目的:基于近红外脑功能成像技术(fNIRS)观察脑卒中偏瘫患者肢体针刺治疗诱发脑皮层特异性激活响应的特征,初步探讨针刺疗法可能的神经机制.方法:纳入19例脑卒中偏瘫患者,根据患者的运动功能障碍严重程度将其分为相对轻度受损组(MI组)10例和相对重度受损组(SI组)9例.所有患者均对患侧肢体进行针刺干预,分别于针刺前静息态及针刺治疗过程中运用32通道fNIRS系统检测患者的大脑双侧前额叶和运动相关皮层的脑血氧参数,采用时频分析方法计算fNIRS信号中感兴趣频段振荡幅值信息,以此分析肢体针刺诱发的脑功能激活响应特征.通过组内和组间比较,重点研究针刺诱发不同运动障碍严重程度患者的脑功能特异性响应特征.结果:组内分析结果显示,与静息态相比,针刺状态下MI组患者非受累侧半球运动区的通道(Ch)26激活相应显著增加(P＜0.05);针刺状态下SI组患者受累侧半球前额叶和运动区的Ch1、Ch3、Ch5、Ch14、Ch15激活响应均显著增加(P＜0.05),非受累侧半球前额叶和运动区的Ch11、Ch23激活响应亦显著增加(P＜0.05).组间分析结果显示,SI组患者由针刺治疗诱发的大脑皮层激活响应在Ch11、Ch13、Ch24、Ch25均显著大于MI组.相关性分析结果显示,MI组患者由针刺治疗诱发的位于前额叶和运动区皮层的激活变化量与患者上下肢运动功能表现呈显著负相关.结论:针刺治疗可诱发脑卒中偏瘫患者双侧大脑激活响应,且运动功能重度受损患者较轻度受损患者在针刺状态下其大脑皮层激活响应更为显著,尤其是受累侧半球.

肿瘤免疫疗法是激活宿主自身免疫系统对抗肿瘤的治疗方式,已广泛应用于临床,然而存在响应率低、免疫相关不良事件等缺陷.有别于传统的化学治疗,免疫治疗的靶标表现出更为广泛的空间异质性,分布在不同细胞类型及二级细胞器中,药物分子易产生脱靶与在靶毒性,极大地影响了治疗的有效性与安全性.由于代谢水平的改变,肿瘤微环境较正常组织显微酸性,而细胞内吞途径伴随着质子的进一步泵入,因此pH可以作为理想的选择性刺激条件,以实现"门控"式的药物精准递释.近年来,pH响应型材料在肿瘤免疫治疗中被广泛研究,如高分子聚合物、生物大分子、脂质纳米粒、生物膜、无机纳米粒、金属-有机框架等.本文从不同的载体类型出发,综述了pH响应型肿瘤免疫治疗的研究策略,为新一代靶向制剂研发提供参考.

肺组织损伤在临床中很常见，根据疾病的发展进程可大致分为慢性肺损伤和急性肺损伤。炎症相关因素在慢性肺损伤与急性肺损伤的发生发展过程中扮演着重要角色。核苷酸结合寡聚结构域样(nucleotide-binding oligomerization domain，NOD)样受体蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain-containing protein 3，NLRP3)炎性小体在急性肺损伤与慢性肺损伤中发挥重要的调节作用。NLRP3炎性小体是一种位于细胞内的高分子蛋白复合物，可响应内源性危险信号和损伤刺激因子，是呼吸道免疫系统的重要组成部分。然而NLRP3炎性小体过度激活会导致细胞焦亡，进而引起炎症因子的释放，诱发肺部炎症级联反应，最终可能导致肺组织损伤和肺功能障碍。现就NLRP3炎性小体在肺组织炎症性损伤中的作用进行综述，旨在为临床治疗肺组织损伤提供更有效的治疗策略以及研究方向。

目的:探讨表皮生长因子受体（EGFR）和核转录因子E2相关因子2（NRF2）对人宫颈癌HeLa细胞受到电离辐射损伤后的DNA损伤响应及修复作用。方法:将人宫颈癌HeLa细胞按2种处理方式分组：（1）采用小干扰RNA敲降HeLa细胞中的EGFR，采用 137Cs γ射线照射源照射细胞。将HeLa细胞分为对照组（HeLa siCtrl）、敲降EGFR组（HeLa siEGFR）、照射组（HeLa siCtrl+8 Gy）、敲降EGFR+照射组（HeLa siEGFR+8 Gy）。采用免疫荧光实验（8 Gy照射后6、12、24 h）检测细胞中磷酸化组蛋白H2A变异体（γ-H2AX）foci的数量；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测NRF2下游靶基因；采用流式细胞术检测EGFR对HeLa细胞周期的影响；采用核质分离实验分离HeLa细胞的胞质蛋白和胞核蛋白；采用蛋白质免疫印迹法检测NRF2、EGFR、血红素氧合酶1（HO-1）、共济失调毛细血管扩张突变基因Rad3相关激酶（ATR）Thr1989位点的磷酸化水平、检查点激酶1（CHK1）在Ser345位点的磷酸化水平。（2）采用小干扰RNA敲降HeLa细胞中的NRF2，采用 137Cs γ射线照射源照射细胞。将HeLa细胞分为对照组（HeLa siCtrl）、敲降NRF2组（HeLa siNRF2）、照射组（HeLa siCtrl+8 Gy）、敲降NRF2+照射组（HeLa siNRF2+8 Gy）。采用免疫荧光实验检测细胞中γ-H2AX foci的数量。符合正态分布的计量资料的组间比较采用两独立样本 t检验（方差齐）。 结果:（1）8 Gy照射6、12、24 h后，HeLa siEGFR+8 Gy组细胞中γ-H2AX foci的数量均多于HeLa siCtrl组[（94.00±1.00）%对（89.67±2.03）%、（72.33±1.76）%对（60.00±1.73）%、（43.00±2.31）%对（26.33±1.20）%]，且差异有统计学意义（ t=3.919、4.919、6.402，均 P<0.05）。与HeLa siCtrl组比较，HeLa siEGFR+8 Gy组的细胞G2/M期阻滞显著受损[（46.53±3.06）%对（37.90±4.61）%]，且差异有统计学意义（ t=4.384， P<0.05）。与HeLa siCtrl组比较，HeLa siEGFR+8 Gy组的HO-1表达下降66.66%（1.35±0.10对0.45±0.02），且差异有统计学意义（ t=8.782， P<0.05）。敲降EGFR后细胞核内的NRF2蛋白水平降低，辐射引起的NRF2下游ATR-CHK1信号通路活化水平及HO-1蛋白水平均降低。（2）8 Gy照射6、12、24 h后，与HeLa siCtrl组相比，HeLa siNRF2+8 Gy组细胞中γ-H2AX foci的数量均多于HeLa siCtrl组[（96.67±0.88）%对（89.67±2.03）%、（77.33±1.20）%对（60.00±1.73）%、（54.33±2.19）%对（26.33±1.20）%]，且差异均有统计学意义（ t=3.166、4.919、11.220，均 P<0.05）。 结论:电离辐射条件下，敲降EGFR可以减少NRF2蛋白入核，抑制ATR-CHK1信号通路激活及下游基因HO-1的表达，降低人宫颈癌HeLa细胞的DNA损伤修复能力。

到目前为止，中枢神经系统在正常葡萄糖稳态和2型糖尿病中所起的作用仍未阐明。但是越来越多的证据表明，中枢神经系统某些区域(如下丘脑)也存在葡萄糖感应系统，与胰腺一样，该系统也能感知和响应循环血液中葡萄糖水平的变化。下丘脑血糖感应系统主要包括葡萄糖刺激性神经元及葡萄糖抑制性神经元，分别在低血糖及高血糖时被激活。在低血糖时，为了保证大脑的葡萄糖供应，该血糖感应系统被激活从而迅速作用在外周靶器官，以抑制胰岛素分泌并上调胰高血糖素分泌，进而升高血糖，该反应即低血糖对抗神经回路反应(CRR)。而在遗传及环境因素的作用下，如果下丘脑感应葡萄糖的能力受损，导致CRR的血糖调定点上调，将促进2型糖尿病的发生。越来越多的临床前证据也表明，通过恢复大脑感知血糖水平功能的治疗措施，可用于治疗2型糖尿病。然而，下丘脑葡萄糖感应系统的细胞内机制仍未完全阐明，有待进一步研究证实。

瘢痕作为成人创伤愈合的终点，对于组织新生和功能恢复是不利的。一般认为Engrailed-1+ Fb谱系（EPF）在瘢痕形成过程中发挥作用，但是对Engrailed-1－ Fb谱系（ENF）的研究较少。为了回答瘢痕形成过程中发挥纤维化作用的EPF本来就存在于组织中还是部分由ENF产生这个问题，研究人员首先利用细胞移植和转基因模型小鼠成功鉴定出了一种皮肤ENF亚群，该细胞亚群能够在小鼠出生后创伤愈合过程中通过激活Engrailed-1 基因产生新的EPF。其次，通过研究ENF对机械力的响应情况，研究人员还观察到，机械力能通过经典的机械转导信号激活Engrailed-1 基因。研究人员进一步证实，利用机械转导的最终转录效应子（YAP）抑制剂维替泊芬或转基因方法对Fb进行特异性YAP 基因敲除能阻断机械转导信号、抑制Engrailed-1 基因的激活。提示，ENF可以介导创面的再生，且YAP机械信号转导途径在ENF到EPF的转变过程中发挥着重要的作用。该研究的结果证明，出生后的创伤愈合有2种可能结果：一种是由EPF介导的纤维化反应，一种是由ENF介导的再生反应。

目的:探讨Toll样受体9（TLR9）信号通路激活对肾小管细胞转录组的影响。方法:提取并培养小鼠原代肾小管上皮细胞，在细胞融合度达80%时分为两组，分别加入10 μL磷酸盐缓冲液（PBS，PBS对照组）和终浓度为5 μmol/L的TLR9激活剂胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸（CpG-ODN，CpG-ODN处理组）。提取细胞RNA后在Illumina平台进行测序，使用差异基因分析软件DEGseq分析两组细胞中基因的差异表达情况，通过Goatools和KOBAS在线软件分析差异基因所参与的信号通路，应用Homer软件预测转录因子。结果:与PBS对照组相比，CpG-ODN处理后有584个显著的差异表达基因，其中102个基因表达上调，482个表达下调。差异表达基因富集最显著的基因本体（GO）为β-干扰素响应、病毒响应或防御等炎症反应相关条目；京都基因与基因组百科全书数据库（KEGG）信号通路富集结果显示，富集系数最显著的信号通路包括2'-5'-寡腺苷酸合成酶活性、核糖核酸酶活性的调节、病毒生命周期的负调控、β-干扰素响应和对原生动物的防御反应等。转录因子预测结果显示，干扰素调节因子3（IRF3）是差异基因启动子序列上富集最显著的转录因子；IRF3是TLR9下游表达差异最显著的转录因子，转录因子21（TCF21）、锌指蛋白135（ZNF135）和阳性调节域4（PRDM4）等转录因子可能是TLR9信号通路的新候选靶标。结论:CpG-ODN激活TLR9信号通路，原代肾小管上皮细胞能直接响应CpG-ODN的刺激并发生转录组学变化，为进一步探究TLR9信号通路在脓毒症相关性急性肾损伤中的分子机制研究提供了基础。

目的:探讨新型光遗传学工具Channelrhodopsin-XXM2.0 （XXM2.0）、Channelrhodopsin- PsCatCh2.0 （ PsCatCh2.0）的光敏感性及动力学特征，分析其是否可用于光遗传学视觉功能的恢复。 方法:通过分子生物学技术将XXM2.0和 PsCatCh2.0的基因片段连接到包含抗氨苄青霉素筛选基因和报告基因的载体pCIG （c）-msFoxn3上，形成新质粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0、pCIG （c）-msFoxn3- PsCatCh2.0。将构建的新质粒转染到HEK 293T细胞上，用HEKA膜片钳系统行全细胞模式记录对光反应。在2.7×10 16、4.7× 10 15、6.4×10 14 photons/ （cm 2·s）的光强下记录电流大小；在2.7×10 16 photons/ （cm 2·s）光强下刺激XXM2.0、 PsCatCh2.0并让其充分恢复，在Clampfit 10.6软件中分析开放和关闭时间常数；在相同光强下，设置2~ 32 Hz的光脉冲刺激，记录XXM2.0、 PsCatCh2.0的响应情况，并在重复光刺激后间隔4000 ms和200 ms来分析电流衰减情况。组间比较均采用独立样本 t检验。 结果:在XXM2.0、 PsCatCh2.0序列两端引入限制性内切酶位点EcoRⅠ和EcoRⅤ，酶切后通过T4 DNA连接酶成功构建新质粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0和pCIG (c）-msFoxn3- PsCatCh2.0，并转染表达在HEK 293T细胞上。XXM2.0和 PsCatCh2.0均表现出光强依赖性，光强越大电流越大。在视网膜安全阈值内的光强6.4×10 14 photons/ （cm 2·s）刺激下，XXM2.0和 PsCatCh2.0仍产生较大电流，分别为（92.8±142.0）、（13.9±5.6）pA；两者比较，差异无统计学意义（ t=1.24、1.24， P=0.28、0.29）。XXM2.0、 PsCatCh2.0的开放时间常数分别为（23.9±6.7）、（2.4±0.8）ms，关闭时间常数分别为（5 803.0±568.2）、（219.9±25.6）ms；两者比较，XXM2.0开放时间常数、关闭时间常数均较 PsCatCh2.0大，差异均有统计学意义（ t=7.10、31.60， P=0.00、0.00 ）。在响应频率方面，XXM2.0和 PsCatCh2.0均能很好地响应32 Hz的高频率脉冲光刺激，并在较长时间（4000 ms）和较短时间（200 ms）间隔的重复光刺激后均保持较小的电流衰减率。 结论:XXM2.0和 PsCatCh2.0均可在对视网膜安全的光强条件下被激活，并都能以较低的电流衰减来响应高频率（至少32 Hz）的脉冲光刺激，均满足利用光遗传学来恢复视觉功能所需的光敏蛋白特性。

背景: 动脉性肺动脉高压（PAH）的发病率和病死率仍然很高。血小板源性生长因子受体、集落刺激因子1受体和肥大细胞或干细胞生长因子受体激酶的激活会刺激炎症、增殖和纤维化途径，从而驱动PAH中的肺血管重塑。塞拉鲁替尼（Seralutinib）是一种吸入性激酶抑制剂，针对这些途径。该研究的目的是评估塞拉替尼对接受标准背景治疗的PAH患者的疗效和安全性。方法：TORREY试验是一项2期、随机、多中心、跨国、双盲、安慰剂对照研究。来自40 家医院和社区站点的PAH患者通过交互式响应技术以1∶1 的比例随机分配接受塞拉鲁替尼（60 mg，2次/d，持续2周，然后根据耐受性增加至90 mg，2次/d），或通过干粉吸入器每天两次接受安慰剂，持续治疗24 周。根据基线肺血管阻力（PVR<800 dyn·s -1·cm -5和≥800 dyn·s -1·cm -5）对随机分组进行分层。如果患者被归类为WHO第1组PH（PAH）、WHO功能等级Ⅱ或Ⅲ，且PVR为400 dyn·s -1·cm -5或以上，6 min步行距离在150~550 m之间，则患者符合入组资格。主要终点是PVR从基线到24周的变化。在随机分配的患者（意向治疗人群）中进行终点疗效分析。安全性分析包括所有接受研究药物的患者。TORREY已在ClinicalTrials.gov（NCT04456998）完成注册。 结果：2020年11月12日至 2022年4月20日共筛查了151例患者，86例接受PAH背景治疗的成年人被随机分配至塞拉鲁替尼组（44例，其中4例男性，40例女性）或安慰剂组（42例，其中4例男性，38例女性）。安慰剂组从基线到第24周的PVR最小二乘平均变化为21.2 dyn·s -1·cm -5（95% CI：-37.4~79.8），塞鲁替尼组为-74.9 dyn·s -1·cm -5（95% CI：-139.7~-10.2）。塞拉鲁替尼组和安慰剂组之间 PVR 变化的最小二乘平均差为-96.1 dyn·s -1·cm -5（95% CI：-183.5~-8.8； P=0.03）。两个治疗组中最常见的治疗中出现的不良事件是咳嗽：安慰剂组中42例患者中16例出现咳嗽（38%）；塞拉替尼组44例中有19例（43%）。 结论：Seralutinib治疗组的患者在24周时PVR的变化较安慰剂组显著减少，达到了研究的主要终点。此外，Seralutinib治疗组在其他疗效终点上也表现出了一定的优势，如改善了6 min步行距离和WHO功能分级。在安全性方面，Seralutinib治疗组和安慰剂组的不良事件发生率相近。

溶瘤病毒是指能够特异性杀伤肿瘤细胞的天然病毒或经过基因工程改造后的病毒，经过瘤内注射后可以通过多重机制达到肿瘤杀伤和激活免疫的治疗效果。膀胱癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一，也是公认对免疫治疗响应性较好的"热肿瘤"。目前，世界范围内卡介苗短缺，需要探索潜在的卡介苗灌注替代药物；针对卡介苗灌注失败的患者也亟需探索新的保膀胱治疗方案。近些年，溶瘤病毒治疗非肌层浸润性膀胱癌和肌层浸润性膀胱癌的基础研究和临床研究均取得许多突破，本文就溶瘤病毒的基本概念、种类特性、给药方式、近年来溶瘤病毒在膀胱癌中的基础研究进展及临床试验进展做出述评。