目的:探讨红景天苷(salidroside，SAL)是否通过介导Toll样受体4/核转录因子-κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)信号通路改善重症肺炎(severe pneumonia，SP)大鼠肺组织损伤。方法:Wistar大鼠75只，随机选择15只作为假手术组，其余60只通过气管内滴注肺炎克雷伯菌( Klebsiella pneumoniae， Kp)悬液诱导构建SP大鼠模型。建模成功大鼠随机分为模型组、SAL低剂量组(30 mg/kg)、SAL高剂量组(60 mg/kg)和地塞米松(dexamethasone, DXMS)组(15 mg/kg)，每组15只，假手术组和模型组均灌服等量生理盐水，连续7 d。检测肺组织湿干重比(Wet/Dry，W/D)；HE和TUNEL染色观察各组大鼠肺脏组织形态及细胞凋亡情况；ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18及IL-10水平；Western blot检测肺组织中TLR4、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88，MyD88)、NF-κBp65、磷酸化NF-κBp65(phosphorylated NF-κBp65，p-NF-κBp65)、NLRP3蛋白相对表达水平。 结果:经气管滴注 Kp悬液成功构建SP大鼠模型；与假手术组比较，模型组大鼠肺组织水肿严重，W/D值升高( P<0.05)，肺泡结构松散不完整，肺泡壁水肿增厚，大量炎性细胞浸润，细胞凋亡率升高，BALF中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-18水平升高，IL-10水平降低，肺组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65、p-NF-κBp65及NLRP3蛋白相对表达水平升高( P<0.05)；与模型组比较，SAL低、高剂量组及DXMS组大鼠肺组织病理损伤情况均逐渐改善，W/D值降低( P<0.05)，肺泡结构逐渐完整，肺泡壁水肿程度逐渐减轻，细胞凋亡率降低，BALF中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-18水平降低，IL-10水平升高，肺组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65、p-NF-κBp65及NLRP3蛋白相对表达水平降低( P<0.05)；低、高剂量SAL及DXMS改善SP大鼠肺组织损伤的作用效果表现为逐渐增强( P<0.05)。 结论:SAL可减少细胞凋亡，改善由 Kp诱导的大鼠肺组织病理损伤，其作用机制可能与阻断TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活，抑制炎性因子表达有关。

目的:探索氢气(H 2)在缺血再灌注(I/R)诱导的急性肺损伤(ALI)中的抗炎作用及其机制。 方法:通过失血1 h，复苏2 h制作大鼠压力控制型失血性休克复苏模型来制作I/R诱导的ALI模型。实验分为3组，假手术组(S组)、模型组(C组)、氢气组(H组)。S、C组大鼠全程吸入60%N 2-40%O 2混合气，H组复苏全程吸入2%H 2-58%N 2-40%O 2混合气，余同C组。通过血气分析、肺干/湿比(W/D)、苏木精-伊红(HE)染色等评价H 2对ALI病理改变及肺功能的影响；采用髓过氧化物酶(MPO)活性，白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肺组织核转录因子(NF)-κBp65的表达评价H 2对ALI炎性反应的影响。组间比较采用单因素方差分析的SNK检验或者非参数秩和检验(Kruskal Wallis秩和检验)。 结果:H 2可提高I/R大鼠PaO 2/FiO 2[C组(325±22) mmHg比H组(370±36) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)， F＝25.285， P<0.05]，减轻肺水肿[肺W/D：C组(4.94±0.14)比H组(4.75±0.12)， F＝8.142， P<0.05]，改善肺损伤(HE染色)，降低肺损伤评分[C组(7.50±1.07)比H组(4.50±1.07)， F＝62.515， P<0.05]，降低TNF-α[C组(66.58±5.17) pg/ml比H组(55.58±10.06) pg/ml， F＝69.229， P<0.05]、IL-6的含量[C组(28.09±2.06) pg/ml比H组(23.50±2.77) pg/ml， F＝24.542， P<0.05]，抑制MPO活性[C组(1.55±0.14) U/g湿片比H组(1.15±0.18) U/g湿片， F＝154.621， P<0.05]，及NF-κBp65的表达[NF-κB p65评分：C组(5.16±1.07)比H组(2.30±0.36)， F＝93.938， P<0.05]。 结论:吸入2%H 2可改善肺功能、降低肺损伤程度，其机制可能是H 2通过抑制NF-κB信号通路抑制I/R诱导的ALI的炎性反应。

目的:观察电针结合有氧训练对高脂血症大鼠肝脏胆固醇逆转运相关基因小凹蛋白1(Caveolin-1)、清道夫受体B组I型(SR-BI)、ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达水平和主动脉弓核转录因子κBp65(NF-κBp65)、环氧化酶2(COX-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:选取无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠30只，按随机数字表法将其分为空白组，模型组和电针结合有氧训练组，每组10只大鼠。模型组和电针结合有氧训练组喂高脂饲料建立高脂模型。模型组和空白组不接受任何干预，电针结合有氧训练组大鼠先取双侧丰隆穴及阴陵泉穴进行电针治疗，每日1次，每次30 min，然后进行无负重游泳训练，每日1次，每次60 min，连续干预4周。于模型组和电针结合有氧训练组造模成功后即刻和电针结合有氧训练组干预结束后当天对3组大鼠进行尾静脉采血，测定其血脂水平。于电针结合有氧训练组干预结束后第二天取3组大鼠肝脏和主动脉弓，采用苏木精伊红(HE)染色法观察其肝脏和主动脉弓脂质沉积和炎症浸润程度，采用实时聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western Blot)法分别观察肝脏Caveolin-1、SR-BI、ABCA1和NF-κBp65、COX-2、TNF-α的mRNA和蛋白的表达水平。结果:造模成功后，与空白组比较，模型组大鼠的总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均显著上升，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则显著下降( P<0.01)，其肝脏Caveolin-1、SR-BI、ABCA1的蛋白和mRNA表达亦显著下降( P<0.01)，主动脉弓NF-κBp65、TNF-α、COX-2、COX-2的蛋白和mRNA的表达则显著上升( P<0.01)。与模型组比较，电针结合有氧训练组干预后，其TC、LDL-C水平显著降低( P<0.01)，HDL-C显著升高( P<0.05)，肝脏Caveolin-1、SR-BI、ABCA1的蛋白及mRNA均显著上调( P<0.05)，主动脉弓NF-κBp65、TNF-α、COX-2的蛋白和mRNA表达均显著下降( P<0.05)。 结论:电针结合有氧训练可促进高脂血症大鼠胆固醇逆向转运，抑制内皮细胞炎症反应，从而改善高脂血症，其机制可能与电针结合有氧训练可促进肝脏Caveolin-1的表达，上调胆固醇逆向转运基因SR-BI、ABCA1表达，下调炎症因子NF-κBp65、COX-2及TNF-2的表达有关。

目的:探讨复方黄柏液联合湿性愈合敷料对老年深Ⅱ度烧伤难愈性创面的治疗效果.方法:选取2018年3月-2023年3月于承德医学院附属医院烧伤整形科治疗的120例老年深Ⅱ度烧伤难愈性创面患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组、高剂量治疗组、低剂量联合组和高剂量联合组4组,每组30例.对照组予1%TBSA创面外用碘伏溶液35 ml及干燥无菌敷料包扎,高剂量治疗组予1%TBSA创面外用复方黄柏液涂剂35 ml及干燥无菌敷料包扎,低剂量联合组予1%TBSA创面外用复方黄柏液涂剂17.5 ml及用湿性愈合敷料包扎,高剂量联合组予1%TBSA创面外用复方黄柏液涂剂35 ml及用湿性愈合敷料包扎,四组均每天换药1次,持续治疗21 d.观测四组患者治疗14d后创面病理学变化,评价治疗21d后临床疗效,于7、14、21d后计算治疗创面愈合率,测定创面组织中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子-7(FGF-7)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、半胱胺酸天冬氨酸水解酶-3(Caspase-3)水平、核转录因子-κBp65(NF-κBp65)表达情况及创面组织细胞凋亡率.结果:治疗后,四组创面愈合率、创面VEGF、FGF-7、TNF-α、NF-κBp65水平、创面细胞凋亡率及Caspase-3水平比较,高剂量联合组最优,之后依次是高剂量治疗组、低剂量联合组、对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:复方黄柏液涂剂外用对老年深Ⅱ度烧伤创面临床治疗与使用剂量呈正相关,与湿性愈合敷料联合后临床疗效更佳,可促进生长因子合成释放,改善炎症反应及抑制细胞凋亡促进创面愈合,值得临床推广.

目的:探讨不同浓度β-淀粉样蛋白 25-35(Aβ25-35)对小胶质细胞髓样细胞触发受体 2(TREM2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响.方法:将 BV2细胞随机分为 5组,分别加入 0、5、10、20、40μmol/L的Aβ25-35,作用 24、48 h,镜下观察细胞形态,CCK-8法测定细胞活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,实时荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定NF-κBp65、TREM2 mRNA表达.结果:显微镜下观察干预 48h后Aβ25-35≥10 μmol/L细胞成片死亡,干预 24h后,CCK-8检测显示,不同浓度Aβ25-35干预 BV2细胞的存活率均>70%,ELISA 和 RT-PCR 检测显示,Aβ25-35 20 μmol/L 和 40 μmol/L 组促炎因子 TNF-α和TREM2 mRNA的表达均明显升高,Aβ25-35 20μmol/L的NF-κB p65 mRNA表达明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:Aβ25-35浓度 20 μmol/L作用 24 h,能够激活小胶质细胞发生炎症反应,可能与 TREM2/NF-κB信号通路的激活有关.

目的:探究血根碱(SAN)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨分化的影响及机制.方法:将hPDLSCs分为6组:Contro l组、TNF-α组、0.1SAN组、1SAN组、10SAN组和100SAN组,所有hPDLSCs均用成骨诱导培养液培养.除Control组外,其他组细胞培养液中均添加10 ng/mL的TNF-α.0.1 SAN组、1SAN组、10SAN组和100SAN组细胞培养液中分别添加0、0.1、1、10和100μmol/L的血根碱.各组hPDLSCs均在37℃、5％CO2条件下培养21 d.通过可见光比色法检测碱性磷酸酶(ALP)活性.通过茜素红染色观察钙化结节形成,并统计OD562nm(代表钙化结节形成量).通过qRT-PCR检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、osterix(OSX)、牙骨质附着蛋白(CAP)、Smad4转录水平.通过 Western blot检测核因子-κB(NF-κB)p65磷酸化水平.结果:与Contro l组比较,TNF-α组细胞的相对ALP活性降低和钙化结节形成量以及RUNX2、OCN、OSX、CAP 和 Smad4 的 mRNA 相对表达量降低(P＜0.05),p-NF-κBp65/NF-κBp65 升高(P＜0.05).与 TNF-α 组比较,1SAN组、10SAN组和100SAN组的相对ALP活性和钙化结节形成量以及RUNX2、OCN、OSX、CAP和Smad4的mRNA相对表达量升高(P＜0.05),p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P＜0.05).结论:血根碱可促进TNF-α处理的hPDLSCs的成骨分化,其机制可能与抑制NF-κB的激活有关,血根碱可能是促进炎性微环境中hPDLSCs成骨分化的候选药物.

目的 基于核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的变化探讨低分子量肝素(LMH)对糖尿病肾病足细胞增殖、凋亡和炎症的影响.方法 体外培养人肾小球足细胞(HGPC),将HGPC分为对照(Con)组(以含5 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养)、高D-葡萄糖(Glu-H)组(以含30 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养)、LMH组(以含30 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养,并分别给予1、5、10、15、20 μmol/L的LMH进行干预)、BAY11-7082组(以含30 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养,并给予1 μmol/L的BAY11-7082干预)、LMH+BAY11-7082组(以含30 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养,并给予最适剂量LMH联合1 μmol/L的BAY11-7082干预)、LMH+Prostratin组(以含30 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养,并给予最适剂量LMH联合20 μmol/L的Prostratin干预).先用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)将不同浓度LMH对高糖诱导的HGPC细胞活力进行检测,以筛选出最适的LMH;采用Hoechst 33258染色法检测HGPC的凋亡情况;采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EDU)法检测HGPC的增殖情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HGPC裂解液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β水平;采用蛋白免疫印迹法检测HGPC中NF-κBp65、磷酸化(p)-NF-KBp65、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达量.结果 经1、5、10、15、20μmol/L LMH处理的HGPC细胞活力逐渐升高,选用20 μmol/L作为LMH最适剂量.与Con组比较,Glu-H组细胞凋亡率升高(P＜0.05),TNF-α、IL-1β水平及Caspase-3、p-NF-KBp6 5蛋白相对表达量升高(P＜0.05),细胞增殖率及Cyclin D1蛋白相对表达量则下降(P＜0.05);与Glu-H组比较,LMH组和BAY11-7082组细胞凋亡率降低(P＜0.05),TNF-α、IL-1β水平及Caspase-3、p-NF-κBp65蛋白相对表达量下降(P＜0.05),细胞增殖率及Cyclin D1蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05);与LMH组比较,LMH+BAY11-7082组细胞凋亡率降低(P＜0.05),TNF-α、IL-1β水平及Caspase-3、p-NF-κBp6 5蛋白相对表达量下降(P＜0.05),细胞增殖率及Cyclin D1蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05);与LMH组比较,LMH+Prostratin组细胞凋亡率升高(P＜0.05),TNF-α、IL-1β水平及Caspase-3、p-NF-κBp6 5蛋白相对表达量升高(P＜0.05),细胞增殖率及Cy-clinD1蛋白相对表达量明显降低(P＜0.05).结论 LMH可抑制高糖诱导的糖尿病肾病足细胞凋亡和炎症反应,并促进细胞增殖,这种作用可能是通过抑制NF-κB信号通路的活化来完成的.

目的 研究小豆蔻明(CAR)通过调节Notch/核转录因子κB(NF-κB)信号通路介导的细胞焦亡对蒽环类药物所致大鼠心脏毒性的保护作用.方法 腹腔注射阿霉素(DOX)建立大鼠心脏毒性模型,将模型大鼠随机分为DOX组、CAR低剂量组、CAR高剂量组、Jagged1组.另取10只大鼠作为对照组.对照组和DOX组给予等量0.9％NaCl,CAR低、高剂量组分别给予大鼠40、80 mg·kg-1 CAR 灌胃,Jagged1 组灌胃 80 mg·kg-1 CAR+和 25 ng·kg-1 Jagged1,每天1次,连续4周.用试剂盒检测心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ);用免疫组化法观察焦亡蛋白Nod样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDM-D)表达;用蛋白质印迹法检测检测心肌组织Notch1、磷酸化NF-κBp65(p-NF-κB p65)蛋白表达.结果 对照组、DOX组、CAR低剂量组、CAR高剂量组和Jagged1组的CK-MB水平分别为(48.51±5.39)、(175.93±13.27)、(106.83±9.73)、(83.71±8.39)和(126.08±9.74)U·L-1,cTn Ⅰ 水平分别为(1.95±0.18)、(12.46±1.83)、(7.15±0.64)、(4.13±0.38)和(8.01±0.78)ng·mL-1,NLRP3 蛋白的平均光密度值分别为0.19±0.07、0.36±0.05、0.25±0.05、0.21±0.03 和0.31±0.06,GSDM-D 的平均光密度值分别为 0.18±0.04、0.43±0.06、0.24±0.03、0.19±0.04和0.32±0.05.DOX组上述指标与对照组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05);CAR低、高剂量组上述指标与DOX组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05),且CAR低、高剂量组上述指标比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05);Jagged1组上述指标与CAR高剂量比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 CAR能改善DOX心脏毒性大鼠心肌损伤,降低氧化应激、炎症反应和细胞焦亡,其作用机制可能与抑制Notch/NF-κB通路有关.

目的 探讨血清视黄醇结合蛋白 4(RBP4)、人核转录因子 p65(NF-κBp65)及内脂素水平在妊娠期糖尿病(GDM)患者中的表达,分析其与妊娠结局的关系.方法 回顾性分析 2020 年 10 月—2021 年 12 月义乌市中心医院收治的 96 例GDM孕妇的临床资料.将 96 例GDM孕妇纳入GDM组,另选取同期 92 例正常孕妇作为对照组.比较两组孕妇血清RBP4、NF-κBp65 及内脂素水平.分析GDM组孕妇不同妊娠结局的发生情况,并对比不同妊娠结局孕妇血清RBP4、NF-κBp65 及内脂素水平.对可能影响GDM发生的因素进行单因素与多因素logistic回归分析.结果 GDM组血清RBP4、NF-κBp65 及内脂素水平均明显高于对照组(均P<0.05).GDM组不良妊娠结局发生率为 19.79%,高于对照组的 5.43%(P<0.05).GDM组中,发生不良妊娠结局者 19 例(不良组),妊娠结局良好者 77 例(良好组).不良组血清RBP4、NF-κBp65 及内脂素水平明显高于良好组(均P<0.05).单因素分析显示:孕妇孕前体质量指数、妊娠期高血压疾病分度、血清RBP4、NF-κBp65 及内脂素水平为GDM孕妇发生不良妊娠结局的影响因素(均P<0.05).logistic回归分析结果显示:孕前体质量指数(≥25 kg/m2)、妊娠期高血压疾病分度(中重度)、血清RBP4(>42 mg/L)、NF-κBp65(>362 mg/L)及内脂素(>6.25 pg/ml)是GDM孕妇发生不良妊娠结局的危险因素(均P<0.05).结论 血清RBP4、NF-κBp65 及内脂素水平在GDM孕妇及不良妊娠结局孕妇中均呈高表达,通过检查上述指标水平可辅助临床监测GDM孕妇病情,评估妊娠结局.

目的:基于网络药理学及分子对接方法分析当归补血汤治疗慢性肾脏病的作用机制,构建慢性肾衰竭大鼠模型进行实验验证.方法:利用数据库筛选当归补血汤活性成分及靶点、慢性肾脏病疾病靶点,取二者交集,构建蛋白互作(PPI)网络模型,对交集靶点进行GO与KEGG通路富集分析,构建药物-疾病靶点-通路网络图,得到当归补血汤治疗慢性肾脏病的关键靶点.对药物核心成分和疾病靶蛋白进行分子对接.构建慢性肾衰竭大鼠模型,运用免疫组化及 Western Blotting方法对核心靶点进行验证.结果:(1)当归补血汤治疗慢性肾脏病的潜在靶点涉及氧化应激、细胞粘附、凋亡等生物学过程,涉及蛋白激酶复合物、细胞外基质等细胞组成,涉及蛋白激酶活性、DNA结合转录因子结合、细胞因子受体结合等分子功能,涉及NF-κB信号通路、FoxO信号通路等多种信号途径.(2)筛选关键基因SIRT1、TLR4、MCP-1 与当归补血汤主要活性成分黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、槲皮素进行分子对接,配体化合物均能良好的包埋在受体靶蛋白的活性口袋中.(3)构建慢性肾衰竭大鼠模型,给予当归补血汤结肠透析治疗,与正常组相比,CRF模型组肾组织SIRT1、Claudin-1、ZO-1 表达降低,TLR4、NF-κBp65、MCP-1 表达升高,给予当归补血汤结肠透析干预后,SIRT1、Claudin-1、ZO-1 表达升高,TLR4、NF-κBp65、MCP-1 表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:当归补血汤可通过多靶点、多途径发挥治疗慢性肾脏病的作用,当归补血汤经结肠透析治疗可能通过激活SIRT1 抑制TLR4 受体在肾脏细胞的表达,抑制NF-κBp65 乙酰化,从而抑制下游炎症反应,并通过修复肾脏细胞紧密连接结构改善慢性肾衰竭大鼠肾组织损伤.