目的:基于网络药理学及实验验证探讨红花-白芍药对治疗偏头痛的作用机制。方法:从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库中筛选红花、白芍的有效成分，使用Swiss Target Prediction预测有效成分的作用靶点；运用GeneCards获取偏头痛的疾病靶点，利用Venny 2.1获取交集靶点。使用STRING进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）分析并使用Cytoscape构建网络图，利用Metascape进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。使用Cytoscape软件构建"药物-靶点-通路"网络图。采用硝酸甘油法建立偏头痛大鼠模型，依据随机数字表法将造模成功的大鼠分为模型组和观察组（每组5只）。观察组灌胃1.8 g/kg红花-白芍溶液，模型组灌胃等体积0.9%氯化钠溶液，1次/d，连续给药2周。治疗后评估症状改善情况及检测大鼠血清核心靶点V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A（RELA）、蛋白激酶B1（Akt1）、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、肿瘤坏死因子（TNF）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、白细胞介素-6（IL-6）表达情况。结果:红花-白芍药对中的24个有效成分通过多条通路直接作用于178个疾病靶点治疗偏头痛，其中6-羟基山柰酚、β-胡萝卜素、黄芩苷、β-谷甾醇、山柰酚等是核心成分，RELA、Akt1、MAPK1、TNF、Caspase-3、IL-6是至关重要的靶点。GO分析显示，细胞组成（CC）有85个，生物过程（BP）有228个，分子功能（MF）有119个。KEGG信号通路富集分析提示红花-白芍药对主要参与晚期糖基化终末产物（AGE）-晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-Akt和MAPK等信号通路。动物实验验证显示，与模型组比较，红花-白芍药对在0～30、60～90、120～150 min 3个时间段内评分均降低（均 P<0.01），大鼠机械性刺激和热刺激痛阈均增加（均 P<0.01），血清RELA、Akt1、MAPK1、TNF、Caspase-3和IL-6水平均降低（均 P<0.01）。 结论:红花-白芍药对主要通过调节IL-17、TNF、Toll受体、T细胞受体、AGE-RAGE、HIF-1、PI3K/Akt和MAPK等信号通路的RELA、Akt1、MAPK1、TNF、Caspase-3和IL-6等疾病靶点治疗偏头痛。

目的:运用网络药理学方法和分子对接技术探究红花逍遥片治疗卵巢早衰的作用机制，并进一步实验验证。方法:应用TCMSP、PubChem数据库获得红花逍遥片活性成分及相关靶点，应用GeneCards数据库获得卵巢早衰相关靶点，利用Venn在线工具筛选两者交集基因，采用STRING数据库构建交集靶点PPI网络，通过Metescape数据库对核心靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，采用Cytoscape 3.7.1软件构建“活性成分-靶点”网络和“中药-活性成分-靶点-关键通路-疾病”网络，并进行分子对接验证。采用随机数字表法将小鼠分为空白组、模型组及红花逍遥片组，每组8只。除空白组外，其余各组小鼠采用透明带多肽3（ZP3）和弗式完全佐剂（FCA）建立免疫性卵巢早衰小鼠模型。红花逍遥片组灌胃红花逍遥片溶液0.56 g/kg，空白组、模型组灌胃等体积生理盐水，连续灌胃4周。采用HE染色观察小鼠卵巢组织病理变化。采用免疫组化染色检测ESR1表达，采用Western blot检测Akt、p-Akt表达。结果:获得红花逍遥片与卵巢早衰交集靶点80个，PPI网络包含核心靶点44个，度值排名前5位的活性成分分别为芒柄花素、槲皮素、白桦脂酸、羟基红花黄A和黄芩苷，排名前5位的靶点分别为PPARG、ESR1、AR、AKT1和IL6。核心靶点分子功能主要为受体配体活性，生物过程主要涉及细胞迁移的正向调节，细胞组分主要包括膜筏，主要涉及信号通路有癌症信号通路、癌症中的蛋白聚糖、PI3K-Akt信号通路及HIF-1信号通路等。“中药-成分-靶点-通路-疾病”网络显示，红花逍遥片处方中8味药具有重要核心成分，其中甘草和红花涉及重要核心成分最多。分子对接结果显示，活性成分与核心靶点亲和力良好。实验验证结果显示，红花逍遥片可促进卵泡发育，提高卵巢组织中ESR1表达，并上调PI3K-Akt信号通路关键因子Akt磷酸化水平。结论:红花逍遥片多种活性成分可能通过作用于PPARG、ESR1等多个靶点，并通过PI3K-Akt、HIF-1等信号通路治疗卵巢早衰，其潜在活性成分主要为芒柄花素、槲皮素等。

目的 观察羟基红花黄色素A(HSYA)对环氧合酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)信号通路的影响,探讨HSYA对脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护机制.方法 90只雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、手术组(CIRI组)、HSYA组和塞来昔布组(C组),HSYA组进一步分为HSYA低剂量组(HSYA-L组)、HSYA中剂量组(HSYA-M组)和HSYA高剂量组(HSYA-H组),每组15只.线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型.各组大鼠于术前30 min腹腔注射给药,HSYA各组分别给予HSYA 10、15、25 mg/kg,C组给予塞来昔布40 mg/kg,S组和CIRI组给予等量的生理盐水.各组大鼠模型制作苏醒后立刻进行神经功能学评分,再灌注24 h时进行脑梗死体积检测,同时Nissl染色观察神经细胞损伤,Real-time PCR和Western blotting检测COX-2 mRNA和蛋白的变化,ELISA检测PGE2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β的变化.结果 与S组比较,CIRI组神经功能学评分显著升高(P＜0.05),脑梗死体积显著增加(P＜0.05),神经细胞损伤较重,数目显著降低(P＜0.05),COX-2 mRNA和蛋白的表达显著增多,同时PGE2、TNF-α和IL-1β的表达也显著增多(P＜0.05);与CIRI组比较,HSYA组及C组神经功能学评分明显降低(P＜0.05),脑梗死体积明显减少(P＜0.05),神经细胞损伤减轻,数目明显增加(P＜0.05),COX-2 mRNA和蛋白及PGE2、TNF-α和IL-1β的表达均明显下降(P＜0.05),且HSYA各组之间及HSYA-L组和HSYA-M组与C组比较差异均较显著(P＜0.05),而HSYA-H组与C组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 HSYA减轻缺血性脑卒中再灌注损伤可能与抑制COX-2/PGE2信号通路有关.

目的:建立五虎口服液指纹图谱及多成分含量测定方法.方法:采用迪马钻石一代C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为 0.8 mL/min;检测波长为 254 nm;柱温为 35℃,建立 21 批五虎口服液指纹图谱,测定其中 8 个成分的含量.结果:21 批五虎口服液指纹图谱共标记了 18 个共有峰,指认了羟基红花黄色素A、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、西红花苷、升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、欧前胡素、异欧前胡素 8 个成分,样品相似度>0.900;经过方法学验证,上述 8 个成分均在一定浓度范围内线性关系良好,r>0.9990;精密度、重复性、稳定性试验结果均良好;21 批样品中上述 8 个成分的平均含量分别为 0.0573、0.0335、0.0322、0.0662、0.5041、0.7151、0.0464、0.0108 mg/mL.结论:该研究建立的方法可用于评价五虎口服液的质量.

目的:以网络药理学系统分析红花平疣颗粒治疗扁平疣的主要活性成分、潜在治疗靶点及作用机制，并以此为基础建立红花平疣颗粒的质量控制指标。方法:借助中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)数据库、SwissTargetPrediction数据库、中医药证候关联数据库(SymMap数据库)，筛选出红花平疣颗粒的主要活性成分及其作用靶点；借助人类基因综合数据库(Genecards数据库)、人类孟德尔遗传数据库(OMIM数据库)检索出扁平疣的相关靶点；借助蛋白质-蛋白质相互作用数据库(STRING数据库)构建潜在靶点的蛋白质互作网络(PPI)图，并利用Cytoscape 3.7.2软件构建“红花平疣颗粒-活性成分-作用靶点”网络图；借助基因功能注释分析数据库Matascape进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析，并利用Cytoscape软件构建“活性成分-核心靶点-信号通路”网络图；最后采用高效液相色谱(HPLC)法对红花平疣颗粒中主要指标成分羟基红花黄色素A进行含量测定。结果:通过网络药理学筛选出157个活性成分，94个核心靶点。此外，红花平疣颗粒可能通过调控白细胞介素-17(IL-17)和缺氧诱导因子1(HIF-1)等信号通路发挥治疗扁平疣的作用。HPLC结果显示，羟基红花黄色素A在6~120?mg/L范围内线性关系良好(r=0.9996)，精密度、重复性、稳定性试验的相对标准偏差(RSD)值均<3%，平均回收率为96.17%~101.85%，RSD为2.19%(n=6)，其平均含量为0.0576?mg/g。结论:通过网络药理学初步探讨红花平疣颗粒治疗扁平疣的作用机制，并对筛选出来的质控指标成分羟基红花黄色素A进行了定量研究，该研究为红花平疣颗粒治疗扁平疣的药效学及质量标准提升研究提供一定的依据。

[目的]基于脂质代谢组学方法考察羟基红花黄色素A(HSYA)对高脂饲料诱导的LDLR-/-小鼠高脂血症脂质代谢的影响及其机制.[方法]将28只雄性LDLR-/-小鼠分为对照组与高脂组.对照组喂养普通饲料,高脂组喂养高脂饲料,6 周后,高脂组按照血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量平均分为 4 组:模型组、辛伐他汀组、HSYA(3.8 mg/kg)低剂量组、HSYA(7.6 mg/kg)高剂量组.给药11周,给药期间同时给予高脂饲料饲养.全自动生化仪检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、LDL-C含量,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理形态,油红O染色观察小鼠肝脏组织脂肪蓄积情况,采用靶向脂质组学技术对LDLR-/-小鼠血清中脂质进行测定.[结果]与对照组比较,模型组小鼠血清中LDL-C、TC、TG、AST、ALT含量升高(P<0.05),肝组织出现大小不等的脂滴浸润,肝细胞排列紊乱,大量脂质蓄积.与模型组比较,HSYA两组小鼠血清中LDL-C、TC、TG、AST、ALT含量降低(P<0.05),肝脏的脂肪变性、脂质蓄积等病理情况得到改善.脂质组学检测结果显示,模型组和对照组之间具有差异的脂质分子共有 14 种(VIP>1,P<0.05).HSYA两组与模型组比较,17 种脂质分子呈现相反的趋势并具有差异,分别为PE(18∶0/18∶1)、PE(18∶0/18∶2)、PE(18∶0/20∶3)、PE(18∶0/20∶4)、PE(O-18∶0/18∶1)、PE(O-18∶0/20∶4)、LPE(18∶1)、LPE(20∶4)、FFA(22∶4)、PI(18∶0/18∶2)、PI(16∶0/18∶1)、PI(18∶1/18∶1)、LPI(18∶0)、PG(18∶1/16∶1)、PG(18∶1/18∶1)、PG(18∶1/18∶2)、PA(18∶1/18∶1)(VIP>1,P<0.05).[结论]研究利用脂质组学技术,发现HSYA可以通过调节高脂血症LDLR-/-小鼠血清中脂质代谢水平,发挥治疗高脂血症的作用,为临床应用HSYA提供了新的参考依据.

背景:缺血性脑卒中严重威胁人类健康,缺血缺氧后星形胶质细胞大量表达脂质运载蛋白2加重脑损伤,但其具体机制并不清楚.羟基红花黄色素A具有抗缺血、抗氧化、抗血栓及抗炎等作用,其是否影响脑缺血缺氧后星形胶质细胞表达脂质运载蛋白2,目前尚不清楚.目的:探究羟基红花黄色素A对脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞中脂质运载蛋白2表达的影响及机制.方法:①将30只成年SD大鼠随机分成3组:假手术组、大脑中动脉闭塞再灌注组、羟基红花黄色素A组,后2组建立大脑中动脉闭塞再灌注模型,羟基红花黄色素A组在再灌注后以12 mg/kg的剂量腹腔注射羟基红花黄色素A.采用Longa评分法评估神经功能缺损程度,采用TTC染色法测定脑梗死体积,Western blot和免疫荧光检测JAK2/STAT3通路及脂质运载蛋白2的表达,ELISA法检测白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平.②将星形胶质细胞分为4组:正常组、糖氧剥夺复糖氧组、羟基红花黄色素A组、AG490组,后3组建立糖氧剥夺复糖氧模型,在糖氧剥夺期间分别用75 μmol/L羟基红花黄色素A、10 μmol/L酪氨酸磷酸化抑制剂AG490处理星形胶质细胞8 h,进一步验证羟基红花黄色素A对脂质运载蛋白2的作用机制.结果与结论:①与假手术组相比,大脑中动脉闭塞再灌注组大鼠脑梗死体积明显增加,并伴有神经功能损伤加重(P<0.01),羟基红花黄色素A治疗可以减小脑梗死体积,改善神经功能(P<0.01);②大脑中动脉闭塞再灌注组p-JAK2、p-STAT3和脂质运载蛋白2的表达高于假手术组(P<0.01),羟基红花黄色素A治疗后抑制了p-JAK2、p-STAT3和脂质运载蛋白2的表达(P<0.01);③大脑中动脉闭塞再灌注组炎性因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平高于假手术组(P<0.01),羟基红花黄色素A治疗后抑制了白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α表达(P<0.01);④体外实验糖氧剥夺复糖氧组p-JAK2、p-STAT3、脂质运载蛋白2的表达高于正常组(P<0.01),加入AG490后JAK2、STAT3磷酸化降低,脂质运载蛋白2表达被抑制(P<0.01).结果表明,羟基红花黄色素A可能通过调控JAK2/STAT3信号通路抑制缺血缺氧后星形胶质细胞中脂质运载蛋白2的表达,从而减轻脑损伤.

目的 采用HPLC法检测复方牙痛酊中 10 种成分含量,并联合化学计量学及熵权优劣解距离法对复方牙痛酊质量进行综合评价.方法 以Diamonsil C18 柱为色谱柱,乙腈-0.4%磷酸为流动相,同时测定 15 批复方牙痛酊中缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚的含量,采用统计学软件对15批样品进行差异分析.结果 10 种成分分别在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率范围96.93%～100.12%(RSD≤1.50%,n=9);化学计量学分析显示 15 批样品聚为 3 类;羟基红花黄色素A、指甲花醌、缬草三酯、红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷是影响复方牙痛酊产品质量的主要潜在标志物;熵权优劣解距离法可评判复方牙痛酊的质量优劣.结论 所建立的HPLC多指标成分定量控制联合化学计量学、熵权优劣解距离法可用于复方牙痛酊质量的综合评价.

藏药二十味肉豆蔻丸源于1506年达旺活佛秘制,收载于地方药典1979版《藏药标准》和1995版国家药典《中华人民共和国卫生部药品标准·藏药(第一册)》中.本文通过以"二十味肉豆蔻丸"为关键词,查阅中国知网、读秀数据库、济南泉方本地PubMed等数据库搜集与二十味肉豆蔻丸相关的中英文文献及藏医相关的书籍,排除有且仅有方名的文献或书籍,有明确组成、配比或功效的保留,总结了藏药二十味肉豆蔻丸的传承、组成、方解及现代研究.结果发现二十味肉豆蔻丸在传承过程中其组成虽稍有改变,但主要功效为镇静安神.现代临床研究主要涉及妇科病、心脑血管疾病、内分泌疾病和藏医中的宁塞病;基础研究的资料主要涉及羟基红花黄色素A、去氢二异丁香酚、丁香酚、肉豆蔻醚等化学成分.希望此文对二十味肉豆蔻丸的进一步研究与应用提供参考与借鉴价值.二十味肉豆蔻丸为传统藏药,由肉豆蔻∶降香∶沉香∶石灰华∶广枣∶红花∶藏茴香∶丁香∶大蒜(炭)∶豆蔻∶阿魏∶草果∶诃子∶乳香∶毛诃子∶儿茶∶余甘子∶力嘎都∶檀香∶牛黄=75∶80∶100∶75∶65∶90∶80∶40∶35∶35∶20∶35∶200∶100∶80∶70∶100∶60∶50∶1组成(图1[1]),是2002年9月6日获批在我国上市的镇静安神药(国药准字Z20023260),用于治疗"宁隆"病引起的神志紊乱、烦燥、精神恍惚、失眠、头晕、健忘耳鸣、颤抖、惊悸.在藏医,宁为心脏,隆为藏医三因学说之一[2].《四部医典》记载,根据所在部位和功能不同,"隆"分为五类:"持命隆(索增隆)"、"上行隆(更久隆)"、"遍行隆(恰不其隆)"、"伴火隆(酶年隆)"和"下泻隆(吐色隆)",此外尚有宁隆、赤隆和培隆[3]2.宁隆是主心脏的隆,它失调则出现心脏病,症状为心慌气短、神志模糊、背部发胀、心情烦躁、心悸失眠等[3]2;其还记载藏医中的"心脏病"是由于心情忧郁,烦乱,饮食失调,失眠,易怒等原因导致,有心悸、心绞痛、心热、心脏积水、心闷、心脏虫病和心怒症7种疾病,二十味肉豆蔻丸治疗的是藏医中心脏病的心悸疾病的症状[3]142.本文对其源流、方解及其临床与基础研究进行了系统梳理,希望对于二十味肉豆蔻丸的进一步研究与应用提供参考与借鉴价值.

以红花为材料,采用大田试验,设置 13 个播期处理,测定红花叶片生理特性、产量、活性成分含量等指标,采用主成分分析和冗余分析处理各指标间相关关系,以期探究播期对宁夏六盘山地区红花产量和活性成分含量的影响.结果表明:秋季和春季提前播期种植对红花植株叶片光合参数、叶片SPAD、抗氧化酶活性、氮代谢酶活性、花丝产量、籽粒产量及羟基红花黄色素A等指标有显著影响.其中,11 月中旬播种和 3 月下旬顶凌播种处理效果最佳,叶片蒸腾速率、气孔导度、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合成酶,增幅分别达 44.9%、52.4%、15.9%、60.8%、10.3%、38.3%;超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性分别降低 10.8%、4.1%、20.9%;红花光合生理特性的改善促进了其干物质累积和生殖生长,最终花丝和种子产量增幅分别达 15.5%、11.7%,羟基红花黄色素A和山柰素分别提高 17.9%、20.0%.可见,适期早播可促进宁夏六盘山区红花生长发育,并显著提高其产量和品质,有利于红花优质高效可持续生产.