目的:建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)数字芯片式RT-PCR(dRT-PCR)方法并与real time RT-PCR(RT-qPCR)方法进行比较，选出适用于检测草莓中HAV的最佳方法。方法:提取HAV疫苗RNA，优化dRT-PCR的反应条件，评价其特异性；碱性洗脱-PEG浓缩法对草莓标本进行前处理后提取核酸，同时采用dRT-PCR与RT-qPCR方法，检测纯水或草莓基质中HAV疫苗RNA的敏感性、抑制率；比较人工污染草莓中HAV的回收率，并应用于市售标本中的检测。结果:确立了dRT-PCR反应的最适退火温度为60 ℃，最佳引物、探针浓度为0.4 μmol/L、0.4 μmol/L、0.2 μmol/L，特异度良好；两种检测方法检测HAV疫苗RNA在纯水或草莓基质中的敏感性没有明显差异，dRT-PCR的抑制率较低。dRT-PCR与RT-qRCR在检测较高浓度HAV污染草莓标本时的回收率分别为12.90±0.006%、30.12±0.02%；在检测较低浓度HAV污染草莓标本时的回收率分别为18.27±0.07%、10.85±0.03%，差异均具有统计学意义( P<0.05)。对市售标本进行检测，两种方法检测结果均为阴性。 结论:本研究建立的dRT-PCR法，与RT-qPCR检测不同基质中的HAV RNA敏感性没有明显差异，但dRT-PCR对PCR反应抑制物有较好的耐受能力，在检测低浓度HAV时回收率较高。两种检测方法均可用于草莓中甲型肝炎病毒的定量检测，可根据具体实际情况进行选择。

目的:探讨负载蛋白聚糖4(PRG4)的温度敏感性聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯共聚物(PCEC)可注射水凝胶材料表征及修复新西兰兔软骨缺损的效果。方法:2022年3月至2023年6月，利用PCEC温敏性水凝胶负载了PRG4效应因子(PRG4@PCEC)，使用扫描电子显微镜观察冷冻干燥的PRG4@PCEC水凝胶的形貌，测量PCEC和PRG4@PCEC水凝胶的最低共溶温度；使用活/死细胞染色技术评估水凝胶的生物安全性；采用雄性新西兰大白兔18只，36个膝关节缺损样本，随机分为3组，其中12个缺损组用PRG4@PCEC水凝胶修复，12个缺损组用PCEC水凝胶修复，12个缺损组为空白对照组，观察水凝胶的软骨修复能力；通过微型计算机断层扫描(Micro-CT)分析软骨下骨再生，标本组织切片苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)染色及荧光定量聚合酶链反应(PCR)评估水凝胶对软骨缺损的修复作用。组间比较采用 t检验。 结果:水凝胶具有明显的多孔微观结构，PCEC和PRG4@PCEC水凝胶分别在35 ℃和38 ℃表现出最低共溶温度；激光共聚焦观察活/死细胞染色结果证明PRG4@PCEC水凝胶对于兔软骨细胞具有良好的生物相容性；载有PRG4的水凝胶组在8周时，缺损已经完全被高含量的新生软骨组织填充，表明软骨缺损修复最佳；Micro-CT显示在8周时PCEC组[(37.33±0.39) mm 3]和PRG4@PCEC组[(25.33±0.21) mm 3]软骨下骨缺损体积均小于对照组[(51.57±0.49) mm 3， t＝32.19、69.56， P<0.01]；切片染色显示PRG4@PCEC水凝胶组软骨下骨有效形成；荧光定量PCR结果显示在4周和8周PCEC组(2.79±0.07、2.18±0.10)与PRG4@PCEC组白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平(1.54±0.07、0.80±0.10)均低于对照组(3.21±0.08、2.54±0.07， t＝0.68、4.97、27.63、24.43， P<0.01)，同时PCEC组(0.95±0.24、1.45±0.34)和PRG4@PCEC组Ⅱ型胶原蛋白(COL2)基因表达水平(1.19±0.45、1.53±0.26)高于对照组(0.64±0.07、1.01±0.14， t＝7.47、0.08、10.70、3.12， P<0.05)。 结论:负载PRG4的温度敏感性PCEC可注射水凝胶具有良好的温度敏感性和生物安全性，对关节软骨缺损有明显修复作用。

目的:建立一种快速、灵敏、可视化的H7亚型禽流感病毒等温核酸扩增检测方法。方法:针对H7N9禽流感病毒的HA片段保守区序列设计引物、探针，优化反应温度，建立H7亚型禽流感病毒的重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条检测技术，评价其特异性和敏感性，并与Real time PCR方法进行比较。结果:该方法检测H7亚型禽流感病毒的最低检出限为20拷贝/μL，与其他流感/禽流感病毒无交叉反应，反应可在20~50℃温度范围内进行，临床样本检测结果与Real time PCR法一致性为100.0％。结论:该检测方法具有快速、特异及灵敏的特点，为在基层和现场快速检测H7亚型禽流感病毒提供了新的方法。

目的:通过fNIRS探究在吞咽热水和冰水时健康受试者脑血流变化情况，以验证fNIRS对于不同温度液体吞咽任务识别的敏感性，为今后应用fNIRS对吞咽障碍患者进行中枢诊断及干预辅助提供理论依据。方法:纳入符合入组条件的健康受试对象16例，按照随机顺序进行吞咽热水和冰水的任务，并采用fNIRS对任务过程进行记录，配对比较静息状态、吞咽热水和吞咽冰水状态两两之间不同脑区激活程度的差异。结果:相较于静息状态，吞咽热水和冰水时均有19个通道激活，共同激活的皮质包括S1、M1、PMC、SMA、Wernicke区、体感联合皮质、视觉联合皮质和额叶眼动区，DLPFC仅在吞咽热水时激活，中央下区仅在吞咽冰水时激活。SMA和PMC在吞咽热水比吞咽冰水时激活程度更高，差异具有统计性。结论:健康受试者的多个脑区都有激活并参与了吞咽热水和冰水的调控，且吞咽热水比吞咽冰水能够更好的激活健康受试者的PMC和SMA。

目的:探讨罕见疾病Marsili综合征的临床特征、遗传规律、诊断方法及与其他引起发热症状疾病的鉴别诊断。方法:总结2021年2月解放军总医院第八医学中心呼吸与危重病医学科确诊的1例Marsili综合征临床资料，对患者及其父母外周血2万个基因的外显子区进行检测。以“Marsili综合征”，“ZFHX2基因突变”为关键词，检索自2000年1月至2021年11月的万方数据库和PubMed数据库相关文献并进行复习。此外，又以“先天疼痛不敏感”及“无汗”为关键词检索国内万方数据库并复习有关文献。结果:患者女性，23岁，临床表现为反复发热2年余，非甾体类抗炎药退热效果差，伴无汗及对疼痛不敏感，眼角膜反射减弱。患者及其母亲ZFHX2基因突变阳性，先天性无痛无汗症特有的NTRK1基因突变阴性，其父亲ZFHX2基因突变阴性。文献检索发现有关Marsili综合征英文文献2篇，世界范围内仅报告1个家庭中6例Marsili综合征病例，国内尚未见报道。本病临床表现为感觉疼痛、温度及出汗能力减弱或消失；对皮肤烧灼伤和骨折引起的疼痛不敏感，但对头痛、内脏痛、女性患者分娩痛及触觉无异常；角膜反射消失或迟钝；对辣椒素刺激敏感性下降。所有患者ZFHX2基因突变阳性，但未测定NTRK1基因。此外，国内有关先天性无痛无汗症文献4篇，共报告病例34例。Marsili综合征和先天性无痛无汗症虽有一些相同的临床表现，但两者是不同的疾病，且预后完全不同。结论:Marsili综合征是一种常染色体显性遗传病，国内外极其罕见。临床遇到不明原因反复发热，使用非甾体类抗炎药效果差，尤其是合并无汗、对疼痛不敏感等临床表现应想到本病的可能性，并进行ZFHX2基因检测。本病为良性疾病，预后良好，尽早明确诊断可避免无效治疗及其不良反应。针对本病目前尚无有效的基因治疗方法。

癌症是致死率最高的疾病之一，癌症的治疗一直以来都是临床医学中的重点研究课题。化学治疗作为最常采用的治疗方法有效却也存在许多弊端，因为大多数化疗药物缺乏选择性和靶向性，会对人体的健康造成不必要的影响，因此纳米药物递送系统在治疗癌症的研究中发挥着重要的作用。而磁性纳米颗粒作为纳米药物递送系统的其中一类载体，既具有粒径小、比表面积大等纳米材料的一般特点，又具有特殊的磁学性能，经表面修饰后可以连接药物、分子、配体等，在内源或外源性因素的激发下，可以有效地靶向肿瘤细胞并发挥其磁性作用。本文将基于以下几个方面进行综述研究：（1）磁性纳米颗粒作为化疗药物递送系统的载体，结合不同的负载药物对癌症治疗的效果；（2）根据肿瘤微环境中特殊的pH响应机制，分析磁性纳米颗粒药物载体的不同表面修饰对肿瘤细胞的靶向性及药物控释的影响；（3）结合肿瘤对温度变化的敏感性，阐述了利用磁性纳米颗粒对肿瘤进行热磁疗的作用效果；（4）分析了在癌症领域利用磁性载药纳米颗粒进行光声疗法、光热疗法、光动力疗法的作用机制及发展现状。（5）总结了磁性纳米颗粒作为药物载体在癌症治疗领域的发展现状及所面临的问题。为其能够早日在临床医学中得到应用提供了参考。

目的:探讨受压界面皮肤温度干预对肩关节镜手术压力性损伤(Pressure Injury，PI)形成的影响。方法:选取2017年9月至2020年9月广西壮族自治区人民医院实施常规肩关节镜手术的患者300例为研究对象，根据随机数字表法分为对照组、降温组和升温组，每组100例。对照组实施常规手术护理，降温组在对照组的基础上对术中受压界面皮肤实施降温干预，升温组则实施升温干预。观察手术不同时间段各组温度变化和差异，比较术后72 h各组PI的发生率。绘制ROC曲线，分析受压界面平均皮肤温度在预测PI中的价值。结果:三组麻醉前、手术开始时受压界面皮肤温度比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。升温组术中、术后受压界面皮肤温度明显高于降温组和对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。降温组PI总发生率最高，与升温组比较，差异有统计学意义( P<0.05)；ROC曲线显示，术中受压界面平均皮肤温度在预测PI中的AUC为0.423(0.329，0.518)，最佳截断值为35.635时，敏感性为81.80%，特异性为78.90%。 结论:对术中患者受压界面皮肤温度实施有效干预，可以降低术后PI的发生率。

目的:利用结直肠癌患者来源的肿瘤类器官作为临床前模型，对比洛铂与奥沙利铂体外热灌注的药物敏感性，以辅助临床制定腹腔热灌注化疗方案。方法:收集2021年7月至2022年12月期间中山大学附属第六医院经病理确诊为结直肠癌的患者手术后切下的部分肿瘤组织及获取的相关临床资料，对肿瘤组织进行类器官培养及传代，对活性良好的类器官进行体外热灌注实验。首先使用10例类器官分别进行6种浓度梯度（1 000、250、62.5、15.6、3.9和0.98 μmol/L）的奥沙利铂和洛铂体外热灌注实验，奥沙利铂于42℃环境下与类器官接触30 min，洛铂于42℃环境下与类器官接触60 min，根据绘制的剂量反应曲线，评估两种药物体外热灌注剂量反应能力。进一步使用30例类器官进行奥沙利铂和洛铂临床剂量的测试，奥沙利铂浓度为579 μmol/L，热灌注温度为42℃，时间为30 min；洛铂浓度为240 μmol/L，热灌注温度为42℃，时间为60 min。评估奥沙利铂和洛铂两种药物的体外热灌注敏感性。结果:成功培养了32例结直肠癌患者的肿瘤类器官。奥沙利铂消除50%肿瘤细胞所需的浓度（IC 50）中位数为577.45 μmol/L（ IQR：1 846.09 μmol/L）；洛铂的IC 50中位数为85.04 μmol/L（ IQR：305.01 μmol/L），两者比较差异无统计学意义（ Z=1.784， P=0.084）；10个类器官中有7个结果显示洛铂体外热灌注IC 50大于奥沙利铂。30例类器官在奥沙利铂和洛铂临床剂量下的测试结果显示：奥沙利铂的平均抑制率为39.6%（95%CI：32.1%~47.0%），洛铂的平均抑制率为89.7%（95%CI：87.0%~92.3%），两者比较差异有统计学意义（ t=-15.282， P<0.001）。 结论:洛铂体外热灌注的抑制率优于奥沙利铂，有希望代替奥沙利铂成为更好的腹腔热灌注化疗药物。

目的:探讨心房颤动（房颤）患者冷冻球囊（CB）消融术后复发的好发部位与术中因素。方法:入选2017年2月至2019年11月在福建省立医院心内科接受房颤再次手术的房颤患者39例（阵发房颤21例，持续房颤18例）。术中左心房行基质电压标测，记录肺静脉电位恢复部位（GAP）。回顾性分析患者首次手术肺静脉电位记录，肺静脉电位隔离时间（TTI），冷冻30 s时的温度（T 30 s）与术后复发的关系。 结果:①肺静脉电位恢复好发于右前三叉处，左上肺静脉顶部，左下、右下肺静脉的底部；②有记录到肺静脉电位，术后无GAP的敏感性为78%，阳性预测值为80%；③T 30 s<-25℃，TTI<60 s的敏感性为84%，阳性预测值为87%；④T 30 s<-25℃，术后无GAP的敏感性为87%，阳性预测值为80%。 结论:右前三叉、左上肺静脉顶部，左下、右下肺静脉的底部是肺静脉电位恢复的好发部位，可记录肺静脉电位、T 30 s<-25℃可以预测房颤冷冻消融术效果。

目的:评估从零售到喂养过程婴儿配方粉中克罗诺杆菌引起的食源性疾病风险，并根据风险评估结果制定婴儿家庭安全喂养建议。方法:利用黑龙江省婴儿配方粉专项监测及风险监测数据，结合国内外相关资料，应用@RISK软件对黑龙江省婴儿配方粉从零售到喂养过程中克罗诺杆菌引起的疾病风险进行评估。结果:定量风险评估的预测结果显示，黑龙江省目前的消费模式引起克罗诺杆菌食源性疾病的风险为5.2×10 -5人/百万（40.0 ℃和50.0 ℃）、1.1×10 -7人/百万（60.0 ℃）、5.5×10 -14人/百万（70.0 ℃）。将婴儿配方粉喂养时间分别调整为0~2 h和2~3 h，上述预测结果没有变化；调整为3~4 h，风险有所增加；调整为4~24 h，室温储存引起克罗诺杆菌增殖14~24个数量级。若将初始污染浓度（冲调后）调整为1 MPN/ml，每餐患病风险平均值为805.7人/百万（40.0 ℃和50.0 ℃）、1.7人/百万（60.0 ℃）、9.1×10 -7人/百万（70.0 ℃）。敏感性分析结果显示，冲调水温（70.0 ℃）、初始污染浓度、室温储存时间和温度是影响风险相关性的重要因素。 结论:控制婴儿配方粉中克罗诺杆菌污染水平、喂养时间控制在3 h以内、冰箱储存、不低于70.0 ℃的水冲调是预防婴儿因食用婴儿配方粉感染克罗诺杆菌的有效措施。