目的:探讨EB病毒（EBV）系列抗体及EB核酸（EBV DNA）检测在儿童EBV感染疾病诊断中的作用。方法:回顾性分析2016年6月至2017年12月广州市妇女儿童医疗中心收治的儿童EBV感染患儿的临床资料，分析血清EBV系列特异性抗体及EBV DNA检测结果的诊断价值。结果:纳入EBV感染患儿481例，年龄1个月~12岁，包括1岁以下组83例、1~3岁组177例、3~6岁组139例、6岁以上组82例。EBV衣壳抗原IgM抗体（EBVCA-IgM）、EBVCA-IgG低亲和力及EBV DNA三项检测指标阳性率及单独阳性率分别为75.47%和34.93%、31.39%和5.20%、54.47%和14.76%。各年龄组EBVCA-IgG低亲和力阳性率比较，差异无统计学意义（均 P>0.05）。与其他年龄组比较，1岁以下组EBVCA-IgM阳性率增高、EBV DNA阳性率降低（均 P<0.05）。481例患儿中EBV原发感染228例，EBV DNA载量为5.030×10 2~1.140×10 8 cps/ml，中位数为6.995×10 3 cps/ml。 结论:EBV系列抗体检测结果为儿童传染性单核细胞增多症提供可靠诊断依据，结合EBV DNA载量有助于早期诊断儿童EBV感染相关的重症疾病。

目的:了解沈阳地区儿童EB病毒(EBV)感染的流行情况，分析其血清学特征。方法:采用LIAISON化学发光分析仪检测2017年8月至2018年7月于中国医科大学附属盛京医院就诊的26 714例患儿血清中抗EBV衣壳抗原IgM(VCA-IgM)抗体、抗衣壳抗原IgG (VCA-IgG)抗体、抗核抗原IgG(EBNA-IgG)抗体及抗早期抗原IgG(EA-IgG)抗体。根据VCA-IgM、VCA-IgG及EBNA-IgG 3项主要抗体的检测结果判断EBV感染状态；对其中VCA-IgM单独阳性的患儿，4～6周后复查EBV抗体。结果:26 714例患儿中VCA-IgM抗体阳性2 963例(11.09%)，VCA-IgG抗体阳性15 349例(57.46%)，EBNA-IgG抗体阳性14 263例(53.39%)及EA-IgG抗体阳性731例(2.74%)。15 149例男童VCA-IgM、VCA-IgG、EBNA-IgG及EA-IgG抗体阳性率分别为10.98%(1 663/15 149例)、57.73%(8 745/15 149例)、53.49%(8 103/15 149例)及2.57%(389/15 149例)，11 565例女童上述抗体阳性率分别为11.24%(1 300/11 565例)、57.10%(6 604/11 565例)、53.26%(6 160/11 565例)及2.96%(342/11 565例)，不同性别患儿在4项抗体检测阳性率间的差异均无统计学意义(均 P>0.05)；VCA-IgG及EGNA-IgG抗体阳性率随患儿年龄的增长逐步增高( χ2＝4 057.744、4 776.285，均 P<0.05)，至14岁时，患儿VCA-IgG及EBNA-IgG的阳性率分别达到87.98%(1 317/1 497例)及88.78%(1 329/1 497例)；三抗体联合检测显示，在VCA-IgM阳性的急性感染患儿中，以典型原发感染状态[36.38%(1 078/2 963例)]及原发感染恢复期或再激活状态[43.81%(1 298/2 963例)]为主；而VCA-IgG及EBNA-IgG双阳性的抗体组合模式占既往感染患儿的95.09%(12 777/13 437例)。在198例VCA-IgM单独阳性患儿中，有133例(67.17%)在复查时未发生血清IgG阳转。在所有就诊患儿中，无单独EA-IgG阳性患儿，而既往感染的患儿中3.19%(428/13 437例) EA-IgG阳性。 结论:EBV 4项抗体阳性率在男女患儿中无差异，其既往感染率随年龄增长而升高；抗体联合检测可为临床诊断提供更详细和可靠的信息；双份血清抗体检测可提高诊断的准确率；而EA-IgG是诊断EBV既往感染再激活的一个重要血清学指标。

目的:了解我国2022年GII.17[P17]诺如病毒(Norovirus，NoV)急性胃肠炎(acute gastroenteritis，AGE)暴发的流行病学特征。方法:收集2022年1～12月AGE暴发信息及标本，应用real-time RT-PCR对样本进行NoV核酸检测，阳性样本通过RT-PCR扩增、测序和序列分析。结果:2022年1～12月，共报告NoV引起的AGE暴发360起，其中266起成功获得基因分型结果，GII.17[P17]为主要基因型之一，为34起(12.78%，34/266)，春季检出最多(3月6起和5月7起)，主要发生在托幼机构和小学(61.76%，21/34)。对不同年龄组感染GII.17[P17]基因型的差异进行比较发现，5岁以下、6～18岁、19～65岁、65岁以上这四个年龄组的GII.17[P17]基因型NoV感染病例占GII基因型NoV感染病例的比例分别为11.78%(53/450)、23.52%(32/136)、52.52%(52/99)、36.36%(4/11)。本研究14株GII.17[P17]基因组在衣壳区和聚合酶区分别属于Cluster III b和Cluster III(Kawasaki308)的SC III分支，均与引起我国2014/15季节AGE暴发流行GII.17[P17]新变异株(GZ41621株)同属一簇。与Cluster I、Cluster II和Cluster IIIa相比，Cluster IIIb存在22个氨基酸位点变化，本研究NoV毒株所在Cluster III b主要的氨基酸变化为：抗原表位A的T294I、Q299R，在抗原表位D发生了一个插入突变，人组织血型抗原受体结合位点site I的H353Q。选择压力分析检测到了大量负向选择位点，表明负向选择对VP1基因进化起着重要作用。结论:GII.17[P17]是2022年引起我国NoV AGE暴发的主要基因型之一，本研究的GII.17[P17]毒株与引起我国2014/15季节AGE暴发流行的GII.17[P17]新变异株(GZ41621株)仍同属一簇，在潜在表位发生少量氨基酸变异。

目的:获得展示新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)刺突蛋白B细胞线性表位的乙型肝炎病毒衣壳样颗粒(capsid-like particles, CLPs)并评价其免疫原性。方法:将SARS-CoV-2的4条B细胞线性表位(M1、S1-57、S14P5和S21P2)置换乙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein, HBc)第80位丙氨酸。在大肠埃希菌BL21 Star (DE3)中诱导表达这4种线性表位和HBc的重组融合蛋白(M1-HBc、S1-57-HBc、S14P5-HBc和S21P2-HBc)。SDS-PAGE、Western blot和非变性琼脂糖凝胶电泳(native agarose gel electrophoresis, NAGE)鉴定表达产物。蔗糖密度梯度超速离心纯化CLPs并经Western blot验证其抗原性。用纯化的CLPs免疫BALB/c小鼠，通过ELISA测定血清中的抗体滴度。结果:重组融合蛋白M1-HBc和S1-57-HBc自组装成M1-CLP和S1-57-CLP，S1-57-CLP免疫小鼠后靶向S1-57多肽的抗体滴度高达1∶1 000 000。结论:在原核系统中成功表达了展示SARS-CoV-2 M1或S1-57线性表位的乙型肝炎病毒CLPs，S1-57-CLP具有良好的免疫原性，为研制SARS-CoV-2新型诊断试剂和疫苗提供了新思路。

戊型肝炎是由戊型肝炎病毒（HEV）引起的一种重要的人畜共患性传染病。该病主要由被污染的水或食物经粪口传播途径扩散，且可跨种属间传播。该病致病原HEV为肝炎病毒科成员，是单正链RNA病毒。其7.2 kb基因组主要包含三个开放阅读框（ORF）：ORF1编码介导病毒复制和转录的非结构多聚蛋白；ORF2编码诱导中和抗体的衣壳蛋白和游离抗原；ORF3与ORF2部分重叠，编码参与病毒粒子形成和释放的多功能小蛋白。HEV具有独特的双重生命周期：以裸病毒粒子形式排入粪便，但以"准囊膜"粒子形式在血液中循环。两种病毒粒子以不同方式吸附、穿入宿主细胞，随后内化脱壳，进行基因组复制，产生更多病毒粒子释放至胞外，介导病毒扩散传播。现对HEV的病毒粒子形态特征、基因组结构、编码蛋白及其功能进行论述，以期为该病的基础研究和综合防控提供理论基础。

目的:了解传染性单核细胞增多症(IM)患儿血清抗EB病毒(EBV)抗体谱类型，分析抗EBV衣壳抗原(VCA)免疫球蛋白(IgG)抗体亲合力检测在诊断IM中的价值。方法:回顾性分析2016年5月至2019年5月在首都医科大学附属北京儿童医院诊断为IM的150例住院患儿的血清抗EBV抗体谱结果及血浆EBV核酸检测结果，抗EBV抗体谱包括抗VCA IgG和IgM，抗早期抗原(EA)IgA，抗EBV核抗原(EBNA)IgG和VCA IgG抗体亲合力。抗EBV抗体谱的检测方法为酶联免疫吸附法，血浆EBV核酸检测使用实时荧光定量PCR方法。结果:150例IM患儿中抗EBV抗体谱大致可分为2种类型：1.抗VCA-IgM/IgG阳性、抗EBNA-IgG阴性和抗VCA-IgG低亲合力抗体阳性130例(86.7%)，其中抗EA-IgA阳性50例；2.抗VCA-IgM阴性，抗VCA-IgG阳性、抗EBNA-IgG阴性和抗VCA-IgG低亲合力抗体阳性18例(12.0%)，其中EA-IgA阳性5例。132例患儿进行了血浆EBV DNA检测，阳性率37.9%(50/132例)。结论:儿童IM患者血清抗EBV抗体谱呈现多种类型，12.0%的IM患儿住院时抗VCA-IgM阴性，依靠抗VCA-IgG抗体亲合力检测可明确诊断。

目的:制备针对严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的单克隆抗体，用于抗原诊断。方法:收集分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞上清液，并用Western blot和间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测单克隆抗体与SARS-CoV-2 N蛋白之间的反应。通过免疫荧光，检测单克隆抗体与Vero细胞培养物中SARS-CoV-2的反应性。结果:从杂交瘤细胞中获得了两种单克隆抗体，分别称为A1和A2。它们都可以与SARS-CoV-2 N蛋白发生反应，而A2也可以识别SARS-CoV N蛋白。这些单克隆抗体可用于ELISA和免疫荧光实验。结论:获得了2种针对SARS-CoV-2 N蛋白的单克隆抗体，为发展SARS-CoV-2抗原检测方法提供了基础。

在慢性乙型肝炎病毒感染的早期阶段，大多数患者处于免疫耐受期。过去通常认为免疫耐受期患者无疾病进展或与肝损伤相关的事件，且其抗病毒疗效欠佳，所以目前国内外指南通常不推荐进行抗病毒治疗。然而越来越多的研究结果显示，免疫耐受期患者如不治疗，亦可进展为肝硬化和肝细胞癌，临床上具有迫切的治疗需求。而目前抑制核衣壳组装、调节免疫、降低表面抗原等新作用机制的药物正在研发，为这部分患者实现病毒抑制甚至功能性治愈提供了可能性。现主要综述免疫耐受期人群最新研究进展、人群特征、治疗需求，对该阶段患者新药临床试验设计策略进行讨论。

目的:建立汉城病毒(Seoul virus, SEOV)L99株特异性双抗体夹心ELISA抗原检测方法，验证其检测性能，为双价肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)疫苗研制、生产和检定过程中Ⅱ型病毒抗原含量检测提供有效手段。方法:小鼠体内诱生法制备L99病毒单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)腹水，Protein-A亲和层析纯化腹水抗体，SDS-PAGE鉴定纯化抗体纯度，间接ELISA法测定McAb效价，Western blot鉴定其特异性；叠加ELISA法对4株McAb进行抗体配对。用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记单抗后，通过正交试验优化包被和标记抗体使用浓度，建立双抗体夹心ELISA病毒抗原检测方法。以Ⅱ型HFRS疫苗标准品作为定量标准，验证方法的检测限、线性范围、专属性、准确性、精密度；通过检测3批Ⅱ型病毒疫苗灭活原液验证方法适用性。结果:4株McAb腹水效价均>1∶10 6，抗体纯度均>98%；经Western blot鉴定，1D5、3A4、5B7特异识别Ⅱ型L99株出血热病毒核衣壳蛋白，2E3与Ⅰ型PS-6株出血热病毒存在交叉反应；经抗体配对筛选后，选择3A4为包被抗体，1D5为标记抗体；棋盘滴定法确定包被抗体工作浓度为20 μg/ml，HRP标记抗体工作浓度为1∶4 000。该方法对SEOV L99抗原最低检测限为0.078 1 μg/ml；线性范围为0.078 1~2.500 0 μg/ml， R2>0.99；专属性验证其对Ⅱ型HFRS疫苗具有检测特异性；抗原回收率在95.8%~108.7%之间，精密度验证变异系数<10%。用该方法检测3批Ⅱ型HFRS灭活疫苗原液结果均呈剂量依赖性。 结论:成功建立了SEOV L99株型特异性双抗体夹心ELISA抗原检测方法，为地鼠肾双价肾综合征出血热疫苗生产及检定过程中，SEOV L99株病毒抗原含量测定提供了检测方法。

目的:了解原发性EB病毒感染患儿的临床和实验室检查特征。方法:回顾性分析2016年9月至2017年3月上海复旦大学附属儿科医院感染科诊治的210例原发性EB病毒感染患儿的临床特征(发热、皮疹等)及相关实验室检查结果(包括肝功能、EB病毒血清学及分子生物学)。结果:210例原发性EB病毒感染患儿的年龄为(4.2±2.4)岁。发热187例(89.0%)，扁桃体和(或)咽峡部渗出130例(61.9%)，颈部淋巴结肿大204例(97.1%)，眼睑水肿95例(45.2%)，皮疹21例(10.0%)，120例(57.1%)患儿有传染性单核细胞增多症典型三联症(发热、咽扁桃体炎和颈部淋巴结肿大)表现。实验室检查结果显示，177例(84.3%)患儿淋巴细胞计数≥5.0×10 9/L, 184例(87.6%)患儿异型淋巴细胞比例≥0.10。96例(45.7%)患儿转氨酶升高，对72例患儿随访至转氨酶恢复正常，6周内恢复正常占97.2%(70/72)。EB病毒衣壳抗原IgM抗体阳性192例(91.4%)，EB病毒衣壳抗原IgG抗体阳性182例(86.7%)，EB病毒早期抗原IgG抗体阳性62例(29.5%)，EB病毒核心抗原IgG抗体均为阴性。199例患儿完成EB病毒DNA检测，阳性122例(61.3%)。 结论:原发性EB病毒感染以学龄前儿童为主，大部分患儿有颈部淋巴结肿大伴发热，且EB病毒血清学指标阳性，部分患儿出现转氨酶一过性升高。