目的 探讨老年危重患者ICU获得性衰弱的危险因素,研究其在临床诊断中的预测价值.方法 选取2017年6月—2018年10月首都医科大学附属复兴医院重症医学科收治的患者进行观察性队列研究,在患者清醒之日使用医学研究委员会评分进行肌力评估,根据临床肌力评估结果将患者分为试验组(肌力评分＜48分)和对照组(≥48分).收集和比较两组相关资料,采用多因素logistic回归分析评估老年危重患者ICU获得性衰弱发生的独立危险因素,采用ROC曲线评估各指标在老年患者ICU获得性衰弱发生中的预测价值.结果 共收集62例清醒的老年危重患者,其中诊断为ICU获得性衰弱者30例为试验组(疾病发病率48.39％),无ICU获得性衰弱的32例为对照组.两组急性生理学和慢性健康状况评价(APACHE)Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估评分、全身炎症反应综合征持续时间、脓毒症持续时间、脓毒症性休克、休克持续时间、多脏器功能障碍及其持续时间、机械通气持续时间、使用神经肌肉阻滞剂及其使用时间、使用去甲肾上腺素及其使用时间、低钙血症及电解质紊乱等指标比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).多因素logistic回归分析显示,APACHE Ⅱ评分及去甲肾上腺素使用时间是老年危重患者ICU获得性衰弱发生的独立危险因素(P＜0.05).ROC曲线提示应用去甲肾上腺素＞3 d和A-PACHE Ⅱ评分＞20分为截断点时预测性能最佳.结论 在老年危重患者中,APACHE Ⅱ评分和去甲肾上腺素使用时间是ICU获得性衰弱发生的独立危险因素和较好的预测指标.

目的 探讨雷珠单抗联合自拟健脾利水方治疗视网膜静脉阻塞黄斑水肿(RVO-ME)的疗效和预后预测指标.方法 选取2021年10月-2022年10月于浙江中医药大学附属第一医院就诊的60例RVO-ME患者,根据随机数字法分为联合治疗组和常规治疗组,各30例.2组均连续3个月进行玻璃体内雷珠单抗注射,联合治疗组口服自拟健脾利水方免煎颗粒,常规治疗组口服安慰剂.比较2组治疗前后外周血炎症指标、最佳矫正视力(BCVA)、OCT图像中高反射信号(HRF)、黄斑中心厚度(CMT)、视网膜下液(SRF)和黄斑囊样水肿(CME)情况.根据疗效将患者分为水肿复发组20例和水肿未复发组40例,比较2组治疗前后指标.结果 治疗后联合治疗组全身免疫炎症指数(SII)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、HRF和CMT显著低于常规治疗组(P＜0.05).联合治疗组的SRF消退率(88.9％vs.50.0％)和CME消退率(63.0％vs.25.0％)均较常规治疗组升高(P＜0.05);联合治疗组RVO-ME复发率(20.0％vs.46.7％)较常规治疗组降低(P＜0.05).水肿未复发组治疗后HRF和CMT较治疗前降低数值显著高于复发组(P＜0.05).ROC曲线提示基线CMT＜497.50 μm(P=0.010)和HRF＜15.5个(P=0.021)患者黄斑水肿复发率较低,视力较好.结论 雷珠单抗联合自拟健脾利水方治疗RVO-ME能提升疗效,减少复发.治疗前CMT＜497.50 μm和HRF≤15个的患者预后较好.

目的 建立基于TaqMan探针的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)E301R基因荧光定量PCR(fluo-rescent quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测方法,并进行验证,以期应用于临床样本中ASFV的检测.方法 通过对ASFVE301R基因序列进行分析,选择基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针.PCR扩增E301R基因片段,克隆至pCAGGS载体,构建质粒标准品,建立基于TaqMan探针的qPCR检测方法,并验证方法的线性范围、精密性、特异性、敏感性及准确性.采用建立的方法检测92份临床样本,并与商品化ASFV荧光PCR试剂盒检测结果进行比较.另采用建立的方法对E301R基因转录动力学进行分析.结果 质粒标准品在1.6×(101～108)拷贝/μL范围内,与Ct呈良好的线性关系,线性回归方程为:y=-3.239 x+40.774,R2=0.994;重复性及中间精密性验证CV均＜2％;除 ASFV外,猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and re-spiratory syndrome virus,PRRSV)、伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)及猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)均未出现扩增曲线;最低可稳定检出1.6× 101拷贝/μL的质粒标准品;浓度为1.6× 102和1.6× 101拷贝/μL质粒标准品的加标回收率在90％～110％之间.建立的方法与商品化ASFV荧光PCR试剂盒对92份临床样本检测结果的符合率为96.7％(Kappa=0.932,P=1.000).E301R基因可能为ASFV感染的中期转录基因.结论 建立的基于TaqMan探针的qPCR检测方法具有良好的精密性、特异性、敏感性及准确性,可用于临床样本中ASFV的检测.

目的:全面了解我国华南地区门静脉高压食管胃静脉曲张出血（EGVB）内镜治疗的现状。方法:本研究通过网络分发调查问卷的方式全面了解华南地区广东省、广西壮族自治区及海南省开展门静脉高压EGVB内镜治疗的基本情况，包括预防EGVB的内镜治疗方案、急性EGVB的处理、胃底及特殊类型静脉曲张的处理、肝硬化门静脉高压的基础治疗与内镜治疗的随访等。医院的治疗方案选择使用百分率表示，并使用卡方检验或Fisher精确检验对不同省份医院对于我国指南的依从性进行比较分析。结果:华南地区共81家医院参与调研，调查显示内镜治疗的最主要适应证是控制急性EGVB（60.5%）。参与调研医院对于我国指南中EGVB一级预防的推荐意见（单纯非选择性β受体阻滞剂或单纯内镜治疗）和二级预防推荐意见（非选择性β受体阻滞剂联合内镜治疗）的依从性为均为55.6%，不同省份之间无明显差异（P=0.976和0.186）。92.6%的医院首选内镜治疗处理急性EGVB，82.7%的医院在出血后12～24 h的时间窗内完成急诊内镜治疗。对于各种类型的胃底静脉曲张和异位静脉曲张，以组织胶为基础的内镜治疗（包括组织胶联合硬化剂注射和单纯组织胶注射）均为最常采用的术式。81.5%的医院将非选择性β受体阻滞剂常规用于肝硬化门静脉高压的治疗，主要使用的药物为普萘洛尔（80.2%）和卡维地洛（19.8%）。结论:本研究证实多种预防和治疗EGVB的内镜治疗技术已在我国华南地区广泛开展，各级医院在开展急诊胃镜进行急性EGVB止血方面均较为积极，但对EGVB的一级预防和二级预防的总体指南依从性仍不理想，未来需进一步提升EGVB治疗的指南依从性。

目的:系统评价不同糖皮质激素（GC）联合（或不联合）透明质酸钠（HA）治疗膝骨关节炎（KOA）疗效的差异。方法:应用计算机检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science、ScienceDirect、中国知网（CNKI）、万方（Wanfang）、维普（VIP）、中国生物医学文献数据库（CBM），搜索有关膝关节内注射糖皮质激素治疗KOA的随机对照试验（RCT）文献，检索时限从建库至2023年5月。排除文献中发表重复、无法获取全文及研究数据不全或有误的，并由2位研究者从文献类型、研究对象、干预措施及结局指标方面对文献进行独立筛选。提取数据并评价偏倚风险，使用软件Review Manager 5.4和Stata 17进行网状Meta分析。结果:共计检索相关文献2 098篇，最终纳入49个RCTs，包括13种用药方案，具体为HA、复方倍他米松（CB）、地塞米松（DXM）、醋酸甲泼尼龙（MPA）、曲安奈德（TA）、以注射用水或生理盐水为主要成分的安慰剂（PLA）、HA+CB、HA+PLA、HA+DXM、HA+MPA、HA+TA、CB+PLA、TA+PLA。治疗KOA过程中，网状Meta分析发现：（1）在提高有效率方面，排名前三位的用药方案分别是：HA+CB［与TA相比，比值比（OR）=22.13，95%(置信区间)CI （6.32，77.47）］、HA+TA［与TA相比，OR=20.39，95%CI （5.49，75.73）］、HA+DXM［与TA相比，OR=19.30，95%CI （4.77,78.20）］；95% CI不包含1表明差异有统计学意义。（2）在降低西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）评分方面，排名前三位的用药方案为：DXM［与CB相比，均数差（MD）=-22.46，95%CI （-38.01，-6.90）］、HA+TA［与CB相比，MD=-13.87，95%CI （-27.38，-0.36）］、HA+CB［与CB相比，MD=-11.03，95%CI （-21.47，-0.60）］；95% CI不包含0表明差异有统计学意义。（3）在降低膝关节疼痛视觉模拟量表（VAS）评分方面，排名前三位的用药方案为：HA+TA［与MPA相比，MD=-4.65，95%CI （-6.78，-2.51）］、CB+PLA［与MPA相比，MD=-2.60，95%CI （-4.69，-0.51）］、HA+CB［与MPA相比，MD=-2.50，95%CI （-4.06，-0.94）］。（4）在降低Lequesne指数方面，排名前三位的用药方案为：HA+TA［与PLA相比，MD=-6.72，95%CI （-9.33，-4.12）］、DXM［与PLA相比，MD=-5.60，95%CI （-8.80，-2.40）］、HA［与PLA相比, MD=-4.63,95%CI (-6.77,-2.49)］。结论:在关节腔注糖皮质激素治疗膝骨关节炎的总体疗效方面，优先选择HA联合GC，其中HA+TA在治疗KOA整体评价方面上有较高的疗效。受限于纳入RCTs的数量及质量，该结论仍需更多高质量临床RCTs进一步验证。

目的 探讨对香豆酸(p-CA)对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗作用及对Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响.方法 将大鼠分为6组:对照组(n=10)、DN组(n=10)、低剂量对香豆酸组(L-p-CA)(n=10)、中剂量对香豆酸组(M-p-CA)(n=10)、高剂量对香豆酸组(H-p-CA)(n=10)和RhoA激动剂U-46619组(U-46619)(n=12).对照组大鼠为健康SD大鼠,其他组大鼠均为高脂饮食联合链脲佐菌素诱导的DN模型大鼠.造模后,对照组和DN组大鼠灌胃2 mL0.5％羧甲基纤维素溶液,L-p-CA组、M-p-CA组和H-p-CA组大鼠分别灌胃2 mL剂量为50,100,200 mg/(kg·d)的对香豆酸溶液,U-46619组大鼠同时灌胃1 mL对香豆酸溶液(剂量为200 mg/(kg·d))以及1 mL剂量为30 μg/(kg·d)的RhoA激动剂U-46619.各组大鼠均干预12周.治疗后检测各组大鼠生化指标水平:空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)和24 h尿蛋白;以及血清氧化应激指标水平:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA).通过苏木精-伊红(HE)和Masson三色染色评价大鼠肾脏损伤和纤维化.通过qRT-PCR检测肾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)转录活性.通过Western blot检测肾脏TNF-α、IL-1β、MCP-1、RhoA和ROCK1蛋白表达水平.结果 与对照组比较,DN组大鼠的FPG、FINS、24 h尿蛋白、HbA1c、BUN和Cr水平升高(P＜0.05);肾组织发生明显病变,肾组织纤维化面积升高(P＜0.05);血清SOD、CAT和GSH-PX水平均降低(P＜0.05),MDA水平升高(P＜0.05);肾组织TNF-α、IL-1β和MCP-1的mRNA和蛋白水平均升高(P＜0.05);肾组织RhoA和ROCK1蛋白表达水平升高(P＜0.05).与DN组比较,L-p-CA组、M-p-CA组和H-p-CA组大鼠的FPG、FINS、24 h尿蛋白、HbA1c、BUN和Cr水平降低(P＜0.05);肾组织病变减轻,肾组织纤维化面积降低(P＜0.05);血清SOD、CAT和GSH-PX水平均升高(P＜0.05),MDA水平降低(P＜0.05);肾组织TNF-α、IL-1β和MCP-1的mRNA和蛋白水平均降低(P＜0.05);肾组织RhoA和ROCK1蛋白表达水平降低(P＜0.05).与L-p-CA组和M-p-CA组比较,H-p-CA组大鼠的FPG、FINS、24h尿蛋白、HbA1c、BUN和Cr水平降低(P＜0.05);肾组织病变减轻,肾组织纤维化面积降低(P＜0.05);血清SOD、CAT和GSH-PX水平均升高(P＜0.05),MDA水平降低(P＜0.05);肾组织TNF-α、IL-1β和MCP-1的mRNA和蛋白水平均降低(P＜0.05);肾组织RhoA和ROCK1蛋白表达水平降低(P＜0.05).与H-p-CA组比较,U-46619组大鼠的FPG、FINS、24h尿蛋白、HbA1c、BUN和Cr水平均升高(P＜0.05);肾组织病变加重,肾组织纤维化面积升高(P＜0.05);血清SOD、CAT和GSH-PX水平均降低(P＜0.05),MDA水平升高(P＜0.05);肾组织TNF-α、IL-1 β和MCP-1的mRNA和蛋白水平均升高(P＜0.05);肾组织RhoA和ROCK 1蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论 对香豆酸通过抑制RhoA/ROCK信号通路减轻糖尿病肾病病变.

目的 构建不同浓度梯度盐酸诱导下的急性胃黏膜损伤(acute gastric mucosal injury,AGMI)大鼠模型,并探讨尾静脉注射不同浓度及剂量的伊文思蓝(evans blue,EB)对大鼠生存率及体表渗出情况的影响.方法 (1)将Wistar大鼠根据体重随机分配到5个组:150～180 g组、180～200 g组、200～250 g组、300～400 g组以及400～500 g组,并进一步根据盐酸浓度分为8个亚组,具体浓度为:0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70 mol/L盐酸组以及以生理盐水组作为对照,共40个小组,每小组3只,共计120只.评估各组大鼠造模后24 h生存率,并分析体重和盐酸浓度对大鼠生存情况的交互关系.在确定5个梯度盐酸浓度的基础上,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察胃黏膜镜下的病理变化.(2)选择(1)结果中适合制备的最高盐酸浓度制备AGMI模型,随后,将大鼠随机分配到不同的EB浓度和剂量组中,具体分组:EB 1(0.5％,0.4 mL)组、EB 2(l％,0.1 mL/100 g)组、EB 3(1％,0.2 mL/100 g)组、EB 4(2％,0.1 mL/100 g)组、EB 5(2％,0.2 mL/100 g)组、EB 6(5％,0.1 mL)组,每组 5 只,共 30只.评估注射EB后24 h内的生存率和体表渗出程度.结果 (1)AGMI大鼠造模后症状随着盐酸浓度升高而加剧,0.65 mol/L和0.70 mol/L在各体重组中的24 h生存率均为0％.Kaplan-Meier生存曲线表明,不同盐酸浓度组大鼠的生存率存在显著性差异(P＜0.001),且盐酸浓度与体重之间的交互作用对大鼠的存活时间产生显著影响(P＜0.001),确定的5个梯度盐酸浓度为0.40、0.45、0.50、0.55、0.60 mol/L.组织学观察结果表明,AGMI大鼠胃黏膜炎性细胞浸润程度随盐酸浓度升高而加剧.(2)0.60 mol/L盐酸制备的AGMI大鼠,尾静脉注射5％EB(0.1 mL)后24 h生存率仅为40％.Kaplan-Meier生存曲线结果显示,EB不同浓度和注射量下AGMI大鼠的生存率无显著性差异(P＞0.05).体表渗出情况分析显示,EB 1组大鼠皮肤和眼睛颜色变化较淡,体表渗出点较少,而EB 4组、EB 5组大鼠皮肤颜色和渗出情况较明显.单因素方差分析进一步证实,EB 3组、EB 4组和EB 5组大鼠的体表EB渗出点数量显著多于EB 1组(P＜0.05,P＜0.01).结论 盐酸造模能够实现多个精确浓度梯度的设置.禁食后体重为180～200 g范围的大鼠,灌胃0.40～0.60 mol/L浓度可有效制备AGMI模型.尾静脉注射2％EB(0.2 mL/100 g),将有利于开展AGMI大鼠体表EB渗出点分布特征随时间和病情变化的研究分析.

目的:分析Eph受体A(Eph receptor A, EPHA)5突变预测肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICI)治疗预后的临床意义。方法:通过生物信息学分析癌症药物敏感性基因组学(genomics of drug sensitivity in cancer, GDSC)-LUAD数据集、癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)-LUAD数据集中可能与LUAD患者ICI应答相关的突变基因。选择2020年1月至2021年1月我院接受帕博利珠单抗治疗的96例LUAD患者，收集患者的石蜡包埋组织肿瘤标本和匹配的血液样本，采用二代基因测序。根据检测结果分为EPHA5-WT亚组66例和EPHA5-MT亚组30例。记录患者的客观缓解率(objective response rate, ORR)、疾病控制率(disease control rate, DCR)及无进展生存期(progression-free survival, PFS)。结果:生物信息学分析显示，EPHA5-MT的LUAD患者可从ICI治疗中获益。临床队列分析结果显示，EPHA5-MT亚组LUAD的肿瘤突变负荷值27.34(19.98，53.24)mut/Mb高于EPHA5-WT亚组13.70(10.77，17.75)mut/Mb(P<0.001)。EPHA5-WT亚组ORR 22.73%低于EPHA5-MT亚组33.33%(P>0.05)，EPHA5-MT亚组的DCR 86.67%高于EPHA5-WT亚组62.12%(P<0.05)。EPHA5-WT亚组疾病进展36例(54.55%)，其中死亡11例。高于EPHA5-MT亚组8例(26.67%)，其中死亡4例。单因素及多因素COX回归分析显示，EPHA5-WT相较于EPHA5-MT是LUAD患者ICI治疗后发生疾病进展的危险因素。绘制Kaplan-Meier生存曲线显示，EPHA5-MT组LUAD患者PFS 14.53[5.71～26.23]个月长于EPHA5-WT组7.89(0.59～30.67)个月(P<0.005)。结论:EPHA5-MT是影响LUAD ICI治疗预后的生物标志物。

目的 评估荧光定量PCR熔解曲线法检测真菌核酸的准确性及临床应用价值.方法 纳入 460 例疑似或确诊为呼吸道真菌感染患者为研究对象,以荧光定量PCR熔解曲线法作为考核方法,以真菌 26S rRNA基因核酸测定试剂盒联合Sanger测序法作为参考方法,采集各研究对象痰液样本并同步使用考核方法、参考方法检测,计算两种方法的Kappa值以评价结果的一致性.结果 以参考方法为对照,考核方法检测结果总符合率为 92.83%(427/460);此外,与参考方法相比,考核方法检测8 种真菌(白念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、新生隐球菌、季也蒙念珠菌、曲霉菌)的阳性符合率、阴性符合率、总符合率分别为 97.34%(183/188)、97.06%(264/272)、97.17%(447/460);100.00%(33/33)、99.77%(426/427)、99.78%(459/460);100.00%(16/16)、99.55%(442/444)、99.57%(458/460);98.11%(52/53)、99.75%(442/444)、99.57%(458/460);95.08%(58/61)、99.50%(397/399)、98.91%(455/460);100.00%(9/9)、99.56%(449/451)、99.57%(458/460);85.00%(17/20)、99.32%(437/440)、98.70%(454/460);97.59%(81/83)、97.88%(369/377)、97.83%(450/460);两种方法检测结果一致性评价的Kappa值均大于 0.8.对两种方法不一致结果进行复核检测,结果发现有 53.7%(22/41)的检测结果与考核方法一致,有 46.3%(19/41)的检测结果与参考方法一致.结论 使用荧光定量PCR熔解曲线法能同时检测 8 种真菌,且检测结果与参考方法高度一致,在真菌检测中具有独特优势,且有重要的临床应用价值.

目的 评估来曲唑片(在达英-35治疗的基础上)对多囊卵巢综合征患者性激素调节及排卵改善的效果.方法 选择2020年1月至2022年12月西安市人民医院(西安市第四医院)收治的多囊卵巢综合征患者80例,按随机数字表法分组分为对照组(40例,接受常规治疗+达英-35治疗)、观察组(40例,接受联合来曲唑片治疗).2组均治疗3个疗程,随访6个月,分析比较2组临床疗效,血清催乳激素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮、抗苗勒管激素(AMH)、人体抑制素B(INHB)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平,排卵率、妊娠率、成熟卵泡、最大卵泡直径、子宫内膜厚度,不良反应发生情况.结果 观察组总有效率较高;治疗后2组血清PRL、FSH、LH、睾酮、AMH、INHB、Vaspin水平降低,且观察组较低;观察组子宫内膜厚度较厚,排卵率、妊娠率较高,最大卵泡直径较长,成熟卵泡数量较多,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用来曲唑片有助于调节多囊卵巢综合征性激素及疾病相关因子水平,改善排卵功能,提高妊娠率,且不易增加不良反应发生风险,效果显著.