者显著有效(右侧:25例,31.2%;左侧:11例,13.8%)的改善效果;与术后即刻相比,术后6个月右、左侧分别有70例(87.5%)、77例(96.2%)患者评分无变化,其他12例患者(13侧)评分较术后即刻增加1分,提示治疗效果稍有减弱。治疗后所有患者均认为面部美观情况较治疗前改善,疗程结束即刻患者GAIS评分为(4.5±0.5)分,治疗后6个月为(4.4±0.5)分,差异无统计学意义( t=1.08, P=0.280)。术后即刻患者满意度(非常满意+满意)为97.5%(78/80)。72例(90.0%)患者表示愿意接受二次治疗。疗程结束后6个月,患者对治疗改善效果和维持效果的满意度(非常满意+满意)为98.8%(79/80),68例(85.0%)患者认为"治疗改善效果能够维持6个月"。术后即刻1例患者出现注射区域轻度泛红及轻微肿胀反应,冰敷后缓解。无其他不良反应。 结论:采用双平面技术注射交联透明质酸钠凝胶能够安全有效地改善面颊部凹陷,缓解中下面部轻中度皮肤松弛状态,治疗效果能够维持6个月左右。
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编辑人员丨6天前
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水光注射微交联透明质酸治疗面部年轻化的临床观察
编辑人员丨6天前
目的:探讨水光注射微交联透明质酸在面部年轻化的效果及安全性。方法:2020年5—6月,云南华美美莱美容医院皮肤美容中心门诊要求面部年轻化美容就医者32例,男1例,女31例,年龄28~41(32.69±8.31)岁。均用自身左右脸对照方法分别进行微交联透明质酸水光注射和非交联透明质酸注射,于治疗前、3次治疗结束后1、2、3个月用VISIA检测仪判断皮肤改善程度,记录并发症及患者满意度。结果:VISIA检测仪显示,治疗侧治疗后1个月有效32例,占100%;疗程结束后3个月有效28例,占87.51%。对照侧治疗后1个月有效28例,占87.50%,3个月后有效7例,占21.88%。左右侧并发症比较差异无统计学意义。患者治疗侧满意31例,占96.88%,对照侧满意28例,占87.50%。结论:水光注射微交联透明质酸能达到面部年轻化效果,并发症发生率低,美容就医者满意度高,安全有效。
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编辑人员丨6天前
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透明质酸基水凝胶在骨组织工程中的应用
编辑人员丨1周前
由于机体自愈能力的有限性,大面积骨缺损的有效修复仍然是对临床治疗的巨大挑战.骨组织工程是多学科领域,其利用细胞、生物材料、生长因子的结合以促进骨骼的成骨和矿化.在应用于骨组织工程的各种支架中,水凝胶因能够模拟细胞外基质,而被认为是很有前途的骨再生材料.近年来,基于透明质酸的水凝胶因能够模拟骨组织的天然细胞外基质并为细胞支持和组织再生提供合适的微环境,而被广泛应用于骨骼相关疾病研究中.该文就近年来透明质酸基水凝胶的交联机制、生物活性物质递送以及与其他生物材料相结合在骨组织工程中的应用进行综述.
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编辑人员丨1周前
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交联透明质酸联合肉毒毒素微量注射治疗玫瑰痤疮1例
编辑人员丨2周前
患者女,45岁,面部红斑伴瘙痒、灼热3年.查体:双侧面颊、鼻背持久性红斑、潮红、毛细血管扩张,以面颊为重.诊断:玫瑰痤疮.治疗:予以注射用肉毒毒素50 u,加入2.5 mL生理盐水稀释为20 U/mL,与注射用交联透明质酸钠凝胶1 mL混合均匀.面部消毒后使用水光治疗仪注射红斑区.患者自述注射1周后红斑开始消退,3个月后复查,红斑大部分消退.给予第二次注射(注射方法相同),红斑消退,随访半年无复发.
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编辑人员丨2周前
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含左旋乳酸-乙二醇共聚物微球的交联透明质酸钠凝胶对兔皮下组织新生胶原水平的影响
编辑人员丨2023/10/28
目的 探讨含左旋乳酸-乙二醇共聚物微球的交联透明质酸钠凝胶(cross-linked sodium hyaluronate gel with PLLA-b-PEG microsphere,PLLA-b-PEG/HA)对兔背部皮下组织新生胶原水平的影响.方法 自 2022年 11月至 2023年 5 月,大连大学附属新华医院整形美容中心在兔背部皮下注射PLLA-b-PEG/HA后,于 4、12、26 周进行取材,通过对注射区的组织切片进行形态学观察,分析组织反应、胶原新生情况及不同胶原比例.结果 注射后 4、12、26 周,兔背部注射区微球周围纤维包膜、微血管数量、新生胶原纤维数量逐渐增多;胶原含量明显升高,注射后 12、26 周与注射后 4 周胶原容积比比较,差异具有统计学意义(P<0.05);注射后Ⅰ型胶原占比有所减少,Ⅲ型胶原占比有所增多.结论 PLLA-b-PEG/HA能够有效地增加兔注射区皮下新生胶原数量,表明PLLA-b-PEG/HA对兔注射区纤维组织再生有明显的促进作用.
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编辑人员丨2023/10/28
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载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒的制备及其体外抗肿瘤活性
编辑人员丨2023/8/12
目的 制备载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒(Cur/cLA-HU NPs),并进行体外抗肿瘤活性评价.方法 以载药量、包封率为指标,采用超声法,通过单因素考察优化Cur/cLA-HU NPs的制备工艺,并对Cur/cLA-HU NPs的粒径、Zeta电位、形态和体外释药情况进行评价.通过荧光倒置显微镜分析HepG2 细胞对Cur/cLA-HU NPs的摄取,以MTT法考察Cur/cLA-HU NPs对HepG2 细胞的毒性.结果 最佳载药工艺为:以甲醇为药物姜黄素有机溶剂,以药质比 4∶10进行投料,超声于 100 W 下次数为 3 次,每次处理 3 min,超声程序设置为开 2 s、停 4 s.Cur/cLA-HU NPs 的包封率为(87.91±1.51)%,载药量为(16.64±0.45)%,粒径为(172.3±2.57)nm,PDI为(0.174±0.021),分散均匀,Zeta电位为(-35.3±2.12)mV.Cur/cLA-HU NPs具有还原响应性,释放药物的快慢受到GSH浓度的影响;靶向肿瘤细胞,且被细胞快速摄取;对HepG2 人肝癌细胞增殖具有明显抑制作用.结论 Cur/cLA-HU NPs载药量和包封率高,其体外抗肿瘤活性稍优于姜黄素,具有肿瘤靶向性.
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编辑人员丨2023/8/12
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复合胶原海绵材料的体内外止血效果
编辑人员丨2023/8/6
背景:胶原材料具有良好的止血效果,但是单一胶原止血材料的吸水能力有限,血液浓缩效果不佳,所以止血效率并不理想.目的:观察复合胶原海绵止血材料的体内外止血效果.方法:以胶原、透明质酸和氯化钙为原料、碳化二酰亚胺为交联剂,制备复合胶原海绵止血材料.①细胞毒性实验:分别以复合胶原海绵止血材料浸提液、苯酚溶液及细胞培养液培养L929小鼠成纤维细胞,培养第2,4,7天,MTT 法检测细胞增殖,判定材料毒性;②材料与全血的关系:将兔抗凝血分别滴于复合胶原海绵止血材料、进口止血材料及国产止血材料表面,扫描电镜观察材料与全血的关系;③体外凝血活性:将兔抗凝血分别滴于复合胶原海绵止血材料、进口止血材料及国产止血材料表面,采用凝血指数检测凝血效果;④体内止血效果:钻透18只兔肝叶,随机分3组,分别以复合胶原海绵止血材料、进口止血材料及国产止血材料止血,检测出血时间及出血量.结果与结论:①复合胶原海绵材料的细胞毒性为1级,合格;②与进口和国产止血材料相比较,复合胶原海绵止血材料既有利于血液中水分继续向纵深吸收又能同时网络血红蛋白、血小板等形成凝血块,还可看到孔隙交替向内部延伸,形成交替复杂的海绵状;③复合胶原海绵止血材料的凝血指数显著低于进口、国产止血材料(P < 0.05);④复合胶原海绵止血材料组的出血时间及出血量明显低于进口止血材料组、国产止血材料组(P < 0.05);⑤结果表明,复合胶原海绵止血材料具有的良好止血效果及生物相容性.
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编辑人员丨2023/8/6
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透明质酸-明胶双网络水凝胶促进骨髓间充质干细胞成骨分化的作用
编辑人员丨2023/8/6
目的·通过双网络(double network,DN)方法构建一种高强度的天然高分子水凝胶,并探讨其对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone mesenchymal stem cells,rBMSCs)成骨分化的促进作用.方法·通过两步光交联法制备透明质酸-明胶双网络(HA-Gel DN)水凝胶,并通过扫描电子显微镜、溶胀、压缩和降解实验评估其物理化学性能.CCK-8和荧光染色检测rBMSCs在水凝胶上的活性和铺展、贴附、增殖能力;定量PCR和Western blotting检测rBMSCs的成骨分化能力.结果·与HA水凝胶和Gel水凝胶相比,HA-Gel DN水凝胶有更适宜于rBMSCs成骨分化的吸水和保水性能[(12.6±0.7)倍,(10.3±0.4)倍],更强的力学性能[(43.7±5.6) kPa]以及更慢的降解速率[12周,(82.3±3.9)%].体外实验显示HA-Gel DN水凝胶具有良好的生物相容性,定量PCR显示它能够促进rBMSCs成骨相关基因(Runx2、BSP、OPN、OCN、OSX和ALP)的表达,Western blotting显示它显著提高rBMSCs成骨相关蛋白(OPN、OSX和BSP)的表达.结论·HA-GelDN水凝胶具有良好的生物相容性和诱导rBMSCs成骨分化的能力,为DN水凝胶成为潜在的骨缺损修复材料提供了新的实验依据.
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编辑人员丨2023/8/6
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小鼠间质干细胞在基质凝胶与细胞微球中的成软骨分化
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨细胞基质凝胶与细胞微球两种不同培养微环境对干细胞成软骨分化影响,分析软骨分化特点以优化培养微环境.方法 采用透明质酸钠、硫酸软骨素及交联剂按照质量比1∶1∶2均匀混合后制成的细胞外基质凝胶,分别运用小鼠间质干细胞与基质凝胶共培养;离心沉淀形成细胞微球等方法进行成软骨诱导培养.在成软骨分化后1、2、3周行定量PCR检测分化相关基因表达;至终末分化后行组织切片及染色,对比细胞外基质形成及分化相关基因表达趋势,评价干细胞成软骨分化结果.结果 干细胞与基质凝胶均匀混合后形成柱状胶体结构,细胞均匀分散其中;而细胞微球则最终形成具有一定韧性的灰白球状组织.细胞排列紧密且组织表面由纤维组织包裹.定量PCR结果示:启动因子SOX-9在两种培养体系中有表达,差异有统计学显著意义.在基质凝胶中,标志基因Aggrecan表达仅在第2周时至最高,而在细胞微球中持续表达,差异有统计学意义.Col-Ⅱa1在基质凝胶中持续表达;在细胞微球早期分化表达显著,差异有统计学意义;Col-Ⅹa1表达在分化第2、3周时,以基质凝胶中为显著;在分化第1、2周时,以细胞微球分化为显著,差异有统计学意义;基质凝胶有利于Col-Ⅱa1的表达且可持续维持软骨细胞肥大状态;细胞微球则有利于Aggrecan的表达;甲苯胺蓝染色凝胶中细胞外基质较细胞微球含量明显增多.结论 基质凝胶培养有利于促进干细胞成软骨分化及维持分化表型;它具有模拟细胞外基质微环境、维持细胞空间结构并提高细胞生物活性等优势.
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编辑人员丨2023/8/6
