目的:探索人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染/艾滋病患者外周血炎症因子和T淋巴细胞激活在抗HIV治疗中的变化。方法:选取2017年1月至2019年12月在长沙中南大学湘雅二医院感染科门诊接受抗反转录病毒治疗(anti-retroviral therapy，ART)的HIV感染/艾滋病患者共206例，为HIV感染组，定期随访并收集治疗前，治疗后6、12、24个月的血液标本；另选取同期进行体格检查者52名，为健康对照组，留取血液标本。采用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素(interleukin，IL)-6、超敏C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)-α。以流式细胞术检测外周血CD3 +CD4 +T淋巴细胞计数、外周血单个核细胞中CD4 +CD38 +和CD8 +CD38 +T淋巴细胞百分比。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血浆HIV RNA载量。统计学方法采用配对 t检验和皮尔逊相关分析。 结果:HIV感染组治疗前血浆IL-6、超敏CRP和TNF-α分别为(13.42±2.35) pg/mL、(4 012.46±1 012.35) μg/L和(51.78±11.32) μg/L，分别高于健康对照组的(6.14±0.78) pg/mL、(707.21±305.76) μg/L和(19.01±6.48) μg/L，差异均有统计学意义( t＝12.56、16.79、13.45，均 P<0.001)；启动ART后，HIV感染组IL-6、超敏CRP和TNF-α水平均逐渐下降，治疗后24个月恢复正常。HIV感染组治疗前CD3 +CD4 +T淋巴细胞计数为(256.00±65.32)/μL，HIV RNA载量为(4.467±4.244) lg拷贝/mL，两者呈负相关( r＝－0.625， P＝0.041)。HIV感染组治疗前，治疗后12、24个月的CD8 +CD38 +T淋巴细胞百分比均高于健康对照组，差异均有统计学意义( t＝3.85、6.84、2.57，均 P<0.050)；治疗前CD8 +CD38 +T淋巴细胞百分比与HIV RNA载量呈正相关( r＝0.768， P＝0.026)。HIV感染组治疗前，治疗后12、24个月的CD4 +CD38 +T淋巴细胞百分比均低于健康对照组，差异均有统计学意义( t＝6.80、1.10、2.11，均 P<0.050)。 结论:HIV感染可致机体免疫功能受损，同时导致异常免疫激活，但随着ART的持续可逐渐好转。

目的:观察异基因骨髓造血干细胞移植（Allo-HSCT）后巨细胞病毒（CMV）性视网膜炎（CMVR）患眼房水中CMV-DNA载量，初步探讨其影响因素。方法:回顾性临床研究。2016年1月至2020年7月于北京大学人民医院眼科检查确诊的Allo-HSCT后CMVR患者19例28只眼纳入研究。其中，男性8例12只眼，女性11例16只眼；中位年龄28岁；单眼10例，双眼9例。患者治疗及随访过程中血液CMV-DNA持续保持阴性状态。患者均给予玻璃体腔注射60 mg/ml更昔洛韦0.05 ml（含更昔洛韦3 mg）治疗。诱导期为2次/周，共4次；维持期为1次/周。每次玻璃体腔注射更昔洛韦（IVG）前抽取房水测定其中CMV-DNA载量。从第4次IVG开始，若房水CMV-DNA载量转阴则终止治疗，并连续随访至少6个月。依据治疗过程中患眼房水CMV-DNA载量是否存在一过性升高，将患眼分为持续下降组和非持续下降组。观察并分析两组间房水CMV-DNA载量及眼部检查表现的差异。房水CMV-DNA载量与IVG次数和治疗时长相关性采用Pearson线性回归分析。结果:治疗终止时，患眼IVG中位次数为7 （4，9）次。相关性分析结果显示，患眼房水CMV-DNA载量与治疗次数[ R2=0.385 ， P<0.000 1， B=-0.237 log 10拷贝/（ml·次）]、治疗时长[ R2=0.394， P<0.000 1， B=-0.301 log 10拷贝/（ml·周）]均呈负相关。28只眼中，持续下降组13只眼（46.4%，13/28 ）；非持续下降组15只眼（53.6%，15/28 ）。持续下降组、非持续下降组患眼基线视力（ t=-1.223 ）、眼压（ t=1.538 ）、房水CMV-DNA载量（ t=-0.109 ）、视网膜炎病灶面积（ Z=-0.308 ）、病变累及象限个数（ Z =-0.024）以及是否累及黄斑（ Z =-1.826）、合并眼前节炎症反应（ Z =-0.499）、合并高眼压（ Z =-1.342）、终末视力（ t=-0.845）、眼压（ t =-0.068）、总IVG次数（ Z=0.907 ）、年龄（ Z =-0.832）、性别构成（ Z =-1.074）等比较，差异均无统计学意义（ P>0.05 ）。 结论:Allo-HSCT后CMVR患眼治疗过程中房水CMV-DNA载量每周下降约50%；房水CMV-DNA载量治疗过程中出现一过性升高不影响治疗过程和临床预后。

目的:库欣病(Cushing′s disease, CD)是由于垂体促肾上腺皮质激素(adrenocorticotroph hormone, ACTH)腺瘤分泌过多促肾上腺皮质激素，引起血浆皮质醇水平升高，导致血糖血脂代谢异常等一系列病理生理变化。若得不到有效治疗，病死率较高，因此阐明库欣病的发病机制十分重要。本研究旨在利用全基因组测序技术探索垂体ACTH腺瘤的发病机制。方法:选取9例确诊为垂体ACTH腺瘤并经过手术治疗患者的垂体瘤组织和与之配对的外周血样本进行了全基因组测序，并进行单核苷酸突变、小的插入或缺失、拷贝数变异、染色体结构变异的分析与验证。结果:5例患者发现USP8基因体细胞热点突变(p.Ser718del、p.Ser718Pro、p.Pro720Arg、p.Pro720Gln)，突变率为55.6%；1例患者检测出USP8拷贝数增加；1例USP8野生型患者检测出TP53(p.Cys135Tyr)、NF1(p.Val1049Glufs*11)及KMT2C(c.3323+1G>A)突变。拷贝数变异分析结果显示1例USP8野生型患者存在多条染色体的杂合性缺失。结构变异分析发现2例意义未明的结构变异。本研究未发现胚系基因突变。结论:USP8基因的体细胞突变和拷贝数增加、TP53等肿瘤相关基因的突变、广泛的体细胞拷贝数变异共同参与垂体ACTH腺瘤的致病。染色体结构变异可能有助于识别高危垂体ACTH腺瘤，患者需要更密切的随访和更积极的治疗。

目的:在全基因组范围内筛选可能与先天性小耳畸形有关的染色体大片段变异及相关致病基因。方法:根据入选标准从2012年1月至2014年1月就诊于中国医学科学院整形外科医院的先天性小耳畸形患者中选择病例组，以同时期内在同一医院行常规整形美容手术治疗的、不患有任何先天性遗传病、年龄相近的正常人群为对照组。采集2组患者的静脉血，提取基因组DNA，并运用基因芯片技术及相关软件对2组病例的染色体进行拷贝数变化(CNV)分析，明确染色体变异的类型，定位畸变发生的位置及受影响的染色体片段长度，并通过等位基因频率的比较，得到因染色体变化发生改变的基因，从中筛查出与先天性小耳畸形发生相关的致病基因。采用Fisher确切法检验进行统计学分析，以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:病例组共纳入942例先天性小耳畸形患者，男695例，女247例，年龄(11.4±3.2)岁；对照组1 802例，男1 290例，女512例，年龄(11.6±4.9)岁。病例组共发现染色体大片段变异5例，对照组未见染色体异常，2组比较差异具有统计学意义( P＝0.003)。染色体变异的5例中，染色体数目变异3例，其中1例为XXY综合征，另外2例为X三体综合征；染色体结构变异2例，其中1例为13号、14号染色体长臂部分重复，发现了可能与小耳畸形相关的基因： OTX2、 BMP4和 GSC，另1例为5号染色体长臂部分重复，发现FGF信号通路相关基因 FGF18、 FGFR4、 FGF1和BMP信号通路相关基因 FST、 MSX2、 SMAD5。 结论:染色体变异与先天性小耳畸形的发生存在一定的相关性；通过筛查发现可能有10个相关的基因通过各种不同的途径参与了小耳畸形的发生。

目的:评估EB病毒（EBV）多拷贝和单拷贝基因的数字PCR（dPCR）核酸检测方法在EBV核酸定量检测中的性能，并探讨其在临床应用中的适用性。方法:对多拷贝BamHI-W基因及单拷贝EBNA1基因dPCR体系的灵敏度、特异性、精密度、检测下限（LoD）和线性进行性能验证比对，采用最小二乘线性回归分析评估其线性。同时，收集2022年1—7月就诊于南方医科大学南方医院疑似EBV感染相关疾病患者的血浆样本182例，使用dPCR和实时荧光定量PCR（qPCR）同步检测EBV DNA载量，采用最小二乘线性回归分析评估其定量相关性。结果:多拷贝和单拷贝基因的dPCR体系均有良好的线性相关（ R2分别为0.992、0.997， P均<0.001），BamHI-W基因dPCR体系LoD为188 IU/ml，EBNA1基因dPCR体系LoD为358 IU/ml；BamHI-W基因dPCR体系和EBNA1基因dPCR体系中高浓度样本（1 000 000 IU/ml）对数变异系数（ CV）值分别为0.34%和0.21%，中低浓度样本（5 000 IU/ml）对数 CV值分别为0.98%和0.64%；7种常见临床感染病原体和EB病毒阳性样本对照检测中，dPCR检测体系中只有EBV阳性样本产生阳性信号，与其他病原体无交叉反应。在182份样本检测中，BamHI-W基因dPCR阳性率为47.80%（87/182），EBNA1基因dPCR阳性率为35.16%（64/182），qPCR阳性率为43.41%（79/182）。定量相关性分析中，BamHI-W基因dPCR体系和EBNA1基因dPCR体系与qPCR检测浓度值线性拟合 R2值分别为0.837和0.763（ P均<0.001）。临床样本中的BamHI-W基因的拷贝数为3~18拷贝，不同患者感染的EBV的BamHI-W基因拷贝数不同。对于每例患者，多拷贝BamHI-W基因dPCR体系和单拷贝EBNA1基因dPCR体系检测的载量监测变化曲线趋势具有较高的一致性。 结论:基于dPCR技术的检测多拷贝BamHI-W基因和单拷贝EBNA1基因的EBV检测方法均具有较高的灵敏度和特异性，精密度和定量准确性均适用于临床样本检测。多拷贝BamHI-W基因dPCR方法在提高检测灵敏度方面具有较大的优势，可作为目前EBV DNA载量检测方法的补充，特别是在低浓度样本中；同一患者的EBV DNA检出和动态监测使用多拷贝基因效果更好，不同患者比较EBV载量需要用单拷贝基因或以同一标准品标化后比较。

高级别胃肠胰神经内分泌肿瘤（HG-GEP-NEN）是一种罕见但预后很差，且是一种未被充分研究的肿瘤类型。包括分化良好的神经内分泌瘤（NET G3）以及分化差的神经内分癌（NEC）。NET G3的预后优于NEC，但对于铂类为基础的化疗敏感性不如NEC。HG GEP-NEC的治疗参考小细胞肺癌的治疗。目前，对于HG GEP-NEN的分类、治疗和预后的分子标志物普遍缺乏。经过病理重新评估，该研究分析了181例HG-GEP-NEN患者的肿瘤DNA和匹配的血液样本，其中152例NEC和29例NET G3。根据对360个癌症相关基因的测序，评估突变和拷贝数变化，NEC中高频突变基因为TP53（64%）、APC（28%）、KRAS（22%）和BRAF（20%）。RB1只有14%发生突变，但有34%的拷贝数变化影响RB1。其他高频拷贝数缺失为ARID1A（35%）、ESR1（25%）和ATM（31%），其中出现高频拷贝数扩增/增加的两个基因为MYC（51%）和KDM5A（45%）。虽然这些分子特征与小细胞肺癌（SCLC）的相似性有限，但在66%的NEC样本中发现了潜在的靶向性改变。突变和拷贝数变化因原发肿瘤部位的不同而不同，BRAF突变主要见于结肠（49%），FBXW7突变主要见于直肠癌（25%）。152例NEC中有8例（5.3%）为微卫星不稳定（MSI）。NET G3中高频突变常见于MEN1（21%）、ATRX（17%）、DAXX（14%）、SETD2（14%）和TP53（14%）。此外该研究还发现HG-GEP-NEN的分子差异与形态分化和起源部位有关。总之其分子水平与小细胞肺癌的相似之处有限，但高比例的靶向性改变表明，个体化治疗的潜力很大。

目的:探讨一例20号染色体母源性单亲二倍体(UPD(20)mat)患儿的临床及遗传学特点。方法:分析华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科2021年4月8日确诊的1例UPD(20)mat患儿的临床表型和内分泌水平；对患儿进行全外显子组测序(whole exome sequencing，WES)。对候选变异进行Sanger测序家系验证。用甲基化特异的多重连接探针扩增(methylation-specific multiplex ligation-dependent probe amplification，MS-MLPA)检测 STX16/GNAS-AS1/GNAS等区域的基因拷贝数变化及甲基化状态，并复习相关文献。 结果:先证者外貌无特殊，表现为通贯掌、生后喂养困难、生长迟缓、身材矮小、注意缺陷与多动障碍、轻度智力低下、言语和语言发育障碍、语音障碍。胰岛素样生长因子-1水平低。染色体核型未见异常，经WES分析、Sanger测序验证和MS-MLPA检测提示，患儿为UPD(20)mat。结论:UPD(20)mat常见的临床表型为喂养困难、生长迟缓、身材矮小，可伴随注意缺陷与多动障碍、言语和语言发育障碍、内分泌激素的紊乱，需长期随访。对于有上述临床表型的高龄母亲，应尽早进行基因检测和遗传咨询。

目的:阐释miR-340-5p对HBV复制的影响及其调控机制，并为HBV感染后的生物标志物和治疗用药提供新的策略。方法:在肝癌细胞HepG2.2.15中转染miR-340-5p的模拟物(340-mimic)和抑制剂(340-inhibitor)及其对应的阴性对照。通过ELISA检测上清中HBeAg和HBsAg的水平变化。同时收取细胞，提取RNA和壳体化DNA，并采用qRT-PCR分别检测HBV总RNA和pgRNA的水平及HBV DNA拷贝数的变化；分子克隆构建STAT3的过表达质粒pEF-flag-stat3，通过qRT-PCR和western blot对STAT3的mRNA和蛋白表达加以验证；此外，共转染miR-340-5p的模拟物和pEF-flag-stat3后通过northern blot，qPCR和ELISA对HBV的复制情况进行检测。结果:miR-340-5p过表达后，HBV转录生成总RNA和逆转录模板pgRNA的水平明显下降至对照组的45.89%、61.46% ( P＝0.001、 P＝0.003)；壳体化DNA的合成及HBeAg和HBsAg的分泌水平分别受到72.46%、18.27%、14.42%的抑制( P<0. 001、 P<0. 001、 P＝0.005)；干扰内源性miR-340-5p则与对照组相比分别增加44.02%、45.56%、22.66%、11.85%、14.04%( P＝0. 009、 P＝0. 01、 P＝0. 011、 P＝0.013、 P＝0.027)。相比之下在此基础上过表达信号转导和转录激活因子(STAT)3能够减弱被miR-340-5p抑制的HBV复制。进一步的实验结果也表明STAT3对HBV的复制有促进作用。 结论:miR-340-5p能够通过靶向作用于STAT3抑制其转录和翻译进而抑制HBV的复制。

患者男，50岁。因右眼视物不见5个月伴眼痛10 d，于2019年10月2日就诊于扬州大学附属苏北人民医院眼科。患者于2018年5月在我院血液科确诊为原发于中枢神经系统的弥漫性大B细胞淋巴瘤，经多次化学药物治疗（化疗），自诉目前病情稳定。眼部检查：右眼最佳矫正视力（BCVA）光感，左眼BCVA 1.0。右眼、左眼眼压分别为22、13 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa ）。右眼角膜清，前房细胞（++），晶状体轻度混浊，玻璃体混浊明显；左眼眼前节未见明显异常。眼底检查，右眼隐约见后极部及颞侧视网膜大片黄白色病灶及出血灶，呈"奶酪番茄酱样"改变（图1A ）；左眼黄斑区黄色环形病灶（图1B）。光相干断层扫描（OCT）检查，左眼黄斑中心凹颞侧小片视网膜色素上皮（RPE）隆起（图1C）。荧光素眼底血管造影（FFA）检查，右眼视网膜动静脉管壁均有荧光素着染，周边视网膜大片无灌注区（图1D）；左眼黄斑区多个点状强荧光。双眼房水检测，右眼巨细胞病毒（CMV）免疫球蛋白（IgG）值86.15 U/ml（参考值范围<9 U/ml），但CMV、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒、EB病毒等病毒核酸拷贝数均为0；双眼白细胞介素（IL）-10/IL-6比值正常（参考值范围<1.0）。我院血液科会诊认为无其他脏器淋巴瘤复发表现。结合患者病史，眼科诊断：右眼CMV性视网膜炎（CMVR）。因患者病程已有5个月，试予全身静脉滴注阿昔洛韦、右眼玻璃体腔注射更昔洛韦治疗。患者自述右眼疼痛好转，视力无变化。2个月后再次行右眼房水检测，提示CMV-IgG浓度为13.61 U/ml，较入院时下降。2020年4月复查，患者右眼视力手动，左眼视力1.0。右眼玻璃体混浊明显好转，原病变区视网膜萎缩呈灰色；左眼较前无明显变化。

目的:探讨肾移植术后BK病毒感染患者预后与外周血相关指标的相关性。方法:回顾性分析2018年8月至2021年8月中南大学湘雅二医院收治的131例肾移植术后首次感染BK病毒患者的病例资料，男93例(71.0%)，女38例(29.0%)。年龄(37.5±11.3)岁。尸体供肾移植109例(83.2%)，亲属供肾移植22例(16.8%)。肾移植术后首次感染BK病毒时间为(188.7±16.6)d。血清肌酐(127.5±39.5)μmol/L。血、尿BK病毒同时阳性25例(19.1%)，仅尿BK病毒阳性106例(80.9%)。131例感染BK病毒后的治疗方案中，70例调低他克莫司血药浓度，12例将他克莫司换为环孢素，49例不详。25例血BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量为5.6(2.4，12.3)×10 3拷贝/ml，感染时白细胞计数(WBC)(5.8±2.0)×10 9/L，血红蛋白(Hb)(122.0±22.4)g/L，血小板计数(PLT)(187.1±63.1)×10 9/L，中性粒细胞计数(NEUT)(3.9±1.7)×10 9/L，淋巴细胞计数(LYM)(1.5±0.8)×10 9/L，单核细胞计数(MONO)(0.4±0.2)×10 9/L，中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)2.2(1.7，3.5)，衍生中性粒细胞与淋巴细胞比值(dNLR)1.7(1.3，2.6)，血小板与淋巴细胞比值(PLR)121.3(86.3，227.3)，单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)0.2(0.1，0.4)，淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)4.7±2.6。106例尿BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量为20.4(0.4，2 570.0)×10 5拷贝/ml，感染时WBC 6.6(4.8，9.1)×10 9/L，Hb(129.0±24.5)g/L, PLT 188.0(147.3，226.5)×10 9/L，NEUT 4.6(3.0，6.6)×10 9/L，LYM(1.7±0.8)×10 9/L, MONO 0.4(0.3，0.5)×10 9/L，NLR 2.8(1.9，3.9)，dNLR 2.1(1.5，3.0)，PLR 120.5(87.0，163.2)，MLR 0.2(0.1，0.4)，LMR 4.5(2.8，6.7)。根据70例调低他克莫司血药浓度患者治疗前后血、尿BK病毒DNA载量变化情况(分组原则优先考虑血BK病毒DNA载量，其次是尿BK病毒DNA载量)，将患者分为BK病毒升高组和BK病毒下降组，比较两组治疗后WBC、Hb、PLT、NEUT、LYM、MONO、NLR、dNLR、PLR、MLR、LMR、他克莫司血药浓度及变化差值、血肌酐及变化差值的差异。 结果:25例血BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量与NLR( r＝0.5062， P＝0.0098)、dNLR( r＝0.5738， P＝0.0027)相关，与WBC( r＝－0.0185， P＝0.9302)、Hb( r＝0.0912， P＝0.6646)、PLT( r＝－0.3931， P＝0.0519)、NEUT( r＝0.2438， P＝0.2401)、LYM( r＝－0.3035， P＝0.1402)、MONO( r＝－0.3279， P＝0.1096)、PLR( r＝0.1054， P＝0.6161)、MLR( r＝0.0738， P＝0.0.7257)、LMR( r＝－0.0738， P＝0.7257)无相关性。106例尿BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量与WBC( r＝0.0222， P＝0.8209)、Hb( r＝－0.0323， P＝0.7423)、PLT( r＝0.0847， P＝0.3881)、NEUT( r＝0.0417， P＝0.6713)、LYM( r＝0.0010， P＝0.9916)、MONO( r＝0.0224， P＝0.8196)、NLR( r＝0.017 0， P＝0.862 3)、dNLR( r＝－0.0013， P＝0.9892)、PLR( r＝0.0387， P＝0.6934)、MLR( r＝－0.0070， P＝0.9433)、LMR( r＝0.0070， P＝0.9433)均无相关性。70例中，BK病毒上升组37例，BK病毒下降组33例，两组的年龄[(38.4±12.0)岁与(39.0±9.0)岁]、性别[男/女：23/14例与27/6例]、血型[A+/B+/AB+：22/13/2例与26/6/1例]、捐献类型[亲属捐献/尸体捐献：29/8例与27/6例]、治疗后血肌酐[123.0(98.4，140.5) μmol/L与132.0(107.1，162.4)μmol/L]、治疗后血肌酐变化差值[0(－15.7，10.5) μmol/L与－2.0(－9.1，15.0)μmol/L]、治疗后他克莫司血药浓度[(6.7±2.0) ng/ml与(6.5±1.5) ng/ml]、治疗后他克莫司浓度变化差值[－1.4(－3.8，0.6) ng/ml与－1.2(－2.2，1.3) ng/ml]差异均无统计学意义( P>0.05)。BK病毒上升组和BK病毒下降组的MONO差异有统计学意义[0.3(0.2，0.5)×10 9/L与0.4(0.3，0.6)×10 9/L， P＝0.033]，两组间WBC[6.6(4.1，8.8)×10 9/L与6.8(5.4，8.9×10 9/L]、Hb[(133.2±25.3)g/L与(131.6±20.6)g/L]、PLT[185.0(151.0，231.5)×10 9/L与196.0(149.0，234.0)×10 9/L]、NEUT[4.3(2.4，6.4) ×10 9/L与4.2(3.1，5.5)×10 9/L]、LYM[1.7(1.1，2.2)×10 9/L与1.8(1.1，2.3)×10 9/L]、NLR[2.5(1.9，3.8)与2.4(1.9，3.7)]、dNLR[2.0(1.5，2.8)与1.9(1.4，2.5)]、PLR[114.9(85.1，159.4)与111.3(77.1，159.6)]、LMR(4.6±2.6与5.2±2.4)、MLR[0.2(0.2，0.4)与0.2(0.2，0.4)]差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:在感染BK病毒的肾移植受者中，血BK病毒DNA载量与外周NLR、dNLR呈正相关。MONO升高与BK病毒感染预后好转相关。