目的:探讨RNA m6A甲基化在低压低氧引起的小脑发育障碍中可能发挥的作用。方法:将出生后5 d的C57/BL6小鼠放置于低压低氧饲养舱中连续处理9 d后，首先通过体重、脑重以及HE染色的方式来初步分析小鼠小脑发育情况；其次，利用免疫组织化学和免疫荧光染色法检测小脑中不同类型细胞特异性标志物的表达以解析其细胞结构的紊乱程度；然后利用即时荧光定量聚合酶链反应、Western blot和免疫组织化学染色方法检测小鼠小脑中RNA m6A主要调控因子的表达变化。结果:相比于对照组小鼠，低压低氧小鼠体重、脑重以及小脑体积显著减小（ P<0.01）；不同类型细胞特异性标志物的免疫染色结果显示，NeuN（成熟神经元）表达下降，Calbindin-D28K（浦肯野细胞）和胶质纤维酸性蛋白（星形胶质细胞）的表达下降（ P<0.01），且细胞分布紊乱；RNA m6A主要调控因子的表达分析结果显示，甲基转移酶METTL3在低压低氧小鼠小脑中的表达显著下调（ P<0.05）。 结论:低压低氧刺激会造成小鼠小脑发育障碍，成熟神经元、浦肯野细胞和星形胶质细胞结构异常；与常压常氧小鼠相比，低压低氧刺激后小鼠小脑METTL3表达下降，提示其介导的RNA m6A甲基化可能在低压低氧引起的小脑发育障碍过程中发挥重要的作用。

目的:观察RNA m6A去甲基化酶ALKBH5基因敲除之后对老年小鼠小脑形态和功能的影响，探究ALKBH5在小脑退行性病变中的作用。方法:免疫印迹实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠（包括2月龄、6月龄、12月龄、18月龄）小脑中ALKBH5的蛋白水平。通过免疫组织化学实验检测中年（12月龄）及老年（18月龄）野生型小鼠和ALKBH5基因敲除（ALKBH5 -/-）小鼠中NeuN、Calbindin-D28K、MAP2、胶质纤维酸性蛋白等蛋白的表达情况。平衡木实验和步态实验检测小鼠平衡能力以及运动协调能力。 结果:ALKBH5蛋白在小脑中的表达水平随着小鼠生理性衰老的进行而逐渐升高。在中年小鼠中，野生型和ALKBH5 -/-小鼠的体重、脑重以及小脑的形态大小没有明显差别，同时颗粒神经元、浦肯野细胞及神经元树突的形态和数量均未见明显改变。在老年小鼠中，相较于野生型小鼠，ALKBH5 -/-小鼠的体重、全脑重和小脑重分别下降15%、10%和21%（ P<0.05）。ALKBH5在浦肯野细胞中的表达高于其他类型的神经细胞，与之对应在老年ALKBH5 -/-小鼠中浦肯野神经元的数量下降40%，树突的长度和密度也明显减少（ P<0.01）。老年ALKBH5 -/-小鼠通过平衡木相较于同龄的野生型小鼠所用的时间增加70%，且出现步态不稳的情况（ P<0.01）。 结论:RNA m6A去甲基化酶ALKBH5缺失会造成老年小鼠小脑萎缩、浦肯野神经元缺失与受损，进而损害其运动协调和平衡能力。上述结果提示RNA m6A甲基化失衡会导致小脑的神经退行性病变。

目的:评价睡眠剥夺对幼鼠小脑沉默信息调节因子6(SIRT6)表达的影响。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠50只，4周龄，体质量14～16 g，采用随机数字表法分为2组( n＝25)：对照组(Con组)和睡眠剥夺组(SD组)。采用多平台水环境法制备小鼠睡眠剥夺模型，每天睡眠剥夺20 h，连续10 d。睡眠剥夺后行平衡木实验检测小鼠平衡和协调能力，麻醉后处死小鼠，取小脑组织，透射电子显微镜观察超微结构，采用高尔基染色法测定小脑浦肯野细胞树突棘密度，采用免疫荧光法检测小脑浦肯野细胞SIRT6和钙结合蛋白D-28k(CbD-28k)共表达情况，检测小脑葡萄糖转运体3(Glut3)表达。 结果:与Con组比较，SD组小鼠平衡木通过时间延长，后足滑脱次数增加，小脑4-6cb神经元突触间隙增大，突触后致密物厚度、浦肯野细胞树突棘密度及SIRT6与CbD-28k共表达阳性细胞数降低，Glut3表达下调( P<0.05)。 结论:睡眠剥夺降低幼鼠平衡和协调能力的机制与下调小脑浦肯野细胞SIRT6表达，降低神经元糖代谢，从而损伤小脑突触可塑性有关。

目的:探讨长期酒精摄入对小鼠小脑皮质浦肯野细胞自发性放电活动的影响。方法:50只3周龄清洁级ICR小鼠，雌雄不限，按照随机数字表法分为对照组和酒精组，每组25只，酒精组小鼠每日灌胃20%乙醇溶液(1.6 g/kg，1次/d)，对照组灌胃同等体积0.9%氯化钠溶液，灌胃周期28 d。通过电生理技术运用膜片钳放大器及数据采集软件记录感觉刺激诱发酒精组及对照组小鼠小脑浦肯野细胞放电活动；采用Clampfit 10.3软件和SPSS 22.0软件进行统计分析，配对 t检验及单因素方差分析进行两组间及每组干预前后的数据比较。 结果:电生理结果显示酒精组小鼠小脑皮质浦肯野细胞自发简单锋电位放电频率低于对照组[(26.8±2.5)%，(34.6±4.7)%； t＝26.08， P<0.05]，简单峰电位放电活动的变异系数高于对照组[(27.3±3.3)%，(19.2±2.3)%； t＝22.95， P<0.05]。脑表面灌流γ-氨基丁酸(GABA)A受体拮抗剂后，酒精组小鼠小脑皮质浦肯野细胞的简单峰电位频率高于给药前( t＝10.19， P<0.05)，变异系数低于给药前( t＝28.36， P<0.05)。脑表面灌流GABAA受体拮抗剂后，对照组小鼠小脑浦肯野细胞自发性简单峰电位放电频率没有显著变化( P>0.05)，变异系数较给药前下降( t＝6.95， P<0.05)。脑表面灌流α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑基丙酸(AMPA)受体拮抗剂后，酒精组小鼠和对照组小鼠小脑浦肯野细胞的简单峰电位的放电频率和变异系数较给药前均差异无统计学意义(均 P>0.05)。同时阻断AMPA和GABAA受体后发现，给药后酒精组小鼠浦肯野细胞自发性放电频率较给药前[(107.3±4.3)%，(99.7±3.7)%]增加( P<0.05)，酒精组的频率增幅值也较对照组高( P<0.05)；同时阻断AMPA和GABAA受体后，对照组小鼠的放电频率无显著变化( P>0.05)；给药后酒精组和对照组小鼠的变异系数均低于给药前(均 P<0.05)，且酒精组的降低幅度较对照组高( P<0.05)。 结论:长期酒精摄入显著抑制小脑浦肯野细胞自发性放电活动，抑制性成分的增强是通过GABAA受体介导的抑制性输入实现的。

脊髓小脑性共济失调（SCA）是一组多呈常染色体显性遗传的进行性加重的神经系统退行性疾病，小脑性共济失调是其核心症状，可伴有锥体束体征、锥体外系体征、认知功能障碍及周围神经病变等。目前SCA虽可以通过基因检测进行精准诊断，但在治疗上仍较为困难。本文现围绕遗传学或基因调控异常、蛋白质质量控制（PQC）网络破坏、能量稳态破坏等以及维持PQC系统稳定、维持小脑浦肯野细胞功能、调控神经炎症等方面，对近年来SCA的发病机制及治疗靶点研究进展进行综述，以期更好地促进其从临床前研究到人体治疗的转化。

酒精是一种世界范围内最广泛使用且滥用的精神活性物质，长期过量摄入酒精可损害中枢神经系统，导致其功能受损。小脑作为中枢神经系统的重要组成部分，也是酒精损伤的主要靶器官之一。小脑皮层神经环路主要体现为外部信息通过苔藓纤维、爬行纤维传入，最终通过浦肯野细胞整合各种信息并输出指令，进而完成各种生理功能。急、慢性酒精摄入会损伤人体运动协调、运动学习以及部分认知功能，其损伤机制被普遍认为是由酒精摄入导致的小脑皮层神经环路功能异常所引起的。文章结合近年来对长期酒精摄入小鼠模型的研究，对长期酒精摄入影响小脑神经网络机制的各个方面进行综述，以期为行为运动、运动协调、认知功能、抑郁等方面研究和治疗提供新思路。随着精准医学的兴起，人们对探索长期酒精摄入对小脑神经网络结构和功能的影响机制愈发感兴趣，如何根据现有研究成果应用于临床，是未来要研究的重要命题。

Charlevoix-Saguenay常染色体隐性痉挛性共济失调(ARSACS)是一种由 SACS基因变异所致的早发罕见的神经变性疾病。 SACS基因位于染色体13q11区，编码sacsin蛋白，后者在运动系统的神经、尤其是小脑浦肯野细胞中高度表达。本文总结了sacsin蛋白的结构和功能异常导致ARSACS的机制，为该病的研究提供参考。

目的:采用基于组织底物实验及实验室内部基于细胞底物实验的抗代谢型谷氨酸受体1抗体联合检测方法，对既往病因不明的1例以小脑性共济失调为主要表现的脑炎病例进行筛查并最终确诊，总结分析其临床和治疗特点。方法:对2020年1月9日解放军总医院神经内科医学部派驻第六医学中心神经内科收治的1例以急性头晕伴行走不稳起病，继而出现头部晃动、反复言语、计算力下降的中年女性患者的临床资料进行总结。首先对患者的血清和脑脊液进行常规神经抗体检测。再通过该患者血清及脑脊液分别孵育大鼠海马、小脑以及转染抗代谢型谷氨酸受体1质粒的人胚肾293细胞，使用间接免疫荧光法进行额外抗体筛查。结合文献对代谢性谷氨酸受体1的生理功能及抗代谢性谷氨酸受体1抗体相关性脑炎的临床特点进行总结。结果:经常规商品化试剂盒筛查，该患者神经抗体呈阴性，但基于组织底物实验显示其血清及脑脊液结合大鼠脑片均出现“神经毡”样染色，其中小脑浦肯野细胞出现了“美杜莎头”样特征性染色。后续结合患者的特征性头部晃动症状，通过实验室内部基于细胞底物实验明确其存在抗代谢型谷氨酸受体1抗体，进而诊断为抗代谢型谷氨酸受体1抗体相关性脑炎。1年后随访，患者经过皮质类固醇激素、人血免疫球蛋白治疗后血清抗体滴度大幅度下降伴脑脊液抗体转阴，症状虽有所缓解，但仍留有较严重小脑萎缩及共济失调。结论:抗代谢型谷氨酸受体1抗体可导致急性脑炎。小脑性共济失调及头部晃动是其特征性临床表现。本病对免疫治疗反应有限，可能会遗留严重后遗症。

神经系统副肿瘤综合征(paraneoplastic neurological syndrome,PNS)是癌症的远隔效应,可影响神经系统的各个部分,发病通常由免疫机制介导.随着抗体生物标志物的发现不断增多,PNS的发现率也逐渐升高,每300例癌症患者中有1例为PNS[1].2021年7月,国际专家组[2]提出了 PNS最新诊断标准及新的诊断评分系统,重新定义PNS常见临床表型,并将其分为高风险表型、中风险表型;同时对抗体进行危险分层,将抗微管相关蛋白1B(microtubule associated protein 1B,MAP1B)抗体作为"高风险抗体",认为其与肿瘤发生有强相关性.但是,目前抗MAP1B抗体引起PNS的病例报道及相关研究尚较少.现报告1例MAP1B抗体相关PNS病例.

目的 探讨脑立体定位斜插法靶向注射小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶的可行性,并观察该方法对小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞纤维的神经投射.方法 利用脑立体定位直插法(进针方向与水平方向垂直)或斜插法(进针方向与水平方向的垂直线呈30°夹角)标记Pcp2-Cre小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶,对比两种手术方式对小鼠颈部上方肌肉组织的影响;选择梯度剂量(500、300、150 nL)的顺行示踪病毒,探索适宜的病毒注射剂量;通过斜插法在小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶注射重组酶依赖性顺行示踪病毒,观察该小叶浦肯野细胞的传出神经投射.结果 相较于脑立体定位直插法,斜插法中小鼠头部皮肤切口更小,且不易破坏小鼠颈部上方肌肉;在前囟后6.00 mm、中线旁开0.00 mm、深4.08 mm坐标处,采用斜插法能靶向定位到小脑蚓部第Ⅸ小叶;同时,150 nL低剂量的病毒可较好的标记小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞,且不发生泄漏;通过病毒顺行示踪,在小鼠小脑顶核中间部、前庭小脑核、前庭内侧核巨细胞部以及前庭下核均检测到来自第Ⅸ小叶浦肯野细胞的神经投射纤维.结论 脑立体定位斜插法能在一定程度上减轻手术对小鼠颈部上方肌肉的破坏,通过该方法注射顺行示踪病毒能精确靶向小脑蚓部第Ⅸ小叶,并观察到该小叶浦肯野细胞的传出神经投射.