目的:探讨新型硬组织切片技术在临床骨与骨髓病理诊断中的潜在应用价值。方法:收集2021年3至12月上海市第六人民医院19例骨病病例（骨软骨瘤1例、软骨肉瘤2例、骨肉瘤4例、纤维结构不良2例、甲状腺乳头状癌骨转移2例、骨髓炎病例2例、骨巨细胞瘤4例、尤文肉瘤2例），其中男14例，女5例，年龄 M（范围）为31（10~66）岁；16例血液病病例，其中男7例，女9例，年龄 M（范围）为28（16~65）岁。对35例临床病例标本分别采用新型硬组织切片技术与石蜡包埋切片技术制片，通过苏木精-伊红（HE）染色、免疫组织化学染色、荧光原位杂交及Sanger测序等方法比较两种制片方法对于临床骨与骨髓疾病病理诊断的优缺点。 结果:新型硬组织切片在HE染色中展现出更好的组织细胞形态；在免疫组织化学染色检测Ki67、SATB2、CD34、SMA、CD68、MPO、CD4、CD33等指标时，新型硬组织切片技术相对于石蜡切片技术表达更好，定位更准确；针对MDM2荧光原位杂交结果显示，新型硬组织切片技术荧光强度更高；Sanger测序结果显示，两种切片技术的DNA纯度均满足条件，且均检测到突变。结论:新型硬组织切片技术简单易行、耗时短，适用于优化临床骨与骨髓病理诊断流程。

目的 对黄芪六一汤中黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖及甘草酸、甘草总黄酮、甘草多糖分别进行提取、分离,并筛选具有防治糖尿病肾病作用的药效组分.方法 单因素法筛选树脂型号、上样浓度和体积、洗脱溶剂及用量建立大孔吸附树脂法对黄芪总皂苷、总黄酮进行富集分离;运用碱液萃取法对甘草酸、甘草总黄酮进行分离,采用水提醇沉法对黄芪多糖、甘草多糖进行纯化.12周龄雄性db/m小鼠8只作为对照组,将12周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组、黄芪六一汤和各组分的高、低剂量(临床等效剂量的4、1倍)组,小鼠一般情况及血生化指标以盐酸罗格列酮片(RSG)为阳性对照;尿白蛋白(U-Alb)水平以缬沙坦分散片(API)为阳性对照,每组8只.各组小鼠分别在ig给药12周前、后,称质量.禁食12 h,自由饮水,收集24 h尿液,马斯亮蓝法检测24 h U-Alb浓度;尾静脉采血测空腹血糖(FBG);摘取眼球取血,采用全自动生化分析仪检测血清血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)含量.对照组、模型组及黄芪六一汤高、低剂量组小鼠肾组织经固定、石蜡包埋切片,Masson染色后,光学显微镜下观察.结果 制得的黄芪总黄酮、黄芪总皂苷、黄芪多糖、甘草酸、甘草总黄酮、甘草多糖质量分数分别为(70.58±2.16)％、(72.97±1.06)％、(67.12±2.60)％、(81.02± 1.04)％、(53.56±1.63)％、(64.62±1.27)％.与模型组比较,给予黄芪六一汤治疗后的各组小鼠肾纤维化程度较轻;与给药前比较,模型组小鼠体质量显著减轻(P＜0.05),甘草总黄酮高、低剂量和甘草多糖低剂量组体质量显著降低(P＜0.05、0.01),其他给药组无显著差异;与模型组比较,黄芪六一汤、黄芪总皂苷、黄芪多糖、黄芪总黄酮、甘草酸FBG、24hU-Alb显著降低(P＜0.05、0.01),黄芪总皂苷、黄芪六一汤、黄芪总黄酮、甘草酸组Scr显著降低(P＜0.05、0.01),黄芪六一汤、黄芪多糖、甘草酸、黄芪总黄酮组BUN显著降低(P＜0.05、0.01),黄芪六一汤、黄芪总皂苷、甘草酸、黄芪多糖高剂量组TG显著降低(P＜0.05、0.01),黄芪六一汤、黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖组TC显著降低(P＜0.05、0.01).结论 各组分确定的制备工艺稳定、科学、可行;黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖、甘草酸可能是黄芪六一汤防治糖尿病肾病的药效物质基础.

目的 通过比较 Beautifil Flow Plus F00、FiltekTM Z350 XT、SDR、Tetric? N-Flows、Constic 5 种流体树脂与牙釉质的粘接性能,为流体树脂的临床选择提供参考.方法 选择因正畸拔除的成人离体前磨牙50颗,将离体牙随机分为5组(n=10),分别为F00组、Z350组、SDR组、Tetric组、Constic组,每组之间互为平行对照组.每颗离体牙颊侧中1/3磨除厚度为0.5 mm牙釉质,以直径为3 mm的圆形形态作为粘接面,每种树脂制作直径和长度均为3 mm圆柱形树脂试件10个,与预备好的牙釉质面进行粘接,自凝树脂进行包埋.将试件进行3 000次冷热循环交替实验和37℃恒温水浴24 h实验后,进行剪切强度测试,记录数据;切断的粘接界面在扫描电镜下观察.结果 F00组的剪切强度为(18.39±2.93)MPa、Z350组的剪切强度(11.03 ±1.55)MPa、SDR 组的剪切强度为(12.77±1.55)MPa、Tetric 组的剪切强度为(15.25±1.88)MPa、Constic 组的剪切强度为(12.79 ±2.78)MPa,对所得数据进行ANOVA检验和SNK检验后得出,F00组的剪切强度显著高于其他4组(Z350组、SDR组、Tetric组、Constic 组)(P＜0.05);Tetric 组的剪切强度显著高于其余 3 组(Z350 组、SDR 组、Constic 组)(P＜0.05);Z350 组、SDR 组、Constic组3组之间的剪切强度没有显著性差异(P＞0.05).结论 5种流体树脂中Beautifil Flow Plus F00流体树脂粘接性能最高,Tetric? N-Flow流体树脂次之,FiltekTM Z350 XT、SDR、Constic这3种流体树脂粘接性能较低.

目的 定量研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝小叶内卵圆细胞(HOC)总体积和轮廓数密度的变化.方法 将11只雄性健康SD大鼠随机分为对照组(n=5)、肝纤维化组(n=6),每周2次皮下注射CCl4与橄榄油混悬液,每次3 mL/kg.在肝纤维化造模5周后取材,从每只大鼠肝脏随机抽选5个大小约1 mm3的肝组织块分别制作1张Epon812环氧树脂包埋超薄切片,运用体视学方法结合透射电子显微镜技术,对大鼠肝小叶内的HOC总体积和轮廓数密度进行定量研究,另从每只大鼠剩余肝脏等距随机抽选4个2 mm厚的肝组织块并分别制作2张石蜡包埋的Masson染色切片,按照肝纤维化Metavir分期标准定性评估每只大鼠的肝纤维化程度.计量资料两组间比较采用成组t检验.结果 体视学定量研究显示,对照组肝小叶内HOC总体积为(15.40±7.63)mm3,肝纤维化组肝小叶内HOC总体积为(146.80±114.00)mm3,与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内HOC总体积显著增加了8.53倍(t=-2.551,P=0.031);对照组肝小叶内HOC轮廓数密度为(56.20±40.40),肝纤维化组肝小叶内HOC轮廓数密度为(566.50±317.00),与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内轮廓数密度显著增加了9.08倍(t=-3.539,P=0.006);定性观察研究结果显示,肝纤维化大鼠肝纤维化分期按照Metavir评分标准达到Ⅱ～Ⅲ期,大鼠窦周隙内肝星状细胞增生部位周围伴随着HOC的大量增生.结论 CCl4诱导肝纤维化大鼠肝小叶内HOC显著增生.

目的 利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜对华支睾吸虫囊蚴脱囊的超微结构进行观察和分析.方法 取华支睾吸虫阳性麦穗鱼,去除头、鱼鳞和内脏,称重后绞碎,按1g∶10ml比例加入人工消化液(成分为0.6g胃蛋白酶,100ml生理盐水,1ml浓盐酸),于37 ℃消化过夜后反复过滤,体视显微镜下分离成熟囊蚴.加入0.025％胰蛋白酶溶液(pH=7.4),37 ℃孵育约3 min,将脱囊后尾蚴、未完全脱出后尾蚴、外形较完整囊蚴及脱下空囊分开收集,使用3％戊二醛与1％四氧化锇固定制样.样品使用50％、70％、80％、90％、100％乙醇逐级浸泡脱水(每级10 min,100％乙醇脱水重复3次),100％六甲基二硅烷浸泡3次(每次10 min),干燥后镀膜喷金,使用扫描电子显微镜观察样品;按50％、70％、90％乙醇、1∶1混合液(90％乙醇:90％丙酮)、90％、100％丙酮逐级脱水(每级10 min,100％丙酮脱水重复3次),依次于丙酮与包埋剂(环氧树脂618)1∶1、1∶3混合液与全包埋剂中浸泡后聚合处理,修块、切片、醋酸铀-柠檬酸铅双重染色,使用透射电子显微镜观察样品.结果 扫描电镜下可见囊蚴外观出现了局部膨胀或凹陷、褶皱及塌陷、囊壁内外层分离;脱囊形成的线状裂口长、边缘平整,未能脱出的后尾蚴被软塌的囊壁包裹,其上皮棘刺穿囊壁;脱囊后尾蚴背、腹面遍布体棘,腹吸盘明显大于口吸盘,口、腹吸盘内壁结构不同;排泄囊内填满大小不一圆球形排泄颗粒.透射电镜下显示,脱囊后尾蚴体壁为合胞体结构,由外向内可见皮层外质膜下为电子致密的颗粒状基质,基质向表面形成突起,基质内含许多分泌颗粒及大小不等囊泡;皮棘根部从基质膜发出,穿过基质从皮层表面穿出;基层厚度差异较大,内含多个高电子密度分泌小体;外环肌和内纵肌发达,深入到细胞层,经胞质管运送的物质在远端形成囊泡;皮层细胞间物质发达,充满杂乱分布的管状、大小不等的囊泡结构及线粒体.结论 囊蚴凭借发达的肌肉组织剧烈运动,在脱囊中起积极作用;皮棘有助于后尾蚴尽快摆脱软化囊壁的包裹;囊内后尾蚴可能借助运动触碰囊壁方式使皮层分泌物可直接作用于内壁,发挥化学性软化内壁作用来协助脱囊.

目的 研究改良型颊牙合高嵌体修复深度楔状缺损的抗折能力.方法 将 30 颗离体下颌前磨牙,随机分为 3 组,制备深度楔状缺损模型(缺损未达轴角):A组纤维桩+树脂充填,B组采用纤维桩+全瓷冠,C组采用纤维桩+改良型颊牙合高嵌体.进行冷热循环处理 5000 次(5℃/55℃),包埋后用万能材料试验机在颊尖顶加载,方向与牙体长轴呈150°,记录折裂力值,并比较折裂模式.结果 折裂力值:A组(707.39±35.75)N,B组(1023.24±46,21)N,C组(902.53±61.23)N,A组小于B、C两组(P<0.05),B与C组差异无统计学意义(P>0.05).折裂模式A组多为Ⅲ类,B组多为Ⅵ类,C组多为Ⅱ类(P<0.05).结论 改良型颊牙合高嵌体与全瓷冠抗折强度均能达到临床需求,但更加微创,且多为可修复型折裂,可在临床试行开展.

目的 探讨磨除表层牙釉质对冠内漂白后牙釉质与树脂水门汀粘接强度的影响.方法 选择离体小牛前牙制备 48 个牙体组织块(长 4 mm、宽 4 mm、厚 4 mm),树脂包埋,根据是否进行冠内漂白随机分为 2 组:漂白组(B)、无漂白组(NB).B组使用 40%过氧化氢漂白剂对牙本质面进行处理,NB组不做漂白处理.于牙釉质面磨除 0.5 mm以模拟贴面牙体预备,将树脂柱(直径 1 mm、高 1 mm)粘接于釉质面.依据是否对试件进行冷热循环,将B及NB组分为 2 个亚组(n=12):冷热循环组(T)、无冷热循环组(NT).T组进行 5000 个周期冷热循环,NT组不进行冷热循环.使用万能材料试验机进行微剪切粘接强度(micro-shear bond strength,μSBS)测试,体视显微镜下观察断裂模式及断裂界面,采用SPSS软件对实验数据进行双因素方差分析.结果 4 个处理组的μSBS值分别为BT组(21.10±5.18)MPa、BNT组(21.85±7.08)MPa、NBT组(22.10±6.38)MPa、NBNT组(25.21±5.83)MPa,4 组间的差异无统计学意义(P>0.05).混合断裂是最常见的断裂模式,其次是界面断裂和内聚断裂.结论 使用 40%过氧化氢进行冠内漂白后,通过磨除表层0.5 mm的牙釉质,可获得良好的牙釉质粘接性能.

[目的]透射电子显微镜技术在生物学研究中发挥着越来越深入广泛的作用,通过透射电镜技术获得生物组织连续切片,从而对其神经网络等延伸结构进行连续追踪及三维重构是非常迫切的科研诉求.但捞片方法的限制使得连续切片的获得困难重重,尤其是对于组织致密的昆虫外骨骼如昆虫触角而言,常因包埋剂浸透不够充分而导致聚合欠佳,增加了连续切片收集的难度.为解决捞取昆虫触角连续切片过程中的系列问题,获得完整、平整的触角连续切片,我们自行研制了一种适用于狭缝载网捞片的组合器具.[方法]用组合器具中的捞样器和放样台分别捞取及放置超薄切片.[结果]捞取的昆虫触角切片不会局部脱离树脂切片而产生不同程度的折叠,不会整片脱离树脂切片而滑落至树脂切片一侧,样品切片完整无破损、无皱褶,连续切片成条贴附在狭缝覆膜区.[结论]新型捞片器具为获得昆虫触角连续切片提供了有力支持.

目的 通过光弹模型分析3种单冠对种植体周围骨应力分布的影响,以期为种植修复单冠的材料选择提供参考.方法 使用医用纯钛仿照种植体(Nobel Replace,直径为4.3 mm,长度为11.5 mm)及美观基台(标准型,穿龈高度1 mm)铸造种植体-基台一体化试件,包埋于光弹模型中.使用椅旁计算机辅助设计与辅助制作系统完成树脂陶瓷冠和氧化锆全冠的单冠制作,对切削成形的冠部形态制取硅橡胶阴模,辅助金属烤瓷冠的饰瓷堆塑.制作树脂陶瓷冠组、氧化锆全冠组和金属烤瓷冠组光弹模型试件,每组5个.对3组光弹模型分别进行垂直及斜向75°加载(300 N),通过数字光弹法分析3组种植体周围骨内不同观测面(0.5、1.5、2.5、3.5 mm)上颈部、颈1/3、中1/3、根1/3及根尖共5个观测点的应力,评价3种单冠受力后的应力缓冲作用.结果 相同加载模式下,树脂陶瓷冠组种植体周围骨应力到达峰值的时间[垂直和斜向加载分别为(1.58±0.08)和(2.75±0.21)s]均显著大于氧化锆全冠组[垂直和斜向加载分别为(1.40±0.12)和(2.30±0.25)s](P<0.05);3组种植体周围相同观测点的等效应力值间差异均无统计学意义(P>0.05),但相比氧化锆全冠组,树脂陶瓷冠组各观测点的等效应力值均呈减小趋势.斜向加载时金属烤瓷冠组种植体颈部应力集中程度最明显.结论 与氧化锆相比,复合树脂陶瓷对种植体周围骨内应力的缓冲作用更具优势.

目的:笔者最近定量研究了1 d、1月和3~12月龄大鼠脾脏主要结构的总体积,本文拟补充研究2月、2年和3年龄的同群动物.方法:采用从同一群正常雄性Sprague-Dawley大白鼠所取的脾脏——以前已取的2月龄大鼠(9只)脾脏以及后来所取的2年和3年龄大鼠(各9只和8只)脾脏,切取甲基丙烯酸树脂包埋切片,应用体视学方法估计脾内主要组织结构的总体积.结果:2月龄大鼠脾脏已形成各种主要结构,从2月龄至2年龄,脾脏体积的平均增加46%;从2年龄至3年龄,脾脏体积的平均减少9%.红髓或白髓在脾内所占体积比例(分别为70% ~76%、17% ~21%),3个年龄组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:大鼠脾脏的发育,在2月龄时就已成熟,但至2~3年龄时仍未见明显萎缩的迹象.