目的 建立利用蒸馏-流动注射联用法检测部分蔬菜及食用菌中氰化物的方法.方法 创新前处理方法,利用水蒸气蒸馏技术处理样品有效除掉干扰杂质,再利用连续流动注射仪检测馏出液中氰化物含量.结果 对20份样品进行氰化物检验,蒸馏-流动注射联用法最低检出限为0.0125 mg/kg,最低定量浓度为0.037 5 mg/kg;回收率为97.0％～103.6％;测定结果相对标准偏差RSD(n=6)为3.74％～4.56％.采用异烟酸-吡唑啉酮分光光度法、异烟酸-巴比妥酸分光光度法与此方法进行比对,蒸馏-流动注射联用法检测速度快、数据准确.结论 蒸馏-流动注射联用法检测结果准确可靠,重复性良好,缩短检验时间,适合对大批量蔬菜及食用菌中氰化物快速准确地检测.

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制.方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和腹部退缩反射评分观察小鼠IBS样症状.(2)采用荧光金(FG)逆行追踪结合荧光免疫组织化学法检测ACC-NAc的GABA能通路和IBS小鼠ACC中GABA神经元兴奋性(均n=8).(3)在正常和IBS小鼠NAc分别注射1.5 μL生理盐水(NS)、GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC)或激动剂异四氢烟酸(Isog),并据此将小鼠分为3组(均n=8):NS组、BIC组和Isog组,观察其IBS样症状.(4)采用化学遗传法将腺相关病毒载体AAV2/9-mDlx-iCre-WPRE-pA定向注射于ACC,AAV2/2Retro Plus-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-eGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为4组(均n=8):NS(腹腔注射)+NS(NAc注射)组、NS+BIC组、氯氮平N-氧化物(CNO)+NS组和CNO+BIC组;或AAV2/2Retro-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-EGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为3组(均n=8):NS+NS组、NS+BIC组和CNO+NS组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织中组胺和5-羟色胺(5-HT)的表达,并观察ACC-NAc的GABA能神经通路对小鼠IBS样症状的影响.结果:CACS诱导小鼠出现IBS样症状;FG逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,ACC的GABA神经元可以投射至NAc.NAc注射BIC后IBS小鼠的焦虑样行为、腹泻样症状和内脏超敏反应显著减轻(P<0.05).化学遗传法抑制投射至NAc的ACC内GABA能神经元可显著减轻IBS小鼠的症状(P<0.05).结论:ACCGABA-NAc神经通路可参与小鼠IBS样症状的调控,其机制可能与肠道组胺和5-HT的释放有关.

目的 通过检测口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢通路的变化,分析过表达miR-181a-5p对皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢物组的影响.方法 实验分为3组,空白对照(Control)组、阴性对照(negative control,NC)组以及实验(over expression of miR-181a-5p,OE)组.将不同组别处理后的细胞混悬液,通过皮下注射到M-NSG重度免疫缺陷雌性小鼠右侧腹股沟中上部,构建成口腔癌皮下移植瘤小鼠模型.按时记录小鼠体重变化,对小鼠小肠组织进行HE染色,观察各组病理变化.采用超高效液相色谱-串联飞行时间质谱联用仪和串联Orbitrap质谱联用仪检测NC组、OE组和Control组小鼠小肠中的代谢物,使用XCMS预分析原始数据,质量评价样本数据,鉴定Control组与NC组、NC组与OE组的差异代谢物,进行KEGG富集分析获取差异代谢通路.结果 Control组和NC组小肠组织中共鉴定出 170种差异代谢物.代谢物富集的显著性信号通路包括胆碱代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、γ-氨基丁酸(GABA)神经突触代谢、甘油磷脂代谢、环磷酸腺苷(cAMP)信号通路代谢、癌症中心碳代谢以及烟酸和烟碱胺代谢通路.NC组和OE组相比,小鼠小肠中检测到VIP(variable importance in the projection)＞2的差异代谢物有16种,显著性差异代谢物包括甘油磷酰胆碱、棕榈酸、3-羟基丁酰肉碱、β-羟丁酸等.代谢物富集到的显著性差异通路为胆碱代谢通路.结论 口腔癌皮下移植瘤可引起小鼠小肠的代谢物发生变化,主要改变了小肠中与能量代谢相关的代谢物.过表达miR-181a-5p影响口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠代谢物,代谢物富集通路为胆碱代谢通路.

目的 探究注射用烟酸对介入治疗老年中度缺血性脑血管狭窄患者血液黏度、脑血流和血管痉挛的影响.方法 选取2020 年1 月—2022 年10 月于开封一五五医院神经内科接受治疗的老年缺血性脑血管狭窄患者 78 例,按随机数字表法分为烟酸组和对照组,每组39 例.对照组于支架植入术后进行口服抗血小板、调节血脂药物,注射神经保护剂等常规治疗,烟酸组在对照组治疗基础上加用静脉滴注注射用烟酸.2 组疗程均为7d.观察并比较2 组患者治疗前后神经功能评分、日常活动Barthel指数(BI)、血液黏度、脑血流灌注、血管痉挛和其他不良反应发生情况.结果 治疗后,烟酸组改良美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分低于对照组(P＜0.05),BI高于对照组(P＜0.05);烟酸组全血高切黏度、全血低切黏度和血浆黏度均低于对照组(P＜0.05);烟酸组脑血容量(CBV)、脑血流量(CBF)值均高于对照组(P＜0.05),烟酸组对比剂平均通过时间(MTT)值低于对照组(P＜0.05);烟酸组脑血管痉挛发生率低于对照组(P＜0.05),而2 组皮肤潮红、皮疹、血管损害等其他不良反应发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 注射用烟酸可降低介入治疗老年中度缺血性脑血管狭窄患者的血液黏度,改善脑血流和脑血管痉挛情况,且具有较好的安全性.

目的 探讨烟酸注射液联合硝酸甘油注射液治疗不稳定型心绞痛的临床疗效.方法 回顾性分析 2019 年 2 月—2023 年 2 月在西安交通大学附属红会医院治疗的 118 例不稳定型心绞痛患者的临床资料.根据用药种类的不同分为对照组和治疗组,每组各 59 例.对照组静脉输入硝酸甘油注射液,20 mL加入 5%葡萄糖注射液 50 mL,初始剂量 5 μg/min,根据病情调整剂量,1 次/d;在此基础上,治疗组肌肉注射烟酸注射液,100 mg/次,5 次/d.两组患者均进行 7 d治疗.观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者心绞痛发作次数及持续时间,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体 1(Lox-1)、I 型胶原吡啶交联终肽(ICTP)、心肌营养素-1(CT-1)、血栓烷素B2(TXB2)、B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)、脂联素(APN)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酸激酶(CK)、α-羟基丁酸脱氢酶(HBDH)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平.结果 治疗后,治疗组临床有效率(98.31%)明显高于对照组(81.36%,P＜0.05).治疗后,两组心绞痛发作次数、每次持续时间均减少(P＜0.05),且治疗组减少最显著(P＜0.05).治疗后,两组患者血清Lox-1、ICTP、CT-1、TXB2、TC、TG、LDL-C、CK、HBDH、CK-MB和LDH水平均明显下降,而Bcl-2、APN、HDL-C水平明显增高(P＜0.05),且治疗组这些指标比对照组改善更明显(P＜0.05).结论 烟酸注射液联合硝酸甘油注射液治疗不稳定型心绞痛可有效缓解临床症状,促进心功能、血脂、血清细胞因子水平改善.

目的 探究以烟酰胺(NAM)和烟酸(NA)为主要有效成分的特医食品精优能对卵巢早衰(POF)的挽救作用.方法 对3周龄ICR雌鼠进行单次白消安腹腔注射建立POF模型,对POF模型鼠连续灌胃28 d不同浓度的精优能,确定恰当的精优能处理用量(200 mg·kg-1·d-1).再按照处理不同将3周龄ICR雌鼠进行分组:空白对照组(CTRL组),给予PBS连续灌胃28 d;空白精优能处理组(C+200组),给予200 mg·kg-1·d-1精优能连续灌胃28 d;模型对照组(B组),白消安单次注射后,予PBS连续灌胃28 d;模型鼠精优能处理组(B+200组),白消安单次注射后,予200 mg·kg-1·d-1精优能连续灌胃28 d.各组处理28 d后,统计各组小鼠体重、卵巢指数、子宫指数;利用免疫组织化学染色法统计卵泡总数及各级卵泡比例;染色法采用卵母细胞体外培养技术统计卵子成熟率;并通过实时定量荧光PCR、蛋白质免疫印迹法检测卵巢内卵泡发育相关基因、蛋白及部分抗氧化酶的表达量.结果 持续200 mg·kg1·d-1的精优能灌胃28 d能够显著改善POF小鼠卵巢部分抗氧化酶(Sod2、Cat、Gpx4)的表达水平(P＜0.05),显著改善POF小鼠的卵巢和子宫指数(P＜0.05),显著增加卵泡数目(P＜0.05),显著改善卵泡发育及卵巢储备相关基因(Gdf9、Bmp15、Amh)的表达水平(P＜0.05),以及显著提高GV期卵母细胞数量和第一极体排出率(P＜0.05).结论 精优能能够提高POF小鼠卵巢的抗氧化能力,维护卵巢储备与卵母细胞成熟,缓解POF的发展.

目的 制名99Tcm-6-肼基烟酸琥珀酰亚胺酯盐酸盐(SHNH)-AC133,通过γ显像研究其靶向CD133阳性结肠癌的能力,探讨其作为肿瘤干细胞(CSCs)靶向分子探针的可行性.方法 采用免疫荧光法及流式细胞术检测人结肠癌Lovo细胞及肿瘤组织CD133的表达.以SHNH为双功能螯合剂,对CD133的特异性单克隆抗体AC133进行99Tcm标记,合成99Tcm-SHNH-AC133,检测其标记率及放化纯.建立荷结肠癌裸鼠模型,进行γ显像,利用感兴趣区技术获得肿瘤与对侧肌肉组织的肿瘤/正常组织放射性(T/NT)比值.注射标记物前,经荷瘤鼠尾静脉注射过量未标记的AC133进行阻断实验.采用两样本t检验分析数据.结果 免疫荧光检测结果显示,CD133表达于Lovo细胞表面.流式细胞检测结果显示,Lovo结肠癌组织中CD133阳性细胞的占比为(29.5±3.4)％.99Tcm-SHNH-AC133标记率＞85％,放化纯为(97.7±2.4)％.γ显像示,99Tcm-SHNH-AC133对Lovo肿瘤有较好的靶向性,12 h后瘤体逐渐显影,24h肿瘤部位放射性浓聚较明显,其T/NT比值为8.16±0.45.阻断实验中,肿瘤部位放射性摄取明显减少(3.52±0.13;t=19.8,P＜0.05).结论 99Tcm-SHNH-AC133具有较高的标记率及放化纯,该标记物对CD133阳性结肠癌具有较强的靶向能力,有望用于CSCs的体内示踪.

目的:建立同时测定复合维生素注射液中11种维生素含量的RP-HPLC方法.方法:采用十八烷基键合硅胶为填料(250 mm×4.6 mm,5μm)的色谱柱,以0.1 mol· L-1的醋酸钠溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,变化流速,联合紫外检测器的程序变化波长,进样量20 μL,柱温35℃.结果:维生素A、维生素D3、维生素E、维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、烟酰胺、叶酸分别在0.272 8～2.728、0.012 4～0.124、1.032 7～10.327、1.131 0～11.310、2.282 8～22.828、0.194 8～1.948、1.016 5～10.165、0.235 8～2.358、1.085 4～10.854、2.168 1～21.681和0.369 4～3.694 μg呈良好的线性关系(r＞0.999);平均加样回收率(n=9)分别为100.0％、104.2％、100.9％、98.9％、100.4％、100.7％、100.1％、99.2％、100.2％、99.8％和100.5％,其RSD(n=9)分别为0.21％、0.02％、1.8％、1.0％、1.2％、0.35％、0.52％、2.8％、0.12％、0.05％和3.6％;精密度的RSD(n=6)分别为0.38％、0.11％、0.07％、0.15％、0.23％、0.06％、0.28％、0.22％、0.05％、0.41％、0.15％;重复性试验的RSD(n=6)分别为0.13％、0.78％、1.2％、2.2％、0.26％、1.5％、1.8％、1.3％、0.69％、0.94％和0.36％;样品平均含量分别为0.839、0.103、0.434、0.331、0.944、0.107、0.467、0.0043、0.134、0.958和0.013 μg· μL-1.结论:本方法适用于复合维生素注射液中维生素A、维生素D3、维生素E、维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、烟酰胺、叶酸的含量测定.

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)移植对缺血再灌注脑损伤的治疗效果及机制.方法 采用线栓法制备缺血再灌注脑损伤SD大鼠模型.96只大鼠随机分为4组:模型组、MSC移植组、PBS对照组和假手术组,每组24只.取体外培养至第6代的骨髓MSC,经烟酸己可碱33342标记后,于造模24 h后经阴茎静脉进行移植,对照组注射等量PBS.分别于实验第2、3、4、8、15、22天对各组大鼠进行神经损伤严重程度(NSS)评分,通过荧光显微镜观察MSC在脑组织内的定植情况,并对脑组织进行2,3,5-氯化三苯四唑(TTC)染色及神经干细胞、神经元、星形胶质细胞的特异性标志物[神经上皮干细胞蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)]的免疫组织化学染色.结果 MSC移植后2d在受损的脑组织局部便可见蓝色荧光分布,并于15 d时达到高峰.免疫组织化学结果显示,与模型组和对照组相比,MSC移植组大鼠受损脑组织局部Nestin、NSE、GFAP阳性细胞的数量均明显增多,差异均有统计学意义(P均＜0.05).MSC移植组自第8天受损部位脑梗死的范围即出现显著缩小,NSS评分也明显下降,且与模型组及对照组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 骨髓MSC移植可有效增加缺血再灌注脑损伤局部神经干细胞、神经元、星形胶质细胞的数量,对神经损伤的修复起一定的促进作用.

目的:研究附子脂溶性生物碱对佐剂性关节炎(AIA)模型大鼠的毒性作用机制.方法:将40只大鼠随机分为空白组(超纯水)、模型组(超纯水)和附子脂溶性生物碱低、高剂量组(12.5、35 mg/kg),每组10只.除空白组外,其余各组大鼠均于右后足垫部位注射0.1 mL完全弗氏佐剂复制AIA模型.造模19 d后开始灌胃给药,每天1次.连续给药14 d后,采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱结合高分辨质谱技术分离并鉴定血浆中内源性代谢物,然后对数据进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA),通过变量投影重要度值(VIP)>1和P值(<0.05)筛选血浆中的差异代谢物;并根据差异代谢物查阅京都基因与基因组百科全书数据库,推测附子脂溶性生物碱对AIA大鼠的毒性作用机制.结果:共鉴定出57个血浆代谢物,并确定了L-脯氨酸、6-羟基烟酸、腺苷等11个差异代谢物.AIA造模后可引起大鼠血浆中L-脯氨酸和尿苷酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),脱氧胞苷含量显著升高(P<0.01).低剂量附子脂溶性生物碱给药后可使模型大鼠血浆中腺苷和L-脯氨酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),血浆中脱氧胆酸含量显著升高(P<0.05);而高剂量附子脂溶性生物碱给药后可使模型大鼠血浆中6-羟基烟酸、腺苷、肉碱、L-脯氨酸、N-甲酰氨基苯甲酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),血浆中脱氧胆酸、L-精氨酸、脱氧胞苷、L-赖氨酸含量显著升高(P<0.05或P<0.01).结论:低剂量附子脂溶性生物碱对AIA模型大鼠的毒性较小;高剂量附子脂溶性生物碱对AIA模型大鼠的毒性作用可能与其引起胆汁分泌异常及赖氨酸生物合成及嘌呤、嘧啶、色氨酸、脯氨酸、精氨酸代谢紊乱有关.