目的:探讨miR-320a调控水通道蛋白4(AQP4)对阿尔茨海默病细胞模型的影响。方法:采用神经生长因子(NGF)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)为神经元细胞，观察PC12组和神经元细胞组的细胞形态。采用β淀粉样蛋白(Aβ)处理诱导的神经元细胞，构建AD细胞模型。根据处理因素的不同将培养细胞分为对照组(不做特殊处理)、miR-320a模拟剂组(加入miR-320a模拟剂50 nmol/L)、miR-320a抑制剂组(加入miR-320a抑制剂50 nmol/L)、Aβ处理组(加入Aβ)、Aβ+miR-320a模拟剂组(加入Aβ+miR-320a模拟剂50 nmol/L)和Aβ+miR-320a抑制剂组(加入Aβ+miR-320a抑制剂50 nmol/L)。采用CCK8法检测细胞活力。利用RT-PCR检测目标基因AQP4、miR-320a、Bax、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA的相对表达。采用免疫印迹法检测目标基因AQP4、Bax、Bcl-2蛋白的相对表达。结果:PC12经NGF诱导后，与PC12组比较，神经元细胞组泛素羧基末端水解酶-L1(Uch-L1)基因表达明显下调，神经丝蛋白(NFP)、微管结合蛋白2(MAP2)、AQP4基因表达明显上调，MAP2和AQP4蛋白相对表达明显增高。造模后，与对照组比较，Aβ处理组神经元细胞凋亡增加，细胞活力明显减低，miR-320a、AQP4、Bcl-2的mRNA及AQP4、Bcl-2蛋白表达明显减少，Bax的mRNA及蛋白表达明显增加。与Aβ处理组比较，Aβ+miR-320a模拟剂组，细胞活力明显增加，miR-320a、AQP4、Bcl-2的mRNA及AQP4、Bcl-2蛋白表达明显增加、Bax的mRNA及蛋白表达明显降低。与Aβ+miR-320a模拟剂组比较，Aβ+miR-320a抑制剂组细胞活力明显降低，miR-320a、AQP4、Bcl-2的mRNA及AQP4、Bcl-2蛋白表达明显降低，Bax的mRNA及蛋白表达明显升高。结论:miR-320a可以上调AD细胞模型中AQP4的表达，减少细胞凋亡，增加细胞存活率。

目的:研究泛素羧基末端水解酶-1（UCH-L1）抗原表位自身抗体在干燥综合征（SS）筛查诊断中的临床意义。方法:用ELISA检测2017年1月至2020年1月于郑州大学第五附属医院和北京大学人民医院就诊的98例SS患者［男17例，女81例，年龄（49.1±12.3）岁］和37名体检健康志愿者［对照组，男6名，女31名，年龄（46.3±5.8）岁］血清UCH-L1抗原表位自身抗体的水平。分析与合成UCH-L1三种潜在的抗原表位肽段，最终抗UCH-L1 203-214抗体和抗UCH-L1 58-69抗体进入研究，比较两组抗UCH-L1抗体水平，并使用Pearson相关分析UCH-L1与患者临床资料的相关性。 结果:SS组血清中抗UCH-L1 203-214抗体水平显著高于健康对照组（108.2±54.3比78.9±25.8， P<0.001）。SS组血清中抗UCH-L1 58-69抗体水平显著高于健康对照组（86.8±33.3比60.4±21.5， P<0.001）。SS患者血清中抗UCH-L1 203-214抗体及抗UCH-L1 58-69抗体阳性率分别为27.6%（27/98）和25.5%（25/98），健康对照组分别为2.7%（1/37）和5.4%（2/37）。在血清抗UCH-L1 58-69抗体阳性的SS患者中，血清IgG、γ球蛋白及类风湿因子（RF）水平及抗SS相关抗原B（SSB）抗体阳性率均高于抗UCH-L1 58-69抗体阴性患者，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。SS组，在抗核抗体（ANA）、抗RNA结合蛋白（RNP）抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阴性患者中抗UCH-L1 203-214抗体阳性率分别为32.1%（9/28）、27.2%（25/92）、36.4%（12/33）、28.6%（18/63）；抗UCH-L1 58-69抗体阳性率分别为21.4%（6/28）、30.4%（28/92）、30.3%（10/33）、20.6%（13/63）。血清抗UCH-L1 203-214抗体水平与SS患者血清IgA水平呈正相关（ r=0.21， P=0.024）；抗UCH-L1 58-69抗体水平与SS患者血清γ球蛋白、IgG、RF水平均呈正相关（ r=0.35、0.33、0.32，均 P<0.01）。 结论:UCH-L1抗原表位自身抗体与SS患者某些临床指标具有相关性，对SS的筛查及诊断具有一定意义。

目的:研究缺氧诱导的泛素羧基末端水解酶L5 (UCHL5）在调节宫颈癌Hela细胞辐射敏感性中的作用。方法:以宫颈癌Hela细胞为研究对象，1% O 2条件下培养观察UCHL5表达水平的变化。采用Western blot和实时定量聚合酶链反应（PCR）检测慢病毒载体感染Hela细胞后稳定调变UCHL5的效率，转录本分为空白对照组、过表达对照组、过表达UCHL5组转录本1~4和沉默对照组、沉默UCHL5组转录本1~2。将实验所用的细胞分为过表达对照组、过表达UCHL5组、沉默对照组和沉默UCHL5组。采用流式细胞术检测8 Gy γ射线照射48 h后细胞的凋亡率；采用细胞克隆形成实验检测0、2、4、6 Gy γ射线单次照射培养2周后4组细胞的克隆形成率；采用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）实验检测4组细胞培养1周后的增殖率以及联合0、2、4、6、8、10 Gy γ射线照射后的增殖率。使用基因表达谱数据动态分析癌症基因组图谱数据库宫颈癌组织和正常组织中抗缺氧诱导因子1α（HIF-1α）与UCHL5表达的相关性。采用双荧光素酶报告基因实验观察HIF-1α对UCHL5的激活作用。组间比较采用单样本 t检验，采用Pearson检验进行相关性分析。 结果:缺氧可诱导宫颈癌Hela细胞UCHL5的表达。Western blot和实时定量PCR结果显示，感染后的Hela细胞可显著上调或下调UCHL5的表达，其中，过表达UCHL5组转录本2和沉默UCHL5组转录本2的表达均较高，所以选择此2种转录本进行后续实验。克隆形成实验结果显示，与接受相同剂量照射的过表达对照组相比，上调UCHL5增加了Hela细胞的克隆形成率，在0、2、4、6 Gy剂量照射后克隆形成率的差异均有统计学意义（ t=14.16、19.22、8.76、6.79，均 P<0.05）。流式细胞术结果显示，与沉默对照组相比，沉默UCHL5促进了Hela细胞的凋亡（ t=10.29， P<0.05），增加了γ射线诱导的细胞凋亡率( t=52.01, P<0.05)。MTT实验结果显示，与过表达对照组相比，上调UCHL5可升高宫颈癌Hela细胞的增殖率，增殖率在第3天时差异有统计学意义( t=3.905， P<0.05)；与过表达对照组相比，等剂量照射UCHL5上调组升高了受照细胞的增殖率，在剂量为6、8、10 Gy时，细胞的增殖率差异均有统计学意义（ t=3.40、4.06、3.68，均 P<0.05）。宫颈癌组织中HIF-1α表达水平和UCHL5表达水平呈正相关（ R=0.31， P<0.01），双荧光素酶报告基因结果显示HIF-1α结合并激活UCHL5启动子的活性，其活性增加了2.5倍（ t=30.47， P<0.05）。 结论:缺氧条件下，宫颈癌Hela细胞中UHCL5的诱导表达降低了细胞的辐射敏感性，其潜在的机制可能与HIF-1α转录激活UCHL5的表达有关。

目的:探讨血清泛素羧基末端水解酶1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1，UCH-L1)、脑红蛋白浓度与心肺复苏后昏迷患者神经功能预后的关系及预测价值。方法:选取2018年2月至2020年6月四川省成都市第三人民医院收治的45例心肺复苏成功后昏迷患者为昏迷组，选取同期收治的62例心肺复苏成功后24 h内意识恢复患者为对照组进行前瞻性研究。入院24 h内均检测血清UCH-L1、脑红蛋白浓度，采用格拉斯哥昏迷(glasgow coma Scale，GCS)和格拉斯哥-匹兹堡脑功能表现分级(cerebral performance category，CPC)评分评估昏迷程度和神经功能预后。Spearman秩相关分析UCH-L1、脑红蛋白浓度与GCS评分、CPC评分相关性。Logistic回归分析影响心肺复苏后昏迷患者神经功能预后的因素，受试者工作特征曲线(receiver operator characteristics curve，ROC)分析UCH-L1、脑红蛋白预测心肺复苏术成功后昏迷患者神经功能预后的价值。结果:昏迷组血清UCH-L1[(0.63±0.21) μg/L]、脑红蛋白浓度[(89.34±21.35) mg/L]高于对照组[(0.27±0.08) μg/L，(32.13±9.21) mg/L]，差异有统计学意义( t值分别为12.338、18.846； P均<0.001)。UCH-L1、脑红蛋白在轻型、中型、重型昏迷组依次升高，组间比较，差异有统计学意义( F值分别为86.430、26.958； P均<0.001)。神经功能预后不良组血清UCH-L1[(0.72±0.06) μg/L]、脑红蛋白浓度[(100.35±5.79) mg/L]高于神经功能预后良好组[(0.52±0.08) μg/L、(75.58±6.91) mg/L]，差异有统计学意义( t值分别为9.585、13.086； P均<0.001)。UCH-L1、脑红蛋白与GCS评分呈负相关( rs＝-0.685、-0.669， P均<0.001)，与CPC评分均呈正相关( rs＝0.688、0.670； P均<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示低GCS评分( OR＝0.552，95% CI：0.392~0.776， P<0.001)、高水平UCH-L1( OR＝1.881，95% CI：1.276~2.773， P<0.001)和脑红蛋白( OR＝1.677，95% CI：1.206~2.331， P＝0.001)与心肺复苏后昏迷患者神经功能预后不良独立相关。联合UCH-L1、脑红蛋白预测心肺复苏后昏迷患者神经功能预后不良的AUC为0.954，大于单独UCH-L1、脑红蛋白的0.821、0.790( Z值分别为2.351、2.649， P均<0.05)。 结论:心肺复苏成功后昏迷患者血清UCH-L1、脑红蛋白浓度均增高，高浓度的UCH-L1、脑红蛋白与昏迷程度加重和神经功能不良有关，可作为神经功能预后评估的潜在生物学指标。

目的:评估泛素羧基末端水解酶L1（UCH-L1）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和神经丝轻链蛋白（NF-L）作为新型神经梅毒检测指标的诊断效能。方法:回顾收集2021年12月至2022年11月于厦门大学附属中山医院就诊的未经治疗的、HIV阴性神经梅毒住院患者51例。使用倾向评分匹配法调整年龄后，纳入同时期未经治疗的、HIV阴性非神经梅毒的梅毒（简称非神经梅毒）住院患者51例。所有纳入的研究对象均同时收集血清和脑脊液（CSF）样本，使用酶联免疫吸附试验检测血清和CSF中UCH-L1、GFAP和NF-L的水平。采用Spearman相关系数分析血清和CSF中3个新型神经梅毒检测指标UCH-L1、GFAP、NF-L与传统神经梅毒检测指标CSF快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、CSF梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、CSF白细胞计数和CSF总蛋白浓度之间的相关性，采用Hanley & McNeil法比较血清和CSF中UCH-L1、GFAP和NF-L水平与4个传统实验室检测指标诊断神经梅毒的受试者工作特征曲线下面积（AUC），采用配对卡方检验比较神经梅毒检测指标间敏感性和特异性的差异。结果:51例神经梅毒患者年龄[ M（ Q1， Q3）]为56.0（48.0，67.0）岁，男33例，女18例；51例非神经梅毒患者年龄为54.0（44.0，64.0）岁，男30例，女21例。神经梅毒患者血清RPR滴度和阳性比例、CSF RPR和TPPA滴度及阳性比例、CSF白细胞计数和升高比例、CSF总蛋白浓度和升高比例均显著高于非神经梅毒患者（均 P < 0.001）。Spearman相关分析显示，51例神经梅毒患者血清和CSF中UCH-L1、GFAP和NF-L水平与CSF TPPA滴度、CSF RPR滴度、CSF白细胞计数和CSF总蛋白浓度均不存在相关性（ rs为-0.22 ~ 0.74，均 P > 0.05）。血清UCH-L1水平的AUC值（0.966）显著高于CSF RPR滴度、CSF TPPA滴度、CSF白细胞计数和CSF总蛋白浓度（AUC = 0.745、0.894、0.845、0.765，均 P < 0.05），血清GFAP水平的AUC值（0.862）与上述4个传统实验室检测指标的AUC值差异无统计学意义（均 P > 0.05），血清NF-L水平的AUC值（0.903）显著高于CSF RPR滴度和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.01），但与CSF TPPA滴度和CSF白细胞计数的AUC值差异无统计学意义（均 P > 0.05）。CSF UCH-L1的AUC值（0.958）显著高于CSF RPR滴度、CSF白细胞数和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.01），与CSF TPPA滴度差异无统计学意义（ P = 0.070）；CSF GFAP的AUC值（0.906）显著高于CSF RPR滴度和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.01），但与CSF TPPA滴度和CSF白细胞计数的AUC值差异无统计学意义（均 P > 0.05）；CSF NF-L的AUC值（0.828）与4种传统实验室检测指标的AUC值差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。血清UCH-L1的诊断敏感性显著高于CSF RPR滴度、CSF白细胞计数和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.05），血清UCH-L1的特异性显著高于CSF TPPA滴度（ P = 0.031），血清GFAP和NF-L的诊断敏感性均显著高于CSF RPR滴度和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.05）；CSF UCH-L1的诊断敏感性显著高于CSF RPR滴度、CSF白细胞计数和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.05），其特异性显著高于CSF TPPA滴度（ P = 0.049），CSF GFAP的诊断敏感性显著高于CSF RPR滴度、CSF白细胞计数和CSF总蛋白浓度（均 P < 0.05），CSF NF-L的诊断敏感性显著高于CSF RPR滴度（ P < 0.001）。 结论:血清和CSF UCH-L1、GFAP和NF-L标志物均具有比传统实验室检测指标更好的神经梅毒诊断效能，具有潜在应用价值。

目的 探讨急性腹泻伴良性惊厥患儿血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、硫化氢(H2S)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)水平变化及其对疾病复发的预测效能.方法 选择秦皇岛市第一医院 2018 年 8 月—2021 年 8月收治的急性腹泻伴良性惊厥的 104 例患儿进行前瞻性研究,另选同期于秦皇岛市第一医院行健康体检的 30例健康儿童为对照组,所有儿童均取空腹静脉血检测血清NSE、H2S、UCH-L1 水平,并对比两组儿童及观察组不同病情患儿的血清NSE、H2S、UCH-L1 水平差异;观察组患儿随访 2 年以观察复发情况,对比有无复发患儿血清NSE、H2S、UCH-L1 水平差异,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析急性腹泻伴良性惊厥患儿血清NSE、H2S、UCH-L1 水平对复发的预测效能.结果 观察组血清NSE、UCH-L1 水平明显高于对照组,H2S水平明显低于对照组(P＜0.05);相较于腹泻 3～5 次/d、惊厥发作 1 次、单次惊厥持续时间＜5 min、惊厥局灶性发作的患儿,腹泻≥6 次/d、惊厥发作≥2 次、单次惊厥持续时间≥5 min、惊厥全面性发作患儿的血清NSE,UCH-L1水平均明显更高(P＜0.05),血清H2S水平明显更低(P＜0.05);复发组患儿的血清NSE、UCH-L1 水平明显高于未复发组(P＜0.05),血清H2S水平明显低于未复发组(P＜0.05);ROC曲线分析显示,急性腹泻伴良性惊厥患儿血清NSE、H2S、UCH-L1 水平及联合检测均对复发有预测效能(P＜0.05),其中单项检测时血清NSE对复发的预测效能较高,曲线下面积(AUC)为 0.787,敏感为 77.78%,特异度为 81.05%;联合检测的预测效能最高,AUC为 0.804,敏感性为 88.89%,特异度为 75.79%.结论 急性腹泻伴良性惊厥患儿的血清NSE、UCH-L1 水平明显升高,血清H2S水平降低,且与病情程度存在相关性,可用于预测惊厥复发.

目的:探讨泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1,UCHL1)通过调控缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)介导的代谢重编程促进肺腺癌细胞的增殖和转移.方法:免疫组化和实时定量聚合酶链反应检测肺腺癌组织和细胞中UCHL1和HIF-1的表达;Kaplan-Meier Plotter和UALCAN数据库分析了 UCHL1和HIF-1的表达量与患者生存期的关联,并进一步分析了二者在不同临床病理等级以及淋巴转移患者肿瘤组织中的表达;克隆形成、迁移和侵袭评估肺腺癌HCC4006细胞转染UCHL1 siRNA后恶性生物学行为变化;Western Blot检测沉默UCHL1后肿瘤细胞糖酵解信号通路IL-6/STAT3标志分子的表达.结果:免疫组化、实时定量聚合酶链反应以及相关性分析,结果显示肺腺癌组织和细胞中UCHL1和HIF-1的表达较癌旁组织和正常人支气管上皮细胞中显著增加,且二者表达水平呈正相关(P＜0.01),与Oncomine数据库中UCHL1和HIF-1的表达趋势相一致.生信分析结果显示,UCHL1和HIF-1异常高表达与肺腺癌患者的生存期呈负相关、而与患者的病理等级和淋巴结转移呈正相关(P＜0.01).转染UCHL1 siRNA的肺腺癌HCC4006细胞的克隆形成、迁移和侵袭能力较对照组细胞显著降低,同时细胞的耗氧量显著增加,并抑制细胞中LDH活性和LD分泌(P＜0.01).Western Blot结果显示,沉默UCHL1可抑制HIF-1表达,并降低缺氧介导的肿瘤细胞糖酵解信号通路IL-6/STAT3标志分子的表达(P＜0.01).结论:肺腺癌细胞通过UCHL1-HIF-1轴介导的代谢重编程获得较强的增殖和转移表型,为靶向该基因网络的治疗提供了理论依据.

目的 探讨维生素B6联合鼠神经生长因子治疗难治性癫痫(refractory epilepsy,RE)患儿的疗效.方法 选取RE患儿89例,根据住院号随机分为观察组(n=43)和对照组(n=46).对照组在原抗癫痫药物治疗基础上联合应用左乙拉西坦片,观察组在对照组基础上辅助应用维生素B6联合鼠神经生长因子治疗.比较两组患儿临床疗效,治疗前后外周血miR-99a-5p、miR-125b-5p、泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)水平变化和对脑电活动的影响,评估患儿智力水平和生活质量改善情况.结果 观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察组miR-99a-5p、miR-125b-5p、UCH-L1和θ波水平,均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察组语言智商、操作智商和总智商评分,儿童癫痫生活质量量表(quality of life in childhood epilepsy,QOLCE)总分,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 维生素B6联合鼠神经生长因子治疗难治性癫痫效果较佳,可显著降低患儿外周血miR-99a-5p、miR-125b-5p、UCH-L1水平,控制脑电活动,从而改善患儿智力水平和生活质量.

目的:探讨神经节苷脂联合脑苷肌肽治疗创伤性颅脑损伤(TBI)的临床价值.方法:选取TBI患者102例,根据随机数字表法将患者分为脑苷肌肽组(51例)和联合组(51例).在常规治疗基础上,脑苷肌肽组给予脑苷肌肽治疗,联合组联合应用脑苷肌肽和神经节苷脂治疗.比较两组患者治疗前后神经功能评估指标、神经损伤及营养指标、脑血流动力学指标以及预后指标.结果:治疗后两组患者格拉斯哥昏迷评分(GCS)、简易精神状态检查量表(MMSE)评分高于治疗前,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分低于治疗前(均P＜0.05).联合组治疗后GCS评分、MMSE评分高于脑苷肌肽组,NIHSS评分低于脑苷肌肽组(均P＜0.05).治疗后,两组患者神经特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)水平低于治疗前,且联合组低于脑苷肌肽组(均P＜0.05).治疗后,两组患者脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)和超氧化物歧化酶(SOD)水平高于治疗前,且联合组高于脑苷肌肽组(均P＜0.05).治疗后,两组患者脑血流量(CBF)高于治疗前,阻力指数(RI)、平均血流速度(Vm)低于治疗前,且联合组患者CBF高于脑苷肌肽组,RI、Vm低于脑苷肌肽组(均P＜0.05).治疗后3个月,联合组预后良好占比高于脑苷肌肽组(P＜0.05).结论:神经节苷脂联合脑苷肌肽治疗TBI能够改善神经功能和脑血流动力学,降低神经损伤和应激水平,提高神经营养状态,改善预后.

目的 探讨复方地黄颗粒通过调节泛素-蛋白酶体系统相关蛋白变化治疗帕金森病(PD)阴虚动风证的分子机制.方法 随机选取 26 只SPF级雄性SD大鼠作为正常对照组、假手术组,每组 13 只,其余大鼠采用 6-羟基多巴胺(6-OHDA)脑部偏侧注射损毁黑质法制备PD阴虚动风证大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,美多芭组(150 mg·kg-1),复方地黄颗粒低、中、高剂量组(1.75、3.5、7 g·kg-1),每组 13 只.各组连续灌胃给药 28 d.观察各组大鼠一般情况及神经行为学表现;免疫组化法、Western blot及 qPCR 法检测各组大鼠脑部损毁侧纹状体组织中泛素(UB)、泛素激活酶(UBE1)、泛素结合酶(UBE2A)、泛素羧基末端水解酶(UCH-L1)阳性细胞表达、蛋白及mRNA表达水平;ELISA法检测各组大鼠脑部损毁侧纹状体中多巴胺(DA)含量变化.结果 正常对照组与假手术组一般情况无明显差异,旋转圈数、悬挂时间及移动格数差异无统计学意义,与假手术组比较,模型组大鼠精神差,易激惹,肢体震颤,行动迟缓,毛色黯黄,饮食少,体质量减轻,旋转圈数增加、悬挂时间及移动格数减少(P<0.01),损毁侧纹状体中UB、UBE1、UBE2A、UCH-L1 阳性细胞表达、mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),DA含量明显减少(P<0.01);与模型组比较,美多芭组及复方地黄颗粒各剂量组大鼠一般情况有所改善,旋转圈数减少、悬挂时间及移动格数增加(P<0.05,P<0.01),UB、UBE1、UBE2A、UCH-L1 阳性细胞表达、mRNA及蛋白表达水平提高(P<0.05,P<0.01),DA含量增加(P<0.01);行为学检测及各指标表达水平以美多芭组和复方高剂量组改善最明显(P<0.05,P<0.01),此二者无统计学意义(P>0.05).结论 复方地黄颗粒可能通过调控泛素-蛋白酶体系统相关蛋白的表达,减少异常蛋白聚集,从而减轻DA含量缺失,发挥治疗PD阴虚动风证的作用,并以复方地黄颗粒高剂量效果最佳.