目的 研究新疆紫草Arnebia euchroma的化学成分.方法 采用硅胶、ODS、凝胶柱色谱等多种柱色谱分离技术进行分离纯化,通过质谱、核磁共振波谱、圆二色谱等技术并结合文献报道的数据,对化合物进行结构鉴定.采用CCK8法,研究化合物对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.结果 从新疆紫草石油醚部位中共分离得到24个化合物,分别鉴定为(S)-1-(6-异丙基-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙-1-酮(1)、(Z)-2-(2-(2,5-二羟基苯基)-2-氧亚乙基)-6-甲基庚-5-烯酸乙酯(2)、2-(2Z)-(3-羟基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯基)-1,4-苯二醇(3)、新藏紫草酚(4)、(+)-(R)-脱氧碘化叶黄素(5)、3-(4-甲基-3-戊烯-1-基)-6-羟基-9-甲氧基-2H-1-苯并氧杂环庚烯-5-酮(6)、对羟基苯甲醛(7)、香草醛(8)、乙酰香草酮(9)、2-羟基-4-甲氧基肉桂醛(10)、guttaquinol B(11)、岩大戟内酯E(12)、3-乙酰氧基齐墩果酸(13)、羟基何帕酮(14)、β-谷甾醇(15)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(16)、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(17)、柠黄醇(18)、euchroquinol B(19)、docosanyl ferulate(20)、arnebin-7(21)、阿卡宁(22)、β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁(23)、异丁酰阿卡宁(24).化合物21、22对MCF-7细胞的增殖具有抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值分别为(16.58+0.02)μmol/L 和(9.19±0.02)μmol/L.结论 化合物1和2为新化合物,分别命名为新疆紫草酮(euchromone)和新疆紫草酚(euchromol).化合物7～11、16、18为首次从软紫草属中分离得到,化合物3和12为首次从新疆紫草中分离得到.化合物21、22具有良好的抑制MCF-7细胞增殖活性.

目的 研究紫草素联合半导体激光对牙釉质表面脱矿的抑制作用.方法 收集2021年12月-2022年7月在新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)就诊的120位15～20岁因正畸减数拔牙的新鲜前磨牙或第三磨牙90颗,用低速金刚石锯将其切割制备成5 mm×5 mm× 3 mm釉质块,选择硬度值在310～350 HV范围内的牙釉质块样本.随机分类法将其分为对照组、紫草素组、激光组、激光联合氟化钠组、氟化钠组、激光联合紫草素组,每组15颗.每组进行3 d的脱矿实验(期间每隔12 h各组按条件给予干预)后,采用显微硬度仪测定各组表面硬度;采用原子力显微镜测定各组脱矿深度、表面粗糙度和表面形貌;采用X射线能谱仪测定各组表面形貌和表面元素变化.结果 与对照组、激光组、紫草素组比较,激光联合紫草素组显微硬度值增大,差异有统计学意义(P＜0.05);与激光联合氟化钠组比较,激光联合紫草素组显微硬度值减小,差异有统计学意义(P＜0.05);与氟化钠组比较,激光联合紫草素组显微硬度值差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组、激光组、紫草素组比较,激光联合紫草素组表面粗糙度和脱矿深度减小,差异有统计学意义(P＜0.05);与激光联合NaF组比较,激光联合紫草素组表面粗糙度和脱矿深度增大,差异有统计学意义(P＜0.05);NaF组比较,激光联合紫草素组表面粗糙度和脱矿深度差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,激光联合紫草素组表面钙磷元素摩尔比值增大,差异有统计学意义(P＜0.05);与激光联合NaF组、NaF组比较,激光联合紫草素组表面钙磷元素摩尔比值减小,差异有统计学意义(P＜0.05);与激光组、紫草素组比较,激光联合紫草素组表面钙磷元素摩尔比值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 紫草素联合半导体激光对牙釉质表面脱矿有明显的抑制作用.

探索野生新疆紫草根际土壤微生物与药材药效成分含量相关性,为生态种植基地选择提供指导.通过提取野生新疆紫草根际土壤微生物总DNA,用IlluminaMiseq高通量测序技术分析土壤根际微生物群落结构,采用高效液相色谱法测定药材中药效成分羟基萘醌总色素、β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量,测定主要产区野生新疆紫草的根际土壤理化性质,并用SPSS软件分析土壤微生物丰度与指标成分含量及土壤理化性质的相关性.结果显示,不同产地新疆紫草根际真菌、细菌在门和属水平的物种组成上相似,但其相对丰度、丰富度指数(Chao1 指数)和群落多样性指数(Simpson指数)均存在差异;相关性分析表明,土壤中有效磷的含量与主要药效成分羟基萘醌总色素、β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量呈正相关,Solicoccozyma等5 种真菌属和Pseudonocardia、Bradyrhizobium等 6 种细菌属的丰度与药材药效成分含量均呈正相关,其中Bradyrhizobium的丰度与β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量呈显著正相关;Archaeorhizomyces等真菌的丰度与根际土壤有效磷的含量呈显著正相关,Bradyrhizobium等与土壤pH呈显著负相关.因此,新疆紫草根际真菌和细菌的丰度与药材药效成分和根际土壤理化性质均有一定的相关性,可为后期生态种植基地的选择提供科学依据.

观察新疆紫草中乙酰阿卡宁对人黑色素瘤A375 细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时探讨其可能的作用机制.设空白组以及乙酰阿卡宁低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 μmol·L-1)分别作用于A375 细胞.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,细胞划痕及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测迁移侵袭相关N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶 9(MMP-9)以及Wnt/β-连环蛋白(β-cate-nin)通路相关Wnt1、轴蛋白2(Axin2)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)、β-catenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21 蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶 2(MMP-2)、N-cadherin、vimentin、β-catenin、snail-1、CD44 mRNA表达情况.MTT结果显示,与空白组比较,乙酰阿卡宁各剂量组细胞抑制率显著上升(P<0.01).细胞划痕和Transwell实验结果显示,与空白组比较,乙酰阿卡宁各组细胞迁移、侵袭数量和迁移侵袭率显著降低(P<0.05,P<0.01),横、纵向迁移及侵袭能力明显减弱.Western blot结果显示,与空白组比较,乙酰阿卡宁高剂量组Axin2 蛋白表达增加(P<0.05),N-cadherin、vimentin、MMP-9、Wnt1、p-GSK-3β、β-catenin、cyclin D1、p21蛋白表达均减少(P<0.05,P<0.01),GSK-3β蛋白表达无显著变化;PCR结果显示,MMP-2、N-cadherin、vimentin、β-catenin、snail-1、CD44 mRNA表达总体呈下降趋势(P<0.01),E-cadherin mRNA的表达升高(P<0.01).乙酰阿卡宁可抑制人黑色素瘤A375 细胞的增殖、迁移及侵袭,作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关.

该研究在茶树转录组测序的基础上,以茶树品种‘福鼎大白茶’的芽叶为供试材料,采用RT-PCR技术,克隆茶树萜类化合物合成途径中的限速酶——甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶全长cDNA序列,命名为CsMVD(GenBank登录号为MF772780);该基因全长1 585 bp,其ORF为1 266 bp,编码421个氨基酸,蛋白质分子量46.45 kD,理论等电点7.10.CsMVD蛋白可能定位于细胞质中,具有MVD1 superfamily的保守结构域,不存在跨膜结构和信号肽,具有多个磷酸化位点,部分保守的氨基酸残基决定了蛋白的催化反应特异性和活性.系统进化分析表明,CsMVD与新疆紫草(Arnebia euchroma)MVD的亲缘关系最近.荧光定量PCR结果显示,CsMVD在茶树不同组织中均有表达,果实中CsMVD的表达量最高,表达水平表现为:果实＞茎＞根＞叶＞花;在白茶萎凋过程中,CsMVD基因的表达量在48 h结束阶段显著高于0h,推测该基因与茶叶萜类香气化合物形成有关.

目的:建立同时测定新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil100-5 C18,流动相为乙腈-0. 1％甲酸溶液(80:20,V/V),流速为1. 0 mL/min,检测波长为516 nm,柱温为25℃, 进样量为10μL.结果:紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素检测质量浓度线性范围分别为0. 404~10. 100 μg/mL (r=0. 9998)、5. 350~107. 000 μg/mL(r=0. 9996)、2. 035~40. 700 μg/mL(r=0. 9998);定量限分别为0. 40、2. 91、1. 34 μg/mL,检测限分别为0. 12、0. 87、0. 40 μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2. 0％(n=6);加样回收率分别为99. 12％～104. 18％(RSD=1. 85％, n=6)、96. 51％~100. 21 ％(RSD=1. 43％, n=6)、98. 11％~102. 51 ％(RSD=1. 42％, n=6).结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定.

目的:为紫草和紫草制剂的抗炎机制研究及产品开发提供参考.方法:以"紫草""紫草素""制剂""抗炎""进展""zicao""shikonin""anti－inflammatory"等为关键词,在Pub Med、CNKI等多个数据库中查询建库至2017年12月31日的相关文献,对紫草、紫草素和紫草复方制剂抗炎作用的相关研究进行综述.结果与结论:共检索到相关文献128篇,其中有效文献41篇.紫草以新疆软紫草品质最佳,而滇紫草、泰山紫草等也被逐步肯定.紫草醇提物抗炎效果最优,紫草素及其衍生物的抗炎活性突出.紫草、紫草素及紫草复方制剂治疗烧烫伤、湿疹、银屑病、过敏性紫癜、关节炎、静脉炎、妇科炎症、急性肺损伤、重症急性胰腺炎伴肺损伤或肝损伤、局部脑缺血等多种疾病的实验研究正逐步深入,多认为其抗炎机制与NF－κB、IL－1β、IL－6、TNF－α、NO、CCR、COX－2、IL－22、IL－17等密切相关.紫草及紫草制剂现已广泛用于临床治疗湿疹、皮炎、妇科炎症、皮肤创面及黏膜损伤等多种炎症性疾病,其剂型多为油剂、膏剂、栓剂、喷雾剂等.如何高效发挥紫草及紫草制剂的抗炎作用,尚有待在微观层面运用生物组学技术等继续深入研究.

目的:以人表皮生长因子受体(EGFR)为靶标,从左旋紫草素,乙酰紫草素,β,β-二甲基丙烯酰紫草素,β-乙酰氧基异戊酰紫草素等新疆紫草所含的4种柰醌类活性成分中筛选潜在的EGFR抑制剂.方法:利用表面等离子体共振(SPR)技术,首先通过预吸附实验,优化固定的pH和浓度,选择最佳条件,构筑EGFR生物芯片.在此基础上,以pH 7.4,浓度10 mmol·L-1的磷酸缓冲溶液(含0.005％聚山梨酯-20)作为相互作用时的缓冲溶液,实时动态研究EGFR与4种单体的相互作用.通过软件计算动力学参数,基于结合动力学常数大小,筛选抑制剂.结果:选择pH4.5,10 mmol· L-1的乙酸缓冲液、质量分数为10 mg·L-1的EGFR为其最佳的固定条件,最终固定量为250 RU.相互作用结果显示4种单体中,β,β-二甲基丙烯酰紫草素与EGFR有明显的结合作用,其他3种单体无明确响应.动力学参数计算结果显示,EGFR与β,β-二甲基丙烯酰紫草素相互作用的结合速率常数ka为1.27×104 L·mol-1·s-1,解离速率常数kd为2.92×10-2s-1,解离平衡常数KD为2.31×10-6 mol·L-1,卡方值(Chi2)为3.25.KD＜1 ×10-5mol· L-1,表明他们有较强的亲和力.结论:β,β-二甲基丙烯酰紫草素可能为EGFR的一种抑制剂.

目的 采用HPLC法测定新疆软紫草属4种植物(新疆紫草、黄花软紫草、天山软紫草、硬萼软紫草)根中7种萘醌类成分(左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素)的含有量.方法 该药材石油醚提取物的分析采用Agilent-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.05％甲酸;体积流量l mL/ min;柱温30℃;检测波长275 nm.结果 7种成分在各自范围内线性关系良好,平均加样回收率为97.37％～ 99.75％,RSD为0.42％～1.94％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于软紫草的质量控制.

目的 对比研究泰山紫草和新疆紫草指纹图谱及其主要成分含量,评价泰山紫草的药用价值.方法 采用HPLC,色谱柱为Symmetry C18色谱柱(4.6 mmn×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(70:30),流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为516 nm.应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)软件,建立泰山紫草、新疆紫草指纹图谱.结果 建立了泰山紫草、新疆紫草指纹图谱的共有模式,以新疆紫草对照图谱作为参照图谱,进行峰匹配,对比计算泰山紫草指纹图谱的相似度为0.798,泰山紫草中含有萘醌类有效成分,但含量与新疆紫草中存在差异.结论 泰山紫草具有一定的药用价值,但不可完全替代新疆紫草使用.