恶性肿瘤的发生、发展是多基因共同作用的结果。部分晚期恶性肿瘤在应用手术、放疗、化疗等常规治疗手段后，肿瘤的复发、转移仍难以遏制，迅猛发展的基因治疗为恶性肿瘤综合治疗提供新的思路。然而，恶性肿瘤的基因治疗如要广泛应用于临床，仍然存在诸多问题，缺乏安全、高效、特异的基因载体，是制约其临床应用的关键因素。理想的肿瘤基因治疗载体应具备靶向性、安全、有效、可调控、长期稳定、容量大、穿透性能好、适度表达和制备方便等特点，目前已有部分纳米载体展示出良好的研究潜能。本文就聚酰胺-胺树状分子（PAMAM）在肿瘤基因治疗中的研究进展进行综述。首先概述PAMAM的性状及研究应用；然后探讨基于肿瘤"精准"治疗的PAMAM表面修饰策略；最后论述PAMAM多功能载体系统的设计。

近年来兴起的树状大分子材料的结构可控，且其与细胞膜和各种活性药物分子具有独特的相互作用，因此成为构建纳米载药体系的优良材料，并在肿瘤靶向治疗领域得到了广泛研究。树状大分子作为具有良好生物相容性的纳米分子，可与肿瘤靶向分子偶联，从而将活性药物分子特异性递送到肿瘤组织，如此可最大限度地提高药物的靶向性，并减少其对非靶组织的毒性作用。笔者就近年来基于树状大分子材料构建的纳米载药体系用于肿瘤靶向治疗的研究进展进行综述。

目的 制备一种高效递送卡巴他赛(CTX)的聚乙二醇(PEG)修饰树状大分子递送胶束(mPEG-PAMAM),优化处方和制备工艺.方法 聚酰胺-胺树状大分子(PAMAM)与PEG发生迈克尔加成反应得到mPEG-PAMAM胶束,经纳米沉淀法进行药物装载,通过红外光谱、核磁共振氢谱鉴定合成材料的结构;通过透射电镜和激光粒度仪观察载药胶束的外貌形态并测定其粒径、电位;高效液相色谱法测定其载药量、包封率等;通过MTT等实验考察其细胞毒性,共聚焦显微镜探究其细胞摄取情况;在动物水平上注射RM-1 前列腺癌细胞构建小鼠肿瘤模型,探究其整体抑瘤能力.结果 mPEG-PAMAM@CTX胶束呈较规则的球形,平均粒径(162.8±0.7)nm,载药量6.58%,包封率61.12%,48 h内药物累计释放量达到86.8%;mPEG-PAMAM@CTX具有良好的细胞摄取,能有效地杀伤肿瘤细胞;在体内动物模型中,CTX经体内循环,主要富集在肿瘤部位,表明CTX能够通过mPEG-PAMAM胶束高效递送到RM-1 肿瘤组织,且肿瘤抑制率为 68.97%.结论 本研究制备的mPEG-PAMAM@CTX胶束能够有效提高CTX溶解度,增强肿瘤抑制效果,为难溶性药物递送的开发提供新的思路.

目的:探究磷酸化聚酰胺-胺(P-PAMAM)树状大分子交联胶原蛋白支架在体内成骨效能.方法:通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)对P-PAMAM进行表征,扫描电镜对胶原蛋白支架、聚酰胺-胺(PAMAM)复合胶原蛋白支架及P-PAMAM复合胶原蛋白支架进行形态表征.将 3 种复合支架植入SD大鼠颅骨骨缺损后,使用Micro-CT三维重建分析骨愈合过程中骨质、骨量的变化,采用HE染色及Masson染色对大鼠颅骨标本进行组织学分析.结果:FTIR显示PAMAM被成功磷酸化;扫描电镜显示,复合支架均具有良好的孔隙;体内成骨实验显示,与胶原蛋白支架和PAMAM复合胶原蛋白支架相比,P-PAMAM复合胶原蛋白支架具有更好的成骨诱导作用.结论:P-PAMAM树状大分子复合胶原蛋白支架在体内具有促进成骨作用.

[目的]巨盘锥(Castanopsis grandicicatricata)是原产于越南中、北部的壳斗科锥属植物,现于云南屏边苗族自治县大围山地区发现一零星分布的居群.为确定该种的身份,检验原始文献基于形态学推测的近亲,并展示该种所处的系统地位.[方法]利用细胞核rRNA基因5.8S、26S间隔区ITS2与叶绿体基因rbcL分子标记重建系统树.[结果]形态上,该种壳斗4.5～6.0 cm,刺树状分枝,坚果扁球形,果脐占坚果表面积2/3,与中国已知锥属均不同.分子系统树支持形态学推测,湄公锥(C.mekongensis)是其近缘种之一.[结论]巨盘锥是中国锥属一新记录种,这对于研究中国滇东南与越南北部植物区系有重要的意义.

目的 通过研究表型分布和分子特征的关联性,了解辽宁省小肠结肠炎耶尔森菌(Yersiniaenterocolitica,YE)的流行趋势,为辽宁省YE病的监测和防控提供数据支撑.方法 对2020-2023年辽宁省60株YE分离株进行血清分型、生物分型、毒力基因检测和PFGE、MLST分子分型研究.结果 60株YE分离株可分为4个血清型、2个生物型、8个毒力基因型和29种ST型.2023年40株YE分离株分为8组PFGE优势带型A-G,A组为2023年沈阳市地区流行分子型.PFGE的分辨力(DI)为0.954,MLST分辨力(DI)为0.948.ST3、ST252位于树状图核心位置向四周发散.PFGE较MLST方法分辨力稍高.结论 2020-2023年辽宁省YE分离株流行致病血清型是O:3,毒力基因型和ST型均呈现多样化状态.沈阳市YE污染较严重.应重点加强对于生物1A型菌株的研究工作.猪是辽宁省地区重要的宿主和传染源.PFGE和MLST对YE分离株分型均是可行的,ST分型与PFGE分型具有一致性.

目的 通过对输尿管芽树状结构三维追踪,结合形态学分析及测量,探讨输尿管芽分支模式及其末端诱导肾单位发生的数量.方法 取胚胎期及生后多时间点小鼠肾脏各3只,制备石蜡和树脂连续切片,显微图像摄取并配准,计算机辅助输尿管芽追踪并可视化,计数其分支数及单个分支所诱导的肾单位数量.此外,石蜡切片进行HE染色用于生肾区与输尿管芽形态学观察,Claudin-7免疫组织化学染色标记输尿管芽,测量输尿管芽分支末端的数量及反映其密度的输尿管芽间距.结果 输尿管芽树状分支三维可视化显示,起始的两主叉分支构成肾髓质,而皮质和生肾区分支茂密,输尿管芽分支末端间距越来越小.单个输尿管芽末端诱导肾单位数量由胚胎14.5d的1个到胚胎17.5 d的2个,偶见3个.结论 三维可视化显示输尿管芽树状分支呈区域复杂性,提示不同区域分子驱动不同的分支模式;而输尿管芽末端在生肾区的密度随肾脏发生发育而增加,与生肾区厚度减少相一致,而出生后分支末端的消失也反映了与肾单位祖细胞逐渐耗竭相一致.

目的:探讨化疗联合Venetoclax桥接异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤的疗效及安全性.方法:回顾性分析2017年7月至2021年12月在武汉市第一医院血液科行allo-HSCT治疗的3例母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤患者的资料.结果:3例患者中男性1例,女性2例,年龄27-52岁.首诊时有典型的皮肤病变,也有以急性白血病为主要特征累及全身.肿瘤细胞特征性的分子标记物CD4、CD56、CD123及CD303均为阳性,均表达Bcl-2.3例患者在初始诱导化疗(1例)或复发、进展(2例)后的化疗中联用Venetoclax.2例行allo-HSCT前获得完全缓解,1例部分缓解.预处理均采用不含全身放射治疗的清髓性预处理方案.移植物抗宿主病的预防方案为抗胸腺细胞球蛋白+酶酚酸酯+环孢素/他克莫司±甲氨蝶吟.回输单个核细胞数为(16.73-18.35)× 108/kg,CD34+细胞数(3.57-4.65)x106/kg.Allo-HSCT后(+21至+28 d)3例患者均获得完全缓解,供受者嵌合率100％,无Ⅲ-Ⅳ度移植物抗宿主病.1例于移植后+50 d死亡,2例随访时间分别为28和15个月,仍无病生存.结论:母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤为高度侵袭性恶性肿瘤,总体预后差.化疗联合Venetoclax桥接allo-HSCT可能使患者获得长期无病生存甚至治愈.移植后的维持治疗目前仍不清楚.

目的 以聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体,将人铁蛋白重链(FTH1)转染到自然杀伤细胞92(NK92细胞)中,并进行体外细胞MRI检查.方法 将第5代聚酰胺-胺树状大分子用聚乙二醇(PEG)修饰之后包裹纳米金颗粒作为非病毒载体,压缩FTH1报告基因然后转染到NK92细胞内.应用磁共振氢谱、紫外分光光度计和透射电子显微镜等对合成的载体材料进行表征;采用琼脂糖凝胶电泳实验确定载体材料与相应基因之间最佳压缩的氮磷比;应用细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)检测载体材料的毒性;通过测定水动力粒径来确定不同氮磷比的条件下载体材料和基因形成的复合物能否顺利通过细胞膜;应用荧光显微镜和流式细胞仪测定转染效率;应用3.0T的MRI对转染FTH1的NK92细胞进行体外成像.结果 合成的聚乙二醇化的包裹纳米金颗粒的树状大分子{ (Au0) 25-G5.NH2-mPEG17} DENPs具有较好的生物相容性,材料细胞毒性较小,在浓度达到3 000 nmol/L时细胞存活率仍然能达到60％以上.荧光显微镜和流式细胞仪测定显示,在氮磷比为1∶1、2∶1、5∶1、10∶1时,转染效率分别为57.8％、64.0％、80.2％、38.3％.在200和500 μmol/L枸橼酸铁铵的条件下,MRI检查发现T2加权像(T2WI)的信号均降低,后者更为明显.结论 聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒能够成功地转染目的基因,MRI检查能有效地在体外检测FTH1转染之后的NK92细胞,为MRI活体示踪自然杀伤细胞过继免疫肿瘤治疗奠定了基础.

目的 比较野生当归Angelica sinensis与栽培当归的遗传多样性.方法 应用ISSR分子标记对48个栽培当归居群和7个野生当归居群1 038个样本进行扩增,利用Popgen 1.32软件对其Shannon's多样性信息指数(I)等遗传信息参数进行分析,并利用SPSS 19.0中的独立样本t检验进行差异显著性检验;运用GenAlEx 6.5软件对野生和栽培当归2个组群遗传变异进行AMOVA分析;应用NTSYS软件构建当归野生和栽培各居群的Nei's遗传距离UPGMA聚类树状图,并使用GenAlEx6.5软件中的Mental test分析遗传距离与地理距离的相关性.结果 野生当归居群和栽培当归居群的多态位点百分率(PPB)为83.77％和96.10％,I平均值为0.221 7和0.282 8,Nei's基因多样性指数(H)平均值为0.344 4和0.434 3,且存在极显著差异(P＜0.001);野生和栽培当归居群的种群间遗传分化指数(Gst)、基因流(Nm)值分别为0.299 1、1.171 8和0.733 4、0.181 7,组间变异百分比为15.85％,居群间变异百分比为54.3％,居群内变异百分比为29.85％;遗传距离变化范围0.014 4～0.730 7.结论 当归野生居群的遗传多样性低于栽培居群,野生居群间的遗传分化程度明显低于栽培居群,当归总的遗传变异来自于居群间,野生居群与栽培居群亲缘关系较远,且遗传距离与地理距离存在相关性.