目的:探讨先天性巨结肠(HSCR)组织中Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)、微小核糖核酸(miR)-145-5p、胶质细胞源性神经营养因子受体alpha1(GFRα1)之间的调控关系。方法:选取湖南省儿童医院2016年3月至2018年6月收治的24例HSCR患儿痉挛段结肠组织为HSCR组，同期18例因新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)手术治疗患儿的坏死结肠组织为NEC组作为对照。实时定量聚合酶链反应检测HSCR组和NEC组结肠组织内miR-145-5p及GFRα1的表达水平，荧光素酶活性实验检测GFRα1与miR-145-5p的关系。之前研究检测的EZH2蛋白水平与miR-145-5p表达水平做相关性分析。采用实时定量聚合酶链反应检测神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y转染EZH2过表达质粒后miR-145-5p的表达水平。两组比较采用独立样本 t检验，使用Pearson进行相关性分析，多组数据使用One-way ANOVA进行单因素方差分析，并使用LSD检验进行两两比较。 结果:HSCR组miR-145-5p水平明显高于NEC组[5.62±2.04比1.11±0.48， t＝9.169， P<0.01]，GFRα1 mRNA水平明显降低(0.39±0.18比1.00±0.37， t＝－7.001， P<0.01)，且miR-145-5p表达水平与GFRα1表达水平呈明显负相关( r＝－0.676， P<0.01)。荧光素酶活性实验证实GFRα1为miR-145-5p的靶基因。EZH2蛋白水平与miR-145-5p表达水平呈明显负相关( r＝－0.56， P<0.01)。EZH2过表达组miR-145-5p的表达显著低于质粒对照组(0.33±0.07比1.02±0.13， t＝7.264， P<0.01)。 结论:HSCR患儿病变结肠组织中EZH2-miR-145-5p-GFRα1调节轴失衡是HSCR发生的重要原因。

目的:探讨长链非编码核糖核酸(RNA)肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、微小RNA-145(miR-145)表达与早产儿视网膜病变(ROP)严重程度的关系.方法:选择2021年1月至2023年12月我院收治的ROP早产儿82例,根据病情严重程度分为重度组、轻度组,例数分别为为38例、44例.另选择同期我院健康早产儿40例纳入对照组.比较三组血清LncRNA MALAT1、miR-145表达,应用Pearson相关性分析血清LncRNA MALAT1、miR-145表达与ROP严重程度的关系.早产儿ROP的影响因素应用多因素Logistic回归模型分析.血清LncRNAMALAT1、miR-145对早产儿ROP的预测价值应用受试者工作特征(ROC)曲线分析.结果:重度组血清LncRNA MALAT1表达显著高于轻度组和对照组,miR-145表达显著低于轻度组和对照组;轻度组LncRNA MALAT1表达显著高于对照组,miR-145表达显著低于对照组(P＜0.05).血清miR-145表达与ROP严重程度呈负相关(r=-0.412,P＜0.05),LncRNAMALAT1表达与ROP严重程度呈正相关(r=0.434,P＜0.05).三组胎龄、出生体重＜1500g构成比、出生1min Apgar评分＜7分、出生5 min Apgar评分＜7分、母亲妊娠期糖尿病发生率有统计学意义(P＜0.05).LncRNA MALAT1升高、miR-145降低、胎龄≤31周、出生体重＜1500 g、母亲妊娠期糖尿病是早产儿ROP发生的危险因素(P＜0.05).血清LncRNA MALAT1、miR-145对ROP严重程度的预测价值具有较高的敏感度、特异度,联合检测对ROP严重程度的曲线下面积(AUC)大于上述指标单独检测.结论:ROP早产儿血清LncRNA MALAT1表达升高、miR-145表达降低与ROP严重程度加重有关,血清LncRNA MALAT1联合miR-145检测对ROP严重程度预测具有一定价值.

目的 探索调控宫颈癌中铁死亡的环状核糖核酸(circRNAs)对开发新的治疗靶点的作用.方法 基于GSE102686、TCGA、GSE9750数据分析宫颈癌组和对照组之间的差异表达的circRNAs(DEcircRNAs)、差异表达的微小核糖核酸(DEmiRNAs)和差异表达的信使核糖核酸(DEmRNAs).通过Starbase数据库预测与DEmiRNAs具有靶向调控关系的circRNAs、mRNAs,并与差异分析结果进行比较分析.对mRNAs进行富集分析以识别与细胞死亡(细胞周期、凋亡和铁死亡)相关的mRNAs,并构建相关竞争性内源性RNAs(ceRNAs)调控网络.通过单因素Cox回归分析识别显著影响患者预后的miRNAs和mRNAs.收集12例宫颈癌患者的宫颈癌组织及远处对照宫颈组织样本,利用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印记方法检测基因的表达,并利用双荧光素酶报告检测基因的靶向结合.结果 宫颈癌和对照之间鉴定了 179个DEcircRNAs、93个DEmiRNAs和739个DEmRNAs,并发现了 160个DEcircRNAs,565 个 DEmRNAs 与 DEmiRNAs 有靶向关系.最终鉴定出 circ_0001461/miR-145-5p/转铁蛋白受体(TFRC)的ceRNAs调控网络与铁死亡相关.circ_0001461、TFRC在宫颈癌组织中显著上调(P＜0.05),miR-145-5p下调表达(P＜0.05).TFRC蛋白在宫颈癌组织中显著上调表达(P＜0.05).此外,miR-145-5p 与 circ_0001461 和 TFRC 均具有靶向结合能力(P＜0.05).结论 circ_0001461/miR-145-5p/TFRC的ceRNAs网络调节铁死亡,并与宫颈癌患者的预后相关,可为宫颈癌患者提供新的治疗方法.

目的:探讨微小核糖核酸(miR)-145、miR-186表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的关系.方法:选择2020年3月至2023年3月我院收治的128例行肺癌根治手术治疗的NSCLC患者,取其术中癌组织和癌旁组织(距离癌组织5 cm以上),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测 miR-145、miR-186 以及 PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA 表达.分析 miR-145、miR-186 表达与 NSCLC 患者临床病理特征的关系;Pearson检验分析NSCLC患者癌组织miR-145、miR-186表达与PI3K mRNA、Akt mRNA、mTORmRNA表达的相关性.结果:癌组织miR-145、miR-186表达低于癌旁组织(P＜0.05),低分化、TNM ⅢA期、淋巴结转移的NSCLC组织miR-145、miR-186表达低于中高分化、TNM Ⅰ～Ⅱ期、未发生淋巴结转移的NSCLC组织(P＜0.05).癌组织PI3KmRNA、Akt mRNA、mTORmRNA 表达均高于癌旁组织(P＜0.05),癌组织 miR-145、miR-186 表达与 PI3K mRNA、Akt mRNA、mTORmRNA表达均呈负相关(P＜0.05).结论:NSCLC组织中miR-145、miR-186表达下调,miR-145、miR-186表达下调可能激活PI3K/Akt/mTOR信号通路促使NSCLC进展,且与NSCLC患者癌组织低分化、TNM ⅢA期、淋巴结转移有关.

目的 基于微小核糖核酸(microRNA,miR)表达谱变化探讨"秩边透水道"针法治疗对子宫内膜异位症(Endometriosis,EMS)患者的疗效.方法 选取2019年10月至2022年10月西北妇女儿童医院收治的133例EMS患者,按随机数字表法分为对照组(n=66)与观察组(n=67),对照组给予米非司酮片治疗,观察组在米非司酮片治疗基础上应用"秩边透水道"针法治疗,两组患者均连续治疗3个月.比较两组患者临床疗效、疼痛视觉模拟量表(Visual simulation scale,VAS)评分、卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)、雌二醇(Estradiol,E2)、黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、抗子宫内膜抗体(Anti endometrial antibody,EM Ab)、癌胚抗原125(Carcinoembryonic antigen 125,CA125)、血流动力学指标[阻力指数(Resistance index,RI)、搏动指数(Pulse index,PI)]及外周血单个核细胞中miR-141-3p、miR-17-5p、miR-145表达水平及不良反应.结果 观察组临床疗效总有效率较对照组显著升高(P＜0.05);与治疗前比较,治疗1、2、3个月后,两组患者VAS评分均降低(P＜0.05),且观察组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);与治疗前比较,治疗3个月后,两组患者FSH、E2、EMAb、CA125、PI、RI、miR-145均降低(P＜0.05),LH、miR-141-3p、miR-17-5p均升高(P＜0.05),且观察组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);用药过程中两组患者呼吸、脉搏、体温、血压等生命体征均平稳,血、尿、便常规基本正常,均未见严重不良反应.结论 "秩边透水道"针法治疗应用于子宫内膜异位症患者,可有效减缓痛经程度,调节性激素及EMAb、CA125水平,改善血流动力学状态,其疗效机制可能与上调miR-141-3p、miR-17-5p及下调miR-145表达水平有关.

目的 探究血清miR-135b和miR-145 在未破裂颅内动脉瘤(unruptured intracranial aneurysm,UIA)患者中的表达水平及临床价值.方法 选取 2018 年 5 月～2020 年 3 月邯郸市第一医院神外三科收治的 102 例UIA患者作为研究组,另选同期健康体检者95例作为对照组,同时收集受试者一般资料进行比较.实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清中miR-135b和miR-145 表达水平;ROC曲线分析血清miR-135b和miR-145 对UIA的诊断价值;Logistic回归分析UIA形成的影响因素.结果 研究组中高血压(62.75%)、高血脂(60.00%)、吸烟史(64.76%)、饮酒史(70.59%)患者所占比例高于对照组(46.72%,44.21%,47.37%,53.68%),差异均有统计学意义(χ2=5.361,4.986,6.139,5.993,均P＜0.05);研究组患者血清miR-135b(0.79±0.20)表达水平低于对照组(1.03±0.27),血清miR-145 水平(1.28±0.24)高于对照组(0.99±0.22),差异均有统计学意义(t=7.122,8.821,均P＜0.05);与动脉瘤个数为 1 及动脉瘤直径<7mm的患者相比,动脉瘤个数≥2 及动脉瘤直径≥7mm的患者血清中miR-135b表达水平(0.68±0.18 vs 0.84±0.21,0.71±0.17mm vs 0.85±0.22mm)降低,miR-145水平(1.37±0.31mm vs 1.24±0.21mm,1.37±0.30mm vs 1.21±0.19mm)升高,差异均有统计学意义(t=2.472～3.689,均P＜0.05);血清miR-135b,miR-145 以及二者联合诊断UIA的曲线下面积(AUC)分别为 0.788,0.836 和 0.907,二者联合的诊断效能优于其各自单独检测(Z=4.236,3.226,均P＜0.05);Logistic回归分析结果显示,高血压(OR=1.326,95%CI=1.044～1.684)、吸烟史(OR=1.457,95%CI=1.077～1.970)、饮酒史(OR=1.879,95%CI=1.113～3.171)、血清miR-135b水平<0.94(OR=0.758,95%CI=0.612～0.939)、血清miR-145 水平≥1.22(OR=1.433,95%CI=1.113～1.845)均是UIA的影响因素(均P<0.05).结论 UIA患者血清miR-135b水平下调,miR-145 水平上调,二者与UIA的形成和发展存在相关性,且二者联合检测对UIA形成的诊断效能较高.

目的 探讨微小核糖核酸miR-370-5p对前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞增殖的影响.方法 将前列腺癌细胞系PC3和DU145分为2组:阴性对照组-转染随机序列(dsCon-trol);实验组-转染miR-370-5p或miR-370-5p+siP21.实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组细胞中p21 mRNA的表达及前列腺癌细胞系中miR-370-5p的基础表达情况;蛋白质印迹法检测p21蛋白的表达;集落形成实验检测各组单个细胞克隆增殖情况;细胞增殖实验检测转染后各组细胞的增殖能力.结果 与正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)比较,前列腺癌细胞系PC3和DU145中miR-370-5p表达下降;与阴性对照组相比,实验组PC3和DU145细胞中p21 mRNA的相对表达量分别提高了(2.457±0.392)倍和(1.844±0.295)倍.实验组PC3和DU145细胞中p21蛋白的相对表达分别为(0.52±0.09)和(0.63±0.14),阴性对照组为(0.18±0.06)和(0.24±0.05),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).阴性对照组和实验组中PC3和DU145细胞的集落形成数目分别为(0.281±0.024)、(0.084±0.016)、(0.293±0.017)和(0.310±0.041)、(0.088±0.019)、(0.300±0.032),实验组在转染miR-370-5p后,细胞集落形成数目均较阴性对照组少;而在miR-370-5p+siP21共转染后,与转染miR-370-5p组相比较,PC3和DU145细胞集落形成数目均显著恢复,差异均有统计学意义(P<0.05).细胞增殖实验结果显示,实验组转染miR-370-5p后,PC3和DU145细胞在48、72、96 h的存活情况(用吸光度OD值表示)分别为(0.395±0.040)、(0.691±0.042)、(0.874±0.045)和(0.437±0.044)、(0.700±0.051)、(0.875±0.052),与阴性对照组相比,实验组细胞增殖能力明显下降(P<0.05);miR-370-5p+siP21共转染后48、72、96 h,PC3和DU145细胞的OD值分别为(0.675±0.041)、(1.072±0.124)、(1.323±0.136)和(0.633±0.106)、(1.072±0.167)、(1.337±0.102),与转染miR-370-5p比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-370-5p能够通过上调p21蛋白的表达抑制前列腺癌细胞的增殖.

目的:探讨微小核糖核酸145 (microRNA-145)表达对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响.方法:实验室常规培养宫颈癌Hela细胞并分为4组,空白(Blank)组(Hela细胞+RPMI1640)、microRNA-145组(Hela细胞+RPMI 1640+microRNA-145-5p mimics)、阴性序列(NC)组(Hela细胞+RPMI 1640+NC)、Mock组(Hela细胞+RPMI 1640+Lipofectamine 2000),记录各组Hela细胞转染率,采用实时荧光定量聚合酶链锁反应(QRT-PCR)检测各组Hela细胞中microRNA-145的表达水平,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测Hela细胞增殖情况,采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法判断Hela细胞凋亡情况.结果:本研究中,各组Hela细胞转染率均＞80％;microRNA-145组microRNA-145的表达显著高于Blank组、NC组和Mock组,差异有统计学意义(P＜0.05).转染24 h、48 h、72 h后,microRNA-145组490 nm波长处的光密度值(OD490值)较转染0h后明显降低,转染48 h、72 h后,Blank组、NC组、Mock组OD490值较转染0h后时明显升高,转染24 h、48 h、72 h后,microRNA-145组OD490值均低于Blank组、NC组、Mock组,差异有统计学意义(P＜0.05).DAPI染色后,microRNA-145组Hela细胞凋亡率高于Blank组、NC组、Mock组,差异有统计学意义(P＜0.05).转染后,Blank组、NC组、Mock组的microRNA-145表达率、OD490值、DAPI染色后Hela细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:microRNA-145表达上调可抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并促进Hela细胞凋亡,通过药物调控microRNA-145表达有望成为宫颈癌治疗的新靶点.

胆固醇稳态受多种因素的密切调节,而胆固醇代谢紊乱与2型糖尿病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪性肝病等多种疾病的发生、发展密切相关.微小RNA(microRNA,miRNA)是脂代谢的转录后调控因子,miRNA-185-5p、miRNA-758-5p、miRNA-33a、miRNA-21、miRNA-122和miRNA-370与胆固醇的合成有关,miRNA-33、miRNA-144、miRNA-26、miRNA-758-3p、miRNA-106b、miRNA-10b、miR-NA-302、miRNA-145、miRNA-27a/b和miRNA-613与胆固醇的转运有关,多种microRNA共同参与调控胆固醇代谢中关键蛋白的表达,调控胆固醇的稳态平衡.

目的 研究微小核糖核酸-145(miR-145)和心肌素在川崎病患儿血清中的表达水平,分析二者与合并冠状动脉损害的关系.方法 选取眉山市妇幼保健院和西南医科大学附属医院2015年5月—2018年10月收治的川崎病患儿72例为研究对象,按照是否出现冠状动脉损害分为无损害组(40例)和损害组(32例),另选取同期在眉山市妇幼保健院体检的健康志愿者40名为对照组.收集3组研究对象临床生化数据及血清炎症相关因子水平,采用酶联免疫吸附法检测血清miR-145和心肌素水平.结果 冠状动脉损害组患儿血清C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、血小板计数(PLT)及白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平高于冠状动脉无损害组和对照组(P<0.05),且冠状动脉无损害组高于对照组(P<0.05).冠状动脉损害组患儿血清miR-145及心肌素水平低于冠状动脉无损害组和对照组(P<0.05),且冠状动脉无损害组低于对照组(P<0.05).miR-145在川崎病患儿血清中表达水平与心肌素水平呈正相关(P<0.01).Logistic回归分析显示,低水平的血清miR-145、心肌素是川崎病患儿并发冠状动脉损害的危险因素(P<0.05).结论 miR-145、心肌素在川崎病合并冠状动脉损害患儿血清中低表达,低水平的血清miR-145、心肌素是川崎病患儿并发冠状动脉损害的危险因素.