旨在探讨茱萸丸对动脉粥样硬化(AS)的影响及可能的作用机制.采用高脂饲料喂养诱导小鼠AS模型,造模周期为12周.造模成功的50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠按照随机数字表法分为5组,即模型组,茱萸丸低、中、高剂量组,阿托伐他汀钙组,每组10只;C57BL/6J小鼠10只作为空白组.空白组及模型组给予等体积无菌蒸馏水灌胃,茱萸丸低、中、高剂量组给予130.54、261.08、522.16 mg·kg-1灌胃,阿托伐他汀钙组给予10.40 mg·kg-1灌胃,每日1次,共12周.给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠主动脉、肝脏、附睾脂肪的病理学变化,并计算主动脉斑块面积占比、附睾脂肪面积、非酒精性脂肪肝活动性积分(NAS);油红O染色、Masson染色观察主动脉脂质及胶原纤维沉积,并计算主动脉红染脂质面积占比、主动脉胶原沉积面积占比;比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、铁离子水平;免疫荧光法检测主动脉环氧合酶2(COX2)、铁蛋白重链1(FTH1)、胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白水平;免疫组化法检测主动脉肿瘤蛋白53(p53)水平;蛋白免疫印迹法检测主动脉p53、SLC7A11蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测小鼠主动脉p53、SLC7A11、GPX4、FTH1、前列腺素G/H合酶2(PTGS2)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)mRNA表达水平.结果显示,与空白组比较,模型组小鼠主动脉斑块面积明显扩大,胶原纤维沉积增加,肝脏脂质沉积增加,脂滴变多,附睾脂肪细胞体积扩大;血清中铁离子、MDA含量升高,SOD、GSH-Px水平降低;p53、COX2蛋白表达升高;主动脉FTH1、SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达降低;PTGS2、NOX1 mRNA表达升高.与模型组比较,茱萸丸低、中、高剂量组及阿托伐他汀钙组小鼠主动脉斑块面积明显缩小,胶原沉积减少,肝脏脂质沉积减少,脂滴变少,附睾脂肪细胞体积缩小;血清中铁离子、MDA含量降低,SOD、GSH-Px水平升高;p53、COX2蛋白表达降低;主动脉FTH1、SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达升高;PTGS2、NOX1 mRNA表达降低.综上所述,茱萸丸对小鼠AS主动脉斑块具有较好的治疗作用,其机制可能与调控p53/SLC7A11信号通路介导的氧化损伤及抑制细胞铁死亡有关.

目的:评价丙泊酚对人黑色素瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及环氧合酶-2/前列腺素E2/金属基质蛋白酶(COX-2/PGE2/MMP)信号通路在其中的作用。方法:体外培养SKMEL-5细胞，采用随机数字表法分为4组( n＝36)：对照组(C组)、丙泊酚组(P组)、COX-2过表达组(COX-2组)和COX-2过表达+丙泊酚组(COX-2+P组)。P组加入终浓度60 μmol/L的丙泊酚；COX-2组和COX-2+P组将COX-2过表达质粒pcDNA3.1-COX-2转染到SKMEL-5细胞，COX-2+P组再加入终浓度60 μmol/L的丙泊酚。孵育48 h时，采用CCK-8法测定细胞增殖率，Transwell法测定细胞侵袭和迁移能力，Western blot法检测细胞COX-2表达，RT-qPCR法检测细胞COX-2 mRNA表达，ELISA法检测上清液PGE2、MMP-2和MMP-9的浓度。 结果:与C组比较，P组细胞增殖率降低，细胞侵袭数和迁移数减少，COX-2及其mRNA表达下调，上清液PGE2、MMP-2和MMP-9的浓度降低，COX-2组细胞增殖率升高，细胞侵袭数和迁移数增加，COX-2及其mRNA表达上调，上清液PGE2、MMP-2和MMP-9的浓度升高( P<0.05)；与P组比较，COX-2+P组细胞增殖率升高，细胞侵袭数和迁移数增加，COX-2及其mRNA表达上调，上清液PGE2、MMP-2和MMP-9的浓度升高( P<0.05)。 结论:丙泊酚可抑制人黑色素瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力，其机制与抑制COX-2/PGE2/MMP信号通路有关。

目的 观察羟基红花黄色素A(HSYA)对环氧合酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)信号通路的影响,探讨HSYA对脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护机制.方法 90只雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、手术组(CIRI组)、HSYA组和塞来昔布组(C组),HSYA组进一步分为HSYA低剂量组(HSYA-L组)、HSYA中剂量组(HSYA-M组)和HSYA高剂量组(HSYA-H组),每组15只.线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型.各组大鼠于术前30 min腹腔注射给药,HSYA各组分别给予HSYA 10、15、25 mg/kg,C组给予塞来昔布40 mg/kg,S组和CIRI组给予等量的生理盐水.各组大鼠模型制作苏醒后立刻进行神经功能学评分,再灌注24 h时进行脑梗死体积检测,同时Nissl染色观察神经细胞损伤,Real-time PCR和Western blotting检测COX-2 mRNA和蛋白的变化,ELISA检测PGE2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β的变化.结果 与S组比较,CIRI组神经功能学评分显著升高(P＜0.05),脑梗死体积显著增加(P＜0.05),神经细胞损伤较重,数目显著降低(P＜0.05),COX-2 mRNA和蛋白的表达显著增多,同时PGE2、TNF-α和IL-1β的表达也显著增多(P＜0.05);与CIRI组比较,HSYA组及C组神经功能学评分明显降低(P＜0.05),脑梗死体积明显减少(P＜0.05),神经细胞损伤减轻,数目明显增加(P＜0.05),COX-2 mRNA和蛋白及PGE2、TNF-α和IL-1β的表达均明显下降(P＜0.05),且HSYA各组之间及HSYA-L组和HSYA-M组与C组比较差异均较显著(P＜0.05),而HSYA-H组与C组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 HSYA减轻缺血性脑卒中再灌注损伤可能与抑制COX-2/PGE2信号通路有关.

红景天苷是从红景天分离得到的一种苯丙素苷,具有耐缺氧、抗氧化、抗炎、保护神经、抗疲劳、抗衰老及调节免疫等广谱药理特性.红景天苷具有多靶点—多途径的整体调节特征,通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路和单磷酸腺苷活化蛋白激酶途径、B淋巴细胞瘤-2基因/B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白通路和内源性抗氧化酶的活性及环氧合酶/前列腺素E2信号通路保护糖尿病性视网膜病变视网膜血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞及Müller细胞;激活调控转化生长因子信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路和分泌性糖蛋白/β-连环蛋白通路,从而抑制青光眼小梁网细胞和神经节细胞凋亡,并调节眼内压的稳定;激活蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3信号通路抑制年龄相关性黄斑变性视网膜色素上皮细胞氧化损伤,降低血管内皮生长因子和缺氧诱导因子-1的表达水平抑制脉络膜新生血管的形成;发挥抗氧化活性,保护白内障晶状体上皮细胞免受氧化损伤;改善近视所致的巩膜缺氧;以及通过激活单磷酸腺苷活化蛋白激酶—沉默信息调节因子1信号通路促进自噬等来抑制机体氧化应激,缓解干眼症引起的角膜上皮细胞氧化损伤等.红景天苷在眼科应用研究涉及的范围越来越广,本文就国内、外红景天苷治疗相关眼科疾病的最新研究进展予以综述.

目的 探讨红景天苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变(DR)的保护作用.方法 将32只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组及红景天苷低、高剂量(50、200 mg/kg)组.腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型.模型诱导成功后,灌胃给予红景天苷12 周.苏木素和伊红染色观察视网膜组织的病理学改变;荧光定量PCR、免疫印迹及酶联免疫吸附试验检测视网膜内相关mRNA和蛋白的表达情况.结果 与对照组相比,糖尿病组视网膜神经节细胞层排列紊乱、视网膜神经节细胞(RGC)密度明显降低(P<0.05);视网膜环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01),前列腺素E2(PGE2)分泌水平显著升高(P<0.01).与糖尿病组相比,红景天苷低剂量组COX-2和VEGF mRNA表达以及PGE2分泌水平显著下降(P<0.05);红景天苷高剂量组RGC层排列情况有所改善,RGC密度明显升高(P<0.05),COX-2和VEGF mRNA及蛋白表达(P<0.05)和PGE2分泌水平(P<0.01)显著降低.结论 红景天苷能改善糖尿病大鼠视网膜组织病理改变,其机制可能与抑制COX-2/PGE2/VEGF通路相关.

目的 探讨前列腺素E2受体1亚型(EP1)在阿霉素(ADR)诱导的足细胞损伤中的作用及其可能机制.方法 (1)动物实验:6～8周龄雄性Balb/c小鼠被随机分为4组:对照组;ADR组;EP1激动剂(17-phenyl PGE2)+ADR组;EP1拮抗剂(SC-19220)+ADR组.尾静脉注射ADR(10 mg/kg)构建小鼠肾病综合征模型,分别给予EP1激动剂(1μg/g)和拮抗剂(25μg/g).检测小鼠尿蛋白量、血生化、肾脏病理改变、电镜下足细胞改变以及足细胞相关蛋白的表达变化.(2)细胞实验:体外培养足细胞,分为4组:对照组;ADR组;EP1激动剂+ADR组;EP1拮抗剂+ADR组.CCK-8法检测足细胞增殖情况;ELISA法检测足细胞前列腺素E2(PGE2)含量;间接免疫荧光法检测足细胞相关蛋白nephrin、podocin、CD2AP在足细胞中的定位;实时定量PCR法及Western印迹法检测足细胞相关蛋白mRNA及蛋白的表达;Western印迹法检测p38 MAPK活性变化;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 (1)动物实验结果:与对照组相比,ADR组小鼠出现明显蛋白尿、血生化及肾脏病理改变;与ADR组相比,EP1激动剂+ADR组尿蛋白量增多、血生化异常及肾脏病理改变加重,拮抗剂+ADR组上述改变减轻.免疫组化结果显示,ADR组足细胞相关蛋白nephrin、podocin、CD2AP表达与对照组相比显著降低,EP1激动剂可进一步抑制其表达,拮抗剂干预后上述改变得到改善(均P＜0.05).电镜下观察ADR组足细胞足突增宽、融合,激动剂组足细胞损伤进一步加重,拮抗剂干预后足细胞损伤减轻.(2)细胞实验结果:与对照组相比,ADR组足细胞中PGE2含量、环氧合酶2(COX2)mRNA及蛋白表达增加,nephrin、podocin、CD2AP mRNA及蛋白表达下降,p38 MAPK活性增加,足细胞凋亡显著增多(均P＜ 0.05).EP1激动剂干预后上述改变加重(均P＜0.05);拮抗剂可下调PGE2及COX2 mRNA及蛋白的表达,上调nephrin、podocin、CD2AP mRNA及蛋白表达,抑制p38 MAPK活性,抑制足细胞凋亡(均P＜0.05).加入p38 MAPK抑制剂(10 μmol/L)可以减轻EP1激动剂对足细胞相关蛋白nephrin、podocin、CD2AP表达的抑制作用.结论 EP1受体可能通过激活p38 MAPK信号通路抑制足细胞相关蛋白nephrin、podocin、CD2AP的表达,介导ADR诱导的足细胞损伤,抑制EP1受体对足细胞有保护作用.

目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人结肠腺癌(Caco-2)细胞中白三烯E4(LTE4)、前列素E2(PGE2)合成水平和核转录因子-λB(NF-κB)活性的影响.方法 在Caco-2细胞中加入不同浓度(0、10、20、50 μmol/L)Hcy作用不同时间(1、3、6h),采用MTT法和检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,观察Hcy对Caco-2细胞生长活性的影响;通过检测Caco-2细胞跨膜电阻(TEER)和样品中荧光素-5-异硫氰酸酯(FITC)浓度,观察Hcy对Caco-2细胞通透性的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定Caco-2细胞上清液中LTE4和PGE2合成水平;采用凝胶迁移实验(EMSA)测定Caco-2细胞中NF-κB活性变化.结果 随Hcy作用时间延长及作用浓度增加,Caco-2细胞活性明显受到抑制;随Hcy作用浓度增加,Caco-2细胞TEER明显降低,FITC跨膜转运量明显增加,细胞上清液中LTE4和PGE2水平明显升高(P＜0.05);Hcy(50μmol/L)处理组细胞中NF-λB活性增强,且呈时间依赖性(1、3、6h).结论 Hcy通过激活NF-λB信号通路,促进Ca-co-2细胞肠黏膜LTE4和PGE2合成,引起肠黏膜炎症损伤.

目的:探讨香砂愈疡汤对乙酸诱导胃溃疡模型大鼠的保护作用并探讨其作用机制,为临床用药提供实验依据.方法:将60只SPF级Wistar大鼠随机分成6组:空白组,模型组,香砂愈疡汤高、中、低剂量组,奥美拉唑组.通过乙酸诱导制作胃溃疡大鼠模型,香砂愈疡汤高、中、低剂量组分别灌胃28,14,7 g·kg-1香砂愈疡汤溶液,奥美拉唑组将奥美拉唑以4.17 g·kg-1溶于生理盐水后灌服,空白组和模型组以等体积生理盐水灌胃,1 次/d.连续治疗14 d后处死大鼠,采血并取胃组织,测量并计算胃溃疡面积、胃溃疡抑制率,制作胃黏膜组织病理学切片并观察胃黏膜损伤状态;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中胃黏膜修复因子、胃组织相关蛋白水平、氧化应激因子、炎症因子等指标的变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃黏膜组织中p62,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keapl),核转录因子E2相关因子2(Nrf2),血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路相关蛋白的表达水平.结果:与正常组比较,模型组胃黏膜出现较为明显的病理变化,白细胞大量浸润;模型组溃疡面积显著增加(P＜0.01),黏蛋白5AC(MUC5AC),表皮生长因子(EGF),超氧化物歧化酶(SOD)和前列腺素E2(PGE2)含量显著减少,胃泌素(GAS),8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG),丙二醛(MDA),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和环氧化酶-2(COX-2)含量显著增多(P＜0.01),Nrf2,HO-l蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),Keapl含量明显增高(P＜0.05),p62蛋白表达降低;与模型组比较,香砂愈疡汤高剂量组和奥美拉唑组细胞层次结构更加清晰,排列规则,形状规整;中、低剂量组对胃黏膜也均有一定的修复作用;香砂愈疡汤高、中剂量组可显著减少乙酸诱导胃溃疡大鼠模型的胃溃疡面积(P＜0.01),提高溃疡抑制率,明显促进胃黏膜组织中MUC5AC和EGF的表达,降低GAS水平(P＜0.05,P＜0.01),显著降低8-OHdG和MDA水平,提高SOD活性(P＜0.01),显著降低TNF-α和COX-2表达水平,增加PGE2的含量,升高胃黏膜组织Nrf2,HO-l 蛋白表达(P＜0.01),香砂愈疡汤高剂量组可明显降低Keap1的蛋白表达(P＜0.05),升高p62蛋白表达量.结论:香砂愈疡汤治疗乙酸诱导胃溃疡模型大鼠效果显著,可有效减少溃疡面积,增加溃疡抑制率,保护溃疡组织.其作用机制可能与激活p62/Keap1/Nrf2信号通路,调控相关基因表达,从而改善炎症反应、调控氧化应激反应有关.

目的:探讨双果喉乐汤改善急性咽炎大鼠的作用机制.方法:将60只大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、双果喉乐汤高、中、低剂量组,每组10只.除对照组外,其他各组大鼠建立急性咽炎模型.造模成功后,模型组、对照组灌胃等体积0.9％氯化钠溶液,地塞米松组、双果喉乐汤高、中、低剂量组分别灌胃相应剂量的药物,给药7d.观察各组大鼠病理状态,检测各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2 (PGE2)含量,咽部组织中丝裂原活化蛋白激酶(ERK1/2)和环氧合酶-2(COX-2)mRNA表达及ERK1/2、p-ERK1/2和COX-2蛋白的表达.结果:与对照组比较,模型组大鼠咽部组织细胞排序紊乱,黏膜上皮有严重角化,可见大量炎性细胞浸润,上皮层增生明显,黏膜内血管扩张及出血,腺体数量增多;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2含量、咽部组织中ERK1/2 mRNA和COX-2 mRNA表达及咽部组织中p-ERK1/2和COX-2蛋白表达水平升高(P＜0.05).与模型组比较,地塞米松组、双果喉乐汤高、中、低剂量组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2含量、咽部组织中ERK1/2 mRNA和COX-2 mRNA表达及咽部组织中p-ERK1/2和COX-2蛋白表达水平降低(P＜0.05).与地塞米松组比较,双果喉乐汤中、低剂量组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2含量、咽部组织中ERK1/2 mRNA和COX-2 mRNA表达较高(P＜0.05);双果喉乐汤低剂量组大鼠咽部组织中p-ERK1/2及COX-2蛋白表达水平较高(P＜0.05);双果喉乐汤高剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6、PGE2含量及咽部组织中ERK1/2 mRNA表达较高(P＜0.05),COX-2mRNA表达较低(P＜0.05).与双果喉乐汤低剂量组比较,双果喉乐汤高、中剂量组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2含量及咽部组织中ERK1/2 mRNA和COX-2mRNA表达较低(P＜0.05);双果喉乐汤高剂量组大鼠咽部组织中p-ERK1/2及COX-2蛋白表达水平较低(P＜0.05).结论:双果喉乐汤对氨水诱发的大鼠急性咽炎具有明显的改善作用,可能与调节ERK1/2-COX-2-PGE2信号通路有关.

目的 研究异氟烷(ISO)对离体大鼠三叉神经节卫星胶质细胞炎症的影响,并初步探讨相关机制.方法 体外培养大鼠三叉神经节卫星胶质细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和乳酸脱氢酶(LDH)法检测并筛选合适的ISO浓度;将细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、ISO组和SN50[核转录因子(NF)-κB抑制剂]组,采用硝酸甘油(GTN)构建卫星胶质细胞炎症模型,其中ISO组用1.5％ ISO以2 L/min的速率处理30 min,其余组用相同速率的空气处理30 min,每组设6个复孔;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法和一氧化氮(NO)检测试剂盒检测细胞上清液中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)水平和NO的含量,采用Western blotting法测定细胞中NF-κB p65、环氧合酶2(COX2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达情况,采用Fluo-3/AM探针负载法检测钙离子浓度.结果 ISO组IL-1β、TNF-α、PGE2、NO水平及钙离子浓度分别为(121.49±12.37) ng/L、(88.41±9.53) ng/L、(439.92±28.81) pg/mL、(9.03±1.04) μmol/L、(101.11±8.23)mmol/L,均明显低于模型组(均P＜0.05);Westem blotting检测发现,ISO组NF-κB p65、COX2及iNOS蛋白表达分别为0.74 ±0.15、0.59±0.14、0.51±0.11,均明显低于模型组(均P＜0.05).SN50组各指标变化趋势与ISO组一致.结论 适当剂量的ISO可以抑制GTN诱导的三叉神经节卫星胶质细胞炎症,其机制可能与减少炎症因子释放、抑制NF-κB/iNOS-COX2信号通路的激活、降低钙离子浓度有关.